专利名称：短肽在制备治疗血管增生性眼科疾病药物中的应用的制作方法
技术领域：
本发明涉及生物医药技术领域，具体涉及血管生成抑制短肽在制备预防或治疗血管增生性眼科疾病药物中的应用。
背景技术：
血管内皮生长因子(vascularendothelial growth factor,VEGF)是一种通过二硫键相连的同源二聚体糖蛋白，分子量34 45kD，序列高度保守，在结构上与TOGF具有同源性的重要序列，遇热遇酸稳定。VEGF是血小板源生长因子家族的一个成员，是最直接的血管内皮细胞促分裂素。VEGF是一种重要的血管生成因子，其具有增加血管的通透性、促进、内皮细胞的增殖、促进血管的生成等重要的生物学功能。VEGF在生理和病理条件下均有表达。生理条件下，很多正常组织中都有表达，但表达水平一般较低。VEGF表达与周期性的血管生成有关，胎盘组织、胚胎组织、黄体、增殖期的子宫内膜等由于血管生成的需要，VEGF表达处于较高水平。在一些代谢旺盛、血供丰富的组织，如心肌、前列腺、肾上腺皮质等，VEGF的表达高于其他组织。病理条件下，VEGF在肿瘤细胞中其mRNA水平和蛋白水平均有过量表达。研究表明，VEGF通过其受体(VEGFR)介导其活性，通过细胞内信号传导发挥生物学效应。VEGF 的两个特异性受体 Fit (Fms-like tyrosine kinase)和 KDR(Kinase insertDomain containing Receptor)能引起内皮细胞迁移、分化、最终形成管状样结构(血管雏形)，是抑制血管生成的重要靶点。因此，通过与VEGF受体的结合，可以降低或抑制VEGF受体介导VEGF表达的作用，从而降低或抑制新生血管的生发。基于通过与VEGF受体结合抑制VEGF表达这一机理，研发人员开发了许多VEGF的抑制剂，诸如W09845331A、TO2005000900A、W02008077077A、W02008022746A、CN1406948A 等，这些专利文献披露的抑制剂大都用于预防和/或治疗肿瘤及相关的疾病。寿成超等人在CN101153054A中披露了一种内源性的血管生成抑制短肽，并命名为FpAT (Fibrinopeptide A truncated)。该短妝只有15个氨基酸序列，具体为Asp-Ser-Gly-Glu-Gly-Asp-Phe-Leu-Ala-Glu-Gly-Gly-Gly-Val-Arg,并披露该肽具有抑制肿瘤生长的作用。脉络膜新生血管(CNV)又称视网膜下新生血管，是来自脉络膜毛细血管的增殖血管，通过Bruch膜的裂口而扩展，于Bruch膜与视网膜色素上皮之间、或神经视网膜与视网膜色素上皮之间、或位于视网膜色素上皮与脉络膜之间增殖形成它较多见于黄斑部，因而严重地损害中心视力。脉络膜新生血管管壁通透性较高，易出血和渗出，久之则形成瘢痕，造成黄斑部损伤，严重影响中心视力，甚至致盲。最常见视网膜病变，是年龄相关黄斑变性(Aging Macular Degeneration, AMD)、糖尿病性视网膜病变(Diabeticretinopathy, DR)等，可造成视力突然下降；治疗比较困难。其中年龄相关黄斑变性(AMD)是50岁以上人群最常见的致盲眼病，据统计在50 65岁人群中患病率是I. 6%，75岁以上则上升为30%。糖尿病视网膜病变据报道，在糖尿病患者中的平均患病率高达50%，糖尿病比非糖尿病的失明者多25倍。目前，治疗CNV相关的眼科疾病的治疗手段有激光治疗、经瞳孔温热疗法、光动力疗法(TOT)、手术治疗和药物治疗，其中药物治疗手段较为成熟、预后较好。临床上使用的药物有Avast in、Lucentis、Macugen等单抗药物。Lucentis是现在AMD治疗的首选药，于2006年在美国上市。英国国家卫生和临床医疗优选研究所也推荐Lucentis作为治疗所有年龄相关性黄斑变性(AMD)的有效药物，但是Lucentis每针售价高达1500美元，患者每年需要多次注射，这就大大增加了患者的负担，而大部分发展中国家的患者根本无力承担如此高昂的治疗费用。因此，开发出一种价格低廉、疗效较好的预防和/或治疗CNV相关的眼科疾病的药物，是十分必要的。全球眼科药物特别是治疗AMD的药物市场目前尚处于快速发展阶段，每年国外的销售额为50多亿美元，年增长率为10% 15%。而在国内，邹海东等人的一项调查结果显示，50岁以上人群的AMD患病率为15.5%，按照我国的人口数据资料，可以推算出我国治疗AMD的市场量每年为40亿人民币。 研究人员创造性地将CNlOl 153054A披露的短肽FpAT应用于制备预防和/或治疗血管增生性眼科疾病的药物，该种药物特别是对脉络膜新生血管(CNV)相关的疾病，具有出乎意料的疗效。
发明内容
本发明提供一种具有式I所示的氨基酸序列的短肽或其药学上可接受的盐在制备预防和/或治疗血管增生相关的眼科疾病药物中的用途，Asp-Ser-Gly-Glu-Gly-Asp-Phe-Leu-Ala-Glu-Gly-Gly-Gly-Val-ArgI。依照寿成超等人在CNlOl 153054A中的命名为FpAT。上述字母简写所代表相应的氨基酸，例如Asp表示的是天冬氨酸(Asparticacid, D), Ser表示的是丝氨酸(Serine, S), Gly表示的是甘氨酸(Glycine, G), Glu表示的是谷氨酸(Glutamic acid, E), Phe表示的是苯丙氨酸(Phenylalanine, F), Leu表示的是亮氨酸(Leucine, L) ,Ala表示的是丙氨酸(Alanine, A) ,Val表示的是缴氨酸(Valine, V),Arg表示的是精氨酸(Arginine，R)等，上述的短肽FpAT可通过常规的氨基酸脱水缩合而成。进一步地，上述短肽FpAT的制药用途中，所述肽的氨基酸序列是经过取代、缺失和/或添加一个或几个氨基酸且具有抑制血管增生相关的眼科疾病中血管生发的作用。对于本领域的普通技术人员而言，可以针对上述的短肽的氨基酸序列进行常规的改变而不改变其功能，诸如通过常规的取代、缺失或添加等操作但并不改变其功能，尤其是进行非极性氨基酸之间或是极性氨基酸之间的取代。另外，术语“药学上可接受的盐”是指在合理医学判断范围内适用于与哺乳动物特别是人的组织接触而无过度毒性、刺激、过敏反应等并与合理的效益/风险比相称的盐，具体到该短肽及其常规的衍生物的药学上可接受的盐，可以是其乙酸盐、二己酸盐、藻酸盐、柠檬酸盐、天冬氨酸盐、苯甲酸盐、苯磺酸盐、硫酸氢盐、丁酸盐、樟脑酸盐、樟脑磺酸盐、甘油磷酸盐、半硫酸盐、庚酸盐、己酸盐、富马酸盐、盐酸盐、氢溴酸盐、氢碘酸酸盐、2-羟基乙磺酸盐、乳酸盐、马来酸盐、甲磺酸盐、烟酸盐、2-萘磺酸盐、草酸盐、3-苯基丙酸盐、丙酸盐、琥珀酸盐、酒石酸盐、磷酸盐、谷氨酸盐、碳酸氢盐、对甲苯磺酸盐和i^一烷酸盐，较优地，可以优选盐酸盐、氢溴酸盐、硫酸盐、磷酸盐、草酸盐、马来酸盐、琥珀酸盐和柠檬酸盐；另外，也可以是其碱性加成盐，例如锂盐、钾盐、钠盐、钙盐、镁盐、铝盐等。进一步地，上述的短肽FpAT或其盐的制药用途中，所述的血管增生相关的眼科疾病为脉络膜新生血管(Choroidal Ncowascularization, CNV)相关的疾病,其中，脉络膜新生血管又称视网膜下新生血管。进一步优选地，所述的短肽FpAT或其盐的制药用途，其特征在于，所述的血管增生相关的眼科疾病为年龄相关性黄斑变性(Aging Macular Degeneration, AMD)、糖尿病性视网膜病变(diabeticretinopathy, DR)、特发性脉络膜视网膜炎、变性近视、视盘玻璃膜疣、眼底血管样条纹、黄色斑点视网膜变性、遗传性原发性玻璃膜疣、成人型黄斑区色素上皮萎缩或中心性渗出性脉络膜病变(Rieger型)，上述疾病的病理等信息可参见王雨生编 著的《脉络膜新生血管性疾病》(人民卫生出版社，2007年出版)相关部分。更进一步优选地，上述的短肽FpAT或其盐的制药用途中，所述的血管增生相关的眼科疾病为年龄相关性黄斑变性或糖尿病性视网膜病变。本发明还提供一种药物组合物，含式I所示的氨基酸序列的短肽或其药学上可接受的盐和药用辅料。Asp-Ser-Gly-Glu-Gly-Asp-Phe-Leu-Ala-Glu-Gly-Gly-Gly-Val-ArgI利用该短肽FpAT制成的药物，对脉络膜新生血管(CNV)相关的疾病具有疗效好、安全性高的优点，而且由于其化学成分是多肽，制备技术成熟，用药成本不足Lucentis的1%。
图I实施例3荧光造影分析统计直方2实施例3脉络膜铺片分析统计直方3实施例3HE染色评估CNV厚度统计直方4实施例4荧光造影图及结果统计直方5实施例4脉络膜铺片分析统计直方6实施例4HE染色评估CNV厚度图及统计直方7实施例5荧光造影图及结果统计直方8实施例6ELISA法检测眼组织VEGF的统计直方9实施例7Western Bloting法检测眼组织VEGF的表达的蛋白条带图
具体实施例方式应当说明的是下列实施例用到的实验动物、药品和仪器的来源和/或型号如下健康成年野生型雄性挪威棕色大鼠(Norway brown rat, BN rat),购自北京维通利华实验动物中心，平均体质量180 200克；
权利要求
1.一种具有式I所示的氨基酸序列的短肽或其药学上可接受的盐在制备预防和/或治疗血管增生相关的眼科疾病药物中的用途， Asp-Ser-Gly-Glu-Gly-Asp-Phe-Leu-Ala-Glu-Gly-Gly-Gly-Val-ArgI。
2.根据权利要求I所述的短肽或其盐的制药用途，其特征在于，所述肽的氨基酸序列是经过取代、缺失和/或添加一个或几个氨基酸且具有抑制血管增生相关的眼科疾病中血管生发的作用。
3.根据权利要求I或2所述的短肽或其盐的制药用途，其特征在于，所述的血管增生相关的眼科疾病为脉络膜新生血管相关的疾病。
4.根据权利要求3所述的短肽或其盐的制药用途，其特征在于，所述的血管增生相关的眼科疾病为年龄相关性黄斑变性、糖尿病性视网膜病变、特发性脉络膜视网膜炎、变性近视、视盘玻璃膜疣、眼底血管样条纹、黄色斑点视网膜变性、遗传性原发性玻璃膜疣、成人型黄斑区色素上皮萎缩或中心性渗出性脉络膜病变。
5.根据权利要求4所述的短肽或其盐的制药用途，其特征在于，所述的血管增生相关的眼科疾病为年龄相关性黄斑变性或糖尿病性视网膜病变。
6.一种药物组合物，含式I所示的氨基酸序列的短肽或其药学上可接受的盐和药用辅料， Asp-Ser-Gly-Glu-Gly-Asp-Phe-Leu-Ala-Glu-Gly-Gly-Gly-Val-ArgI。
全文摘要
本发明涉及具有Asp-Ser-Gly-Glu-Gly-Asp-Phe-Leu-Ala-Glu-Gly-Gly-Gly-Val-Arg所示的氨基酸序列的短肽FpAT或其药学上可接受的盐在制备预防和/或治疗血管增生相关的眼科疾病药物中的用途。利用该短肽FpAT制成的药物，对血管增生相关的眼科疾病特别是脉络膜新生血管(CNV)相关的疾病具有疗效好、安全性高的优点，而且由于其化学成分是多肽，制备技术成熟，用药成本低廉，非常适用于临床使用和推广。
文档编号A61K38/10GK102716464SQ20121018741
公开日2012年10月10日 申请日期2012年6月8日 优先权日2012年6月8日
发明者刘涛, 巩慧, 徐念沁, 陈慧敏, 顾传虎 申请人:江阴司特易生物技术有限公司