专利名称：一种环磷腺苷葡胺脂质体注射剂的制作方法
技术领域：
本发明涉及一种环磷腺苷葡胺的新制剂，具体涉及ー种环磷腺苷葡胺脂质体注射剂及其制法，属于医药技术领域。
背景技术：
环磷腺苷葡胺是环磷腺苷与葡甲胺摩尔比1:1的盐，为ー种新型的能量合剂、细胞激活剂，易透过细胞膜，使细胞内cAMP浓度增加，具有正性肌カ及扩张心脑血管作用，并对磷酸ニ脂酶有一定的抑制作用，更利于cAMP发挥作用。一方面使心肌细胞正性肌カ增强，改善心肌泵血功能，具有温和的强心作用；另一方面可减轻动脉及周围血管阻力，増加冠状动脉血流，改善心肌缺血；减轻心脏前后负荷；保护和改善心肌缺血和缺氧时心肌细胞的形态和功能，显著增加心肌细胞的搏动强度和频率；具有第二信使作用，能直接进入细胞内，降低心肌氧耗量，改善心肌细胞代谢，保护缺氧的心肌细胞，提高心肌的应激能力；介入机体的许多重要代谢调控，对心律有双向调节作用，并具有药理作用强，毒性低，作用迅速，稳定性高接近于生理性，应用范围广等独特的优点，是目前唯一应用于临床的第二信使类药物。临床上环磷腺苷葡胺主要用于治疗心カ衰竭、心肌炎、病窦综合征、冠心病、心肌病，以及心律失常的辅助治疗。几年来，由于其疗效确切，作用独到，安全性能好，在临床上被广泛应用。专利文献CN102283804A和CN101455631A公开了环磷腺苷葡胺注射液及其制备方法，选择合适的溶媒和附加剂制成环磷腺苷葡胺注射液。由于环磷腺苷微溶于水，在环磷腺苷中加入葡甲胺可增强其溶解性，然而，在环磷腺苷葡胺溶液中，随着保存时间的延长，环磷腺苷会逐渐析出，使药液发生变质、浑浊；环磷腺苷葡胺注射液在保存过程中，易遇光发生变化，使药物降解，并且易受环境因素的影响发生氧化、聚合使药品的结构发生变化。环磷腺苷葡胺注射液的 各种不稳定性使药物的疗效下降，给临床用药带来了极大的安全隐
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■/Q1、O专利文献CN1579413A公开了ー种注射用环磷腺苷葡胺及其制备エ艺，所述的环磷腺苷、葡甲胺和赋形剂制成冻干粉针剂；专利文献CN1923180A公开了ー种注射用环磷腺苷葡胺的制备エ艺，采用现代制剂技术制成无菌冻干粉针剂。然而环磷腺苷葡胺冻干粉针剂存在制备エ艺复杂，成本高，产品复溶性差等问题。专利文献CN101491500A公开了ー种环磷腺苷葡胺微球及其制法，主要由环磷腺苷、葡甲胺、聚己内酷、聚こ烯醇、表面活性齐IJ、渗透压调节齐U、冻干支持剂制成。但是药物在长期放置过程中会产生结块现象，不易重分散。脂质体(liposomes)最初是由英国学者Bangham和Standish将磷脂分散在水中进行电镜观察时发现的。脂质体是指将药物包封于类脂质双分子形成的薄膜中间所制成的超微型球状定向药物载体制剂，属于靶向给药系统的ー种新剂型。20世纪60年代末Rahman等人首先将脂质体作为药物载体应用，近年来，随着生物技术的不断进展，脂质体制备エ艺逐步完善，脂质体作用机制进ー步阐明，脂质体作为药物载体，具有诸多优点如脂质体既能包封脂溶性药物，又能包封水溶性药物；减轻变态反应和免疫反应；延缓释放，降低体内消除速度；能有效地保护被包裹药物，提高生物利用度；改变药物在体内的分布，并能靶向性释药，能降低药物的毒副作用；适合多途径给药等。本发明人经过长期认真的研究，出乎意料的发现，将环磷腺苷葡胺制成脂质体注射剂，能解决上述问题。
发明内容
本发明的目的在于提供一种稳定的环磷腺苷葡胺脂质体注射剂，主要由环磷腺苷葡胺、牛胆酸钠、胆固醇、十二烷基磺酸钠、焦亚硫酸钠、甘露醇制成。本发明的脂质体注射剂具有良好的制剂稳定性，冻干过程中脂质体不会因脱水、融合、冰晶等发生破裂，水合复溶后，脂质体同样保持良好的包封率，減少了毒副作用，提高了制剂产品质量，而且较现有产品具有更好的生物利用度。本发明解决的技术方案如下本发明提供一种环磷腺苷葡胺脂质体注射剂，主要由环磷腺苷葡胺、牛胆酸钠、胆固醇、十二烷基磺酸钠、焦亚硫酸钠、甘露醇制成。本发明提供一种环磷腺苷葡胺脂质体注射剂，其中环磷腺苷葡胺的规格为30mg、60mg、90mg 和 2ml: 30mg、2ml: 60mg、5ml: 60mg、5ml: 90mg、IOml: 150mg (注射液体积环憐腺苷葡胺重量)。本发明提供一种环磷腺苷葡胺脂质体注射剂，主要由以下重量份数比的成分制成
环磷線苷葡驗I份
牛胆酸納1-5份
胆固醇1-5份十二烷基磺酸德0.5-2份
焦亚硫酸钠0.05-0.2份
甘露醇1-5份本发明提供一种环磷腺苷葡胺脂质体注射剂，其中优选的重量份数比的成分组成
如下
环磷線苷葡胺I份
牛胆酸钠2-4餘
胆固醇2-4份
十二烷基磧酸钠1-2翁
焦亚硫酸钠0.05-0.1份
甘露醇1-4翁
本发明还提供一种环磷腺苷葡胺脂质体注射剂的制备方法，包括如下步骤(I)称取环磷腺苷葡胺、牛胆酸钠、胆固醇和十二烷基磺酸钠溶于适量有机溶剂中，搅拌溶解；(2)将焦亚硫酸钠和甘露醇溶于缓冲盐溶液中，然后将缓冲盐溶液加入到上述溶液中，进行短时超声，直到形成稳定的W/0型乳化剂；(3)将上述乳化剂进行减压蒸发除去有机溶剂，达到胶态后，然后加入适量的缓冲盐溶液，旋转震荡直至使器壁上的凝胶脱落，加压条件下继续蒸发，制得水性混悬液，然后短时超声；(4)将超声后的脂质体混悬液离心分离，经超滤膜除去细菌及热源，然后流通蒸汽消毒，无菌条件下冷冻干燥，分装；或者将超声后的脂质体混悬液经超滤膜除去细菌及热源，然后流通蒸汽消毒，定容，无菌条件下灌装，灭菌，制得环磷腺苷葡胺脂质体注射剂。上所述的制备方法，其中所述的有机溶剂选自甲醇、こ醇、氯仿、正丁醇、异丙醇、丙酮、こ腈中的ー种或几种，优选体积比为4 1的こ醇和氯仿的混合溶剤。上所述的制备方法，其中所述的缓冲溶液选自磷酸盐缓冲溶液、枸櫞酸盐缓冲溶液、碳酸盐缓冲溶液中的ー种，优选为pH为6. 2的磷酸盐缓冲溶液。上所述的制备方法，其中将超声后的脂质体混悬液4500rpm，离心lOmin，经超滤膜除去细菌及热源。本发明制得的环磷腺苷葡胺脂质体注射剂，提高了制剂产品的质量，減少了毒副作用，増加了药物在体循环中的保留时间，提高了药物的生物利用度，疗效明显提高；并且制备方法简单， 适合于エ业化大生产。
具体实施例方式以下通过具体优选的实施例对本发明进行进ー步说明。这些实施例仅是说明性的，并不应理解为对本发明的限制。实施例1环磷腺苷葡胺脂质体冻干粉针剂处方(1000瓶)
环磷腺苷葡胺 30g
牛胆酸钠〗50g
胆固醇60g
十二垸基磺酸钠 30g 焦亚破酸钠3g
甘露醇90g制备エ艺(I)精密称取30g环磷腺苷葡胺、150g牛胆酸钠、60g胆固醇和30g十二烷基磺酸钠溶于800ml体积比为4 1的甲醇和氯仿的混合溶剂中，搅拌溶解；(2)将溶有3g焦亚硫酸钠和90g甘露醇的pH为6. 2的磷酸盐缓冲溶液800ml，溶入到上述溶液中，进行短时超声，直到形成稳定的W/0型乳化剂；
(3)将上述乳化剂进行减压蒸发除去有机溶剂，达到胶态后，加入800ml pH为6. 0的磷酸盐缓冲溶液，旋转震荡直至使器壁上的凝胶脱落，加压条件下继续蒸发，制得水性混悬液，然后短时超声；(4)将超声后的脂质体混悬液4500rpm，离心lOmin，经超滤膜除去细菌及热源，然后流通蒸汽消毒30分钟，无菌条件下冷冻干燥，分装，制得环磷腺苷葡胺脂质体冻干粉针齐U。实施例2环磷腺苷葡胺脂质体冻干粉针剂处方(1000瓶)
环磷腺苷葡胺90g
牛胆黢钠I50g
齡固醇90g
十二烷基磺酸钠 45g
焦亚. 酸钠4.5g
甘露醇lWg制备ェ艺`(I)精密称取90g环磷腺苷葡胺、150g牛胆酸钠、90g胆固醇和45g十二烷基磺酸钠溶于IOOOml体积比为4 1的甲醇和氯仿的混合溶剂中，搅拌溶解；(2)将溶有4. 5g焦亚硫酸钠和90g甘露醇的pH为6. 2的磷酸盐缓冲溶液1000ml，溶入到上述溶液中，进行短时超声，直到形成稳定的W/0型乳化剂；(3)将上述乳化剂进行减压蒸发除去有机溶剂，达到胶态后，加入IOOOml pH为6. O的磷酸盐缓冲溶液，旋转震荡直至使器壁上的凝胶脱落，加压条件下继续蒸发，制得水性混悬液，然后短时超声；(4)将超声后的脂质体混悬液4500rpm，离心lOmin，经超滤膜除去细菌及热源，然后流通蒸汽消毒30分钟，无菌条件下冷冻干燥，分装，制得环磷腺苷葡胺脂质体冻干粉针齐U。实施例3环磷腺苷葡胺脂质体注射液处方(1000瓶)
环磷腺苷葡胺 60g
牛Ua酸钠《)g
胆固醇300
十二烷基磺酸纳 120g
焦*硫酸钠12g
甘露醇240g制备エ艺
(I)精密称取60g环磷腺苷葡胺、60g牛胆酸钠、300g胆固醇和120g十二烷基磺酸钠溶于1500ml体积比为4 1的甲醇和氯仿的混合溶剂中，搅拌溶解；(2)将溶有12g焦亚硫酸钠和240g甘露醇的pH为6. 2的磷酸盐缓冲溶液1500ml，溶入到上述溶液中，进行短时超声，直到形成稳定的W/0型乳化剂；(3)将上述乳化剂进行减压蒸发除去有机溶剂，达到胶态后，加入1500ml pH为6. 0的磷酸盐缓冲溶液，旋转震荡直至使器壁上的凝胶脱落，加压条件下继续蒸发，制得水性混悬液，然后短时超声；(4)将超声后的脂质体混悬液经超滤膜除去细菌及热源，然后流通蒸汽消毒30分钟，用PH为6. 2的磷酸盐缓冲溶液定容至2000ml，无菌条件下灌装，灭菌，制得环磷腺苷葡胺脂质体注射液。对比例ト3分别选用本发明优选组分之外的成分以及本发明组分优选含量配比之外的组合
进行对比例试验，制备エ艺同实施例1-3，从而制得对比例1-3，各对比例组分如下表所示
权利要求
1.一种环磷腺苷葡胺脂质体注射剂，其特征在于主要由环磷腺苷葡胺、牛胆酸钠、胆固醇、十二烷基磺酸钠、焦亚硫酸钠、甘露醇制成。
2.根据权利要求1所述的环磷腺苷葡胺脂质体注射剂，其特征在于环磷腺苷葡胺的规格为:30mg、60mg、90mg 和 2ml: 30mg、2ml: 60mg、5ml: 60mg、5ml: 90mg、IOml: 150mg (注射液体积环磷腺苷葡胺重量)。
3.根据权利要求1或2任一所述的环磷腺苷葡胺脂质体注射剂，其特征在于主要由下列重量份的成分制成环磷線苷葡胺I份 牛胆酸钠1-5份 胆固醇1-5翁 十二烷基磺酸钠0.S-2翁 'mmM0.05-0.2 餘背Si醇1-5份.
4.根据权利要求1-3所述的环磷腺苷葡胺脂质体注射剂，其特征在于各重量份的成分为环磷腺苷葡驗I份 牛胆酸钠2-4份 胆固醇2-4# 十二烷基磺酸钠1-2份焦IE疏酸鈉0.05-0.1输 甘露醇1-4
5.一种制备环磷腺苷葡胺脂质体注射剂的方法，其特征在于包括如下步骤 (1)称取环磷腺苷葡胺、牛胆酸钠、胆固醇和十二烷基磺酸钠溶于适量有机溶剂中，搅拌溶解； (2)将焦亚硫酸钠和甘露醇溶于缓冲盐溶液中，然后将缓冲盐溶液加入到上述溶液中，进行短时超声，直到形成稳定的W/0型乳化剂； (3)将上述乳化剂进行减压蒸发除去有机溶剂，达到胶态后，然后加入适量的缓冲盐溶液，旋转震荡直至使器壁上的凝胶脱落，加压条件下继续蒸发，制得水性混悬液，然后短时超声； (4)将超声后的脂质体混悬液离心分离，经超滤膜除去细菌及热源，然后流通蒸汽消毒，无菌条件下冷冻干燥，分装；或者将超声后的脂质体混悬液经超滤膜除去细菌及热源，然后流通蒸汽消毒，定容，无菌条件下灌装，灭菌，制得环磷腺苷葡胺脂质体注射剂。
6.根据权利要求5所述的环磷腺苷葡胺脂质体注射剂的制备方法，其特征在于所述有机溶剂选自甲醇、乙醇、氯仿、正丁醇、异丙醇、丙酮、乙腈中的一种或几种，优选体积比为4:1的乙醇和氯仿的混合溶剂。
7.根据权利要求6所述的环磷腺苷葡胺脂质体注射剂的制备方法，其特征在于所述的缓冲溶液选自磷酸盐缓冲溶液、枸橼酸盐缓冲溶液、碳酸盐缓冲溶液中的一种，优选为PH为6. 2的磷酸盐缓冲溶液。
8.权利要求1环磷腺苷葡胺脂质体注射剂的在制备治疗心力衰竭、心肌炎、病窦综合征、冠心病、心肌病及心律失常的药物中的应用。
全文摘要
本发明提供一种环磷腺苷葡胺脂质体注射剂，主要由环磷腺苷葡胺、牛胆酸钠、胆固醇、十二烷基磺酸钠、焦亚硫酸钠、甘露醇制成。与现有制剂相比，本发明的制剂大大提高了制剂的稳定性和生物利用度，释药平稳，提高了制剂产品的质量，减少了毒副作用，疗效更显著。
文档编号A61K9/127GK103040745SQ201210548679
公开日2013年4月17日 申请日期2012年12月17日 优先权日2012年12月17日
发明者王平 申请人:海南百思特医药科技有限公司