使用BCL-9的安定的α螺旋将癌症中失调WNT信号传递订为目标的制作方法
【专利摘要】本发明提供将以BCL9?HD2螺旋烃装订的结构约束的肽用作治疗剂。本发明进一步提供使用本发明的结构约束的肽的方法和试剂盒。本发明至少部分是基于本文提供的证实烃装订的螺旋肽展现优异的蛋白分解、酸以及热安定性，恢复肽的天然螺旋结构，相较于相应于未改性的肽具备优势的药物动力学性质，以及对于体外、细胞内以及体内结合β-联蛋白是高度有效的，破坏BCL-9/β-联蛋白的交互作用，以及藉以干扰失调Wnt/β-联蛋白讯息传递而进行各种人类疾病(包含人类癌症)的治疗益处的结果。
【专利说明】使用BCL-9的安定的α螺旋将癌症中失调WNT信号传递订为目标
[0001]本申请案主张于2011年4月15日申请的美国临时申请案连续号61/475，932的利益，其内容是以参考方式全部并入本文中。
[0002]对美国联邦政府赞助的研究下完成的发明的权利的声明
[0003]这部分的成果由美国国家卫生研究院的ROl CA151391_01(R.D.C)所支持。美国政府对于这发明有某些权利。
【背景技术】
[0004]典型的Wnt路径调节联蛋白的持续性浓度和细胞内定位，联蛋白为胚胎发育和成人组织恒定两者所需的紧密调节的受体介导的信号转导网络的重要成分。于未刺激的正常细胞中，β-联蛋白结合腺肿性息肉(adenomatous polyposis coli, APC)、肝醣合成酶激酶3 β (GSK3 β )以及体轴抑制蛋白(Axin),形成磷酸化β-联蛋白的破坏复合体，以联蛋白为目标来进行蛋白酶体分解。fct配体结合至绉缩(frizzled)和低密度的脂蛋白受体(LRP5和LRP6)抑制GSK3 β /APC/体轴抑制蛋白复合体的活性，使得非磷酸化的β_联蛋白能经历核易位以发挥其转录效果。核β_联蛋白与转录因子的淋巴增强因子/T 细胞因子(lymphoid enhancer factor (LEF) /T-cell factor (TCF))家族相关，以诱导细胞增生、迁移以及存活基因，诸如，c-Myc和cyclin Dl的表现。通常，当Wnt配体与其受体去率禹时，这转录路径是关闭的。然而，各种APC和Axin中的功能流失突变和联蛋白本身中的活化突变使得β-联蛋白能从破坏复合体逃脱，存留在核中，以及驱动致癌的转录。 [0005]于黑腹果蚬(Drosophila melanogaster)中，β _联蛋白的转录活性进一步取决于两个辅助因子BCL9和Pygopus。由TCF、β -联蛋白、BCL9以及Pygopus所组成的四级复合体的形成增强β_联蛋白依赖性fct转录活性。人类BCL9基因是藉由将来自患有前驱B细胞急性淋巴性白血病(ALL)的病患的t(l ；14) (q21 ；q32)易位克隆化而首度辨识。在宽广范围的人类癌症种类中观察到BCL9基因存在于其中的染色体lq21_基因座中的扩增物，而且该基因已与肿瘤扩展、减少存活以及差的临床结果相关。最近，PiggyBac转座子的插入突变法辨识出BCL9—次。反之，在直肠结肠癌(colorectal cancer, CRC)中，APC和β-联蛋白中确立的突变驱动致癌的表型，而多发性骨髓瘤(multiple myeloma, MM)中尚无报导此突变且fct活化反而是由BCL9所驱动，隐含这β -联蛋白辅助因子是真正的致癌基因。BCL9过度表现自此已从大子群的人类肿瘤中辨识，但尚未在肿瘤所源自的正常细胞相对处中表现。BCL9介导的β -联蛋白的转录活性的增强是藉由促进上皮的表型的流失和获得似间质功能性，而增加细胞增生、迁移、侵袭以及肿瘤细胞的转移的潜力。shRNA诱导的体内的BCL9的向下调节减抑Wnt目标(c-Myc、cyclin D1、CD44以及VEGF)的表现，并且相应地藉由减少肿瘤负荷量、转移以及宿主血管生成反应，而增加具有CRC和MM的异体移植小鼠的存活。这些癌症惊人的BCL9依赖性和约30%上皮肿瘤中的BCL9表现提供以BCL9/β-联蛋白蛋白质交互作用为目标的令人信服的理论基础。重要地，Bcl9剔除小鼠缺乏显明的疾病表型，暗示BCL9/ β -联蛋白复合体药理封锁可为相对无毒。[0006]Wnt路径是由脊椎动物和无脊椎动物中的胚胎发育和成人组织恒定两者所需的紧密调节受体介导的信号转导系统所组成，并且涉及典型的和非典型的fct路径。业经显示典型的fct信号传递串联的许多成分在广范围的共同人类癌症(包含结肠直肠癌、肝细胞癌、乳癌、上皮癌以及MM)中作用为肿瘤抑制基因(tumor suppressor gene, TSG)或作用为致癌基因。另外，典型的fct路径已涉及正常(例如，创伤愈合)以及病理过程(例如，糖尿病)的调节。这些观察强调这路径与致癌产生的相关性，以及进一步研究将fct信号传递成分作为癌症治疗、创伤愈合、血管生成以及糖尿病的潜在目标的需求。
[0007]本发明的目的为设计和产生BCL9的HD2结构域的烃装订(stapled)肽(BCL9的装订的α -螺旋或SAH-BCL9)以阻挡Wnt信号传递。本发明的目的亦为证实安定的α -螺旋肽与β_联蛋白的直接结合防止β_联蛋白/BCL9交互作用、Wnt转录活性以及下游目标的表现。此机转会造成一种以SAH-BCL9治疗癌症细胞方法，并且造成肿瘤细胞增生、迁移、肿瘤诱导的血管生成、肿瘤负荷量、去分化(上皮间质转变[epithelial-mesenchymatransistion, EMT])以及Wnt/ β -联蛋白驱动的癌症中的转移的抑制。
【发明内容】
[0008]本发明提供结构约束，抗蛋白酶以及细胞可穿透的BCL9C1-螺旋肽，以及将彼等肽用作治疗和预防剂的方法。相较于相应的未改性的肽，此结构约束的肽展现优异的蛋白分解、酸以及热安定性，而且具备优异的药物动力学性质。本发明的肽以至少一种烃装订安定，但可包含两种、三种或更多种烃装订。多种烃装订的加入特别适合长度为20或更多个氨基酸的α螺旋肽。由于BCL9 HD2结构域的螺旋结构的安定，烃装订允许交互作用面上的氨基酸残基适当地定向。
[0009]于一个态样中，本发 明提供一种BCL9的HD2结构域(BCL9-HD2)的结构约束的肽，包括至少一种烃装订或缝线。
[0010]于一个具体例中，肽包括由与β-联蛋白交互作用的氨基酸所组成的交互作用面。
[0011]于另一个具体例中，交互作用面包括约3至约20个氨基酸。
[0012]于某些具体例中，交互作用面包括4至15个氨基酸。
[0013]于多个具体例中，交互作用面包括与β -联蛋白结合的BCL9-HD2的螺旋面有40%或更大的同一性，其中该交互作用面包括BCL9残基Gln-355、His-358、Arg-359、Ser-362、Leu-363、Leu-366, Ile-369, Gln-370, Leu-373 以及 Phe-374 或其保守性取代。
[0014]又其它具体例中，交互作用面包括与β -联蛋白结合的BCL9-HD2的螺旋面有50%至90%同一性，其中该交互作用面包括BCL9残基Gln-355、His-358、Arg-359、Ser-362、Leu-363、Leu-366, Ile-369, Gln-370, Leu-373 以及 Phe-374 或其保守性取代。
[0015]于另一个具体例中，交互作用面表示α-螺旋的单面。
[0016]于多个具体例中，螺旋的单面包括一个、两个、三个或四个相邻的堆栈列的氨基酸，其中该堆栈列的氨基酸是由每转具有3.6个氨基酸的α螺旋中的位置a、d以及g ;位置b和e ;或位置c和f所定义，其中氨基酸连续地且顺序地指定为位置a至g ;由每转具有3个氨基酸的31(|螺旋中的位置a和d ;位置b和e ;或位置c和f所定义，其中氨基酸连续地和顺序地指定为位置a至f ;或其同系物。[0017]于其它具体例中，本发明提供一种结构约束的肽，其是由以下者所组成:与BCL9-HD2 的氨基酸 351 至 374 (SEQ ID NO: I (LSQEQLEHRERSLQTLRDIQRMLF))有约 20% 至100%之间的序列同源性，
[0018]其中该肽包括一个和五个之间的烃装订。
[0019]于其它具体例中，本发明提供一种结构约束的肽，其是由以下者所组成:与BCL9-HD2 的氨基酸 351 至 374 (SEQ ID NO: I (LSQEQLEHRERSLQTLRDIQRMLF))有约 50% 至100%之间的序列同源性，
[0020]其中该肽包括一个和五个之间的烃装订。
[0021 ] 于多个具体例中，烃装订或缝线在一个或多个天然或非天然氨基酸之间。
[0022]于某些具体例中，烃装订或缝线是以烯烃换位反应形成。
[0023]于另一个具体例中，非天然氨基酸是选自下列各者:
【权利要求】
1.一种BCL9的HD2结构域(BCL9-HD2)的结构约束的肽，包括至少一个烃装订或缝线。
2.根据权利要求1所述的结构约束的肽，其中所述肽包括由与β_联蛋白交互作用的氨基酸所组成的交互作用面。
3.根据权利要求2所述的结构约束的肽，其中所述交互作用面包括约3至约20个氨基酸。
4.根据权利要求3所述的结构约束的肽，其中所述交互作用面包括4至15个氨基酸。
5.根据权利要求4所述的结构约束的肽，其中所述交互作用面包括与结合β-联蛋白的BCL9-HD2的螺旋面有40%或更大的同一性，其中所述交互作用面包括BCL9残基Gln-355、His-358、Arg-359、Ser-362、Leu-363、Leu-366、Ile-369、Gln-370、Leu-373、以及Phe-374或其保守性取代。
6.根据权利要求5所述的结构约束的肽，其中所述交互作用面包括与结合β-联蛋白的BCL9-HD2的所述螺旋面有50%至90%的同一性，其中所述交互作用面包括BCL9残基Gln-355、His-358、Arg-359、Ser-362、Leu-363、Leu-366、Ile-369、Gln-370、Leu-373、以及Phe-374或其保守性取代。
7.根据权利要求 2所述的结构约束的肽，其中所述交互作用面表示α-螺旋的单面。
8.根据权利要求7所述的结构约束的肽，其中螺旋的所述单面包括一个、两个、三个或四个相邻的堆栈列的氨基酸，其中所述堆栈列的氨基酸是由每转具有3.6个氨基酸的α螺旋中的位置a、d以及g ;位置b和e ;或位置c和f所定义，其中所述氨基酸连续地且顺序地指定为位置a至g ;由每转具有3个氨基酸的31(|螺旋中的位置a和d ;位置b和e ;或位置c和f所定义，其中氨基酸连续地和顺序地指定为位置a至f ;或其同系物。
9.根据权利要求2所述的结构约束的肽，是由以下者所组成:对BCL9-HD2的氨基酸351 至 374 (SEQ ID NO:1 (LSQEQLEHRERSLQTLRDIQRMLF))有约 20% 至 100% 之间的序列同源性， 其中所述肽包括一个至五个之间的烃装订。
10.根据权利要求2所述的结构约束的肽，对BCL9-HD2的氨基酸351至374(SEQ IDNO:1 (LSQEQLEHRERSLQTLRDIQRMLF))有约 50% 至 100% 之间的序列同源性， 其中所述肽包括一个至五个之间的烃装订。
11.根据权利要求2所述的结构约束的肽，其中所述烃装订或缝线是在一个或多个天然或非天然的氨基酸之间。
12.根据权利要求11所述的结构约束的肽，其中所述烃装订或缝线是以烯烃换位反应形成。
13.根据权利要求11所述的结构约束的肽，其中所述非天然氨基酸是选自以下各者:
14.根据权利要求2所述的结构约束的肽，包括在所述BCL9HD2肽内的I个至5个装订或缝线。
15.根据权利要求14所述的结构约束的肽，其中一个装订或缝线是位于所述BCL9HD2肽的以下位置内:a) 1、i+4 ；b) i，i+7 ；以及c) 1、i+30
16.根据权利要求14所述的结构约束的肽，其中另一个装订或缝线是位于所述BCL9HD2 肽的以下位置内:a) 1、i+4 ;b) 1、i+7 ;以及 c) 1、i+3。
17.根据权利要求14所述的结构约束的肽，其中任何其它装订或缝线是位于所述BCL9HD2 肽的以下位置内:a) 1、i+4 ;b) 1、i+7 ;以及 c) 1、i+3。
18.根据权利要求2所述的结构约束的肽，其中一个烃装订是位于所述BCL9HD2肽的以下例示性位置内，以及藉由装订扫描迭代: . 351 LSQEQLEHRERSLQTLRDIQRBLF 374 BCL9-HD2 结构域 .
1、i+4单一装订:
XSQEXLEHRERSLQTLRDIQRBLF
LXQEQXEHRERSLQTLRDIQRBLF
LSXEQLXHRERSLQTLRDIQRBLF
LSQXQLEXRERSLQTLRDIQRBLF
LSQEXLEHXERSLQTLRDIQRBLF
LSQEQXEHRXRSLQTLRDIQRBLF
LSQEQLXHREXSLQTLRDIQRBLF
LSQEQLEXRERXLQTLRDIQRBLF
LSQEQLEHXERSXQTLRDIQRBLF
LSQEQLEHRXRSLXTLRDIQRBLF
LSQEQLEHREXSLQXLRDIQRBLF
LSQEQLEHRERXLQTXRDIQRBLF
LSQEQLEHRERSXQTLXDIQRBLF
LSQEQLEHRERSLXTLRXIQRBLF
LSQEQLEHRERSLQXLRDXQRBLF
LSQEQLEHRERSLQTXRDIXRBLF
LSQEQLEHRERSLQTLXDIQXBLF
LSQEQLEHRERSLQTLRXIQRXLF
LSQEQLEHRERSLQTLRDXQRBXF
LSQEQLEHRERSLQTLRDIXRBLX . 1、i+7装订:
XSQEQLEXRERSLQTLRDIQRBLF
LXQEQLEHXERSLQTLRDIQRBLF
LSXEQLEHRXRSLQTLRDIQRBLF
LSQXQLEHREXSLQTLRDIQRBLF
LSQEXLEHRERX LQTLRDIQRBLF
LSQEQXEHRERSXQTLRDIQRBLF
LSQEQLXHRERSLXTLRDIQRBLFLSQEQLEXRERSLQXLRDIQRBLF LSQEQLEHXERSLQTXRDIQRBLF LSQEQLEHRXRSLQTLXDIQRBLF LSQEQLEHREXSLQTLRXIQRBLF LSQEQLEHRERXLQTLRDXQRBLF LSQEQLEHRERSXQTLRDIXRBLF LSQEQLEHRERSLXTLRDIQXBLF LSQEQLEHRERSLQXLRDIQRXLF LSQEQLEHRERSLQTXRDIQRBXF LSQEQLEHRERSLQTLXDIQRBLX 1、i+3单一装订: XSQXQLEHRERSLQTLRDIQRBLF LXQEXLEHRERSLQTLRDIQRBLF LSXEQXEHRERSLQTLRDIQRBLF LSQEXLEXRERSLQTLRDIQRBLF LSQEQXEHXERSLQTLRDIQRBLF LSQEQLXHRXRSLQTLRDIQRBLF LSQEQLEXREXSLQTLRDIQRBLF LSQEQLEHXERXLQTLRDIQRBLF LSQEQLEHRXRSXQTLRDIQRBLF LSQEQLEHREXSLXTLRDIQRBLF LSQEQLEHRERXLQXLRDIQRBLF LSQEQLEHRERSXQTXRDIQRBLF LSQEQLEHRERSLXTLXDIQRBLF LSQEQLEHRERSLQXLRXIQRBLF LSQEQLEHRERSLQTXRDXQRBLF LSQEQLEHRERSLQTLXDIXRBLF LSQEQLEHRERSLQTLRXIQXBLF LSQEQLEHRERSLQTLRDXQRXLF LSQEQLEHRERSLQTLRDIXRBXF LSQEQLEHRERSLQTLRDIQXBLX。
19.根据权利要求2所述的结构约束的肽，其中两个烃装订是位于所述BCL9 HD2肽的以下例示性位置内，而且藉由装订扫描迭代:
351 LSQEQLEHRERSLQTLRD IQRBLF 374 BCL9-HD2 结构域
1、i+3双装订: XSQXQLEHRERSLQTLRDIQXBLX XSQXQLEHRERSLQTLRDIXRBXF XSQXQLEHRERSLQTLRDXQRBXF i λ i+4双装订:XSQEXLEHRERSLQTLRDIXRBLX
XSQEXLEHRERSLQTLRDXQRBXF
XSQEXLEHRERSLQTLXDIQRXLF
.1、i+7双装订:
XSQEQLEXRERSLQTLXDIQRBLX
XSQEQLEXRERSLQTXRDIQRBXF
XSQEQLEXRERSLQXLRDIQRXLF。
20.根据权利要求2所述的结构约束的肽，其中所述一个或多个烃装订或缝线是位于所述BCL9 HD2结构域的任何以下例示性位置内，而且藉由装订扫描迭代: .351 LSQEQLEHRERSLQTLRD IQRBLF 374 BCL9-HD2 结构域 混合的1、i+4 ;1、i+3 ;以及1、i+7双装订:
XSQEXLEHRERSLQTLXDIQRBLX
XSQEXLEHRERSLQTXRDIQRBXF
XSQEXLEHRERSLQXLRDIQRXLF
XSQEXLEHRERSLQTLRDIQXBLX
XSQEXLEHRERSLQTLRDIXRBXF
XSQEXLEHRERSLQTLRDXQRXLF
XSQEQLEXRERSLQTLRDIXRBLX
XSQEQLEXRERSLQTLRDXQRBXF
XSQEQLEXRERSLQTLRXIQRXLF
XSQEQLEXRERSLQTLRDIQXBLX
XSQEQLEXRERSLQTLRDIXRBXF
XSQEQLEXRERSLQTLRDXQRXLF
XSQXQLEHRERSLQTLRDIXRBLX
XSQXQLEHRERSLQTLRDXQRBXF
XSQXQLEHRERSLQTLRXIQRXLF
XSQXQLEHRERSLQTLXDIQRBLX
XSQXQLEHRERSLQTXRDIQRBXF
XSQXQLEHRERSLQXLRDIQRXLF
依序的1、i+4装订:
XSQEXLEHXERSLQTLRDIQRBLF
LXQEQXEHRXRSLQTLRDIQRBLF
LSXEQLXHREXSLQTLRDIQRBLF
LSQXQLEXRERXLQTLRDIQRBLF
LSQEXLEHXERSXQTLRDIQRBLF
LSQEQXEHRXRSLXTLRDIQRBLF
LSQEQLXHREXSLQXLRDIQRBLF
LSQEQLEXRERXLQTXRDIQRBLF
LSQEQLEHXERSXQTLXDIQRBLFLSQEQLEHRXRSLXTLRXIQRBLF
LSQEQLEHREXSLQXLRDXQRBLF
LSQEQLEHRERXLQTXRDIXRBLF
LSQEQLEHRERSXQTLXDIQXBLF
LSQEQLEHRERSLXTLRXIQRXLF
LSQEQLEHRERSLQXLRDXQRBXF
LSQEQLEHRERSLQTXRDIXRBLX
依序的1、i+3装订:
XSQXQLXHRERSLQTLRDIQRBLF
依序的1、i+7装订:
XSQEQLEXRERSLQXLRDIQRBLF
混合的依序装订:
XSQXQLEXRERSLQTLRDIQRBLF
XSQXQLEHREXSLQTLRDIQRBLF
XSQEXLEXRERSLQTLRDIQRBLF
XSQEXLEHRERXLQTLRDIQRBLF
XSQEQLEXREXSLQTLRDIQRBLF
XSQEQLEXRERXLQTLRDIQRBLF。
21.根据权利要求18所述的结构约束的肽，进一步包括一个至四个另外的烃装订。
22.根据权利要求21所述的结构约束的肽，其中所述另外的烃装订是位于所述BCL9HD2结构域的任何以下例示性位置内，并且藉由装订扫描迭代:
，351 LSQEQLEHRERSLQT LRD IQRBLF 374 BCL9-HD2 结构域
，1、i+4单一装订:
XSQEXLEHRERSLQTLRDIQRBLF
LXQEQXEHRERSLQTLRDIQRBLF
LSXEQLXHRERSLQTLRDIQRBLF
LSQXQLEXRERSLQTLRDIQRBLF
LSQEXLEHXERSLQTLRDIQRBLF
LSQEQXEHRXRSLQTLRDIQRBLF
LSQEQLXHREXSLQTLRDIQRBLF
LSQEQLEXRERXLQTLRDIQRBLF
LSQEQLEHXERSXQTLRDIQRBLF
LSQEQLEHRXRSLXTLRDIQRBLF
LSQEQLEHREXSLQXLRDIQRBLF
LSQEQLEHRERXLQTXRDIQRBLF
LSQEQLEHRERSXQTLXDIQRBLF
LSQEQLEHRERSLXTLRXIQRBLF
LSQEQLEHRERSLQXLRDXQRBLF
LSQEQLEHRERSLQTXRDIXRBLF
23.根据权利要求2所述的结构约束的肽，其中位置351至374的所述氨基酸序列是选自以下各者: SEQ ID N0:1:BCL9 HD2 结构域:
LSQEQLEHRERSLQTLRDIQRMLF SEQ ID N0:2:BCL9 HD2 结构域 M372B
LSQEQLEHRERSLQTLRDIQRBLF SEQ ID N0:3:SAH-BCL9a:LSQEQLEHRERSLQTLRXIQRXLF SEQ ID N0:4:SAH-BCL9b:LSQEQLEHRERSLXTLRXIQRBLF SEQ ID N0:5:SAH-BCL9c:LSQEQLEHREXSLQXLRDIQRBLF
SEQ ID NO:6:SAH-BCL9b(H358D): LSQEQLEDRERSLXTLRXIQRBLF
SEQ ID NO:7:SAH-BCL9b(R359E): LSQEQLEHEERSLXTLRXIQRBLF
24.一种组成物，包括权利要求1至23中任一项所述的肽及医药上可接受的载体。
25.—种抑制受试者的典型的Wnt/β-联蛋白讯息传递的方法，包括给药权利要求1至23中任一项所述的肽。
26.—种抑制受试者的BCL9与β -联蛋白的结合的方法，包括给药权利要求1至23中任一项所述的肽。
27.根据权利要求25或26所述的方法，其中对BCL9与β-联蛋白的结合的所述抑制是由权利要求1至23中任一项所述的结构约束的肽造成。
28.一种治疗受试者的BCL9/0 -联蛋白结合介导的疾病或病症的方法，包括对所述受试者给药权利要求1至23中任一项所述的化合物。
29.根据权利要求28所述的方法，其中所述受试者已经辨识为需要BCL9/i3-联蛋白交互作用或fct讯息传递的抑制剂。
30.根据权利要求28所述的方法，其中所述疾病是癌、肿瘤细胞增生、肿瘤细胞去分化以及转移、肿瘤转移、肿瘤诱导血管生成、癌症干细胞化学抗性、以及增生疾病；或涉及创伤愈合、血管生成或糖尿病。
31.根据权利要求30所述的方法，其中所述疾病是结肠直肠癌、多发性骨髓瘤、肺癌、结肠癌、乳癌、前列腺癌、肝癌、胰脏癌、脑癌、肾脏癌、卵巢癌、胃癌、皮肤癌、骨癌、胃癌、乳癌、胰脏癌、神经胶瘤、胶质母细胞瘤、肝细胞上皮癌、乳突样肾上皮癌、头和颈鳞状细胞上皮癌、白血病、淋巴瘤、骨髓瘤、以及固态肿瘤。
32.—种治疗受试者的癌症的方法，包括对所述受试者给药权利要求1至23中任一项所述的化合物。
33.根据权利要求32所述的方法，其中所述受试者已先前经辨识为需要典型的Wnt/β-联蛋白讯息传递抑制剂以治疗所述癌症。
34.根据权利要求30所述的方法，其中所述疾病涉及创伤愈合、血管生成或糖尿病.35.根据权利要求28至34中任一项所述的方法，其中对所述受试者给药另外的治疗剂、辐射或化疗。
35.权利要求35缺失。
36.根据权利要求35所述的方法，其中所述另外的治疗化合物是抗癌症化合物。
37.根据权利要求35所述的方法，其中所述化合物和所述另外的治疗剂是同时或依序地给药。
38.根据权利要求35所述的方法，其中所述化合物和所述另外的治疗剂共同连结(亦即，双官能性化合物)。
39.根据权利要求25至38中任一项所述的方法，其中所述受试者为人类。
40.一种试剂盒，包括权利要求1至23中任一项所述的结构约束的肽以及用于治疗癌症的指不。
41.一种辨识抑制BCL9与β_联蛋白的结合的化合物的方法，包括以下步骤:使权利要求1至23中任一项所述的肽与β -联蛋白接触，以及接着筛选破坏权利要求1至23中任一项所述的肽与β-联蛋白之间的交互作用的小分子或化合物。
【文档编号】A61P35/00GK103649113SQ201280029656
【公开日】2014年3月19日 申请日期:2012年4月16日 优先权日:2011年4月15日
【发明者】L·D·瓦伦斯基, R·卡拉斯科, G·H·伯德 申请人:达纳-法伯癌症研究所有限公司