专利名称：一种长形肉豆蔻总木脂素提取物的制备方法
技术领域：
本发明涉及肉豆蘧活性物质的提取方法，具体是一种长形肉豆蘧总木脂素的制备方法。
背景技术：
长形肉豆蘧为肉豆蘧科肉豆蘧属植物长形肉豆蘧Iri1Siica argen tea. Warb.的干燥成熟种仁。长形肉豆蘧在印度尼西亚等国家作为药用，在中国则作为食用香料，不做药用。但近年来研究发现，长形肉豆蘧中的木脂素具有抗乳腺癌细胞增殖、抗芳香酶、抗17 β -羟基类固醇脱氢酶和抗氧化等多种活性，具较高的药用价值。长形肉豆蘧的化学成分主要为挥发油，脂肪油，木脂素等。其中挥发油中主要含有肉豆蘧醚、黄樟醚、甲基丁香酚、榄香脂素等；脂肪油主要成分为长形肉豆蘧酸甘油酯等；木脂素主要成分为赤式-6-澳白木脂素、去氢二异丁香酚、利卡啉-B、异愈创木素等。现代药理研究表明长形肉豆蘧总木脂素类成分具有抗氧化、保肝、抗炎、抗肿瘤等作用。目前尚未见有关于长形肉豆蘧总木脂素提取物的制备方法。
发明内容
本发明的目的，是提供一种长形肉豆蘧总木脂素提取物的制备方法，通过溶剂提取，利用大孔吸附树脂技术，提高长形肉豆蘧提取物中总木脂素的含量，方法简单易行，适合工业化生产。采用的 技术方案是
一种长形肉豆蘧总木脂素提取物的制备方法，包括下述工艺步骤
(O药材粉碎取长形肉豆蘧，净选，除去虫蛀和霉变品，粉碎成粗粉，备用。(2)去除长形肉豆蘧中挥发油及水溶性成分取上述长形肉豆蘧粗粉适量，称定重量，加8-12倍药材量水，浸泡I小时，提取挥发油5小时，过滤，药渣再加10倍药材量水煎煮2小时，滤过，药渣在50°C下真空干燥至恒重；所得的上述水煎液及挥发油弃去。(3)制备长形肉豆蘧总木脂素粗提液取上述干燥至恒重的长形肉豆蘧粗粉药渣，精密称定，分别加药渣8-10倍量体积份数的90%乙醇提取2-3次，每次1. 5-2小时，滤过，合并醇提滤液，放冷静置24小时，滤过，滤液真空浓缩回收乙醇至无醇味，浓缩至每Iml药液相当于Ig药渣，浓缩液放冷静置至室温，加水稀释至2倍体积，搅匀，离心(4000r/min)30分钟,弃去上清液。取沉淀物加2倍长形肉豆蘧粗粉重量的水超声分散，得混悬液。将混悬液先用石油醚提取，石油醚提取液弃去；然后再用乙酸乙酯提取，回收溶剂、浓缩，减压干燥至恒重，得乙酸乙酯提取物；
将乙酸乙酯提取物加适量无水乙醇超声溶解，与2倍乙酸乙酯提取物重量的AB-8型大孔吸附树脂拌匀，加入> 10倍无水乙醇量的水，搅拌均匀，得粗提液。(4)制备长形肉豆蘧总木脂素提取物取步骤(3)制备成的粗提液，加于已处理好的AB-8型大孔吸附树脂柱上，先用30%的低浓度乙醇洗脱至无色，弃去30%乙醇洗脱液，再分别用50%、70%的乙醇洗脱至无色，合并上述洗脱液，回收乙醇，浓缩至相对密度1. 30 1. 33 (60°C)的清膏，真空干燥，即得。上述百分比为质量百分比。总木脂素的含量测定采用紫外分光光度法取长形肉豆蘧总木脂素提取物适量，精密称定，配成一定浓度，以空白溶剂做参比，在275 nm波长处测定吸光度，代入去氢二异丁香酚标准曲线方程，计算长形肉豆蘧提取物中总木脂素含量。本发明能提高长形肉豆蘧提取物中总木脂素含量，方法简单易行，适于工业化生产。
具体实施例方式一种长形肉豆蘧总木脂素提取物的制备方法，包括下述工艺步骤
(I)药材原料制备
取长形肉豆蘧，净选，除去虫蛀和霉变品，粉碎成粗粉，备用。(2)去除长形肉豆蘧中挥发油及水溶性成分
取上述长形肉豆蘧粗粉100g，称定重量，加12倍药材量水，浸泡I小时，提取挥发油5小时，过滤，药渣再加10倍药材量水煎煮2小时，滤过，药渣在50°C下真空干燥至恒重；所得的上述水煎液及挥发油弃去。(3)制备长形肉豆蘧 总木脂素粗提液
取上述干燥至恒重的长形肉豆蘧粗粉药渣，精密称定，分别加药渣10倍量体积份数的90%乙醇，提取2次，每次1. 5小时，滤过，合并醇提滤液，放冷静置24小时，滤过，滤液真空浓缩回收乙醇，浓缩至每Iml药液相当于Ig药渣，浓缩液放冷静置至室温，加水稀释至2倍体积，搅勻，离心(4000r/min) 30分钟,弃去上清液,取沉淀物加200ml水超声分散,得混悬液。将混悬液先用等体积的石油醚提取(30 60°C) 4次，合并的石油醚提取液弃去；然后再用等体积的乙酸乙酯提取4次，回收溶剂、浓缩，减压干燥至恒重，得乙酸乙酯提取物；将乙酸乙酯提取物加适量无水乙醇超声溶解，与2倍乙酸乙酯提取物重量的AB-8型大孔吸附树脂拌匀，加入大于或等于10倍无水乙醇量的水，搅拌均匀，得粗提液。(4)制备长形肉豆蘧总木脂素提取物
将步骤(3)制备的粗提液，加于已处理好的AB-8型大孔吸附树脂柱上，先用30%的低浓度乙醇洗脱至无色，弃去30%乙醇洗脱液，再分别用50%、70%乙醇洗脱至无色，合并上述洗脱液，回收乙醇，浓缩至在60°C下相对密度为1. 30 1. 33的清膏，真空干燥，即得。
权利要求
1.一种长形肉豆蘧总木脂素提取物的制备方法，其特征在于包括下述工艺步骤(1)药材原料制备取长形肉豆蘧，净选，除去虫蛀和霉变品，粉碎成粗粉，备用；(2)去除长形肉豆蘧中挥发油及水溶性成分取上述长形肉豆蘧粗粉，称定重量，加12倍药材量水，浸泡I小时，提取挥发油5小时，过滤，药渣再加10倍药材量水煎煮2小时，滤过，药渣在50°C下真空干燥至恒重；所得的上述水煎液及挥发油弃去；(3)制备长形肉豆蘧总木脂素粗提液取上述干燥至恒重的长形肉豆蘧粗粉药渣，精密称定，分别加药渣10倍量体积份数的90%乙醇提取2次，每次1. 5小时，滤过，合并醇提滤液，放冷静置24小时，滤过，滤液真空浓缩回收乙醇，浓缩至每Iml药液相当于Ig药渣，浓缩液放冷静置至室温，加水稀释至2倍体积，搅匀，离心30分钟，离心机4000r/min，弃去上清液，取沉淀物加2倍长形肉豆蘧粗粉重量的水超声分散，得混悬液，将混悬液先用石油醚提取，石油醚提取液弃去；然后再用乙酸乙酯提取，回收溶剂、浓缩，减压干燥至恒重，得乙酸乙酯提取物；将乙酸乙酯提取物加适量无水乙醇超声溶解，与2倍乙酸乙酯提取物重量的AB-8型大孔吸附树脂拌匀，加入大于或等于10倍无水乙醇量的水，搅拌均匀，得粗提液；(4)制备长形肉豆蘧总木脂素提取物将步骤(3)制备的粗提液，加于已处理好的AB-8型大孔吸附树脂柱上，先用30%的低浓度乙醇洗脱至无色，弃去30%乙醇洗脱液，再分别用50%、70%乙醇洗脱至无色，合并上述洗脱液，回收乙醇，浓缩至在60°C下相对密度为1. 30 1. 33的清膏，真空干燥，即得。
全文摘要
本发明介绍一种长形肉豆蔻总木脂素提取物的制备方法。该制备工艺为1.药材粉碎成粗粉。2.挥发油及水溶性成分的去除取药材粗粉提取挥发油，药渣干燥。3.总木脂素粗提液的制备取药渣加90%乙醇提取，醇提液回收乙醇，浓缩，离心，上清液弃去，沉淀物加水分散得混悬液。将混悬液先用石油醚提取，提取液弃去；再用乙酸乙酯提取，回收溶剂，干燥，得乙酸乙酯提取物；将该提取物加无水乙醇溶解，与适量大孔吸附树脂拌匀，加水搅匀得粗提液。4.总木脂素提取物制备将粗提液，加于已处理好的大孔吸附树脂柱上，依次用不同浓度乙醇洗脱，收集相应的洗脱液，回收乙醇，浓缩干燥，即得。本法操作简单，制得的长形肉豆蔻总木脂素提取物纯度较高。
文档编号A61P1/16GK103054919SQ201310009799
公开日2013年4月24日 申请日期2013年1月11日 优先权日2013年1月11日
发明者袁子民, 王静, 贾天柱 申请人:辽宁中医药大学