一种保肝制品的制作方法
【专利摘要】本发明提供一种保肝制品。所述保肝制品至少包括芝麻提取物和水飞蓟提取物，所述芝麻提取物和水飞蓟提取物的重量百分比为1:0.01－0.01：1。本发明还提供了所述保肝制品的制备方法。本发明提供的保肝制品可以较全面地预防由酒精或四氯化碳等化学物质引起的肝脏组织损伤，提高肝脏抵御化学损伤的能力。
【专利说明】—种保肝制品
【技术领域】
[0001]本发明涉及一种生物制品，尤其涉及一种保肝制品。
【背景技术】
[0002]肝脏是人体重要的排毒器官，经人体肠道等消化系统所吸收的有毒物质，通过肝脏解毒后变为无毒物质，再经过胆汁或尿液排出体外。肝脏功能损伤会直接威胁者人体健康，在诸多引起肝脏损伤的因素中，化学物质造成的肝脏损伤越来越引起人们的关注。可引起肝损伤的化学物质包括酒精、环境中的化学毒物等。
[0003]研究发现，酒精对肝脏的损伤是由于过量酒精进入人体后，在代谢过程产生大量的NADH (烟碱酰胺腺嘌呤二核苷酸)和NADP+ (烟碱酰胺腺嘌呤二核苷磷酸盐)，而NADH的增加促进脂质的合成，从而导致脂肪肝；同时，酒精代谢过程中还会产生大量代谢产物乙醛，为了消除乙醛的毒副作用，需要消耗大量的谷胱甘肽(GSH)，造成抗氧化物质谷胱甘肽(GSH)含量的下降，最终破坏细胞内氧化还原稳态并诱导氧化应激，产生大量不能有效去除的活性氧自由基(reactive oxygen species, ROS),包括超氧阴离子(02_)、轻自由基(OH)和过氧化氢(H2O2)等，这些氧化应激可能会引起线粒体功能障碍、脂质过氧化以及蛋白质改性，从而进一步导致肝细胞的死亡、炎症反应的发生、以及星形细胞的活化等。
[0004]环境中的化学毒物，如四氯化碳，在人体内代谢会产生一种氧化能力很强的中间产物，导致生物膜上的脂质过氧化，破坏膜的磷脂，改变细胞的结构与功能，并干扰脂蛋白的合成与转运，形成脂肪肝。由四氯化碳引起的急性肝功能损害患者的血清ALT、AST活性会明显升高，患者的肝脏严重受损时，其血清胆红素、凝血酶原时间也会明显升高，血清白蛋白含量则明显降低。
[0005]多种天然提取物经研究证实对消除或减轻上述化学性肝损伤有益，例如:芝麻提取物和水飞蓟提取物等。芝麻提`取物:包括芝麻素，表芝麻素、芝麻林素、芝麻酚和芝麻酚林等，可有效减轻酒精对肝脏的损伤和促进肝脏脂肪代谢，减少肝脏脂肪堆积，例如:抑制血清谷丙转氨酶(ALT)、谷草转移酶(AST)、谷胱甘肽转移酶(GST)，以及提高乙醛脱氢酶(ADHL)的活性，减轻酒精对肝脏的损伤；还可促进乙醛脱氢酶(ADHL)的基因表达，增加乙醇与乙醛的代谢，减轻乙醛的毒性，缓解酒精中毒；另外还可以降低血清中的三酸甘油酯(这是造成脂肪肝的主要脂肪来源)水平，并能通过提高乙酰辅酶A氧化酶的活性，抑制多不饱和脂肪酸的增加，促进脂肪氧化，降低肝脏脂肪的蓄积。此外，还可增加肝脏谷胱甘肽(GSH)含量，降低肝脏丙二醛(MDA)含量。水飞蓟提取物:包括水飞蓟素(包括水飞蓟宾(silybin)、异水飞蓟宾(isosilybin)、水飞蓟宁(siIidianin)和水飞蓟丁(silihristin))可有效消除氧自由基，促进肝脏内蛋白质的生物合成减轻氧化应激引起的肝损伤，例如:通过消除氧自由基、抗脂质过氧化和刺激肝细胞内蛋白质的生物合成，促进受损肝细胞的复元；稳定肝细胞膜，保护肝细胞不受损害。此外，水飞蓟宾通过增进蛋白质合成促进肝的再生、可抑制肝损伤时生成白细胞三烯(Ieukotriene)和引起炎症反应的前列腺素的生成，具有抗氧化作用、以及预防谷胱甘肽的缺乏等作用。[0006]但是，现有的研究表明单独使用上述两种提取物均不能较全面地预防由酒精或四氯化碳等化学物质造成的肝脏功能损伤，尤其是不能较全面防止肝脏的组织学特征恶化，因此如何提供一种能较全面地预防肝脏功能损伤，尤其是能较全面防止肝脏的组织学特征恶化的保肝制品成为有待解决的问题。
【发明内容】
[0007]本发明的目的是提供一种保肝制品，通过使用特定比例的芝麻提取物和水飞蓟提取物作为活性成分，能较全面预防肝脏功能由于酒精或四氯化碳等化学物质的损伤，尤其是能较全面防止肝脏组织学特征的恶化。
[0008]本发明提供的一种保肝制品，至少包括芝麻提取物和水飞蓟提取物，所述芝麻提取物和水飞蓟提取物的重量百分比为1:0.01 — 0.01:1。
[0009]在本发明的【具体实施方式】中，所述的芝麻提取物可以是专利200610089321.9中所述方法获得的芝麻素。本发明的芝麻提取物也可以是以芝麻素为主要成分，进一步还可含有表芝麻素、芝麻林素、芝麻酹和芝麻酹林中的一种或多种。
[0010]所述水飞蓟提取物可以是专利200910238368.0中所述方法获得的水飞蓟素。本发明的水飞蓟提取物也可以是以水飞蓟素(包括水飞蓟宾和异水飞蓟宾)主要成分，进一步还可含有水飞蓟亭、水飞蓟宁、水飞蓟宾葡甲胺盐和水飞蓟宾二偏琥珀酸酯钠中的一种或多种。
[0011]在本发明方案中，所述芝麻提取物和水飞蓟提取物的总重占所述保肝制品0.lwt%-25wt%o
[0012]进一步的，所述芝麻提取物和水飞蓟提取物的总量占所述保肝制品5wt%_25wt%。
[0013]进一步的，所述保肝制`品还包括:五味子提取物、葛根提取物、枸杞提取物和茶提取物中的一种或多种。所述五味子提取物为五味子甲素、五味子乙素、五味子丙素、五味子醇甲、五味子醇乙、五味子酯甲或五味子酯乙。所述五味子提取物、葛根提取物、枸杞提取物和茶提取物均可通过商购获得，或者通过水浸提取获得，水浸提取的条件一般可以是:温度90°C，浸提时间为3小时，浸提过程的液固质量比为15:1。
[0014]在本发明的方案中，所述芝麻提取物、水飞蓟提取物、五味子提取物、葛根提取物、枸杞提取物和茶提取物中的一种或多种均可用作本发明保肝制品的活性成分(即有效成分)。
[0015]进一步的，本发明提供的保肝制品可以保肝药品或保肝食品。
[0016]进一步的，所述保肝药品还包括医药学上可接受的赋形剂。更进一步的，所述保肝药品的制剂形式可以为硬胶囊、软胶囊、片剂、颗粒剂、粉剂、悬浮液、糖浆、口服液或注射液。进一步的，所述片剂可以为普通片剂、分散片或泡腾片。
[0017]在本发明的一个【具体实施方式】中，本发明的保肝药品的有效成分包括芝麻提取物和水飞蓟提取物的组合，该保肝药品的每日剂量取决于多种因素:例如根据个体摄入的酒精或接触的四氯化碳等化学物质的量，可以每天向个体施用含有治疗有效量(有效成分的总量)为10-5000mg的保肝药物，本领域技术人员根据需要确定保肝药物的剂量，只要能较全面地预防由酒精或四氯化碳引起的肝损伤，尤其是能较全面防止肝脏的组织学特征恶化即可。[0018]所述保肝药品的每日剂量当然也可以根据个体已经产生的肝脏损伤(由酒精或四氯化碳等化学物质引起)的程度(例如:脂肪肝的严重性)、个体的年龄、身体条件、并发症等进行适当调整。通常可以每天向肝脏损伤个体施用含有治疗有效量为10-5000mg的保肝药物。进一步的，对于轻度肝脏损伤个体施用含有治疗有效量为10-400mg的保肝药物。对于中度肝脏损伤的个体施用含有治疗有效量为500-2000mg的保肝药物。对于重度肝脏损伤个体施用含有治疗有效量为2500-5000mg的保肝药物。以实现缓解或预防酒精或四氯化碳引起的肝损伤，提高肝脏抵御化学损伤的能力。
[0019]进一步的，所述保肝药品可以是单位制剂。所述单位制剂为满足一次给药所需有效成分的制剂，常见的单位制剂如一单位(片)片剂、一单位(针)针剂或粉针剂等。所述单位制剂中含有10-5000mg的芝麻提取物和水飞蓟提取物。进一步的，所述单位制剂中含有10-400mg的芝麻提取物和水飞蓟提取物。更进一步的，所述单位制剂中含有500-2000mg的芝麻提取物和水飞蓟提取物。更进一步的，所述单位制剂中含有2500-5000mg的芝麻提取物和水飞蓟提取物。
[0020]在本发明的一个实施方式中，以注射方式施用含有治疗有效量的所述保肝药品。更好地是对患者以单位制剂的剂量给药，所述单位制剂为满足一次给药所需有效成分的制剂，常见的单位制剂如一单位(片)片剂、一单位(针)针剂或粉针剂等。患者一次施用所需的药物的量可以方便地通过计算患者的体重和该患者一次用药所需单位体重剂量的乘积得到。例如，在制备药物的过程中，一般认为成人体重为50-90kg，可以最初可以通过实验动物与人的单位体重剂量之间的等效剂量换算关系来确定用药量。例如，可以根据FDA、SFDA等药品管理机构提出的指导意见，也可参考(黄继汉等，“药理试验中动物间和动物与人体间的等效剂量换算”，《中国临床药理学与治疗学》，2004S印;9 (9):1069-1072)来确定。在本发明的实施方式中，可以使用按照人和大鼠的体表面积折算系数0.018来换算人和大鼠的剂量。根据本发明实施方式，所述保肝药品中的芝麻提取物和水飞蓟提取物每次以5-200mg/kg大鼠剂量施用至大鼠时治疗效果较好，当以10-100mg/kg大鼠剂量，例如100mg/kg、50mg/kg,以及10mg/kg大鼠剂量施用至大鼠时治疗效果更佳。制药商可以根据上述换算方法得到用于人的单位制剂中的有效成分含量，用以应用于其制药过程中。
[0021]在本发明的技术方案中，根据等效剂量换算关系以及人的常规体重，并且综合用药安全、成本和药效，优选的，所述单位制剂中含有20-800mg的所述芝麻提取物和水飞蓟提取物，更优选含有40-450mg的所述芝麻提取物和水飞蓟提取物。
[0022]进一步的，所述保肝食品中还可以含有果糖和/或奶制品。
[0023]所述果糖可通过添加含有果糖成分的果葡糖浆、结晶果糖、蜂蜜等方式实现，添加量可以为根据保肝食品的口感以及风味的需要适当选择。在所述保肝食品中加入果糖除了可以改善保肝食品的风味外，还可以加快乙醇的代谢，有防醉、解酒和保护肝脏的作用。
[0024]所述奶制品可以鲜奶、酸奶或奶酪。所述酸奶可以由长双歧杆菌、两歧双歧杆菌、婴儿双歧杆菌、青春双歧杆菌、保加利亚乳杆菌、嗜热链球菌、嗜酸乳杆菌中的一种或多种发酵获得的酸奶。所使用到的各种益生菌均为可商购获得的益生菌，发酵方法采用本领域常规的发酵方法。
[0025]进一步的，本发明提供的所述保肝食品包括:含有上述活性成分的糖果、口香糖、奶含片、奶球、奶条或奶提子等产品。这些产品采用本领域已知的工艺进行制备。所述保肝食品还可以是保肝饮料，包括固体饮料和液体饮料。
[0026]本发明提供的保肝食品中活性成分(包括芝麻提取物和水飞蓟提取物)的量可以视目的(预防或健康促进)而定适当地确定。通常，可以将芝麻提取物和水飞蓟提取物(芝麻提取物与水飞蓟提取物的重量百分比为1:0.01 - 0.01:1)以0.lwt%-25wt%、优选5wt%-25wt%的总量添加到所述保肝食品中。
[0027]本发明还提供了上述保肝制品的制备方法，包括在制备过程添加重量百分比为1:0.01 - 0.01:1芝麻提取和水飞蓟提取物。
[0028]本发明提供的保肝制品和其制备方法的具有以下优点:
[0029]1、本发明的保肝制品具有突出的抑制酒精或四氯化碳引起的胆管增生、肝脏炎症肝损伤的作用，以及抑制肝脏中丙二醛含量的升高的作用，可以较全面防止由于酒精或四氯化碳等化学物质引起的肝脏功能损伤，尤其是能预防肝脏的组织学特征的恶化。
[0030]2、本发明的保肝制品可以含有酸奶，酸奶能在胃肠黏膜表层形成一层生物活性保护膜(酒精防护墙)，把酒精和胃肠黏膜隔离开来，有效减少人体对酒精的吸收，有效地保护肠胃不受乙醇的直接刺激，并激活肠胃的自我防御修复系统，使有害物质对器官的伤害降至最低；另外，酸奶中益生菌所产生的乙醇脱氢酶(ADH)和乙醛脱氢酶(ADHL)，可促进酒精分解，减轻对肝脏的毒害；并且益生菌产生的VB1、VB2、VB6、VB12等对解酒有利；同时益生菌发酵后产生的乳酸可有效地提高钙的利用率，也有利于解酒，并提高肾脏细胞的活力和功能，快速排除体内的酒精及其衍生物和其它有毒物质。
[0031]3、本发明的保肝制品可以含有果糖，除了可以改善制品的风味外，还可以加快乙醇的代谢，有防醉、解酒和保护肝脏的作用。
【具体实施方式】
[0032]下文，本发明将通过实例来更详细地描述。然而，以下实例仅用于理解本发明且其并不限制本发明。以下实施例中如无特别说明，所述的芝麻提取物为专利200610089321.9中所述方法获得的芝麻素，所述水飞蓟提取物为专利200910238368.0中所述方法获得的水飞蓟素。
[0033]实施例1动物实验
[0034]一.实验材料
[0035]1、动物:购自内蒙古大学实验动物研究中心的60只雄性大鼠(SD种)(平均体重=120-130g)。
[0036]2、药物、试剂及仪器:
[0037]阳性药物1:芝麻提取物；阳性药物2:水飞蓟提取物。
[0038]橄榄油和CCL4均商购获得。
[0039]3、分组及药物剂量
[0040]将上述60只大鼠随机分为6组，大鼠每组10只，分别为:
[0041]I)空白对照组(施用橄榄油)；2)模型组(施用橄榄油和CCL4)；
[0042]3)阳性药物组I (施用橄榄油和CCL4,以及表1-3中相应剂量的芝麻提取物)；阳性药物组2 (施用橄榄油和CCL4,以及表1-3中相应剂量的水飞蓟提取物组)；
[0043]4)高剂量组、5)中剂量组、6)低剂量组(施用橄榄油和CCL4,以及表1_3中相应治疗有效量的保肝药品)。
[0044]二、实验过程
[0045]实验第I天，空白对照组腹腔注射0.75ml/kg大鼠体重的橄榄油，每周一次，共8周。其余各组大鼠:模型组、高剂量组、中剂量组、低剂量组，阳性药物组，分别腹腔注射CCL4与橄榄油的混合物，施用量为0.75ml/kg大鼠体重，该混合物中CCL4占40% (体积)，每周一次，共8周。在上述对除空白对照组以外的各组大鼠进行腹腔注射CCL4与橄榄油的混合物的同一天，对高、中、低剂量组分别施用相应剂量的保肝制品一次，对阳性药物组1，2分别施用相应的阳性药物一次。
[0046]最后一次给药结束后，对空白对照组，模型组，高、中、低剂量组，以及阳性药物组的大鼠停止供食12小时，然后分别腹腔注射10%水合氯醛进行麻醉，取血收集血清，根据试剂盒的操作要求检测血清中AST和ALT值。
[0047]收集完血清后，将大鼠肝使用冰生理盐水清洗组织表面，滤纸吸干，制备肝组织匀浆:取左叶肝组织10%匀浆，以3000rpm离心10分钟，取上清液，根据试剂盒的操作要求检测肝组织中SOD、GPX、GSH、MDA水平。
[0048]将剩余的肝组织置于10%中性福尔马林溶液中固定24小时，常规石蜡包埋，4μ m切片，HE染色，光学显微镜下进行肝脏的组织学特征检查，包括:检查肝脏胆管增生、肝脏炎症、肝脏脂肪细胞变性、肝脏细胞坏死以及肝脏纤维化的情况等。由轻到重的程度分别标记为I分，2分，3分，4分，无明显病变为O分，极轻度病变为0.5分，累加所有分数，并计算出每组每只动物的均分(土SD)，分值越高提示病变程度越重。对病变评分结果进行两个样本比较的秩和检验，与模型组进行比较。
[0049]三、数据处理:对所有数据进行数据处理，对病理学评分采用秩和检验，其他数据采用t检验，并统计分析结果。`
[0050]四、结果如表1-3所示
【权利要求】
1.一种保肝制品，其特征在于，至少包括活性成分芝麻提取物和水飞蓟提取物，所述芝麻提取物和水飞蓟提取物的重量为1:0.0l — 0.0l:1。
2.根据权利要求1所述的保肝制品，所述芝麻提取物和水飞蓟提取物的总重占所述保肝制品 0.lwt%-25wt%o
3.根据权利要求1所述的保肝制品，所述芝麻提取物和水飞蓟提取物的总量占所述保肝制品 5wt%-25wt%。
4.根据权利要求1所述的保肝制品，还包括:五味子提取物、葛根提取物、枸杞提取物和茶提取物中的一种或多种。
5.根据权利要求1-4任一项所述的保肝制品，所述保肝制品为保肝药品或保肝食品。
6.根据权利要求5所述的保肝制品，所述保肝药品还包括医药学上可接受的赋形剂。
7.根据权利要求5所述的保肝制品，所述保肝药品的制剂形式为硬胶囊、软胶囊、片剂、颗粒剂、粉剂、口服液或注射液。
8.根据权利要求7所述的保肝制品，所述保肝药品为单位制剂，所述单位制剂中含有10-5000mg的芝麻提取物和水飞蓟提取物。
9.根据权利要求5所述的保肝制品，所述保肝食品中还含有果糖和/或奶制品。
10.根据权利要求9所述的保肝`制品，所述奶制品为鲜奶、酸奶或奶酪。
【文档编号】A61K31/357GK103446212SQ201310411115
【公开日】2013年12月18日 申请日期:2013年9月11日 优先权日:2013年9月11日
【发明者】王鼎, 赵永强, 孙立, 廖小雪 申请人:白心亮