一种对哮喘有治疗作用的冬虫夏草口服液及其制备方法
【专利摘要】本发明涉及保健品领域，具体而言，涉及一种对哮喘有治疗作用的冬虫夏草口服液及其制备方法。该方法，在洁净度级别为10万级的洁净区内进行如下步骤：将培养至对数生长期的冬虫夏草无性型菌的菌液以5～10%体积比加至发酵液中，并培养至对数生长期；将在发酵液中培养至对数生长期的冬虫夏草无性型菌的菌体与发酵液一起碾磨至80%以上的菌体在300目以下；将碾磨后的混合液经孔径300目过滤；将过滤后的混合液在45℃～60℃蒸发浓缩，至100g浓缩液中腺苷含量≥80mg；将浓缩液与蜂蜜混合均匀，且浓缩液占总重量的85-99%，灌装得到成品。本发明提供的方法生产的冬虫夏草口服液，副作用小，对哮喘具有良好的治疗效果。
【专利说明】一种对哮喘有治疗作用的冬虫夏草口服液及其制备方法
【技术领域】
[0001]本发明涉及保健品领域，具体而言，涉及一种对哮喘有治疗作用的冬虫夏草口服液及其制备方法。
【背景技术】
[0002]哮喘是一种常见病、多发病，是影响人们身心健康的重要疾病。控制不佳的哮喘患者对日常工作及日常生活都会发生影响，可导致误工、误学，导致活动、运动受限，使生命质量下降，并带来经济上的负担及对家人的生活发生负面影响。哮喘反复发作可导致慢性阻塞性肺疾病、肺气肿、肺心病、心功能衰竭、呼吸衰竭等并发症。哮喘治疗不及时、不规范，哮喘可能致命。
[0003]目前，治疗哮喘的药物大多为西药或是喷剂，虽然其见效快，但是只能暂时延缓病情，且产生的副作用大。
【发明内容】
[0004]本发明的目的在于提供一种对哮喘有治疗作用的冬虫夏草口服液及制备方法，以解决上述的问题。
[0005]在本发明的实施例中提供的一种对哮喘有治疗作用的冬虫夏草口服液的制备方法，在洁净度级别为10万级的洁净区内进行如下步骤:
[0006]将培养至对数生长期的冬虫夏草无性型菌的菌液以5~10%体积比加至发酵液中，并培养至对数生长期；
[0007]将在发酵液中培养至对数生长期的冬虫夏草无性型菌的菌体与发酵液一起碾磨至80%以上的菌体在300目以下；
[0008]将碾磨后的混合液经孔径300目过滤；
[0009]将过滤后的混合液在45°C~60°C蒸发浓缩，至100g浓缩液中腺苷含量≥80mg ；
[0010]将所述浓缩液与所述蜂蜜混合均匀，且所述浓缩液占总重量的85-99%，灌装得到成品。
[0011]优选地，在所述将培养至对数生长期的冬虫夏草菌液以5~10%体积比接入至发酵液中，并培养至对数生长期的步骤中，所述发酵液的体积占发酵罐体积的65-75%。
[0012]优选地，在所述将培养至对数生长期的冬虫夏草菌液以5~10%体积比接入至发酵液中，并培养至对数生长期的步骤中，培养温度为18~20°C。
[0013]优选地，在所述将培养至对数生长期的冬虫夏草菌液以5~10%体积比接入至发酵液中，并培养至对数生长期的步骤中，培养时间为20-30天。
[0014]优选地，在所述将过滤后的混合液在45°C~60°C蒸发浓缩，至100g浓缩液中腺苷含量> 80mg的步骤中，采用二效动态循环中温浓缩装置进行浓缩。
[0015]优选地，在所述将过滤后的混合液在45°C~60°C蒸发浓缩，至100g浓缩液中腺苷含量≥80mg的步骤中，所述浓缩至原体积的75~85%。[0016]优选地，在所述浓缩液与所述蜂蜜混合均匀，且所述浓缩液占总量的85-99%，灌装得到成品的步骤中，所述浓缩液占总量的90%。 [0017] 在本发明的实施例中还提供了一种根据上述制备方法制备的一种对哮喘有治疗作用的冬虫夏草口服液。
[0018]本发明实施例提供的冬虫夏草口服液，主要成分包括冬虫夏草无性型菌体及其发酵液和蜂蜜；整个生产过程是在洁净度级别为10万级的洁净区内进行，采用45-60°C蒸发浓缩，最大程度上保存了其原有的营养成分，生产得到的冬虫夏草口服液，副作用小，对哮喘具有良好的治疗效果。
【具体实施方式】
[0019]下面通过具体的实施例子对本发明做进一步的详细描述。
[0020]本发明所用的冬虫夏草无性型菌为 申请人:自己分离所得，于2014年I月06日保藏于中国微生物菌种保藏管理委员会普通微生物中心，地址:北京市朝阳区北辰西路I号院3号中国科学院微生物研究所，邮编:100101，保藏号为:CGMCC N0.9151，分类命名:中国被毛孢(Hirsutella sinensis),保藏名称为:中国被毛孢F3-02-1。冬虫夏草无性型菌即为中国被毛孢。
[0021]分离方法:
[0022](一 )试剂
[0023]1、培养基
[0024]牛肉汤500ml、牛奶200ml、葡萄糖30g、琼脂18g、水解乳蛋白5g、酵母lg、磷酸氢二钾lg、核糖核酸0.5g、硫酸镁0.2g、加水定容至1000ml，121°C、0.1MPa条件下灭菌30min
后备用。
[0025]牛肉汤的制备:先将新鲜牛肉去除筋和脂肪，然后取Ikg牛肉加蒸馏水2kg放入容器内煮沸，煮沸约40min后将肉渣滤去，肉水经121°C、0.1MPa高压灭菌30min后备用。
[0026]注:①煮沸时应边煮边搅动；②煮沸前应在容器壁上划一刻度，煮沸时随时添补蒸馏水。
[0027]2、升汞消毒液
[0028]准确称取0.1gHgCl2加少许蒸馏水溶解后用蒸馏水定容至100mL。
[0029]( 二)菌体的获得
[0030]1、在青海省玉树州杂多县附近的山上采集虫体饱满、子座短小的冬虫夏草，冬虫夏草外包裹的土(菌)鞘要完好，放入携带便携式超净工作箱；
[0031]2、将采收回来的冬虫夏草外包裹的土(菌)鞘于超净工作台内剥离，然后用灭菌的毛刷洗净冬虫夏草表面的泥土，用灭菌水清洗干净，放入升汞消毒液灭菌5min后取出，用无菌蒸馏水冲冼三次后备用；
[0032]3、在超净工作台内取一根冬虫夏草放置在无菌的培养皿中，用医用手术刀切去冬虫夏草的外表皮，选取里面的白色菌丝组织块，将组织块放入另一个无菌的培养皿内切碎至碎粒状；
[0033]4、将碎粒状组织块接种至有培养基的试管中，盖上棉塞后放入培养箱中18°C恒温培养。[0034](三)菌体的形态特征和分子鉴定
[0035] 该菌培养7d后，在接种组织周围出现辐射状沟纹突起；培养IOd~15d出现白色细毛状菌丝；30d后形成灰白色光滑的菌苔，气生菌丝不发达，下面菌丝开始伸入培养基中；60d后形成茸状圆形的菌落；90d菌落直径可达1.5cm~2.5cm，菌落突起呈馒头状，表面不平，灰白色至棕黄色，菌落坚硬，伸入培养基中的菌丝呈棕黑色，同时有棕黑色色素向外围扩散，菌丝体具鲜香菇气味；培养120d~150d开始产生分生孢子。
[0036]镜检观察时可见分生孢子顶生、肾形，着生在分生孢子梗顶端，分生孢子颜色为黄褐色。
[0037]根据该菌体的形态特征推测该菌体为冬虫夏草无性型菌，经分子鉴定，确认为该菌体为冬虫夏草无性型菌-中国被毛孢，命名为中国被毛孢F3-02-1。
[0038]将得到的冬虫夏草无性型菌用于生产冬虫夏草口服液。
[0039]一种对哮喘有治疗作用的冬虫夏草口服液的制备方法，在洁净度级别为10万级的洁净区内进行如下步骤:
[0040]a.将培养至对数生长期的冬虫夏草无性型菌的菌液以5~10%体积比加至发酵液中，并培养至对数生长期；
[0041]b.将在发酵液中培养至对数生长期的冬虫夏草无性型菌的菌体与发酵液一起碾磨至80%以上的菌体在300目以下；
[0042]c.将碾磨后的混合液经孔径300目过滤；
[0043]d.将过滤后的混合液在45°C~60°C蒸发浓缩，至100g浓缩液中腺苷含量^ 80mg ；
[0044]e.将所述浓缩液与所述蜂蜜混合均匀，且所述浓缩液占总重量的85-99%，灌装得到成品。
[0045]对数生长期是冬虫夏草无性型菌体生长最旺盛的时期，此时发酵液中的菌体为絮状的混浊体，便于碾磨工艺的实施。若是培养时间过短，则菌丝生长不充分；若培养时间过长，则菌丝容易绕成球形，绕成球形后球体中间的菌丝易死亡，而影响最后得到的冬虫夏草口服液的效果。
[0046]冬虫夏草菌液以5~10%体积比进行接种，既保证了菌体生长的初始菌量，又保证了菌体生长的速度。
[0047]在a步骤中，所述发酵液的体积占发酵罐体积的65-75 %。发酵液的体积占发酵罐体积的65-75%，保留了发酵罐一定的空间，利于贮存一定的氧气量，从而利于菌体的生长。
[0048]具体地，在a步骤中，培养采用18~20°C培养。经验证，18~20°C为冬虫夏草菌体培养的适宜温度。
[0049]进一步地，在a步骤中，培养时间为20-30天。此时，发酵液中的菌丝体为絮状的混浊体，便于碾磨。此时，100mL菌液中菌丝体干重为5~7克。
[0050]具体地，在d步骤中，采用二效动态循环中温浓缩装置进行蒸发浓缩。本发明中所用的二效动态循环中温浓缩装置购至济宁金百特工程机械有限公司，由两套一效设备构成，该套设备一效加热的温度在55V~60°C，二效蒸发的温度在40V~45°C。设备由二套蒸发罐、二套换热器、一套冷凝器、二套回收储罐、二套蒸发循环泵等组成，配备热源和冷源。系统的热源采用蒸汽，然后用汽水换热器转换为热水循环加热蒸发，冷却采用冷却塔循环。这样，保证了在60°C以下进行浓缩混合液，60°C以下时还可以保留混合液中绝大部分的有效成分。
[0051]进一步地，在d步骤中，腺苷含量是检测浓缩液是否达到生产冬虫夏草口服液的标准，100g浓缩液中腺苷含量> SOmg即达到标准，经验证，浓缩至原体积的75~85%即可。
[0052]优选地，在e步骤中，浓缩液以百分比为90%与所述蜂蜜混合均匀。此时，所得到的口服液味觉效果最好。
[0053]在本发明的实施例中提供的一种对哮喘有辅助治疗作用的冬虫夏草口服液，主要成分包括:冬虫夏草无性型菌体及其发酵液和蜂蜜。
[0054]冬虫夏草性平味甘，具有平喘、祛痰、补肺肾、益虚损、养精气的功效，是年老体弱、病后体衰、产后体虚者的最佳补品。现代药理学表明，冬虫夏草对支气管有明显扩张作用，扩张支气管后无疑能减小呼吸道的阻力，缓解呼吸困难等症状。
[0055]蜂蜜味甘，具有抗菌消炎、促进组织再生、提高免疫力、润肺止咳等功效，它含多种微量元素，是一种营养丰富的天然滋养食品。
[0056]本发明提供的冬虫夏草口服液除了包括冬虫夏草无性型菌体外，还包括其发酵液，研究发现，菌体在发酵过程中，菌体会分泌一些有效药理成分至发酵液中，如:核苷类物质等。研究还发现，发酵液有很强的抑菌能力。因此，虽然发酵液中含有一定的药理成分。 [0057]本实施例中，所有的操作在洁净度级别为10万级的洁净区内进行，混合液采用45°C~60°C蒸发浓缩。相对于采用高温灭菌，本发明提供的方法不易破坏菌体及发酵液中的有效营养成分，从而避免了对疗效、药性的影响。
[0058]将得到的冬虫夏草口服液符合如下的检验标准。
[0059]
【权利要求】
1.一种对哮喘有治疗作用的冬虫夏草口服液的制备方法，其特征在于，在洁净度级别为10万级的洁净区内进行如下步骤: 将培养至对数生长期的冬虫夏草无性型菌的菌液以5~10%体积比加至发酵液中，并培养至对数生长期； 将在发酵液中培养至对数生长期的冬虫夏草无性型菌的菌体与发酵液一起碾磨至80%以上的菌体在300目以下； 将碾磨后的混合液经孔径300目过滤； 将过滤后的混合液在45°C~60°C蒸发浓缩，至100g浓缩液中腺苷含量≥80mg ； 将所述浓缩液与蜂蜜混合均匀，且所述浓缩液占总重量的85-99%，灌装得到成品。
2.根据权利要求1述的一种对哮喘有治疗作用的冬虫夏草口服液的制备方法，其特征在于，在所述将培养至对数生长期的冬虫夏草菌液以5~10%体积比接入至发酵液中，并培养至对数生长期的步骤中，所述发酵液的体积占发酵罐体积的65-75%。
3.根据权利要求2所述的一种对哮喘有治疗作用的冬虫夏草口服液的制备方法，其特征在于，在所述将培养至对数生长期的冬虫夏草菌液以5~10%体积比接入至发酵液中，并培养至对数生长期的步骤中，培养温度为18~20°C。
4.根据权利要求3所述的一种对哮喘有治疗作用的冬虫夏草口服液的制备方法，其特征在于，在所述将培养至对数生长期的冬虫夏草菌液以5~10%体积比接入至发酵液中，并培养至对数生长期的步骤中，培养时间为20-30天。
5.根据权利要求1所述的一种对哮喘有治疗作用的冬虫夏草口服液的制备方法，其特征在于，在所述将过滤后的混合液在45°C~60°C蒸发浓缩，至100g浓缩液中腺苷含量^ 80mg的步骤中，采用二效动态循环中温浓缩装置进行浓缩。
6.根据权利要求2所述的一种对哮喘有治疗作用的冬虫夏草口服液的制备方法，其特征在于，在所述将过滤后的混合液在45°C~60°C蒸发浓缩，至100g浓缩液中腺苷含量≥80mg的步骤中，所述浓缩至原体积的75~85%。
7.根据权利要求2所述的一种对哮喘有治疗作用的冬虫夏草口服液的制备方法，其特征在于，在所述浓缩液与所述蜂蜜混合均匀，且所述浓缩液占总量的85-99%，灌装得到成品的步骤中，所述浓缩 液占总量的90%。
8.根据权利要求1-7任一项所述的制备方法制备的一种对哮喘有治疗作用的冬虫夏草口服液。
【文档编号】A61P11/06GK103933079SQ201410013614
【公开日】2014年7月23日 申请日期:2014年1月10日 优先权日:2014年1月10日
【发明者】刘欣, 李玉玲, 马少丽, 徐海峰, 张宗豪 申请人:青海省畜牧兽医科学院