本发明属于一种医药技术领域，具体是涉及到一种注射用硫酸软骨素的制备方法。
背景技术：
硫酸软骨素（CS）是共价连接在蛋白质上形成蛋白聚糖的一类糖胺聚糖。硫酸软骨素广泛分布于动物组织的细胞外基质和细胞表面，糖链由交替的葡萄糖醛酸和N-乙酰半乳糖胺（又称N-乙酰氨基半乳糖）二糖单位组成，通过一个似糖链接区连接到核心蛋白的丝氨酸残基上。
硫酸软骨素存在于从线虫到人除植物外的所有生物中，发挥着许多重要的生理功能。虽然多糖的主链结构并不复杂，但就硫酸化程度、硫酸基和两种差异向异构糖醛酸再链内的分布来说，呈现高度的不均一性。
注射用硫酸软骨素的要求很高，制造也比较困难，成本高，中国专利申请号为201410807849.X的专利申请公开了一种注射级硫酸软骨素的制备方法，包括以下步骤：
（1）酶解
将口服硫酸软骨素用纯化水溶解成8-10%溶液，用20%的氢氧化钠调pH8.0加入0.1%的胰酶，55±2℃酶解3小时；
（2）除蛋白
将以上溶液加入2%氯化钠，加温至85±2℃，保温1小时，离心过滤（4000rpm）；
（3）碳处理
过滤液加入经干烤除热原的活性炭0.5%，用6N HCl调pH6.5，加温至80±2℃，保温1小时；
（4）过滤
炭处理液用帆布过滤2-3次，使滤液澄清，再精滤（0.45μm）一次；
（5）沉淀
滤液加入4倍量药用95％乙醇搅匀后，室温静置沉淀15小时；
（6）收集、干燥、磨粉
收集沉淀物，脱水，装盘（厚≤5cm）真空干燥(60℃±2)24小时。
上述方法虽然能除去一部分杂质，但是产品的品质还有待提高。
技术实现要素：
本发明要解决的技术问题是提供一种杂质含量低、稳定性好的注射用硫酸软骨素的制备方法。
本发明是一种注射用硫酸软骨素的制备方法，步骤为：
（1）、将硫酸软骨素加入到50-60℃注射用水中，搅拌，得到硫酸软骨素溶液；
（2）、向上述硫酸软骨素溶液中加入甘露醇，搅拌使溶解，然后加入药用炭，搅拌均匀；
（3）、用微孔膜筒式滤芯过滤器粗滤，得到粗滤液；
（4）、将上述粗滤液调pH至5.5-6.5，补加注射用水，搅拌均匀，用0.2μm微孔膜筒式滤芯过滤器除菌过滤，冻干，得到注射用硫酸软骨素。
优选的，所述步骤3中用到的微孔膜筒式滤芯过滤器为0.65μm-0.45μm微孔膜筒式滤芯过滤器。
所述100ml注射用硫酸软骨素的原料中，各组分的含量为：硫酸软骨素1.5-2.5mg、甘露醇0.2-0.4mg、药用炭0.1-0.2mg。
所述冻干步骤为，将过滤后的产品在-45℃—-35℃之间预冻1-4小时，然后降温至-60℃保持1-3小时，抽真空，控制真空度到20MPa以下，缓慢升温至-15℃维持1-2h，继续缓慢升温至10℃，升温时间为5-7h；继续升温至10℃，升温时间为5-7h，在35℃保温干燥1-3h，得到注射用硫酸软骨素。
本发明的有益效果是，本发明注射用硫酸软骨素的稳定性好，杂质含量低，细菌内毒素低至3EU/ml，极大了提高了产品的效能，保证了药液的纯度，提高了用药安全。
具体实施方式
实施例1
本发明注射用硫酸软骨素的制备方法的步骤为：
（1）、将硫酸软骨素加入到50-60℃注射用水中，搅拌，得到硫酸软骨素溶液；
（2）、向上述硫酸软骨素溶液中加入甘露醇，搅拌使溶解，然后加入药用炭，搅拌均匀；
（3）、用0.65μm和0.45μm微孔膜筒式滤芯过滤器分别粗滤，得到粗滤液；
（4）、将上述粗滤液调pH至6.5，补加注射用水，搅拌均匀，用0.2μm微孔膜筒式滤芯过滤器除菌过滤，冻干，得到注射用硫酸软骨素。
所述100ml注射用硫酸软骨素的原料中，各组分的含量为：硫酸软骨素1.5mg、甘露醇0.4mg、药用炭0.2mg。
所述冻干步骤为，将过滤后的产品在-40℃之间预冻1小时，然后降温至-60℃保持3小时，抽真空，控制真空度到20MPa以下，缓慢升温至-15℃维持2h，继续缓慢升温至10℃，升温时间为5h；继续升温至10℃，升温时间为7h，在35℃保温干燥1h，得到注射用硫酸软骨素。
将实施例1制备得到的注射用硫酸软骨素进行检测，其小分子杂质含量低于常规产品，细菌内毒素含量低于3EU/ml。
实施例2
本发明注射用硫酸软骨素的制备方法的步骤为：
（1）、将硫酸软骨素加入到50-60℃注射用水中，搅拌，得到硫酸软骨素溶液；
（2）、向上述硫酸软骨素溶液中加入甘露醇，搅拌使溶解，然后加入药用炭，搅拌均匀；
（3）、用0.65μm和0.45μm微孔膜筒式滤芯过滤器分别粗滤，得到粗滤液；
（4）、将上述粗滤液调pH至5.5，补加注射用水，搅拌均匀，用0.2μm微孔膜筒式滤芯过滤器除菌过滤，冻干，得到注射用硫酸软骨素。
所述100ml注射用硫酸软骨素的原料中，各组分的含量为：硫酸软骨素2.5mg、甘露醇0.2mg、药用炭0.1mg。
所述冻干步骤为，将过滤后的产品在-45℃之间预冻1小时，然后降温至-60℃保持1小时，抽真空，控制真空度到20MPa以下，缓慢升温至-15℃维持1h，继续缓慢升温至10℃，升温时间为7h；继续升温至10℃，升温时间为5h，在35℃保温干燥2h，得到注射用硫酸软骨素。
将实施例1制备得到的注射用硫酸软骨素进行检测，其小分子杂质含量低于常规产品，细菌内毒素含量低于4EU/ml。