本发明涉及医药领域，具体涉及一类低极性稀有人参皂苷混合物及其用途。
背景技术：
癌症是残害人类生命的世界第二大疾病，死亡率仅次于心脑血管疾病，是人类死亡的最主要因素之一。由世卫组织组织下属的的官方癌症机构国际癌症研究中心(IARC)负责的最新版《世界癌症报告》预测，全球癌症病例将呈现迅猛增殖态势，由2012年的1400万人，逐年迅增至2025年的1900万人，到2035年将达到2400万人。报告还显示，2012年全球新增癌症病例有近一半出现在亚洲，其中大部分在中国，中国新增癌症病例高居首位。2012年中国新增307万癌症患者并造成约220万人死亡，分別占全球总量的21.9％和26.8％。世卫的数据略低于中国自己的统计。全国肿瘤登记中心发布的2012年数据显示，中国每年新增癌症病例约350万，约有250万人因此死亡。
现今癌症的常用治疗方法主要有三种模式：手术、放疗和药物治疗，而选定哪个治疗方法则取决于肿瘤的位置、恶性程度、发展程度以及病人身体状态。三种模式中，手术的治疗方法，常因为癌细胞入侵蔓延到邻近组织或远端转移而效果有限；放疗的治疗方法，则受限于对体内其他正常组织造成的伤害；药物的治疗方法，对于晚期弥散性和转移性恶性肿瘤是最基本的治疗方法。过去的几十年里，着眼于直接杀伤肿瘤细胞的化疗虽有明显的发展和进步，成为肿瘤药物治疗的中坚，但这一治疗模式对增殖缓慢的实体瘤效果差、药物选择性小、毒副反应多且严重的缺陷成为临床治疗中的重要限制因素。继手术、放疗和化疗之后的第四种模式是肿瘤的生物治疗，其主要是通过肿瘤宿主防御机制或生物制剂的作用来调节机体自身的生物学反应，从而抑制或消除肿瘤；生物治疗虽然没有太大毒副作用，但由于技术要求严、工艺复杂，因此价格高，众多癌症患者及家属难以承受，影响其在癌症治疗领域的普及。
由于存在上述各种限制，天然抗肿瘤药物的研发取得了越来越多的关注。天然抗癌药物无论是在抑制或杀伤肿瘤细胞、调整机体免疫功能、改善症状与特征和减轻放化疗毒副作用上，还是在肿瘤的病后调理上，均具有重要作用。由此，天然植物新疗法将成为继手术、放疗、化疗和生物疗法之后的第五种模式。
五加科(araliaceae)人参属(Panax)植物，如人参(P.ginseng)、西洋参(P.quenquefolinus)、三七(P.notoginseng)、竹节参(P.uaponicus)，葫芦科绞股蓝属植物绞股蓝(Gynostemma oentaphyllum Thrunb Mak)等均为中国名贵的传统药用植物，其主要有效成分为达玛烷型四环三萜人参皂苷系列化合物。目前已发现五加科植物中的原型人参皂苷有60多种，命名为R1、Ral、Ra2、Rb1、Rb2、Rb3、Rc、Rd、Re、Rf、Rg1、Rg2、Rh1、F等，皆由甙元和糖组成，通常易溶于水，其疗效主要包括：免疫调节功能、改善微循环作用、调节消化机能、增强记忆和学习能力、抗衰老、安神等，但并没有表现出明显的抗肿瘤活性。
低极性稀有人参皂苷在原人参属植物中含量甚微，只存在于野山参，或者红参、黑参和熟三七等炮制的人参和三七产品中，也仅为万分之几，且难溶于水，通常只溶解在乙醇或乙酸乙酯等低极性有机溶剂中，被称为低极性稀有人参皂苷，主要包括：Rg3、Rh2、Rk1、Rg5、Rk2、Rh3、Rk3、Rh4等。现代药理学研究表明，低极性稀有人参皂苷具有较强的抗肿瘤活性，可以抑制癌细胞生长，诱发癌细胞凋亡，选择性抑制肿瘤细胞浸润和转移，并使癌细胞再分化诱导逆转成非癌细胞等，因此低极性稀有人参皂苷具有极高的药用价值和应用前景。
Tung等人(Chem.Pharm.Bull.58(8)1111-1115(2010))曾报道过低极性稀有人参皂苷Rk2或低极性稀有人参皂苷Rh3在对人类急性早幼粒细胞白血病HL-60细胞系中有较强抗癌活性；目前，也有低极性稀有人参皂苷作为抗癌药品或保健品中的主要成分已经上市，如低极性稀有人参皂苷-Rg3(“参一胶囊”)和低极性稀有人参皂苷-Rh2(“今幸胶囊”)。然而，现有的低极性稀有人参皂苷单体，例如上述几种人参皂苷在其广谱的抗癌活性以及有效性方面仍未体现出绝对的优势。
技术实现要素：
本发明要解决的技术问题是提供一种具有广谱的高抗癌有效性的低极性稀有人参皂苷混合物Rk2/Rh3，本发明提供了所述低极性稀有人参皂苷混合物Rk2/Rh3的用途，本发明进一步提供了包含有低极性稀有人参皂苷混合物Rk2/Rh3的组合物及其用途。
本发明所述的低极性稀有人参皂苷混合物Rk2/Rh3由具有如下结构式的
低极性稀有人参皂苷单体Rk2和具有下列结构式
的低极性稀有人参皂苷单体Rh3混合而成，Rk2和Rh3在化学结构上属于同分异构体。
所述低极性人参皂苷单体Rk2与低极性人参皂苷Rh3的重量比为1～9:9～1,优选为1～5：5～1，进一步优选为1～3：3～1。我们在实验中发现：两种同分异构体的结合在药效上产生了增效作用。
所述的低极性稀有人参皂苷混合物Rk2/Rh3在一个用途中，表现在制备用于治疗和/或预防肿瘤和/或癌症的药物中的用途。
其中所述的肿瘤和/或癌症选自：
恶性肿瘤，包括但不限于膀胱癌、乳腺癌、结肠癌、肾癌、肝癌、肺癌(包括小细胞肺癌、非小细胞肺癌)、头和颈癌、食管癌、胆囊癌、卵巢癌、胰腺癌、胃癌、子宫颈癌、甲状腺癌、前列腺癌和皮肤癌(包括鳞状细胞癌)；
淋巴系统的造血肿瘤，包括但不限于白血病、急性淋巴细胞白血病、急性成淋巴细胞白血病、B-细胞淋巴癌、T-细胞淋巴癌、霍奇金淋巴癌、非-霍奇金淋巴癌、毛细胞淋巴癌、外套细胞淋巴瘤、骨髓瘤和Burkett′s氏淋巴癌；
骨髓系统的造血肿瘤，包括但不限于急性和慢性髓细胞性白血病、骨髓增生异常综合征和前髓细胞性白血病；
间质成因的肿瘤，包括但不限于纤维肉瘤和横纹肌肉瘤；
中枢和周围神经系统的肿瘤，包括但不限于星形细胞瘤、成纤维神经瘤、神经胶质瘤和神经鞘瘤；以及
其他肿瘤，包括但不限于黑素瘤、精原细胞瘤、畸胎癌、骨肉瘤、外生性色素颈瘤、甲状腺滤囊癌和卡波氏肉瘤。
所述的低极性稀有人参皂苷混合物Rk2/Rh3的另一个用途中，表现在制备用于免疫调节、改善微循环、提高生命质量的保健品中的用途。
本发明还提供了一种组合物，包括所述低极性稀有人参皂苷混合物Rk2/Rh3。
该组合物优选为药物制剂，其包含治疗和/或预防有效量的所述低极性稀有人参皂苷混合物Rk2/Rh3以及任选的药学可接受的稀释剂、载体、赋形剂、辅料或媒介物。
所述药物制剂的剂型为口服剂型、注射剂型或局部用药剂型中的任何一种。
所述口服剂型包括但不限于片剂、粉剂、悬浊液、乳浊液、胶囊、颗粒剂、糖衣片、药丸、液体、醑剂、糖浆或柠檬水剂。
所述注射剂型包括但不限于水剂、悬浊液或溶液。
所述局部用药剂型包括但不限于软膏、固体、悬浊液、水剂、醑剂、粉剂、糊剂、栓剂、气溶胶、泥敷剂、涂抹剂、洗剂、灌肠剂或乳剂。
所述的组合物的一个用途中，表现在制备用于治疗和/或预防肿瘤和/或癌症的药物中的用途。
其中所述的肿瘤和/或癌症选自：
恶性肿瘤，包括但不限于膀胱癌、乳腺癌、结肠癌、肾癌、肝癌、肺癌(包括小细胞肺癌、非小细胞肺癌)、头和颈癌、食管癌、胆囊癌、卵巢癌、胰腺癌、胃癌、子宫颈癌、甲状腺癌、前列腺癌和皮肤癌(包括鳞状细胞癌)；
淋巴系统的造血肿瘤，包括但不限于白血病、急性淋巴细胞白血病、急性成淋巴细胞白血病、B-细胞淋巴癌、T-细胞淋巴癌、霍奇金淋巴癌、非-霍奇金淋巴癌、毛细胞淋巴癌、外套细胞淋巴瘤、骨髓瘤和Burkett′s氏淋巴癌；
骨髓系统的造血肿瘤，包括但不限于急性和慢性髓细胞性白血病、骨髓增生异常综合征和前髓细胞性白血病；
间质成因的肿瘤，包括但不限于纤维肉瘤和横纹肌肉瘤；
中枢和周围神经系统的肿瘤，包括但不限于星形细胞瘤、成纤维神经瘤、神经胶质瘤和神经鞘瘤；以及
其他肿瘤，包括但不限于黑素瘤、精原细胞瘤、畸胎癌、骨肉瘤、外生性色素颈瘤、甲状腺滤囊癌和卡波氏肉瘤。
所述组合物为保健品，其包含治疗和/或预防有效量的所述低极性稀有人参皂苷混合物Rk2/Rh3以及任选的保健品中可接受的载体。
所述的组合物的另一个用途中，表现在制备用于免疫调节和/或改善微循环和/或提高生命质量的保健品中的用途。
本发明使用的术语具有以下定义，除非另有描述：
本文所用的术语“低极性”，是指相对于普通人参皂苷而言，含量稀少的Rg3、Rh2、Rk2、Rh3等难溶于水，只能溶解在低极性有机溶剂中。
本文所用的术语“组合物”意指包括包含指定量的各指定成分的产品，以及直接或间接从指定量的各指定成分的组合产生的任何产品。所述局部用药剂型包括软膏、固体、悬浊液、水剂、醑剂、粉剂、糊剂、栓剂、气溶胶、泥敷剂、涂抹剂、洗剂、灌肠剂或乳剂。。在无菌条件下将活性化合物与药学可接受的载体和任何所需的防腐剂、缓冲剂或推进剂混合。眼用制剂、眼软膏剂、散剂和溶液剂也被考虑在本发明范围内。
当用于上述治疗或其他治疗时，治疗和/或预防有效量的一种本发明化合物可以以纯形式应用，或者以药学可接受的盐、酯或前药形式(在存在这些形式的情况下)应用。或者，所述化合物可以以含有该目的化合物与一种或多种药学可接受的赋形剂的药物组合物给药。词语“治疗和/或预防有效量”的本发明化合物指以适用于任何医学治疗的合理效果/风险比治疗障碍的足够量的化合物。但应认识到，本发明化合物和组合物的总日用量须由主诊医师在可靠的医学判断范围内作出决定。对于任何具体的患者，具体的治疗和/或预防有效剂量水平须根据多种因素而定，所述因素包括所治疗的障碍和该障碍的严重程度；所采用的具体化合物的活性；所采用的具体组合物；患者的年龄、体重、一般健康状况、性别和饮食；所采用的具体化合物的给药时间、给药途径和排泄率；治疗持续时间；与所采用的具体化合物组合使用或同时使用的药物；及医疗领域公知的类似因素。例如，本领域的做法是，化合物的剂量从低于为得到所需治疗效果而要求的水平开始，逐渐增加剂量，直到得到所需的效果。
本发明还提供包含任选地与一种或多种无毒药学可接受的稀释剂、载体、赋形剂、辅料或媒介物配制在一起的本发明化合物的药物制剂。所述药物制剂可特别专门配制成以固体或液体形式供口服给药、供胃肠外注射或供直肠给药。
本发明的药物组合物可通过口服、直肠、胃肠外、池内、阴道内、腹膜内、局部(如通过散剂、软膏剂或滴剂)、口颊给予人类和其他哺乳动物，或者作为口腔喷雾剂或鼻腔喷雾剂给予。本文所用术语“胃肠外”指包括静脉内、肌肉内、腹膜内、胸骨内、皮下和关节内注射和输液的给药方式。
在另一个方面，本发明提供包含本发明成分和生理可耐受稀释剂的药物组合物。本发明包括一种或多种上述化合物，其与一种或多种无毒生理可耐受或可接受的稀释剂、载体、辅料或媒介物(本文将它们统称为稀释剂)一起配制成组合物，以供胃肠外注射、鼻内传递、以固体或液体形式口服给药、直肠或局部给药等等。
适合于胃肠外注射的组合物可包括生理上可接受的无菌含水或非水溶液剂、分散剂、混悬剂或乳剂，及供重构成无菌可注射溶液剂或分散剂的无菌散剂。合适的含水或非水载体、稀释剂、溶剂或媒介物的实例包括水、乙醇、多元醇(丙二醇、聚乙二醇、甘油等)、植物油(如橄榄油)、可注射有机酯如油酸乙酯及它们的合适混合物。
这些组合物也可含有辅料，如防腐剂、湿润剂、乳化剂和分散剂。通过各种抗细菌剂和抗真菌剂，例如尼泊金酯类、三氯叔丁醇、苯酚、山梨酸等，可确保防止微生物的作用。还期望包括等渗剂，例如糖类、氯化钠等。通过使用能延迟吸收的物质，例如单硬脂酸铝和明胶，可达到可注射药物形式的延长吸收。
混悬剂中除活性化合物外还可含有悬浮剂，例如乙氧基化异十八醇、聚氧乙烯山梨醇和聚氧乙烯失水山梨糖醇酯、微晶纤维素、偏氢氧化铝、膨润土、琼脂和黄蓍胶或者这些物质的混合物等。
在一些情况下，为延长药物的作用，期望减慢皮下或肌内注射药物的吸收。这可通过使用水溶性差的晶体或无定形物质的液体混悬剂来实现。这样，药物的吸收速度取决于其溶解速度，而溶解速度又可取决于晶体大小和晶型。或者，胃肠外给药的药物形式的延迟吸收通过将该药物溶解于或悬浮于油媒介物中来实现。
可注射贮库制剂形式可通过在生物可降解聚合物如聚丙交酯-聚乙交酯(polylactide-polyglycolide)中形成药物的微胶囊基质来制备。可根据药物与聚合物之比和所采用的具体聚合物的性质，对药物释放速度加以控制。其他生物可降解聚合物的实例包括聚原酸酯类(poly(orthoesters))和聚酐类(poly(anhydrides))。可注射贮库制剂也可通过将药物包埋于能与身体组织相容的脂质体或微乳中来制备。
可注射制剂可例如通过用滤菌器过滤或通过掺入无菌固体组合物形式的灭菌剂来灭菌，所述固体组合物可在临用前溶解或分散于无菌水或其他无菌可注射介质。
供口服给药的固体剂型包括胶囊剂、片剂、丸剂、散剂和颗粒剂。在此类固体剂型中，活性化合物可与至少一种惰性的药学可接受的赋形剂或载体如柠檬酸钠或磷酸二钙和/或以下物质混合：a)填充剂或增量剂如淀粉、乳糖、蔗糖、葡萄糖、甘露糖醇和硅酸；b)粘合剂如羧甲基纤维素、海藻酸盐、明胶、聚乙烯吡咯烷酮、蔗糖和阿拉伯树胶；c)保湿剂如甘油；d)崩解剂如琼脂、碳酸钙、马铃薯或木薯淀粉、海藻酸、某些硅酸盐和碳酸钠；e)溶液阻滞剂如石蜡；f)吸收加速剂如季铵化合物；g)湿润剂如鲸蜡醇和甘油单硬脂酸酯；h)吸附剂如高岭土和膨润土以及i)润滑剂如滑石粉、硬脂酸钙、硬脂酸镁、固体聚乙二醇、十二烷基硫酸钠和它们的混合物。在胶囊剂、片剂和丸剂的情况下，所述剂型中也可包含缓冲剂。
相似类型的固体组合物使用赋形剂例如乳糖及高分子量聚乙二醇等，也可用作软胶囊和硬胶囊中的填充物。
片剂、糖衣丸剂(dragees)、胶囊剂、丸剂和颗粒剂的固体剂型可与包衣和壳料如肠溶衣材和医药制剂领域公知的其他衣材一起制备。这些固体剂型可任选含有遮光剂，且其组成还可使其只是或优先地在肠道的某个部位任选以延迟方式释放活性成分。可以使用的包埋组合物的实例包括高分子物质和蜡类。如果适合，活性化合物也可与一种或多种上述赋形剂配成微囊形式。
供口服给药的液体剂型包括药学可接受的乳剂、溶液剂、混悬剂、糖浆剂和酏剂。液体剂型除含有活性化合物外还可含有本领域常用的惰性稀释剂，例如水或其他溶剂，增溶剂和乳化剂例如乙醇、异丙醇、碳酸乙酯、乙酸乙酯、苄醇、苯甲酸苄酯、丙二醇、1，3-丁二醇、二甲基甲酰胺、油类(特别是棉籽油、花生油、玉米油、胚芽油、橄榄油、蓖麻油和芝麻油)、甘油、四氢糠醇(tetrahydrofurfuryl alcohol)、聚乙二醇和脱水山梨糖醇的脂肪酸酯及它们的混合物。口服组合物除包含惰性稀释剂外还可包含辅料，例如湿润剂、乳化和悬浮剂、甜味剂、矫味剂和香味剂。
供直肠或阴道给药的组合物优选是栓剂。栓剂可通过将本发明化合物与合适的非刺激性赋形剂或载体例如可可脂、聚乙二醇或栓剂蜡混合来制备，它们在室温下为固体，但在体温下则为液体，因此可在直肠腔或阴道腔内熔化而释放出活性化合物。
本发明化合物也可以脂质体形式给药。如本领域所公知，脂质体通常用磷脂或其他脂类物质制得。脂质体由分散于含水介质中的单层或多层水化液晶所形成。任何能够形成脂质体的无毒、生理上可接受和可代谢的脂质均可使用。脂质体形式的本发明组合物除含有本发明化合物外，还可含有稳定剂、防腐剂、赋形剂等。优选的脂类是天然和合成的磷脂和磷脂酰胆碱(卵磷脂)，它们可单独或者一起使用。形成脂质体的方法是本领域公知的。
本文所用的术语“药学可接受的前药”代表本发明化合物的前药，其在可靠的医学判断范围内适合用于与人类和低等动物的组织接触而不出现过度的毒性、刺激、过敏反应等，与合理的效果/风险比相称且对其预定用途有效，在可能的情况下还代表本发明化合物的两性离子形式。本发明的前药可例如通过在血液中水解而在体内快速转化成上式的母体化合物。
本发明的低极性稀有人参皂苷混合物Rk2/Rh3具有抑制人肿瘤细胞(17种已测肿瘤细胞)及人脐静脉内皮细胞增殖的抗肿瘤活性，经实验证明因混合物协同作用使其广谱高抗癌活性及有效性优于低极性稀有人参皂苷单体Rg3、Rh2、Rk2和Rh3，可以被制成用于治疗和/或预防不同癌症和/或肿瘤的药物，以及用于免疫调节和/或改善微循环和/或提高生命质量的保健品，重点应用于恶性肿瘤的治疗，具有广阔的应用前景。
具体实施方式
除非特殊说明，本发明所用术语具有本发明所属领域中的一般含义。
下面参考具体实施例，对本发明进行说明，需要说明的是，这些实施例仅仅是说明性的，而不能理解为对本发明的限制。实施例中未注明具体技术或条件的，按照本领域内的文献所描述的技术或条件或者按照产品说明书进行。所用试剂或仪器未注明生产厂商者，均为可以通过市购获得的常规产品。
实施例1低极性稀有人参皂苷混合物Rk2/Rh3及其制备方法
本实施例提供了一种低极性稀有人参皂苷混合物Rk2/Rh3，其由具有如下结构式的
低极性稀有人参皂苷单体Rk2和具有下列结构式
的低极性稀有人参皂苷单体Rh3以重量比1:3的比例混合而成。
具体制备方法如下：
称取2.59mg低极性稀有人参皂苷单体Rk2(自上海源叶生物科技有限公司购买，产品编号为YY91303)和7.76mg低极性稀有人参皂苷单体Rh3(自上海源叶生物科技有限公司购买，产品编号为YY90242)，混合均匀，即得到低极性稀有人参皂苷混合物Rk2/Rh3。
实施例2低极性稀有人参皂苷混合物Rk2/Rh3及其制备方法
本实施例与实施例1的区别在于，是称取8.63mg的低极性稀有人参皂苷单体Rk2和1.73mg的低极性稀有人参皂苷单体Rh3以重量比5:1的比例混合均匀，得到低极性稀有人参皂苷混合物Rk2/Rh3。
实施例3低极性稀有人参皂苷混合物Rk2/Rh3及其制备方法
本实施例与实施例1的区别在于，是称取1.04mg的低极性稀有人参皂苷单体Rk2和9.32mg的低极性稀有人参皂苷单体Rh3以重量比1:9混合均匀，得到低极性稀有人参皂苷混合物Rk2/Rh3。
实施例4低极性稀有人参皂苷混合物Rk2/Rh3的应用
实验类别：
不同混合比例的低极性稀有人参皂苷混合物Rk2/Rh3体外抑制多类肿瘤细胞增殖实验
实验样品：
测试药物：实施例1、2、3制备得到的低极性稀有人参皂苷混合物Rk2/Rh3。
对照药物：低极性稀有人参皂苷单体Rg3(自上海源叶生物科技有限公司购买，商品货号为B21059)；低极性稀有人参皂苷单体Rh2(自上海源叶生物科技有限公司购买，YY91267)；低极性稀有人参皂苷单体Rk2(自上海源叶生物科技有限公司购买，产品编号为YY91303)；低极性稀有人参皂苷单体Rh3(自上海源叶生物科技有限公司购买，产品编号为YY90242)。
实验步骤：
以18种细胞系(包括17种肿瘤细胞系和1种人脐静脉内皮细胞系)为实验用细胞系，取对数生长期细胞(3x 104/mL至2.5x 105/mL)，以每孔100μL接种在96孔板内，每个细胞系用一个96孔板；然后以高浓度150μM至低浓度2μM取7个对数递减浓度(每个浓度设两个复孔)，分别加入测试药物溶液和对照药物溶液(测试药物溶液或对照药物溶液配制：分别采用测试药物或对照药物溶于0.5％的DMSO溶液)500nL，经测试/对照药物溶液作用72小时后，用(Promega；Cat.#G7573)发光细胞活力检测法求出各细胞系中的每种药物的每个浓度对该系细胞的增殖抑制百分率，并绘制量效关系图，最后根据图中曲线测算IC50和最高抑制百分率(Emax)，如表1和表2所示。
表1：不同混合比例的低极性稀有人参皂苷混合物Rk2/Rh3以及对照药物Rg3、Rh2、Rk2和Rh3抑制细胞增殖活性检测结果
表2：不同混合比例的低极性稀有人参皂苷混合物Rk2/Rh3以及对照药物Rg3、Rh2、Rk2和Rh3抑制细胞增殖有效性检测结果
注:表1、表2及上下文出现的术语表达的含义如下：
Rk2/Rh3(1:3)代表低极性稀有人参皂苷混合物Rk2/Rh3中的Rk2与Rh3的重量比为1：3，即实施例1得到的低极性稀有人参皂苷混合物Rk2/Rh3。
Rk2/Rh3(5:1)代表低极性稀有人参皂苷混合物Rk2/Rh3中的Rk2与Rh3的重量比为5：1，即实施例2得到的低极性稀有人参皂苷混合物Rk2/Rh3。
Rk2/Rh3(1:9)代表低极性稀有人参皂苷混合物Rk2/Rh3中的Rk2与Rh3的重量比为1：9，即实施例3得到的低极性稀有人参皂苷混合物Rk2/Rh3。
使用SPSS Statistics软件(提供者：IBM corporation,软件版本:XL fit 21)提供统计学分析。用重复测量变异数分析(Re peated measure ANOVA)检测表1至表2中每组平均值之间的差异是否呈现统计显著(P<0.05或P<0.01)，再用Bonferroni T t ests事后检定进一步探求每组平均数差异原因。
分析结果：
(1)表1显示，当不同混合比例的低极性稀有人参皂苷混合物Rk2/Rh3在18个细胞系中的平均IC50分别与对照药物低极性稀有人参皂苷单体Rg3、Rh2、Rk2和Rh3在18个细胞系中的平均IC50比较时，低极性稀有人参皂苷混合物Rk2/Rh3(5:1)与所有四种对照药物低极性稀有人参皂苷单体Rg3、Rh2、Rk2和Rh3之间的差异均呈现统计显著(P<0.05同时P<0.01)，且其与低极性稀有人参皂苷混合物Rk2/Rh3(1:3)之间也有明显差异(P<0.05同时P<0.01)；而低极性稀有人参皂苷混合物Rk2/Rh3(1:3)与所有四种对照药物以及另外两种比例(5:1和1:9)的混合物相比均有明显差异(P<0.05同时P<0.01)；最后，低极性稀有人参皂苷混合物Rk2/Rh3(1:9)与对照药物低极性稀有人参皂苷单体Rg3、Rh2、Rh3、以及低极性稀有人参皂苷混合物Rk2/Rh3(1:3)的差异呈现统计显著(Rk2/Rh3(1:9)比Rg3、Rh2、Rk2/Rh3(1:3)的P<0.05同时P<0.01；Rk2/Rh3(1:9)比Rh3的P<0.05)。此外，对照药物之间除Rk2和Rh3的组合无显著差异(P>0.05)外，其余组合方式均有明显差异(P<0.05同时P<0.01)。
(2)表2显示，当不同混合比例的低极性稀有人参皂苷混合物Rk2/Rh3在18个细胞系中的平均最高抑制百分率分别与对照药物低极性稀有人参皂苷单体Rg3、Rh2、Rk2和Rh3在18个细胞系中的平均最高抑制百分率比较时，低极性稀有人参皂苷混合物Rk2/Rh3(5:1)与对照药物低极性稀有人参皂苷单体Rg3、Rk2之间的差异呈现统计显著(Rk2/Rh3(5:1)比Rg3的P<0.05同时P<0.01；Rk2/Rh3(5:1)比Rk2的P<0.05)；而低极性稀有人参皂苷混合物Rk2/Rh3(1:3)除与低极性稀有人参皂苷混合物Rk2/Rh3(5:1)之间无明显差异外(P>0.05)，与其余四种对照药物，以及低极性稀有人参皂苷混合物Rk2/Rh3(1:9)之间的平均最高抑制百分率均有明显差异(Rk2/Rh3(1:3)比Rg3的P<0.05同时P<0.01；Rk2/Rh3(1:3)比Rh2、Rk2、Rh3、Rk2/Rh3(1:9)的P<0.05)；最后，低极性稀有人参皂苷混合物Rk2/Rh3(1:9)与对照药物低极性稀有人参皂苷单体Rg3和低极性稀有人参皂苷混合物Rk2/Rh3(1:3)的差异也呈现统计显著(Rk2/Rh3(1:9)比Rg3的P<0.05同时P<0.01；Rk2/Rh3(1:9)比Rk2/Rh3(1:3)的P<0.05)。此外，对照药物低极性稀有人参皂苷单体Rg3与其余三种对照药物分别对比时均有明显差异(P<0.05同时P<0.01)；其余三种对照药物之间无显著差异(P>0.05)。
结论：
(1)不同比例的低极性稀有人参皂苷混合物Rk2/Rh3在所有18种所测细胞系中的抑制细胞增殖活性和有效性均不同程度的高于同类低极性稀有人参皂苷单体Rg3、Rh2和该低极性稀有人参皂苷混合物的单体Rk2、Rh3，表明两种同分异构体低极性稀有人参皂苷单体Rk2、Rh3的结合在药效上产生了增效作用。
(2)在所有被测细胞系中，当低极性稀有人参皂苷混合物Rk2/Rh3中的Rk2和Rh3以重量比为1:3的比例混合时，其活性高于另外两种混合比例(5:1和1:9)，其有效性高于Rk2和Rh3以重量比为1:9的比例混合的低极性稀有人参皂苷混合物Rk2/Rh3，因此低极性稀有人参皂苷混合物Rk2/Rh3中的Rk2与Rh3的重量比为1:3的比例是目前所测的低极性稀有人参皂苷混合物Rk2/Rh3中的Rk2与Rh3混合的最佳比例。
(3)在所有被测细胞系中，低极性稀有人参皂苷混合物Rk2/Rh3(1:3)在纤维肉瘤细胞系中具有最高抑制细胞增殖活性(IC50＝10.41μM)；抑制细胞增殖活性排在其次的细胞系是人脐静脉内皮细胞(IC50＝13.78μM)。
(4)低极性稀有人参皂苷混合物Rk2/Rh3(1:3)对所有被测细胞系的最高抑制百分率(有效性)都非常接近100％，这意味着它具有广泛的高抗癌有效性。而同类对照药物低极性稀有人参皂苷单体Rg3只对1种细胞系有近100％的抑制率；同类对照药物低极性稀有人参皂苷单体Rh2和该低极性稀有人参皂苷混合物的单体Rk2、Rh3的有效性虽明显高于对照药物低极性稀有人参皂苷单体Rg3，但均仍低于低极性稀有人参皂苷混合物Rk2/Rh3(1:3)的有效性。