细菌核糖核酸细胞壁组合物及其制备和使用方法与流程

文档序号:13108707阅读:来源:国知局
技术特征:
1.组合物,其包含:从分枝杆菌细胞分离的分枝杆菌RNA;和从分枝杆菌细胞分离的分枝杆菌细胞壁,其中所述组合物不含苯酚或链霉蛋白酶,且所述RNA是寡核糖核苷酸和多核糖核苷酸的形式,其中所述寡核糖核苷酸和多核糖核苷酸的长度是2至150个碱基,其中所述分支杆菌细胞是选自以下的一种或多种分支杆菌的细胞:草分枝杆菌(Mycobacteriumphlei)、牝牛分枝杆菌(Mycobacteriumvaccae)、耻垢分枝杆菌(Mycobacteriumsmegmatis)、鸟分枝杆菌副结核亚种(Mycobacteriumaviumsubspeciesparatuberculosis)和牛分枝杆菌BCG(MycobacteriumbovisBCG)。2.根据权利要求1所述的组合物,其中所述分支杆菌细胞来自草分枝杆菌。3.根据权利要求1或权利要求2所述的组合物,其另外包含完整的分枝杆菌细胞。4.根据权利要求3所述的组合物,其中所述完整的分枝杆菌细胞是选自以下的一种或多种分支杆菌的完整细胞:草分枝杆菌、牝牛分枝杆菌、耻垢分枝杆菌、鸟分枝杆菌副结核亚种和牛分枝杆菌BCG。5.根据权利要求3所述的组合物,其中所述完整的分枝杆菌细胞是草分枝杆菌的完整细胞。6.根据权利要求1所述的组合物,其中所述寡核糖核苷酸和多核糖核苷酸的长度是2至40个碱基,或20至40个碱基。7.根据权利要求3所述的组合物,其中所述完整的分枝杆菌细胞占所述组合物的0.05重量%至95重量%,或所述完整的分枝杆菌细胞占所述组合物的0.19重量%至19.6重量%。8.根据前述权利要求中的任一项所述的组合物,其另外包含药学上可接受的载体或递送系统。9.制备根据权利要求1所述的组合物的方法,所述方法包括下述相继步骤:A)破碎分枝杆菌细胞生物质,以产生破碎的分枝杆菌细胞、完整的分枝杆菌细胞、破碎的分枝杆菌细胞壁和RNA;B)任选地将完整的分枝杆菌细胞与所述破碎的分枝杆菌细胞壁和RNA分离;和C)将所述破碎的分枝杆菌细胞的一部分的可溶性的细胞溶质内容物与所述破碎的分枝杆菌细胞壁和RNA分离,以得到分枝杆菌细胞壁、核糖核酸组合物;和D)在足以产生2至150个碱基的寡核糖核苷酸和多核糖核苷酸的温度下进行加热,其中将所述完整的分枝杆菌细胞灭活。10.根据权利要求9所述的方法,其中所述寡核糖核苷酸和多核糖核苷酸的长度是2至40个碱基,或20至40个碱基。11.根据权利要求9所述的方法,其中所述破碎步骤A包括在约10,000psi或更高下的高压均质化。12.根据权利要求9所述的方法,其中在所述分离步骤B或C之前,将所述破碎步骤A重复2-5次。13.根据权利要求9所述的方法,所述方法另外包括:在所述分离步骤C之后,重复所述破碎步骤A2-5次。14.根据权利要求9所述的方法,其中所述分离步骤B是低速离心,且所述分离步骤C是高速离心。15.根据权利要求9所述的方法,所述方法另外包括下述相继步骤:重复步骤A)和B),以控制完整的分枝杆菌细胞的数目。16.根据权利要求1-8中的任一项所述的组合物,其用于治疗癌症。17.根据权利要求1-8中的任一项所述的组合物,其用于刺激免疫系统。18.根据权利要求17所述的组合物,其中刺激免疫系统包括:刺激一种或多种造血祖细胞的分化,增加细胞因子或趋化因子的分泌,增加造血生长因子的合成,活化核苷酸结合寡聚化结构域2(NOD2)受体,或活化Toll-样受体2(TLR2)受体。19.根据权利要求1-8中的任一项所述的组合物,其用于刺激造血生长因子的合成。20.根据权利要求1-8中的任一项所述的组合物,其用作癌症治疗的佐剂或用作免疫刺激治疗的佐剂。21.根据权利要求1-8中的任一项所述的组合物,其中所述RNA和所述细胞壁从所述细胞组合地分离。22.根据权利要求16所述的组合物,其中所述癌症选自:膀胱癌、结直肠癌、白血病、黑素瘤、肺癌、直肠癌、肝癌和宫颈癌。23.权利要求1-8中的任一项所述的组合物在制备用于治疗癌症的药物中的用途。24.根据权利要求23所述的用途,其中所述癌症选自:膀胱癌、结直肠癌、白血病、黑素瘤、肺癌、直肠癌、肝癌和宫颈癌。25.权利要求1-8中的任一项所述的组合物在制备用于刺激免疫系统的药物中的用途。26.根据权利要求25所述的用途,其中刺激免疫系统包括:刺激一种或多种造血祖细胞的分化,增加细胞因子或趋化因子的分泌,增加造血生长因子的合成,活化核苷酸结合寡聚化结构域2(NOD2)受体,或活化Toll-样受体2(TLR2)受体。27.权利要求1-8中的任一项所述的组合物在制备用于刺激造血生长因子的合成的药物中的用途。28.权利要求1-8中的任一项所述的组合物在制备用作癌症治疗的佐剂或用作免疫刺激治疗的佐剂中的用途。
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