本发明涉及组合物领域，尤其涉及一种含辅酶Q10的自微乳型营养组合物、制备方法及用途。
背景技术：
帕金森病(Parkinson disease,PD)是一种多发于中老年人，慢性发展的神经系统退行性疾病，典型表现为静止性震颤、运动迟缓、肌强直及姿势步态异常等，同时还伴有较严重的非运动症状，如认知障碍、睡眠障碍、抑郁精神症状及自主神经功能障碍等，这不仅严重降低了患者的生活质量，而且给家庭和社会带来了沉重的负担。随着我国人口结构老年化问题的日益严峻，帕金森病的发病率也在逐年大幅度增加，帕金森病已经成为影响老年人健康的主要杀手。因此，积极开发出安全有效的预防或治疗帕金森病的药物及其制剂已成为医药科研工作者的艰巨而又紧迫的任务。
PD的发病机制非常复杂，病因迄今尚不明了。遗传因素、氧化应激、线粒体功能障碍、免疫功能异常及环境因素等都可能诱发PD。目前针对PD的不同临床症状，治疗方法有药物治疗、手术治疗、康复和心理治疗等。药物治疗仍占主导地位，虽然药物能明显改善患者的症状，但是存在毒性副作用大、生物利用率低的缺点。因而，选用毒性小、天然活性物质预防或治疗PD的需求越来越大。
辅酶Q10(Coenzyme Q10，CoQ10)是一种生物体内广泛存在的脂溶性醌类化合物，化学名称为2,3-二甲氧基-5-甲基-6-癸异戊烯基-1,4-苯醌。辅酶Q10是一种良好的生物药物，是人体内产生能量的要素，存在于各脏器细胞膜中，能够改进心肌代谢、加强心脏功能；而且它的强抗氧化功能能保护机体细胞免受自由基的破坏，提高机体的免疫力。随着辅酶Q10在生物学方面的重要功能和保健作用的不断被揭示，再加上其无毒性、无致畸作用和无明显副作用的特点，近几年在国际范围内，已被广泛用于各类心脏病，糖尿病、癌症、急慢性肝炎、帕金森症等疾病的治疗，并可预防动脉硬化、中风和高血压，对心脏、肝脏和肾均有良好的保健作用，辅酶Q10的实际应用范围被不断扩大。辅酶Q10在欧美国家被广泛地用于食品、化妆品、营养补充剂等，我国现今市场上也有着各种相关的软胶囊产品。
大量的研究表明，辅酶Q10在神经系统的损伤与修复中具有重要的保护作用。美国加州大学圣迭戈分校的神经学家Shults对PD患者分组施以3种剂量的Q10进行了16个月的临床试验，研究发现在施用最高剂量Q10的实验组中，帕金森氏症的发展进程被延缓了44％。山东大学的刘菲等人发现Q10对PD患者的认知功能、焦虑情绪及睡眠障碍有改善作用。Mischley发现PD患者Q10含量较正常人群显著偏低。以上事实说明Q10在PD的预防或治疗上具有一定积极意义。
辅酶Q10是脂溶性物质，它的水不溶性使其在人体的消化吸收方面存在困难。且辅酶Q10结构中存在醌基，对光和氧相当敏感，制成常规的片剂、硬胶囊及混悬型软胶囊其生物利用率极低。
姜黄素是从姜科姜黄素属植物的干燥根茎中提取的一种黄色色素，有着重要的经济价值和广泛的药理作用(抗肿瘤、抗氧化、抗炎、降血脂等)。由于姜黄素安全性高且毒副作用小，在现代医学中，姜黄素因其与神经再生(尤其是帕金森病)以及致癌物质之间的联系而受到了特别的关注。近年来的研究表明，姜黄素可用于神经退行性疾病如PD和AD的治疗。但姜黄素和Q10一样，几乎不溶于水，口服生物利用度很低。
因此，如何提高辅酶Q10及姜黄素在水相介质中的溶解性和贮藏稳定性，成为其在生产和消费过程中的关键技术问题。
自微乳给药系统(self-microemulsifying drug delivery system，SMEDDS)是由药物、油相、表面活性剂和助表面活性剂所组成的均一、热力学稳定、各向同性的口服液体剂型或固体剂型。该给药系统的基本特征是，口服后在胃肠道的蠕动下自发形成粒径＜100nm的水包油乳剂。SMEDDS可提高水溶性差或脂溶性药物的溶解度和生物利用度，同时可以避免水中不稳定性药物的降解及药物对胃肠的不良刺激。其促进药物吸收的机制及优势主要体现在以下几个方面：(1)乳化所需的自由能非常低，在胃肠道的轻微蠕动下自发形成粒径很小的乳滴具有较大的表面积，增加了药物在胃肠道上皮细胞的渗透性；(2)提高药物的溶解度并改善药物的溶出度；(3)微小的微乳滴因具有较小的表面张力和微乳表面的亲水性，使其易于通过胃肠道壁的水化层，增加穿透性，促进吸收和提高生物利用度；(4)相对普通乳剂，具有更高的物理稳定性；(5)制备工艺简单，适合进行工业化生产。
相关研究表明，机体的胃肠道上皮细胞是带负电的。因而可以在微乳液中引入阳离子物质，使其与胃肠道上皮细胞因静电吸引作用，从而进一步促进难溶药物的吸收，提高生物利用度。Gemini是一种双子型表面活性剂，它是由两个单体表面活性剂在各自离子头基处通过联接基而化学键合起来的一类表面活性剂。这种特殊的二聚结构赋予了双子表面活性剂较相应的传统单头基、单烷烃链表面活性剂更为优越的性能，如高表面活性、低Krafft点和好的水溶性,在降低水的表面张力方面表现出更高的效率与能力，其和单体表面活性剂，尤其是非离子型表面活性剂的复配能产生更强的协同效应、对油的增溶能力更强。
技术实现要素：
本发明的目的在于提供一种水溶性良好、稳定性优异、生物利用度高的含辅酶Q10的自微乳型营养组合物。
为实现上述目的，本发明提供一种含辅酶Q10的自微乳型营养组合物，其特征在于，其由如下重量份的各成分制备得到，
1～15份辅酶Q10、1～15份姜黄素、10～50份载体油、15～75份非离子型表面活性剂、1～5份阳离子型Gemini表面活性剂、5～30份助表面活性剂，0-2份抗氧化剂。
进一步，其由如下重量份的各成分制备得到，2～12份辅酶Q10、2～12份姜黄素、15～45份载体油、25～60份非离子型表面活性剂、1.5～4.5份阳离子型Gemini表面活性剂、10～25份助表面活性剂，0-2份抗氧化剂。
进一步，其由如下重量份的各成分制备得到，5～10份辅酶Q10、5～10份姜黄素、20～30份载体油、30～45份非离子型表面活性剂、2～3份阳离子型Gemini表面活性剂、12～20份助表面活性剂，0-1份抗氧化剂；
优选的，其由如下重量份的各成分制备得到，8份辅酶Q10、7份姜黄素、28份载体油、40份非离子型表面活性剂、2份阳离子型Gemini表面活性剂、15份助表面活性剂，1份抗氧化剂。
进一步，所述辅酶Q10为氧化型辅酶Q10、还原型辅酶Q10中的至少一种；优选的，辅酶Q10为微生物发酵法制备而得的天然氧化型辅酶Q10和还原型辅酶Q10中的至少一种；
任选的，所述载体油为天然植物油或对主要组分溶解能力强的、经过结构改造、水解后的植物油或脂肪酸酯；优选的，天然植物油为大豆油、花生油、橄榄油、蓖麻油、红花油中的一种或多种；对主要组分溶解能力强的、经过结构改造、水解后的植物油或脂肪酸酯为杏仁油油酸PEG-6甘油酯、肉豆蔻酸异丙酯、油酸乙酯、中链脂肪酸甘油酯、油酸聚乙二醇甘油酯、单亚油酸甘油酯和聚丙二醇辛酸酯中的一种或多种；
任选的，所述非离子型表面活性剂选自聚氧乙烯十二羟硬脂酸酯、辛酸癸酸聚乙二醇甘油酯、聚氧乙烯40氢化蓖麻油、HLB值13～16的蔗糖酯、聚氧乙烯-聚氧丙烯共聚物、维生素E聚乙二醇琥珀酸酯、吐温-85、吐温-80、泊洛沙姆188、卵磷脂中的一种或多种；
任选的，所述助表面活性剂选自甘油、乙醇、乙二醇、PEG200-600、二乙二醇单乙基醚、丙烯碳酸酯和丙二醇中的一种或多种；
任选的，所述抗氧化剂选自抗坏血酸钠、天然维生素E及其酯衍生物、迷迭香提取物中的一种或多种。
进一步，本发明所述含辅酶Q10的自微乳型营养组合物还含有抑菌剂、稳定剂、助流剂和着色剂中的一种或多种。
进一步，制备方法为，
按比例称取各组分，将辅酶Q10和姜黄素外的其余各组分混合均匀，再加入辅酶Q10和姜黄素，加热至50-65℃搅拌直至整个体系均一透明，再保温15-60min，冷却至常温即可。其中的保温搅拌有利于形成稳定的油剂，辅酶Q10不易析晶。
进一步，所述制备过程及制备后的保存处于非活性气氛或真空状态；优选氮气或氦气气体氛围。
进一步，可制备成微胶囊、软胶囊、硬胶囊、片剂、散剂、丸剂、乳剂或混悬剂。
本发明还提供所述含辅酶Q10的自微乳型营养组合物用于制备预防和/或治疗帕金森病药物的用途。
本发明还提供所述含辅酶Q10的自微乳型营养组合物用于制备预防和/或治疗帕金森症的膳食补充剂或保健食品的用途。
本发明制备得到的含辅酶Q10的自微乳型营养组合物稳定性好，没有浮油、聚集现象。当不在本发明的用量范围时，含辅酶Q10的自微乳型营养组合物油剂有浮油、聚集现象。
本发明所述辅酶Q10和姜黄素都有抗氧化、消除自由基、修复受损神经的功能，发明人发现二者按一定比例进行配伍可发挥协同增效的作用，辅酶Q10与姜黄素的配伍稳定，不发生化学反应，无不良反应，安全和可行。
所述抗氧化剂没有特殊的限制，可以是抗坏血酸钠、天然维生素E及其酯衍生物、迷迭香提取物等中的一种或多种；对所述抑菌剂、稳定剂、助流剂、着色剂等其他辅料没有特别的限制，但应是可以允许添加到食品、药品等中的成分。
本发明所述含辅酶Q10的自微乳型营养组合物或其制剂，经口服后，在体内通过胃肠道的蠕动自发形成油滴平均粒径小于100nm的微乳液。
本发明中通过引入处方量的阳离子型Gemini表面活性剂来形成带正电荷的微乳滴，通过静电相互作用以增强机体对辅酶Q10及姜黄素的有效吸收。
本发明的有益效果是：
1、本发明所制备的含辅酶Q10的自微乳型营养组合物与水混合后，能形成均匀、稳定、澄清透明的溶液。在应用过程中，可以简单方便的按需要量添加到水相食品、药品等体系当中。
2、本发明所制备的含辅酶Q10的自微乳型营养组合物具有高度的稳定性，显著抑制了辅酶Q10的析晶，延长了产品货架期。
2、本发明所制备的含辅酶Q10的自微乳型营养组合物形成的乳滴粒径可达10-100纳米，属于纳米制剂范畴，体内吸收效果好。通过添加处方量的阳离子型Gemini表面活性剂来形成带正电荷的微乳滴，通过静电相互作用以增强机体对辅酶Q10及姜黄素的有效吸收，进一步提高药物的生物利用度。
3、服用本发明的含辅酶Q10的自微乳型营养组合物后，辅酶Q10与姜黄素在血浆中释放的比例基本上是恒定的，不是随意释放的，而是按照配方中的比例缓慢、平稳的在血浆中释放，从而保障服用的安全性和有效性。
4、本发明将在预防或治疗PD上具有潜在的应用价值的辅酶Q10与姜黄素进行科学配伍，二者均为纯天然产品，具有明显的协同增效作用。
5、本发明可直接在制得的自微乳化油剂基础上加入水溶性壁材溶液，搅拌均匀后，喷雾干燥制得水溶性良好的自微乳化微胶囊，或制备成各种期望的剂型。
6、本发明所述含辅酶Q10的自微乳型营养组合物的制备工艺简单，不发生化学变化，不改变辅酶Q10与姜黄素化学结构，整个制备过程绿色环保、低能耗，易于实现工业化生产。
具体实施方式
下面详细描述本发明的实施例，所述实施例的示例在旨在用于解释本发明，而不能理解为对本发明的限制。实施例中未注明具体技术或条件者，按照本领域内的文献所描述的技术或条件或者按照产品说明书进行。所用试剂或仪器未注明生产厂商者，均为可以通过市购获得的常规产品。
实施例1：
表1实施例1-6各成分用量表
表2实施例7-13各成分用量表
制备方法：按表1中所列质量份数称取各成分，将辅酶Q10和姜黄素外的其余各组分混合均匀，再加入辅酶Q10和姜黄素，加热至55℃搅拌直至整个体系均一透明，再保温30min，降至常温后即得到橙黄色透明均一的自微乳化油剂。
取所得自微乳化油剂约1g加入到100ml去离子水中，稍震荡，得到橙黄色的透明水乳液，由此看出本产品水分散性良好。
(1)将所得自微乳化油剂通过软胶囊生产设备获得辅酶Q10-姜黄素软胶囊。
(2)在所得自微乳化油剂中加入200质量份的水，搅拌形成均一溶液后投入56质量份辛烯基琥珀酸淀粉钠、35质量份麦芽糊精、9质量份白砂糖，搅拌溶解、在30Mpa下均质，最后将微乳液进行喷雾干燥，喷雾塔进风口温度控制在170℃，出风口温度控制在80℃，雾化器转速1200r/min，喷雾干燥得自微乳化微胶囊。
实施例2
原材料：见表1。
制备方法：按表1中所列质量份数称取各成分，将辅酶Q10和姜黄素外的其余各组分混合均匀，再加入辅酶Q10和姜黄素，加热至50℃搅拌直至整个体系均一透明，再保温40min，降至常温后即得到橙黄色透明均一的自微乳化油剂。
取所得自微乳化油剂约1g加入到100ml去离子水中，稍震荡，得到橙黄色的透明水乳液，由此看出本产品水分散性良好。
(1)通过软胶囊生产设备获得辅酶Q10-姜黄素软胶囊。
(2)按实施例1的微胶囊制备工艺制备自微乳化微胶囊。
实施例3
原材料：见表1。
制备方法：按表1中所列质量份数称取各成分，将辅酶Q10和姜黄素外的其余各组分混合均匀，再加入辅酶Q10和姜黄素，加热至60℃搅拌直至整个体系均一透明，再保温50min，降至常温后即得到橙黄色透明均一的自微乳化油剂。
取所得自微乳化油剂约1g加入到100ml去离子水中，稍震荡，得到橙黄色的透明水乳液，由此看出本产品水分散性良好。
(1)通过软胶囊生产设备获得辅酶Q10-姜黄素软胶囊。
(2)按实施例1的微胶囊制备工艺制备自微乳化微胶囊。
实施例4
原材料：见表1。
制备方法：按表1中所列质量份数称取各成分，将辅酶Q10和姜黄素外的其余各组分混合均匀，再加入辅酶Q10和姜黄素，加热至65℃搅拌直至整个体系均一透明，再保温60min，降至常温后即得到橙黄色透明均一的自微乳化油剂。
取所得自微乳化油剂约1g加入到100ml去离子水中，稍震荡，得到橙黄色的透明水乳液，由此看出本产品水分散性良好。
(1)通过软胶囊生产设备获得辅酶Q10-姜黄素软胶囊。
(2)按实施例1的微胶囊制备工艺制备自微乳化微胶囊。
实施例5：
原材料：见表1。
制备方法：按表1中所列质量份数称取各成分，将辅酶Q10和姜黄素外的其余各组分混合均匀，再加入辅酶Q10和姜黄素，加热至52℃搅拌直至整个体系均一透明，再保温35min，降至常温后即得到橙黄色透明均一的自微乳化油剂。
实施例6：
原材料：见表1。
制备方法：按表1中所列质量份数称取各成分，将辅酶Q10和姜黄素外的其余各组分混合均匀，再加入辅酶Q10和姜黄素，加热至62℃搅拌直至整个体系均一透明，再保温45min，降至常温后即得到橙黄色透明均一的自微乳化油剂。
实施例7：
原材料：见表2。
制备方法：按表1中所列质量份数称取各成分，将辅酶Q10和姜黄素外的其余各组分混合均匀，再加入辅酶Q10和姜黄素，加热至54℃搅拌直至整个体系均一透明，再保温55min，降至常温后即得到橙黄色透明均一的自微乳化油剂。
实施例8：
原材料：见表2。
制备方法：按表1中所列质量份数称取各成分，将辅酶Q10和姜黄素外的其余各组分混合均匀，再加入辅酶Q10和姜黄素，加热至56℃搅拌直至整个体系均一透明，再保温32min，降至常温后即得到橙黄色透明均一的自微乳化油剂。
实施例9：
原材料：见表2。
制备方法：按表1中所列质量份数称取各成分，将辅酶Q10和姜黄素外的其余各组分混合均匀，再加入辅酶Q10和姜黄素，加热至58℃搅拌直至整个体系均一透明，再保温15min，降至常温后即得到橙黄色透明均一的自微乳化油剂。
实施例10：
原材料：见表2。
制备方法：按表1中所列质量份数称取各成分，将辅酶Q10和姜黄素外的其余各组分混合均匀，再加入辅酶Q10和姜黄素，加热至59℃搅拌直至整个体系均一透明，再保温20min，降至常温后即得到橙黄色透明均一的自微乳化油剂。
实施例11：
原材料：见表2。
制备方法：按表1中所列质量份数称取各成分，将辅酶Q10和姜黄素外的其余各组分混合均匀，再加入辅酶Q10和姜黄素，加热至61℃搅拌直至整个体系均一透明，再保温25min，降至常温后即得到橙黄色透明均一的自微乳化油剂。
实施例12：
原材料：见表2。
制备方法：按表1中所列质量份数称取各成分，将辅酶Q10和姜黄素外的其余各组分混合均匀，再加入辅酶Q10和姜黄素，加热至63℃搅拌直至整个体系均一透明，再保温52min，降至常温后即得到橙黄色透明均一的自微乳化油剂。
实施例13：
原材料：见表2。
制备方法：按表1中所列质量份数称取各成分，将辅酶Q10和姜黄素外的其余各组分混合均匀，再加入辅酶Q10和姜黄素，加热至64℃搅拌直至整个体系均一透明，再保温57min，降至常温后即得到橙黄色透明均一的自微乳化油剂。
实施例14：粒径检测、自微乳化时间实验
粒径检测：
将实施案例制备的自微乳化油剂及自微乳化微胶囊样品用蒸馏水以1:20的比例稀释、轻轻摇匀，即形成澄清的微乳。然后用激光粒度分布仪(英国Malvern公司)测定乳液的粒径分布，测定温度为25℃。
自微乳速率：
根据《中华人民共和国药典》(2005版)附录溶出法浆法进行测定，取实施例1-4的自微乳化油剂及自微乳化微胶囊(各100mg)溶于37℃人工胃液中，记录各实施案例自微乳化时间。
表1自微乳制剂的粒径、自乳化时间数据表
实验结果显示，乳液平均粒径均小于100nm，溶液澄清透明，说明形成了稳定均一的微乳液；完全乳化分散均匀的时间均小于3分钟，具有较快的自微乳化速度，即通过轻微的搅拌，就能够形成外观透明均一的乳剂。
实施例5-13的结果同此。
实施例15：稳定性实验：
取实施例1制备得到的自微乳化油剂、自微乳化微胶囊和辅酶Q10原料分别置于4500Lx光照强度照射、充氧灌装(25℃)、60℃(恒温箱)放置15天，分别于0天、5天、10天、15天取样测定，用HPLC法测定辅酶Q10含量，考察光照、氧气、温度条件对辅酶Q10标示含量(％)的影响。结果如表2所示：
表2光照对稳定性的影响表
表3氧气对稳定性的影响
表4温度对稳定性的影响表
影响因素实验结果表明，本发明的自微乳化油剂和进一步制备得到的自微乳化微胶囊在光照、充氧、高温条件下，辅酶Q10标示含量和外观形状均没有变化。外观形状方面，自微乳化油剂呈黄色澄明溶液，没有结晶析出；自微乳化微胶囊为黄色粉末，颜色上没有明显改变。辅酶Q10标示含量方面，随着时间的推移(5天、10天、15天)，其辅酶Q10标示含量变化不大，比辅酶Q10原料中的辅酶Q10标示含量更稳定。说明本发明的自微乳化油剂和进一步制备得到的自微乳化微胶囊具有较好的稳定性，降低了光照、氧气、温度对其性质的影响，延长了产品保存期。
实施例2-13的结果同此。
实施例16：体内药代动力学实验：
16.1样品：
实施例1～4制备的辅酶Q10-姜黄素软胶囊(代号为：样品1，样品2，样品3，样品4)；
辅酶Q10-姜黄素原料药溶液剂的配置：精密称取50g辅酶Q10、10g姜黄素(二者重量比例5:1，与样品1比例一致)，溶于800ml乙醇-PEG400溶液中(v/v，1:1)(代号为：原料样)。
总共五个样品进行动物性实验。
16.2实验条件：实验室饲养环境温度25±3℃，相对湿度55％～70％，每日自由饮水摄食(去离子水和标准饲料)，其在实验前禁食12h，自由饮水。
16.3实验动物与分组：由长沙市开福区东创实验动物科技服务部(实验动物使用许可证号为SYXK(湘)2010-0010)提供的SPF级昆明种雌性小鼠，鼠龄3个月，体重18～22g。按照国际实验动物实验准则对动物进行操作，以减少实验动物在实验过程中的痛苦。采用完全随机设计将禁食12h的小鼠随机每10只分为一组，共五组。
16.4口服给药及样品采集、处理：分别给予小鼠灌胃相同剂量(35mg/kg：辅酶Q10与姜黄素总含量)的自微乳给药系统样品(即样品1-4)和原料药(即原料样)，给药后分别于5、15、30min及1、2、4、6、12h采集血浆至含肝素的抗凝离心管中，混匀，3000r/min离心处理10min后，分离血浆，处理后用HPLC法检测血浆药物浓度。
16.5药代动力学实验
根据血药浓度结果，应用统计分析软件对实验结果进行统计学拟合分析，计算血药浓度数据，结果以均值±标准差表示(表5)。
表5小鼠经口服给药样品平均血药浓度-时间(mean±SD，n＝10)(mg/L)表
结果表明口服给药后，自微乳型制剂(即实施例1-4的辅酶Q10-姜黄素软胶囊)的峰浓度Cmax值显著高于原料药的Cmax值(P＜0.05)，AUC值也大于原料药的AUC值，辅酶Q10与姜黄素经自微乳化后在小鼠体内吸收加快并能达到较高的血浆浓度，机体的生物利用度也显著增加。自微乳制剂属于纳米制剂范畴，有利于提高药物吸收的均匀性，所示自微乳制剂峰浓度的波动小于原料药，从而提高用药的安全性。
表6小鼠经口服给药辅酶Q10与姜黄素在各检测时间下血浆浓度中的比值表
从表6根据对比各样品、原料样在不同测试时段血浆中辅酶Q10与姜黄素的浓度比值，可以看出，本发明制备的自微乳制剂辅酶Q10与姜黄素在血浆中释放的比例基本上是恒定的，即是按照配方中的比例缓慢、平稳的释放。
相对生物利用度F是衡量某一种药物相较于同一药物的其他处方的生物利用度，即受试试剂与参比试剂的血药浓度-时间曲线下面积AUC的比值，关于药物吸收性能的重要参数。结果见表7。
表7小鼠经口服给药样品药动力学参数表
从表7可知样品1的F值为206.9％(72.88/35.22)，即自微乳化制剂的生物利用度是原料药的2.07倍，样品2是217.9％，样品3是226.8％，样品4是202.5％。说明改变剂型对药物在体内吸收过程大大改善。说明本发明制备得到的含辅酶Q10的自微乳型营养组合物的不同剂型均大大改善了药物的体内吸收过程。
自微乳制剂的生物半衰期t1/2与原料药没有显著差异，说明自微乳化制剂不影响药物在体内的消除。
实施例5-13的结果同此。
实施例17：行为学观察与测试：
17.1样品：
样品1：实施例1制备的自微乳化油剂。
对照品1：实施例1配方中的姜黄素替换成同等质量份数的MCT，其余组分及制备方法与实施例1一致，制备得到自微乳化油剂对照品1。
对照品2：实施例1配方中的辅酶Q10替换成同等质量份数的MCT，其余组分及制备方法与实施例1一致，制备得到自微乳化油剂对照品2。
17.2实验条件：实验室饲养环境温度25±3℃，相对湿度55％～70％，每日自由饮水摄食(去离子水和标准饲料)，其在实验前禁食12h，自由饮水。
17.3实验动物与分组：由长沙市开福区东创实验动物科技服务部(实验动物使用许可证号为SYXK(湘)2010-0010)提供的SPF级昆明种雌性小鼠，鼠龄3个月，体重18～22g。按照国际实验动物实验准则对动物进行操作，以减少实验动物在实验过程中的痛苦。采用完全随机设计将小鼠随机每10只分为一组，共6组。各对照组腹腔注射体积一致，每天注射时间点相似。
正常对照组：连续腹腔注射生理盐水24天；
溶剂对照组：连续5天腹腔注射30mg/kg MPTP(1-甲基-4-苯基-1,2,3,6-四氢吡啶)，随后连续19天腹腔注射DMSO(二甲亚砜)；
治疗1组：样品1+MPTP组，即连续5天腹腔注射30mg/kg MPTP，再改用30mg/kg样品1连续注射19天；
治疗2组：对照品1+MPTP组，即连续5天腹腔注射30mg/kg MPTP，再改用30mg/kg对照品1连续注射19天；
治疗3组：对照品2+MPTP组，即连续5天腹腔注射30mg/kg MPTP，再改用30mg/kg对照品2连续注射19天；
预防组：在进行MPTP模型处理前连续7天注射30mg/kg样品1，然后连续5天腹腔注射30mg/kg MPTP，随后连续19天腹腔注射DMSO；
17.4阿朴吗啡诱导旋转试验：在各观察时间点在小鼠皮下注射剂量为0.3mg/kg的阿朴吗啡，诱发小鼠的旋转行为，规定旋转360°为一转，记录小鼠30min内的旋转转数。若受试物组旋转转数明显小于溶剂对照组旋转转数，且差异有显著性(P<0.05)，可判定该受试物有预防或缓解帕金森病的作用。试验结果见表8。
表8阿朴吗啡诱导旋转试验转数(X±S，n＝10)表
从表8可以看出，治疗组1-3组及预防组的阿朴吗啡诱导旋转试验转数明显低于溶剂对照组，且差异有显著性(P<0.05)，说明本发明的自微乳化油剂具有预防或缓解帕金森病的作用。同时可见，辅酶Q10与姜黄素的配伍具有明显的协同增效作用(治疗1组的试验效果显著优于治疗2组和治疗3组)。
17.5触发不对称放置实验：握住小鼠躯干并离开地面，将其一侧触须触碰桌角。当小鼠一侧触须触碰桌角时可诱发同侧前肢向桌角的放置动作，受损前肢不能将前肢成功放置于桌角。评分时，两侧前肢分别试验10次，计算触发不对称放置实验得分。所得数据为计量资料，若受试物组触发不对称放置实验得分明显低于溶剂对照组，且差异有显著性(P<0.05)，可判定该受试物有预防或缓解帕金森病的作用。试验结果见表9。
表9触发不对称放置实验得分(X±S,n＝10)表
从表9可以看出，治疗1-3组及预防组触发不对称放置实验得分明显低于溶剂对照组，且差异有显著性(P<0.05)，说明本发明的自微乳化油剂具有预防或缓解帕金森病的作用。同时可见，辅酶Q10与姜黄素的配伍具有明显的协同增效作用(治疗1组的试验效果显著优于治疗2组和治疗3组)。
17.6免疫组化分析：
各组小鼠行为学检测后，在乌拉坦深度麻醉下，用4％多聚甲醛(4℃)灌注固定脑组织，取鼠脑中脑节段，浸入固定液中24小时。将固定后的鼠脑中脑节段处理后选择中脑黑质、纹状体部位，进行免疫组化染色处理，封片后置于激光共聚焦显微镜下进行观察，将各组小鼠的黑质TH阳性细胞计数，结果如下表10所示：
表10小鼠的黑质TH阳性细胞计数及P值表
从表10可以看出，治疗1-3组、预防组的TH阳性细胞数较溶剂对照组明显增加(P＜0.05)，由此可见，辅酶Q10与姜黄素可以促进TH的表达，减少神经毒素对黒质TH的损伤，进而在预防或治疗PD上具有潜在的应用价值。同时可见，辅酶Q10与姜黄素的配伍具有明显的协同增效作用(治疗1组的试验效果显著优于治疗2组和治疗3组)，且无不良反应、安全性高、稳定性好。
实施例2-13的结果同此。
尽管上面已经示出和描述了本发明的实施例，可以理解的是，上述实施例是示例性的，不能理解为对本发明的限制，本领域的普通技术人员在不脱离本发明的原理和宗旨的情况下在本发明的范围内可以对上述实施例进行变化、修改、替换和变型。