本发明属于药品领域，涉及一种抗病毒的中药组合物及其制备方法。
背景技术：
：手足口病是一种儿童传染病，又名发疹性水疱性口腔炎。多发生于5岁以下儿童，可引起手、足、口腔等部位的疱疹，少数患儿可引起心肌炎、肺水肿、无菌性脑膜脑炎等并发症。个别重症患儿如果病情发展快，导致死亡。该病以手、足和口腔粘膜疱疹或破溃后形成溃疡为主要临床症状。手足口病是由肠道病毒引起的传染病，引发手足口病的肠道病毒多达20多种，其中以柯萨奇病毒A16型(CoxA16)和肠道病毒71型(EV71)最为常见。目前，对于手足口病的治疗，尚无特异、高效的抗病毒药物。西医主要采用抗病毒药物加对症治疗，主要利巴伟林、阿昔洛韦、更昔洛韦等抗病毒药物来治疗，具有一定的疗效，外加加强护理以及密切观察病情变化，及时发现并发症。中医认为，手足口病属于“温病”范畴，温热邪毒夹湿侵入口鼻肌肤，内转入心脾两脏，再自内向外透发。脾开窍于口而主四肢，心开窍于舌而主血脉，故疹发于口舌与手足之肌肤。治疗上以清热利湿、解毒透疹为法。本发明针对手足口病的发病原因，研究出一种治疗儿小手足口病的中药组合物，目前，尚未见相关报道。(1)金银花，为忍冬科植物忍冬LonicerajaponicaThunb.的干燥花蕾或带初开的花。收载于中国药典2015年版：【性味与归经】甘，寒。归肺、心、胃经。【功能与主治】清热解毒，疏散风热。用于痈肿疗疮，喉痹，丹毒，热毒血痢，风热感冒，温病发热。(2)铁线草，为铁线蕨科植物扇叶铁线蕨AdiantumflabellulatumL.的干燥全草。收载于《广西中药材标准》1990年版：【性味】微苦、辛，凉。【功能与主治】清热解毒，利湿，消肿。用于泌尿系结石，肝炎，痢疾，感冒发热，泄泻，砂淋。(3)败酱草，为败酱科植物黄花败酱和白花败酱的全草。《中华本草》记载：【药性】味辛、苦，性微寒。归胃、大肠、肝经；【功能与主治】清热解毒，活血排脓。主治肠痈，肺痈，痈肿，痢疾，产后瘀滞腹痛。技术实现要素：本发明的目的是提供一种用于治疗小儿手足口病以及感冒发热疗效好、见效快的抗病毒的中药组合物及其制备方法。本发明抗病毒的中药组合物在中医传统理论的基础上，结合民间用药经验，运用现代科学理论配制而成。具有组方严谨，药少力专，对手足口病、感冒发热有良好的疗效，能有效改善患者的临床症状，缩短病程，提高患者的生活质量。本发明所采用的技术方案如下：一种抗病毒的中药组合物，由以下重量份的中药组分组成：金银花10-50份、铁线草10-30份、败酱草5-30份。以上所述的抗病毒的中药组合物，优选由以下重量份的中药组分组成：金银花20-40份、铁线草15-25份、败酱草10-20份，最佳优选由以下重量份的中药组分组成：金银花30份、铁线草20份、败酱草15份。以上所述抗病毒的中药组合物，可制备成药品上允许的任意剂型，如：颗粒剂、片剂、口服液或糖浆剂等，优选制成口服液。以上所述抗病毒的中药组合物制成口服液的制备方法，包括以下步骤：(1)分别取金银花、铁线草、败酱草，净选，干燥；(2)按重量份称取：金银花30份、铁线草20份、败酱草15份；(3)将称量好的中药加6-10倍量水，加热回流提取2-3次，每次1-3小时，滤过，合并滤液；(4)将所得滤液浓缩至相对密度为在60℃时为1.20～1.25的清膏，加入3-5倍量80％乙醇，搅匀，静置24～48小时，滤取上清液；(5)将上清液浓缩至适量，加入防腐剂、矫味剂，煮沸，搅匀，滤过，灭菌，即得。所述防腐剂可为苯甲酸、苯甲酸钠、对羟基苯甲酸甲酯、对羟基苯甲酸乙酯、山梨酸、山梨酸钾等中的一种或两种以上的组合，优选为苯甲酸钠。所述矫味剂为蔗糖、单糖浆、山梨醇、甘露醇、甜菊苷、天冬甜精等中的一种或两种以上的组合优选为甜菊苷。以上所述抗病毒的中药组合物，在制备治疗手足口病以及感冒发热药物中的应用。本发明中金银花具有清热解毒，疏散风热功效；铁线草具有清热解毒，利湿，消肿之功；败酱草具有清热解毒，活血排脓的作用，诸药合用，达到清热解毒、疏风除湿之功，用其治疗小儿手足口病、感冒发热疗效好，见效快，愈后效果好。本发明的有益效果是：1.原料药均取自中药品种，药味简单易得，安全无毒副作用。2.组方严谨，药少力专，具有清热解毒、疏风除湿等功效，能有效抑制手足口病病毒以及流感病毒，能有效改善患者的临床症状，缩短病程，提高患者的生活质量，对小儿手足口病有良好的疗效，临床应用总有效率达100％以上。具体实施方式下面结合具体实施例对本发明作进一步描述，但不限制本发明的保护范围和应用范围：一、抗病毒的中药组合物口服液的制备实施例1一种抗病毒的中药组合物制备成口服液的方法，包括以下步骤：(1)分别取金银花、铁线草、败酱草，净选，干燥；(2)按重量份称取：金银花50kg、铁线草30kg、败酱草30kg；(3)将称量好的中药加10倍量水，加热回流提取3次，每次2小时，滤过，合并滤液；(4)将所得滤液浓缩至相对密度1.25(60℃)的清膏，加入5倍量80％乙醇，搅匀，静置24～48小时，滤取上清液；(5)将上清液浓缩至适量，加入苯甲酸、对羟基苯甲酸乙酯、蔗糖，煮沸，搅匀，滤过，灭菌，即得。实施例2一种抗病毒的中药组合物制备成口服液的方法，包括以下步骤：(1)分别取金银花、铁线草、败酱草，净选，干燥；(2)按重量份称取：金银花30kg、铁线草20kg、败酱草15kg；(3)将称量好的中药加8倍量水，加热回流提取2次，每次2小时，滤过，合并滤液；(4)将所得滤液浓缩至相对密度1.23(60℃)的清膏，加入4倍量80％乙醇，搅匀，静置24～48小时，滤取上清液；(5)将上清液浓缩至适量，加入苯甲酸钠、甜菊苷，煮沸，搅匀，滤过，灭菌，即得。实施例3一种抗病毒的中药组合物制备成口服液的方法，包括以下步骤：(1)分别取金银花、铁线草、败酱草，净选，干燥；(2)按重量份称取：金银花40kg、铁线草25kg、败酱草20kg；(3)将称量好的中药加9倍量水，加热回流提取2次，每次3小时，滤过，合并滤液；(4)将所得滤液浓缩至相对密度1.24(60℃)的清膏，加入4倍量80％乙醇，搅匀，静置24～48小时，滤取上清液；(5)将上清液浓缩至适量，加入山梨酸钾、单糖浆、甘露醇，煮沸，搅匀，滤过，灭菌，即得。实施例4一种抗病毒的中药组合物制备成口服液的方法，包括以下步骤：(1)分别取金银花、铁线草、败酱草，净选，干燥；(2)按重量份称取：金银花10kg、铁线草10kg、败酱草5kg；(3)将称量好的中药加6倍量水，加热回流提取3次，每次1小时，滤过，合并滤液；(4)将所得滤液浓缩至相对密度1.20(60℃)的清膏，加入3倍量80％乙醇，搅匀，静置24～48小时，滤取上清液；(5)将上清液浓缩至适量，对羟基苯甲酸乙酯、山梨酸、天冬甜精，煮沸，搅匀，滤过，灭菌，即得。实施例5一种抗病毒的中药组合物制备成口服液的方法，包括以下步骤：(1)分别取金银花、铁线草、败酱草，净选，干燥；(2)按重量份称取：金银花20kg、铁线草15kg、败酱草10kg；(3)将称量好的中药加7倍量水，加热回流提取2次，每次2小时，滤过，合并滤液；(4)将所得滤液浓缩至相对密度1.21(60℃)的清膏，加入4倍量80％乙醇，搅匀，静置24～48小时，滤取上清液；(5)将上清液浓缩至适量，加入对羟基苯甲酸甲酯、单糖浆、甘露醇，煮沸，搅匀，滤过，灭菌，即得。二、体外抗病毒试验采用体外实验CPE(细胞病变)法对上述实施例进行体外抗病毒试验。1、材料宿主细胞：猴胚胎肾细胞(MA104细胞)，购自中国协和医科大学基础所细胞中心；病毒：肠道病毒EV71株，流感病毒甲型，均购自美国典型菌种保藏中心(ATCC)；细胞培养液：DEME培养液(美国Gibco公司)加10％胎牛血清(美国HyClone公司)；细胞维持液：RPMI-1640细胞维持液(美国GibcoTM公司)；样品：上述实施例1-5，同时以市售利巴韦林颗粒做对照；2、供试品溶液的制备取实施例1-5样品，分别用0.22μm的微孔滤膜滤过，存于西林瓶中，放于-40℃冰箱备用；取利巴伟林颗粒，制备成溶液后，用0.22μm的微孔滤膜滤过，存于西林瓶中，放于-40℃冰箱备用。3.体外抗病毒试验3.1病毒毒力测定MA104细胞接种于96孔板，100μl/，含细胞2×104个/孔，37℃培养24h，细胞长成单层，加入10倍稀释9个浓度的病毒液，每浓度4孔，100μl/孔，37℃，50％CO2温箱培养，每天用显微镜观察细胞病变情况(CPE)。细胞病变(CPE)判断标准：无CPE,记录为(-)；0～25％CPE，记录为(+)；25％～50％CPE，记录为(++)；50％～75％CPE，记录为(+++)；75～100％CPE，记录为(++++)。第7～8天判定结果，用Reed-Muench法计算病毒半数感染剂量(TCID50)。3.2对MA104细胞的毒性试验取各供试品溶液用培养液做1∶2～1∶256倍比稀释后，加到已长成单层的MA104细胞培养板中，100μL/孔，每个稀释度药液做4个复孔，同时设正常细胞对照。将培养板置37℃，5％CO2培养箱中培养，每日倒置显微镜下观察细胞病变情况(CPE)，确定细胞不出现明显病变的最低稀释倍数(最大无毒浓度)，按Reed-Muench法计算50％细胞毒性浓度(TC50)和最大无毒浓度(TC0)。3.2对MA104细胞的体外抗病毒试验取已长成单层细胞的培养板，倒掉培养液，用细胞维持液冲洗细胞面3遍后，分别加入100TCID50的肠道病毒EV71和流感病毒甲型病毒液，每种病毒50μL/孔，置37℃，5％CO2培养箱中吸附1h后，再加入相应稀释度的实施例1-5样品100μL/孔，同时设正常细胞对照和病毒对照，并以利巴韦林为阳性对照。置37℃，5％CO2培养箱中培养，每日倒置显微镜下观察细胞病变情况，当病毒对照组细胞病变为++++时记录试验结果。按Reed-Muench计算50％抑制浓度(IC50)和治疗指数(TI)。TI＝TC50/IC504结果4.1病毒毒力测定结果M各病毒在A104细胞的TCID50测定结果见表1。表1各病毒TCID50测定结果表病毒种类TCID50EV7110-3.58流感病毒甲型10-2.954.2对MA104细胞的毒性试验结果本发明实施例及利巴韦林对MA104细胞的TC0和TC50测定结果见表2。表2对MA104细胞的TC0和TC50测定结果表组别TC0(mg/mL)TC50(mg/mL)实施例14.987.65实施例25.768.41实施例35.237.85实施例46.749.35实施例56.128.68利巴韦林10.8515.624.3对MA104细胞的体外抗病毒试验结果本发明实施例1-5以及利巴韦林在体外对肠道病毒EV71、流感病毒甲型致MA104细胞病变的抑制作用结果见表3。表3体外抗病毒试验结果表由表3可见，本发明实施例1-5与利巴韦林在体外对肠道病毒EV71，流感病毒甲型致MA104细胞病变均具有明显的抑制作用，本发明实施例1-5对两种病毒的抑制作用均比利巴韦林强，说明本发明能有效的抑制手足口病病毒以及流感病毒。三、临床应用1、诊断标准以《中医药治疗手足口病临床技术指南(2012年版)》为诊断标准，诊断为手足口病患者。临床表现为：口腔粘膜出现分散状疱疹，米粒大小，疼痛明显；手掌、脚掌或臀部出现米粒大小疱疹，疱疹周围有炎性红晕，疱内液体较少；有些患儿先以发热起病，一般为38℃左右，有些患儿伴随有恶心、呕吐等反应。2、疗效标准根据《中药新药临床研究指导原则》，北京：中国医药科技出版社，作者：郑筱萸；制定疗效标准。临床痊愈：全身症状消失，皮疹愈合，实验室各项生化指标恢复正常；显效：全身症状好转，皮疹未完全愈合，实验室各项生化指标好转；有效：全身症状好转，皮疹未完全愈合，实验室各项生化指标基本无变化；无效：全身症状无好转或加重，实验室各项生化指标明显异常。3、给药方法(1)样品组：服用实施例1-5的产品，每次10ml，每天3次，连续服用6天；(2)对照组：按说明书服用利巴韦林颗粒，每次1袋，每天3次，连续服用6天，加强对症治疗，做好口腔护理，合并感染者给予头孢类药物进行抗菌治疗。4、应用结果本发明抗病毒的中药组合物，曾用于治疗和观察66例患儿，同时以市售某公司生产的利巴韦林颗粒做对照。将上述制备好的5种实施例样品以及对照样品，分别用于手足口病患儿(男35例，女31例，平均年龄2岁)结果详见表2。表2用于治疗手足口病临床应用效果表组别痊愈(％)显效(％)有效(％)无效(％)总有效率(％)实施例154.536.49.10100实施例245.545.49.10100实施例345.445.59.10100实施例436.336.427.30100实施例545.436.418.20100利巴韦林18.236.327.318.281.8结果表明：采用本发明中药组合物，对手足口病的治疗总有效率达到100％，大于利巴韦林对照组，说明本发明中药组合物对手足口病有良好的疗效，能有效改善患者的临床症状，缩短病程，提高患者的生活质量。以下为几个典型病例：病例1：患儿古××，男，4岁，手掌、脚掌有疱疹，口腔黏膜可见散在疱疹，疼痛明显，疱疹破溃后形成溃疡，影响进食，精神状态差，嗜睡，头痛，伴随恶心、呕吐。服用本发明实施例4，3天后精神状态好转，头痛、恶心、呕吐现象消失，口腔溃疡减少，疱疹出现干瘪的迹象，再服用3天后，症状完全消失，痊愈。病例2：患儿王××，男，1岁，入院时体温38.3℃，手、足、臀部、肛周均有疱疹，口腔粘膜可见分散状疱疹，流涎、拒食，精神状态差、嗜睡、易惊。服用本发明实施例1，3天后患儿体温恢复正常，精神状态好转，饮食情况好转，疱疹部分消退，无新发皮疹，再服用2天后，症状完全消失，患儿康复。病例3：患儿朱××，女，1岁，入院时体温38.0℃，手、足、臀部有疱疹，口腔可见粘膜疱疹，流涎，拒食，精神状态差、嗜睡、睡眠时偶有肢体抖动，伴随呕吐。服用本发明实施例3，3天后患儿体温恢复正常，精神状态好转，呕吐现象消失，饮食情况好转，手、足、臀部的疱疹出现干瘪的迹象，再服用2天后，症状全部消失，痊愈。病例4：患儿孙××，女，3岁，入院时体温38.2℃，手、足、臀部有疱疹，口腔可见粘膜疱疹，吞咽食物有疼痛感，精神状态差、嗜睡、伴随恶心、呕吐。服用本发明实施例2，3天后患儿体温恢复正常，精神状态好转，吞咽食物时疼痛感减轻，呕吐现象消失，手、足、臀部的疱疹出现干瘪的迹象，再服用3天后，症状全部消失，痊愈。病例5：患儿周××，男，2岁，体温37.8℃，手掌、脚掌有疱疹，口腔粘膜可见分散状疱疹，拒食，哭闹，精神状态差，伴随呕吐。服用本发明实施例5，2天后患儿体温恢复正常，精神状态好转，饮食情况有所好转，呕吐现象消失，疱疹部分消退，无新发皮疹，再服用4天后，症状完全消失，患儿康复。当前第1页1 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