本发明涉及医学用品或日用品
技术领域：
，更具体地，涉及一种治疗HPV感染的蛋白质组合物及其应用。
背景技术：
：人乳头瘤病毒(Humanpapillomavirus，HPV)属于乳头瘤病毒科的乳头瘤病毒属，为球形无包膜的小型双链环状DNA病毒。目前已发现其有200种以上，根据感染部位分类包括上皮型(例如1、5、8、14、20、21、25和47型)和黏膜型(例如6、11、16、18、31、33、35、39、41、45、51、52、56、58、59、68、70型)，根据是否致癌可将HPV分为高危型和低危型。HPV的致病机制是HPV对皮肤和黏膜上皮细胞有高度亲嗜性，在感染宿主皮肤或黏膜上皮细胞后，可在细胞核内自我复制或整合到宿主细胞DNA中，并随宿主细胞同步复制并转录。病毒复制诱导上皮增殖，使表皮变厚伴棘层增生和某种程度表皮角化，最终导致上皮增殖形成乳头状瘤，亦称为疣。疣一般是良性的，其中HPVDNA是游离的。但某些型别的HPV具有诱导细胞转化的能力，其DNA可整合到宿主上皮细胞的染色体中，促进细胞DNA的合成，使皮肤特别是黏膜上皮细胞变为永生化细胞，从而诱发癌前病变或恶性肿瘤。HPV感染可导致多种病变，其临床表现亦多种多样。孕妇和免疫力低下的人群感染后病情将更为严重。常见有以下几种：宫颈炎、宫颈糜烂、皮肤乳头状瘤、生殖器疣、尖锐湿疣、扁平疣等，甚至导致恶性肿瘤，如子宫癌。目前HPV阳性主要是以外治为主，内治为辅。外治的方法包括药物治疗、冷冻治疗、激光治疗、微波治疗、电烧治疗及手术治疗等。药物治疗方便，易于操作，但有些药物有灼伤粘膜的可能。注射干扰素、白介素等免疫增强剂会起到一定作用，但其疗效在学术界尚存争议，而且大部分人会产生一定的副作用，并且相关药物价格昂贵。贻贝(MytilusedulisLinnaeus)是一种海洋软体动物，属于双壳贝类，俗称“青口”和“淡菜”，遍布世界各沿岸国家。贻贝种类繁多，仅中国沿海就有30多种，经济价值较高的有10多种，其中紫贻贝、翡翠贻贝和厚壳贻贝是主要的养殖品种。贻贝富含蛋白质、脂肪、碳水化合物、钙、磷、铁、核黄素、尼克酸等营养元素，而且具有很高的药用价值。胰蛋白酶(Trypsin,Parenzyme)，EC3.4.21.4，是从牛、羊、猪的胰脏提取的一种丝氨酸蛋白水解酶。胰脏制造的前体胰蛋白酶原分泌到小肠后，肠肽酶使其活化，成为胰蛋白酶。胰蛋白酶是肽链内切酶，它能选择性地水解多肽链的赖氨酸和精氨酸残基中的羧基。胰蛋白酶不仅起消化酶的作用，而且还能限制分解糜蛋白酶原、羧肽酶原、磷脂酶原等其它酶的前体，起活化作用。目前，胰蛋白酶主要是用于细胞培养，本发明人在中国发明专利申请号201610883795.4提出了含有胰蛋白酶和贻贝软组织提取物的蛋白质组合物用于治疗妇科炎症，所述妇科炎症主要是由霉菌、葡萄球菌、链球菌、大肠杆菌、淋病双球菌、结核杆菌、滴虫和阿米巴虫等引起的炎症。技术实现要素：出人意料地，本发明人发现贻贝软组织提取物和胰蛋白酶的组合可用于治疗HPV感染。根据本发明的一个方面，本发明涉及包括贻贝软组织提取物和胰蛋白酶的蛋白质组合物在制备用于HPV感染的药物中的应用。根据本发明的一个或多个实施方式，所述蛋白质组合物按重量份可以包括：贻贝软组织提取物0.1-20份，以及胰蛋白酶0.2-20份。根据本发明的一个或多个实施方式，按组合物的重量计，贻贝软组织提取物可以是例如0.1份、0.15份、0.2份、0.25份、0.3份、0.35份、0.4份、0.45份、0.5份、0.55份、0.6份、0.65份、0.7份、0.75份、0.8份、0.85份、0.9份、0.95份、1份、1.5份、2份、2.5份、3份、3.5份、4份、4.5份、5份、5.5份、6份、6.5份、7份、7.5份、8份、8.5份、9份、9.5份、10份、11份、12份、13份、14份、15份、16份、17份、18份、19份、20份等，以及胰蛋白酶可以是例如0.2份、0.25份、0.3份、0.35份、0.4份、0.45份、0.5份、0.55份、0.6份、0.65份、0.7份、0.75份、0.8份、0.85份、0.9份、0.95份、1份、1.5份、2份、2.5份、3份、3.5份、4份、4.5份、5份、5.5份、6份、6.5份、7份、7.5份、8份、8.5份、9份、9.5份、10份、11份、12份、13份、14份、15份、16份、17份、18份、19份、20份等。根据本发明的一个或多个实施方式，所述蛋白质组合物中：贻贝软组织提取物与胰蛋白酶可以分别隔离存在或可以混合存在。这里，“隔离存在”是指两种成分以保持各自性质的互不干扰的独立包装存在。“混合存在”是指两种成分混合存在于一个包装中。根据本发明的一个或多个实施方式，所述蛋白质组合物中：贻贝软组织提取物与胰蛋白酶可以是干粉。根据本发明的一个或多个实施方式，所述蛋白质组合物中：贻贝软组织提取物与胰蛋白酶可以是液体。根据本发明的一个或多个实施方式，所述蛋白质组合物配制为液体后的最终pH值为2.5-9.0，例如，优选pH值为4.5-8.0，或者，例如优选pH值为5.5-7.0。根据本发明的一个或多个实施方式，所述贻贝软组织提取物是以贻贝除贝壳以外的所有组分为原料，经过酸性水溶液提取而获得的上清液，其中蛋白质含量为0.2-15mg/ml，pH值1.0-6.0。特别地，所述贻贝软组织提取物可以是以足丝为原料经过酸性水溶液提取而获得的上清液。根据本发明的一个或多个方面，所述贻贝包括紫贻贝、翡翠贻贝、厚壳贻贝中的一种、两种或三种。根据本发明的一个或多个实施方式，所述酸性水溶液可以选自：乙酸-乙酸钠缓冲液、乙酸、柠檬酸、高氯酸等，但不限于此。根据本发明的一个或多个实施方式，所述贻贝软组织提取物的蛋白质含量可以为例如0.2mg/ml、0.3mg/ml、0.4mg/ml、0.5mg/ml、0.6mg/ml、0.7mg/ml、0.8mg/ml、0.9mg/ml、1.0mg/ml、1.5mg/ml、2.0mg/ml、2.5mg/ml、3.0mg/ml、3.5mg/ml、4.0mg/ml、4.5mg/ml、5.0mg/ml、5.5mg/ml、6.0mg/ml、6.5mg/ml、7.0mg/ml、7.5mg/ml、8.0mg/ml、8.5mg/ml、9.0mg/ml、9.5mg/ml、10.0mg/ml、10.5mg/ml、11.0mg/ml、11.5mg/ml、12.0mg/ml、12.5mg/ml、13.0mg/ml、13.5mg/ml、14.0mg/ml、14.5mg/ml和15.0mg/ml等，但不限于此。根据本发明的一个或多个实施方式，所述胰蛋白酶可以是从市场上常规购买的。替代地，所述胰蛋白酶可以是通过盐析、柱层析等方法制备的。根据本发明的一个或多个实施方式，本发明提供一种包括贻贝软组织提取物和胰蛋白酶的蛋白质组合物用于治疗HPV感染。本发明的另一方面涉及一种治疗HPV感染的药物组合物，其特征在于，所述药物组合物由本发明的贻贝软组织提取物和胰蛋白酶组成。根据本发明的一个或多个实施方式，所述治疗可以包括缓解性治疗和预防性治疗。根据本发明的一个或多个实施方式，所述HPV感染可以是低危型HPV感染，或高危型HPV感染，特别是高危型HPV感染，例如HPV16、18、31、33、35、39、41、45、51、52、56、58、59、68、70型。本发明的另一方面涉及一种治疗妇科炎症的药物组合物，其中，所述药物组合物可以包括贻贝软组织提取物和胰蛋白酶。根据本发明的一个或者多个实施方式，所述药物组合物还可以包括其它活性成分。根据本发明的一个或者多个实施方式，所述药物组合物还可以包括药学上可接受的载体。根据本发明的一个或者多个实施方式，所述药物组合物可以是全身给药或局部给药，优选局部给药。根据本发明的一个或者多个实施方式，所述药物组合物可以是片剂。根据本发明的一个或者多个实施方式，所述药物组合物可以是液体剂。根据本发明的一个或者多个实施方式，所述药物组合物可以是泡沫剂。根据本发明的一个或多个实施方式，所述药物组合物可以是凝胶剂。根据本发明的一个或多个实施方式，所述药物组合物可以是泡腾片。根据本发明的一个或多个实施方式，所述载体可以包括任何以及所有的溶剂、盐、分散介质、包衣材料、表面活性剂、抗氧化剂、防腐剂(例如抗菌剂、抗真菌剂)、等渗剂、吸收延迟剂、药物稳定剂、粘合剂、赋形剂、崩解剂、润滑剂、甜味剂、矫味剂、染料等和它们中一种、多种或全部的组合，这是本领域技术人员所熟知的(例如参见Remington'sPharmaceuticalSciences,18thEd.MackPrintingCompany,1990,pp.1289-1329)。除了与活性成分不相容的载体外，可考虑在治疗用或药物组合物中使用的任何常规载体。本发明的又一个目的涉及上述本发明的蛋白质组合物或药物组合物在治疗HPV感染，尤其是高危型HPV感染中的应用。本发明的又一个目的涉及上述本发明的蛋白质组合物用作治疗HPV感染的消毒产品。本发明的又一个目的在于上述本发明的蛋白质组合物用作针对HPV感染的养护和保健产品。本发明的又一个目的涉及一种治疗HPV感染的方法，包括给予本发明的蛋白组合物或药物组合物。根据本发明的一个或多个实施方式，向有需要的受试者给予根据本发明的蛋白质组合物，所述蛋白质组合物是包括贻贝软组织提取物和胰蛋白酶或是由其组成的。根据本发明的一个或多个实施方式，所述贻贝软组织提取物和胰蛋白酶可以是混合存在于组合物中。根据本发明的一个或多个实施方式，所述贻贝软组织提取物和胰蛋白酶可以是分别隔离存在于组合物中。这里，当将贻贝软组织提取物与胰蛋白酶组合给药时，给药可以是顺序给药或者同时给药，优选可以是顺序给药。对于顺序给药来说，可以将贻贝软组织提取物和胰蛋白酶以任何顺序给药。例如，可以先给予贻贝软组织提取物再给予胰蛋白酶，以此顺序交替给药持续整个治疗，或者可以先给予胰蛋白酶再给予贻贝软组织提取物，以此顺序交替给药持续整个治疗，或者可以在治疗的每一天以不同顺序给药。采用本发明的胰蛋白酶与贻贝软组织提取物的蛋白质组合物，能够杀灭HPV病毒。另外，本发明的蛋白质组合物吸附于炎症创面，形成细胞支架促进炎症创面的快速愈合并能维持患病部位细胞的正常状态。同时，由于贻贝软组织提取物中含有的蛋白成分的分子量大，不会透皮或经皮吸收，可持久稳定在患病部位发挥作用，延长作用时间，起到长效治疗的作用。本发明制备的治疗HPV感染的组合物可迅速清除病灶部位上皮糜烂组织，隔离病原微生物，促进炎症消除，修复创面，消除异味，维持菌群平衡，疗程短、治愈率高，且无任何毒副作用，不产生依赖性。具体实施方式以下实施例以治疗妇科炎症的组合物为例进行说明，但不限于此，上述本发明提出的各种包含贻贝软组织提取物及胰蛋白酶的产品均适用于本发明。实施例1：贻贝软组织提取物的制备方法。取贻贝去壳，收集软组织300g，分成三份，每份加入100ml含量0.3％的下表1中的酸性溶液，匀浆10min后离心得到上清液即为贻贝软组织提取物。测定上清液中蛋白含量和pH值，蛋白含量测定采用考马斯亮蓝法。表1实例酸性溶液蛋白质含量pH值1柠檬酸2.6mg/ml4.52乙酸3.5mg/ml3.23高氯酸3.0mg/ml1.0实施例2：一种治疗HPV感染的蛋白质组合物包含贻贝软组织提取物与胰蛋白酶的组合物由以下组分构成：贻贝软组织提取物干粉15mg，胰蛋白酶干粉20mg，分别加入纯化水充分溶解后得到口服溶液剂。收集经HPVDNA分型检测均感染高危型HPV病毒(包括16、18、31、33、35、39、45、51型等)但无临床症状的女性患者30例，随机分为试验组和对照组。试验组服用实施例2制备的组合物，先服用贻贝软组织提取物口服溶液剂10ml，间隔30min后服用胰蛋白酶口服溶液剂10ml，每日1次，用药期间禁止性生活及盆浴，月经期暂停，连续使用2周。对照组不使用任何治疗措施。所有患者的治疗后至复查期内的性生活全程使用避孕套。两组患者在治疗前和停药1个月后均进行HPV检测。结果显示，使用本发明后73.3％的患者HPV病毒载量检测低于1.00RLU/Co(HC2法)，而对照组仅有13.3％。试验组的患者HPV病毒载量平均下降了78.26％，而对照组的HPV病毒载量反而平均升高了4.65％。表明本发明的组合物具有治疗HPV感染的作用。实施例3：一种治疗HPV感染的蛋白质组合物包含贻贝软组织提取物、胰蛋白酶的组合物由以下组分构成：贻贝软组织提取物干粉10mg，胰蛋白酶干粉15mg，贻贝软组织提取物和胰蛋白酶过筛,将可压性淀粉、微晶纤维素、羧甲基纤维素钠混合，用5％的羟丙甲纤维素水溶液制粒、60℃烘干，将处方量的低取代羟丙基纤维素、微粉硅胶、胰蛋白酶、贻贝软组织提取物混合均匀后与颗粒混合，分装后制成颗粒剂。收集30例宫颈HPV感染患者，年龄在20-50之间，病程3-21个月。宫颈HPV感染诊断标准为：取宫颈脱落细胞，检测样本的RLU/Co≥1.0，诊断为宫颈HPV感染阳性。药品用量为服用实施例3制备的治疗HPV感染的颗粒剂，每日先服用胰蛋白酶10g，间隔30min后服用贻贝软组织提取物10g，每日一次。连续用药治疗2周后复查。疗效标准：连续用药2周后复查HPV-DNA，RLU/Co＜1.0时即痊愈；RLU/Co＜10.0时即为有效；RLU/Co＞10.0时即为无效。临床结果：30例患者中，痊愈21例，痊愈率70％，有效4例，有效率(含痊愈)83.33％，无效5例，无效率为16.67％。结论：本发明治疗HPV感染的组合物对HPV感染的患者具有很好的治疗作用。实施例4：一种治疗HPV感染的蛋白质组合物包含贻贝软组织提取物、胰蛋白酶的组合物由以下组分构成：贻贝软组织提取物干粉8.5mg，胰蛋白酶干粉10.5mg，加入生理盐水充分溶解制成喷剂。病情治疗案例一：安某临床诊断：生殖器尖锐湿疣，HPV阳性；临床治疗：取实施例4制备的喷剂外用，每日3次，每次喷于患处3-5下，2周为一个疗程，共3个疗程。停药后疣体干瘪部分脱落，停药20天后做HPV检测，结果显示为阳转阴。病情治疗案例二：田某某临床诊断：生殖器疱疹，HPV阳性；临床治疗：取实施例4制备的喷剂外用，每日2次，每次喷于患处3-5下，一个月为一个疗程，共1个疗程。停药后疱疹消失，停药后20天后做HPV检测，结果显示阳转阴。当然，本发明还可有其它多种实施例，在不背离本发明精神及其实质的情况下，熟悉本领域的技术人员可根据本发明作出各种相应的改变和变形，但这些相应的改变和变形都应属于本发明权利要求的保护范围。本申请主张2016年10月8日递交的中国发明专利申请号201610883795.4的优先权。当前第1页1 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