本申请要求于2015年10月9日提交的美国临时申请号62/239,667的优先权，出于所有目的将其通过引用并入本文。本发明总体上涉及遗传疾病的药物疗法领域。更具体地，本发明涉及使用组合疗法进行的囊性纤维化的新颖的治疗。
背景技术：
：囊性纤维化(cf)是高加索人群中最常见的常染色体隐性遗传疾病。大约每25名高加索人中有1名是该疾病的携带者。已经将响应基因定位于染色体7的长臂上。该序列编码被称为“囊性纤维化跨膜调节物”(“cftr”)的膜相关蛋白。该cftr基因包含27个外显子，并且编码1480个氨基酸的蛋白质(gregory等人，1990；rich等人，1990)。cftr是糖蛋白，并被分类为abc(atp-结合盒)转运蛋白。该蛋白由五个结构域组成。存在两个核苷酸结合结构域(nbd1和nbd2)、调节域(rd)和两个跨膜结构域(msd1和msd2)。该蛋白的活性由camp-依赖性蛋白激酶(pka)调控，该蛋白激酶催化调节域(rd)的磷酸化作用，并且还通过将两种atp分子与nbd1和nbd2结构域结合(riordan等人.，2005)调控。当cftr基因序列被转录成rna时，cftr蛋白质的产生始于细胞核内；然后发生剪接以形成信使rna(mrna)。mrna从细胞核转运至内质网(er)，在此处mrna被翻译成蛋白质并发生蛋白质折叠。蛋白质从er转运至细胞膜(macdonald等人，2007)。正常的转录和翻译过程形成细胞膜上正常量的cftr蛋白质，并导致正常的氯化物转运活性。cftr中的突变导致有缺陷的氯离子转运和有缺陷的电解质转运。已经鉴定出cftr基因的超过2000个突变，并且可以基于这些突变对cftr产生和活性的影响将这些突变分类为：i类：导致cftr蛋白合成的(几乎)完全缺失；ii类：导致成熟停滞和cftr蛋白的细胞内定位缺陷；iii类：导致氯离子转运功能有缺陷的激活的调节的抑制；iv类：导致氯离子的电导降低；以及v类：导致cftr蛋白合成的减少。该cftr基因的最常见的突变是多肽链位置508处的苯丙氨酸缺失(突变f508del-cftr)，该突变是ii类突变。为恢复细胞中cftr的功能，可以使用不同类型的调节剂。简言之，对囊性纤维化患者的治疗需要突变的cftr蛋白的不同调节剂，即“校正剂”和/或“增效剂”，取决于cftr基因的突变，该突变将患者分成遗传差异性亚组。除了cftr的这些直接调节剂，通常使用补充药物(例如具有抗菌作用或抗炎作用的那些药物)以缓解症状。cftr增效剂改善具有门控(iii类)或传导(iv类)突变的cftr通道的功能(rogan等人，2011)。存在来自体外研究的另外的证据，即cftr增效剂还可以增强具有ii类突变的cftr通道的功能(vangoor等人，2009)。然而，只有表达的cftr通道已经位于细胞膜上，增效剂才能起作用。因此，单独的cftr增效剂不能治疗i类或ii类突变，这类突变特征在于不存在或缺失合成的cftr蛋白。增效剂的实例是vx-770，该vx-770仅在患有具有iii/iv类缺陷(例如像g551d-cftr基因缺陷)的囊性纤维化的患者中是成功的，这些患者代表所有囊性纤维化患者的1％-5％(vangoor等人，2009)，但在具有f508del-cftrii类突变的患者中无显著的治疗效果(flume等人，2012)。这意味着需要对患有囊性纤维化的患者亚组进行定制治疗，并且这种治疗取决于cftr基因中突变的性质以及cftr蛋白中产生的缺陷。将校正剂化合物用于治疗ii类突变(例如f508del-cftr)。这样的校正剂的实例是vx-809。该突变的蛋白f508del-cftr，除了具有ii类突变效应(cftr蛋白的减少的成熟和细胞内定位缺陷)，还具有减少的氯离子传导。已经进行了对vx-809校正剂与vx-770增效剂的组合的测试，从而调节突变的蛋白f508del-cftr的功能，并且在携带ii类突变效应的患者中显示出改进的结果(www.clinicaltrials.gov，研究代码nct01225211)。尽管增效剂和校正剂对cftr功能具有不同的影响，但是在人类中通过汗液氯化物水平的变化和体外原代人类支气管上皮细胞检测到的cftr活性之间存在潜在的相关性(rowe等人，2013)。这证实了在临床前模型中化合物的性能可用于鉴定预期的增效剂和校正剂。cftr基因中的另一类更稀有的突变，i类突变，包括提前终止密码子(“ptc”)或终止密码子(还被称为“无义突变”)。无义突变是导致全球约10％的囊性纤维化病例的原因。然而，在以色列，无义突变是大多数患者的囊性纤维化的原因(kerem等人，1997)。ptc被定义为基因的编码序列中的终止密码子，位于正常终止密码子上游。无义突变是dna中的单点改变，导致在相应的mrna转录物的蛋白质编码区域中不适当地存在uaa、uag、或uga终止密码子。然而正常的终止密码子终止基因翻译并能够使得全长野生型蛋白质合成，该ptc阻止野生型蛋白质合成并导致突变基因的转录的部分或完全抑制。进而，cftr蛋白的部分或全部缺失导致病理学异常。并非所有的i型突变都导致细胞中cftr蛋白的完全缺失。rowe等人，2007描述了实验证据，即在位置1164之后发生的i类突变的某个子集展现出膜定位，并且在通读剂存在下增强表达后保留了低的但可检测的氯离子通道功能。提前终止密码子抑制子，也称为“通读剂”，它们引人关注是由于它们可能用于治疗由i类突变引起的囊性纤维化。氨基糖苷类抗生素是第一个被证明抑制致病突变中ptc的药物，允许翻译全长蛋白(hermann等人，2007)。howard等人(howard等人，1996)在1996年描述了通过合成氨基糖苷类遗传霉素(g418)抑制ptc，恢复了表达无义密码子的hela细胞中的蛋白质功能。在cf患者中使用另一种药物庆大霉素的研究显示在鼻腔电位差(npd)值中存在微小变化(wilschanski等人，2003)。然而，肠胃外给予的不便和严重副作用的可能性排除了庆大霉素的用于抑制i类突变的长期全身性使用(wilschanski等人，2012)。ataluren(临床研究代码ptc124)也具有促进ptc通读而不会在正常治疗剂量下显示毒性效应的能力(wilschanski等人，2003；kerem等人，2008)。尽管ataluren似乎对于提前终止密码子具有特异性，但如果药物允许正确的终止密码子的通读，则可能会发生严重的不良反应。ataluren还具有干扰无义密码子介导的mrna降解的潜能，从而针对提前终止密码子的有害副产物提供保护。因此，需要一种治疗i类突变的方法，特别是在携带提前终止密码子(ptc)的患者中或在cftr蛋白质的第1164位之后发生的无义突变。本发明通过提供增效剂与一种或两种校正剂的新颖的组合来解决对于这样的突变的可替代治疗的需求，该组合能够恢复具有位于野生型cftr的全长编码序列的位置1164-1480之间的i类突变的患者中的cftr功能，而无需另外的给予通读校正剂分子。发明概述本发明提供了增效剂化合物与一种或多种非通读校正剂的组合，该组合在通读剂不存在的情况下恢复具有位于野生型cftr的全长编码序列的位置1164-1480之间的i类突变的cftr蛋白的功能活性。在一方面，本发明提供了在受试者中治疗囊性纤维化的方法，该方法包括以下步骤：a.对来自该受试者的囊性纤维化跨膜传导调节物(cftr)蛋白的序列中提前终止密码子(ptc)或无义突变的存在进行分析，b.对具有位于seqidno：1的氨基酸残基1164-1480之间的突变的受试者进行鉴定，并且c.给予组合，该组合包含：i.囊性纤维化跨膜传导调节物(cftr)蛋白的功能调节剂(p增效剂)，ii.细胞加工和/或定位的调节剂(c校正剂)，其中所述c校正剂不是通读校正剂，其中所述组合不包含通读剂，并且其中所述组合产生如在w1282x费舍尔大鼠甲状腺(frt)细胞中使用跨上皮钳位电路测定(tecc测定)所测量的另外的至少1ms/cm2的跨上皮电导(δgt)。更具体地，如本文披露的所述c校正剂是c1或c2校正剂。本发明还提供了在受试者中治疗囊性纤维化的方法，该方法包括以下步骤：a.对来自该受试者的囊性纤维化跨膜传导调节物(cftr)蛋白的序列中提前终止密码子(ptc)或无义突变的存在进行分析，b.对具有位于seqidno：1的氨基酸残基1164-1480之间的突变的受试者进行鉴定，并且c.给予组合，该组合包含：i.囊性纤维化跨膜传导调节物(cftr)蛋白的功能调节剂(p增效剂)，ii细胞加工和/或定位的调节剂(c校正剂)，其中所述c校正剂不是通读校正剂，并且其中所述c校正剂不通过cftr的跨膜结构域1(msd1)结构域起作用，其中所述组合不包含通读剂。更特别地，所述c校正剂是c2校正剂。这些组合可以进一步包含细胞加工和/或定位的第二调节剂(第二c校正剂)，其中所述第二c校正剂也不是通读校正剂。更特别地，所述c校正剂是c2校正剂，并且所述第二c校正剂是c1校正剂。更具体地，所述校正剂与cftr蛋白的不同部分结合。本发明进一步披露了试剂盒以及使用本发明的组合增强突变型cftr的活性的方法。附图说明图1显示野生型cftr蛋白的不同结构域。图2显示在费舍尔大鼠甲状腺(frt)细胞中校正剂(c1和c2)和增效剂(gp-5)对传导的影响。单独地和与通读剂的组合，在frtcftrptc突变w1282x：c1+c2中校正剂和增效剂组合的作用显著更有效。使用fsk和增效剂gp-5激活cftr通道后的第二天，用通读剂和/或校正剂c1/c2将细胞处理24小时(*p＜0.05、**p＜0.01、***p＜0.001、****p＜0.0001)。图3显示cfbe41o-细胞系中，在细胞表面表达测定中校正剂的作用。针对c1校正剂、c2校正剂、和c1校正剂与c2校正剂的组合(固定的c1校正剂浓度)的剂量响应。图4显示在具有和不具有g418(通读剂)的情况下，增效剂与c和c1校正剂的组合在含有w1282xcftr突变的frt细胞中对传导的影响。在该图中，在用增效剂(gp-5)的“急性”和“慢性”治疗之间做出比较。在所有条件下将校正剂c1/c2或g418在细胞上孵育24小时，在“急性”条件下用毛喉素刺激cftr通道后添加gp-5，在“慢性”处理情况下，还将gp-5连同校正剂一起孵育24小时。校正剂和/或通读剂连同gp-5增效剂的共孵育改进w1282xcftr拯救(*p＜0.05、**p＜0.01、***p＜0.001、****p＜0.0001)。图5显示在同时具有delf508和w1282x突变的原代人类支气管上皮(hbe)细胞中，校正剂(c1和c2)和/或通读剂g418和增效剂(gp-5)组合的作用。当添加c1+c2校正剂混合物(与用gp-5增效剂打开的通道组合)时，通道活性显著地提高(*p＜0.05、**p＜0.01、***p＜0.001、****p＜0.0001)。图6显示w1282xcftrfrt细胞与增效剂、c1校正剂、c2校正剂、和g418剂的不同组合孵育24小时后，cftr蛋白质表达。较高的条指示较高的表达。校正剂组合显示增加的cftr蛋白水平。发明详述注意，如本说明书和期望的权利要求中所使用的，除非上下文另外清楚地指出，否则单数形式“一个”，“一种”和“该”包括复数指示物。因此，例如，对“一种化合物”的提及包括单一化合物连同一种或多种相同或不同的化合物，提及“一种药学上可接受的载体”是指单一的药学上可接受的载体连同一种或多种药学上可接受的载体等。定义如在本说明书和随附权利要求书中所使用的，下列术语具有所示含义，除非规定与此相反：如本文使用的术语“烯基”是指含有从2至10个碳并含有至少一个碳-碳双键的直链或支链烃链。术语“c2-c6烯基”是指含有2-6个碳原子的烯基。c2-c6烯基的非限制性实例包括丁-1，3-二烯基、乙烯基、2-丙烯基、2-甲基-2-丙烯基、3-丁烯基、4-戊烯基、和5-己烯基。如本文使用的，术语“c1-c3烷氧基”是指通过氧原子与母体分子部分连接的如本文所定义的c1c3烷基基团。c1-c3烷氧基的实例包括但不限于甲氧基、乙氧基、丙氧基、和2-丙氧基。这里使用的术语“烷基”是指饱和的直链或支链烃链基团。在一些情况下，烷基部分中的碳原子数由前缀“cx-cy”表示，其中x是取代基中碳原子的最小值，y是最大值。因此例如，“c1-c6烷基”意指含有从1至6个碳原子的烷基取代基并且“c1-c3烷基”是指含有从1至3个碳原子的烷基取代基。c1-c6烷基的代表性实例包括但不限于甲基、乙基、正丙基、异-丙基、正丁基、仲-丁基、异-丁基、叔丁基、正戊基、异戊基、新戊基、正己基、1-甲基丁基、2-甲基丁基、3-甲基丁基、3，3-二甲基丁基、1，1-二甲基丙基、1，2-二甲基丙基、2，2-二甲基丙基、1-甲基丙基、2-甲基丙基、1-乙基丙基、以及1，2，2-三甲基丙基。术语“亚烷基(alkylene或alkylenyl)”是指衍生自直链或支链饱和烃链的二价基团，例如具有1-10个碳原子或1-6个碳原子(c1-c6亚烷基)或具有1-4个碳原子或具有1至3个碳原子(c1-c3亚烷基)或具有2至6个碳原子(c2-c6亚烷基)。c1-c6亚烷基的实例包括但不限于-ch2-、ch2ch2-、-c((ch3)2)-ch2ch2ch2-、-c((ch3)2)ch2ch2、-ch2ch2ch2ch2-、和-ch2ch(ch3)ch2-。如本文使用的术语“c2-c6炔基”是指含有从2至6个碳原子并含有至少一个碳-碳三键的直链或支链烃基团。c2-c6炔基的代表性实例包括但不限于：乙炔基、1-丙炔基、2-丙炔基、3-丁炔基、2-戊炔基、和1-丁炔基。如本文使用的术语“环烷基”意指如本文所定义的c3-c6环烷基，其中c3-c6环烷基可进一步含有一个或两个具有1、2、3或4个碳原子的亚烷基桥，并且每一个桥连接该环上的两个非相邻碳原子。这种桥环体系的实例包括但不限于二环[2.2.1]庚基、二环[2.1.1]己基、和二环[3.1.1]庚基。除非另外指明，环烷基环体系(包括示例性的环)任选地被取代。本文使用的术语“c3-c6环烷基”是指环丙基、环丁基、环戊基、和环己基，除非另外指明，其各自任选地被取代。如本文使用的术语“c4-c6环烯基”是指环丁烯基、环戊烯基、和环己烯基，除非另外指明，其各自任选被取代。如本文使用的术语“卤代”或“卤素”意指cl、br、i、和f。如本文使用的术语“c1-c3卤代烷氧基”是指如本文所定义的通过氧原子与母体分子部分连接的c1-c3卤代烷基基团。c1-c3卤代烷氧基的实例包括但不限于三氟甲氧基、二氟甲氧基、和2-氟乙氧基。如本文使用的术语“卤代烷基”是指如本文所定义的烷基基团，其中一个、两个、三个、四个、五个或六个氢原子被卤素代替。术语“c1-c6卤代烷基”是指如本文所定义的c1-c6烷基基团，其中一个、两个、三个、四个、五个或六个氢原子被卤素代替。术语“c1-c3卤代烷基”是指如本文所定义的c1-c3烷基基团，其中一个、两个、三个、四个或五个氢原子被卤素代替。卤代烷基的代表性实例包括但不限于：氯甲基、2-氟乙基、2，2-二氟乙基、氟甲基、2，2，2-三氟乙基、三氟甲基、二氟甲基、五氟乙基、2-氯-3-氟戊基、三氟丁基、和三氟丙基。如本文使用的术语“杂环”或“杂环的”意指单环杂环、二环杂环、或螺杂环的基团。单环杂环是三元、四元、五元、六元、七元或八元碳环，其中至少一个碳原子被独立地选自下组的杂原子代替，该组由以下组成：o、n、和s。三元或四元环含有零或一个双键，以及一个选自下组的杂原子，该组由以下组成：o、n、和s。五元环含有零或一个双键和选自下组的一个、两个、或三个杂原子，该组由以下组成：o、n、和s。五元杂环的实例包括在环中含有以下的那些：1个o；1个s；1个n；2个n；3个n；1个s和1个n；1个s和2个n；1个o和1个n；或1个o和2个n。5元杂环基团的非限制性实例包括：1，3-二氧戊环基、四氢呋喃基、二氢呋喃基、四氢噻吩基、二氢噻吩基、咪唑烷基、噁唑烷基、咪唑啉基、异噁唑烷基、吡唑烷基、吡唑啉基、吡咯烷基、2-吡咯啉基、3-吡咯啉基、噻唑啉基、和噻唑烷基。六元环含有零、一个、或两个双键和选自下组的一个、两个或三个杂原子，该组由以下组成：o、n、和s。六元杂环的实例包括在环中含有以下项的那些：1个o；2个o；1个s；2个s；1个n；2个n；3个n；1个s、1个o和1个n；1个s和1个n；1个s和2个n；1个s和1个o；1个s和2个o；1个o和1个n；以及1个o和2个n。6-元杂环基团的实例包括四氢吡喃基、二氢吡喃基、二噁烷基、1，4-二硫化环戊烷基、六氢嘧啶、吗啉基、哌嗪基、哌啶基、1，2，3，6-四氢吡啶基、硫代吡喃基、硫代吗啉基、噻噁烷基、和三噻烷基。七元和八元环含有零个、一个、两个、或三个双键和一个、两个、或三个选自下组的杂原子，该组由以下组成：o、n、和s。单环杂环的代表性实例包括但不限于：氮杂环丁烷基、氮杂环庚烷基、吖丙啶基、二氮杂环庚烷基、1，3-二噁烷基、1，3-二氧戊环基、1，3-二硫戊环基、1，3-二噻烷基、咪唑啉基、咪唑烷基、异噻唑啉基、异噻唑烷基、异噁唑啉基、异噁唑烷基、吗啉基、噁二唑啉基、噁二唑烷基、噁唑啉基、噁唑烷基、氧杂环丁烷基、哌嗪基、哌啶基、吡喃基、吡唑啉基、吡唑烷基、吡咯啉基、吡咯烷基、四氢呋喃基、四氢吡啶基、四氢吡喃基、四氢噻吩基、噻二唑啉基、噻二唑烷基、噻唑啉基、噻唑烷基、硫代吗啉基、硫代吡喃基、和三噻烷基。二环杂环是与苯基稠合的单环杂环、或与c3-c6环烷基稠合的单环杂环、或与c4-c6环烯基稠合的单环杂环、或与单环杂环稠合的单环杂环。二环杂环的代表性实例包括但不限于苯并吡喃基、苯并硫代吡喃基、2，3-二氢苯并呋喃基、2，3-二氢苯并噻吩基、2，3-二氢-1h-吲哚基、3，4-二氢异喹啉-2(1h)-基、2，3，4，6-四氢-1h-吡啶并[1，2-a]吡嗪-2-基、六氢吡喃并[3，4-b][1，4]噁嗪-1(5h)-基、六氢吡咯并[3，4-c]吡咯-2(1h)-基、和六氢环戊[c]吡咯-3a(1h)-基。单环杂环和双环杂环还可以含有一个或两个亚烷基桥，每个亚烷基桥由1、2、3或4个碳原子组成并且各自连接环体系的两个不相邻原子。此类桥连杂环的实例包括但不限于氮杂二环[2.2.1]庚基(包括2-氮杂二环[2.2.1]庚-2-基)、8-氮杂二环[3.2.1]辛-8-基、八氢-2，5-环氧并环戊二烯基、六氢-2h-2，5-甲桥环戊[b]呋喃、六氢-1h-1，4-甲桥环戊[c]呋喃、氮杂金刚烷(1氮杂三环[3.3.1.13，7]癸烷)、和氧杂-金刚烷(2-氧杂三环[3.3.1.13，7]癸烷)。如本文使用的术语“螺杂环”意指如本文所定义的单环杂环，其中单环杂环的同一碳原子上的两个取代基与所述碳原子一起形成第二单环杂环或c3-c6环烷基环。螺杂环的非限制性实例包括：6-氮杂螺[3.4]辛烷、2-氧杂-6-氮杂螺[3.4]辛-6-基、和2，7-二氮杂螺[4.4]壬烷。除非另外指明，单环、二环、和螺杂环(包括示例性的环)是任选地被取代的。单环、二环、和螺杂环通过环体系中所含的任何碳原子或任何氮原子与母体分子部分连接。杂环中的氮和硫杂原子可以任选地被氧化(例如1，1-二氧化四氢噻吩基、1，1-二氧化-1，2-噻唑烷基、1，1-二氧化硫代吗啉基)并且氮原子可以任选地被季铵化(quarternized)。如本文使用的术语“4元至6元单环杂环”或“4元至6元单环杂环的”是指如上文所定义的4-、5-或6-元单环杂环。4元至6元单环杂环的实例包括氮杂环丁烷基、二氢吡喃基、吡咯烷基、四氢呋喃基、四氢吡喃基、哌嗪基、哌啶基、硫代吗啉基、和吗啉基。除非另外指明，4元至6元单环杂环(包括示例性的环)任选地被取代。如本文使用的术语“单环杂芳基”是指5或6元单环芳环。五元环含有两个双键。5元环可以包含一个选自由o和s组成的组的杂原子。或一个、两个、三个、或四个氮原子和任选的一个氧或一个硫原子。六元环含有三个双键和一个、两个、三个或四个氮原子。单环杂芳基的代表性实例包括但不限于：呋喃基、咪唑基、异噁唑基、异噻唑基、噁二唑基、1，3-噁唑基、吡啶基、哒嗪基、嘧啶基、吡嗪基、吡唑基、吡咯基、四唑基、噻二唑基、1，3-噻唑基、噻吩基、三唑基、和三嗪基。除非另外指明，单环杂芳基(包括示例性的环)任选地被取代。单环杂芳基通过环体系中所含的任何可取代的碳原子或任何可取代的氮原子与母体分子部分连接。杂芳基环中的氮原子可以任选地被氧化，并且可以任选地被季铵化。如本文使用的术语“杂原予”是指氮、氧、和硫。如本文使用的术语“氧代”是指＝o基团。术语“放射性标记”是指本发明的化合物，其中至少一个原子是放射性原子或放射性同位素，其中该放射性原子或同位素自发地发射γ射线或高能粒子，例如α粒子或β粒子，或正电子。这样的放射性原子的实例包括但不限于3h(氚)、14c、11c、15o、18f、35s、123i、和125i。当非氢基团代替一个部分的任何可取代原子的氢基时，该部分被描述为“被取代的”。因此，例如，被取代的杂环部分是其中至少一个非氢基团代替杂环上的氢基团的杂环部分。应该认识到，如果在一个部分上存在一个以上的取代，则每个非氢基团可以相同的或不同的(除非另外指明)。如果一个部分被描述为“任选地被取代”，则该部分可以是(1)未被取代的，或(2)被取代的。如果一个部分被描述为任选被至多具体数目的非氢基团取代，则该部分可以是(1)未被取代的；抑或(2)被至多该具体数目的非氢基团取代的或被取代至多该部分上的可取代位置的最大数目，取其更少者。因此例如，如果一个部分被描述为任选地被至多3个非氢基团取代的杂芳基，那么具有少于3个可取代位置的任何杂芳基将任选地被多达仅仅与可取代位置一样多的非氢基团取代。用于说明，四唑基(其仅仅具有一个可取代位置)将任选地被至多一个非氢基团取代。用于进一步说明，如果氨基氮被描述为任选地被至多2个非氢基团取代，则伯氨基氮将任选地被至多2个非氢基团取代，而仲氨基氮将任选低被至多仅仅1个非氢基团取代。术语“治疗(treat、treating和treatment)”是指缓解或消除疾病和/或其伴随症状的方法。在某些实施例中，“治疗(treat、treating和treatment)”是指改善受试者不能感受到的至少一个物理参数。在又一个实施例中，“治疗(treat、treating和treatment)”是指在身体上(例如稳定可辨别的症状)，生理学上(例如稳定身体参数)调节疾病或障碍，或两者。在进一步的实施例中，“治疗(treat、treating和treatment)”是指减缓疾病或障碍的进展。短语“治疗有效量”是指一定量的化合物或其药学上可接受的盐，当单独地或与另一治疗剂结合给予用于治疗具体受试者或受试者群体时，该量足以在一定程度上预阻止被治疗的病症或障碍的一个或多个症状的发展或将其减轻。“治疗有效量”可以取决于化合物、疾病及其严重程度、以及待治疗的受试者的年龄、体重、健康等而变化。例如，在人类或其他哺乳动物中，治疗有效量可以在实验室或临床环境下通过实验确定，或者可以是美国食品和药物管理局或相当的国外机构对于具体疾病和被治疗的受试者所要求的量。短语“药学上可接受的盐”是指在合理的医学判断范围内适用于与人类和低等动物的组织相接触，而没有不适当的毒性、刺激、过敏反应等，并且与合理的效益/风险比率相称的那些盐。术语“受试者”在本文中被定义为是指动物如哺乳动物，包括但不限于，灵长类动物(例如，人)、牛、绵羊、山羊、猪、马、狗、猫、兔、大鼠、小鼠等。在一个实施例中，受试者是人。术语“人”、“患者”和“受试者”在本文中可互换使用。术语“一个或多个”是指一至四个。在一个实施例中，它指的是一至三个。在另一个实施例中，它指的是一至三个。在另一个实施例中，它指的是一至两个。在又一个实施例中，它指的是两个。在又一个另外的实施例中，它是指一个。如本文使用的“cf”意指囊性纤维化(还被称为黏液黏稠病)。如本文使用的“cftr”意指囊性纤维化跨膜传导调节物。在特定的实施例中，该cftr是哺乳动物cftr，更具体地，是人类cftr，为1480个氨基酸的蛋白质。在登录号p13569下提供人类cftr的序列。如本文使用的“野生型cftr”意指天然的或非突变体序列，典型地是蛋白质序列。野生型cftr意指天然的cftr，并且特别地是在膜中具有正常的氯化物通道活性的天然的哺乳动物的cftr(mcftr)或人类cftr(hcftr)。本文中“野生型cftr序列”意指天然的原代氨基酸序列。更具体地，术语“野生型cftr”意指具有根据seqidno：1的氨基酸序列的蛋白质。如本文使用，“一种或多种i类突变”是指干扰蛋白质合成的突变。它们导致在mrna中引入翻译的提前终止信号(终止密码子)。截短的cftr蛋白质是不稳定的并且迅速降解，所以净效果是在顶端膜上没有蛋白质。特别地，一种或多种i类突变意指cftr蛋白的位置1164和1480之间的突变。更具体地，一种或多种i类突变意指w1282x突变。增效剂和校正剂如本文使用的“p增效剂”或“p”意指cftr蛋白的任何合适的功能调节剂。特别地，该p增效剂展现出突变型cftr蛋白的通道活性的提高。在本发明的特定的实施例中，p增效剂选自具有式(i)和式(ii)的化合物。将具有式(i)和式(ii)的化合物以及制备和使用该化合物的方法披露于wo2015/018823和美国专利申请号15/164,317中，通过引用将其完整披露并入本文中。具有式(i)的化合物如下所示：其中r1是-c3-7单环或螺环环烷基，其任选地被一个或多个独立选择的r2基团取代，-4元至7元单环或螺环杂环烷基，其包含一个或多个独立地选自o、n、和s的杂原子，被一个或多个独立选择的r2基团取代，-c6-10单环或二环芳基，其任选地被一个或多个独立选择的r3基团取代，-5-10元单环或稠和的二环杂芳基，其包含一个或多个独立地选自n、o、和s的杂原子，并且任选地被一个或多个独立选择的r3基团取代，或-c1-6烷基，其任选地被一个或多个独立选择的r4基团取代，每个r2选自-卤基、-oh、--cn、--oc(＝o)c1-4烷基、--c(＝o)-c1-4烷氧基、-氧代、-c1-4烷基(其任选地被一个或多个独立选择的r5a取代)，以及-c1-4烷氧基(其任选地被一个或多个独立选择的r5a取代)，每个r3选自-卤基、--oh、--cn、-c1-4烷基(任选地被一个或多个独立选择的r5b取代)、-c1-4烷氧基(任选地被一个或多个独立选择的r5b取代)、-c2-4烯基(任选地被一个或多个独立选择的r5b取代)、-c3-7单环环烷基、-包含一个或多个独立地选自n、o、和s的杂原子的4元至7元单环杂环烷基、-包含一个或多个独立地选自n、o、和s的杂原子的4元至7元单环杂环烯基、-包含一个或多个独立地选自n、o、和s杂原子的5-10元单环或稠和的二环杂芳基，和--nhso2-c1-4烷基；每个r4选自-卤基、-oh、-c3-7单环环烷基、--cn、和-c1-4烷氧基(任选地被一个或多个独立选择的r5c取代)、每个r5a、r5b、和r5c独立地选自о卤基、оoh、о-op(＝o)2oh、о-cn、о-nr6ar6b、和оc1-4烷氧基；并且每个r6a或r6b独立地选自h和c1-4烷基。具有式(ii)的化合物如下所示其中x是h；卤基；c1-4烷基，其任选地经一个或多个独立选择的卤基取代；c1-4烷氧基，其任选地经一个或多个独立选择的以下基团取代-oh；c1-4烷氧基；或-nr11ar11b；-nr12ar12b；环丙基，其任选地经一个或多个独立选择的r5基团取代；苯氧基，其任选地经一个或多个独立选择的r5基团取代；或苯基，其任选地被一个或多个独立选择的r5基团取代；r1是c1-4烷基，其任选地经一个或多个独立选择的以下基团取代-oh；c1-4烷氧基；或4元至6元单环杂环，其包含1个或2个独立地选自下组的杂原子，该组由以下组成：o、s、和n；苯基，其任选地经一个或多个独立选择的r4基团取代；包含1、2或3个独立地选自由n、o和s组成的组的杂原子的n-连接4元至6元单环杂环，其中该单环杂环任选地经一个或多个独立选择的r5基团取代；包含1、2或3个独立地选自由n、o和s组成的组的杂原子的、稠合至苯基的n-连接4元至6元单环杂环，其中该单环杂环及该苯基任选地经一个或多个独立选择的r5基团取代；c3-7环烷基，其任选地经一个或多个独立选择的r5基团取代；或-nr6r7；r2是h；c1-6烷基，其任选地经一个或多个独立选择的以下基团取代-oh；卤基；c1-4烷氧基，其任选地经一个或多个独立选择的以下基团取代卤基；c1-4烷氧基；c3-7环烷基，其任选地经一个或多个独立选择的r5基团取代；或包含1或2个独立地选自由n、o和s组成的组的杂原子的4元至6元单环杂环，其中该单环杂环任选地经一个或多个独立选择的r5基团取代；-c(＝o)nr8ar8b；c3-7环烷基，其任选地经一个或多个独立选择的以下基团取代-oh；卤基；c1-4烷氧基，其任选地经一个或多个独立选择的卤基取代；或c1-4烷基，其任选地经一个或多个独立选择的-oh、卤基或c1-4烷氧基取代；包含1或2个独立地选自由n、o及s组成的组的杂原子的4元至6元单环杂环，其中该单环杂环任选地经一个或多个独立选择的以下基团取代-oh；卤基；c1-4烷氧基，其任选地经一个或多个独立选择的卤基取代，或c1-4烷基，其任选地经一个或多个独立选择的卤基取代；包含1、2或3个独立地选自由o、s和n组成的组的杂原子的5元至6元单环杂芳基，其中该单环杂芳基任选地经一个或多个独立选择的r5基团取代；或苯基，其任选地被一个或多个独立选择的r5基团取代；c3-7环烷基，其任选地经一个或多个以下基团取代-oh；卤基；c1-4烷基，其任选地经一个或多个独立选择的卤基或-oh取代；或c1-4烷氧基，其任选地经一个或多个独立选择的卤基取代；包含1或2个独立地选自由o、s和n组成的组的杂原子的4元至6元单环杂环，其中该单环杂环任选地经一个或多个以下基团取代-oh；卤基；c1-4烷基，其任选地经一个或多个独立选择的卤基取代；或c1-4烷氧基，其任选地经一个或多个独立选择的卤基取代；包含1或2个独立地选自由o、s及n组成的组的杂原子的、稠合至苯基环的4元至6元单环杂环，其中该单环杂环及该苯基任选地经一个或多个独立选择的r5基团取代；包含1或2个独立地选自由o、s及n组成的组的杂原子的5元至11元螺环杂环，其中该螺环杂环任选地经一个或多个独立选择的r5基团取代；包含1、2或3个独立地选自由o、s和n组成的组的杂原子的5元至6元单环杂芳基，其中该单环杂芳基任选地经一个或多个独立选择的r5基团取代；或-nhc(＝o)r13；并且r3是h；或r2和r3与其所附接的氮原子一起形成氮杂环丁烷环或吡咯烷环，其中该氮杂环丁烷及该吡咯烷任选地经一个或多个独立选择的r9基团取代；或包括一个或多个独立地选自由n、o及s组成的组的杂原子的7元至11元螺环杂环；其中该螺环杂环任选地经一个或多个独立选择的r5基团取代；每个r4独立地选自由以下组成的组：卤基；c1-4烷基，其任选地经一个或多个独立选择的卤基取代；以及c1-4烷氧基，其任选地经一个或多个独立选择的卤基取代；每个r5独立地选自由以下组成的组：-oh；卤基；c1-4烷基，其任选地经一个或多个独立选择的以下基团取代c1-4烷氧基；卤基；或-oh；以及c1-4烷氧基，其任选地经一个或多个独立选择的卤基取代；r6是h、c1-4烷基、或c3-7环烷基，其中该c3-7环烷基任选地被一个或多个独立选择的r5基团取代；r7是c1-4烷基，其任选地经一个或多个独立选择的以下基团取代卤基；苯基，其任选地经一个或多个独立选择的以下基团取代卤基；c1-4烷基，其任选地经一个或多个独立选择的卤基取代；或c1-4烷氧基，其任选地经一个或多个独立选择的卤基取代；c1-4烷氧基，其任选地经一个或多个独立选择的卤基取代；或包含1或2个独立地选自由o、s和n组成的组的杂原子的4元至6元单环杂环；其中该单环杂环任选地经一个或多个独立选择的r5基团取代；每个r8a和r8b独立地选自由以下组成的组h；c1-4烷基，其任选地经一个或多个独立选择的卤基取代；以及c3-7环烷基，其任选地经一个或多个独立选择的r5基团取代；每个r9独立地选自由以下组成的组：-oh：卤基；-cn；c1-4烷基，其任选地经一个或多个独立选择的以下基团取代-oh；卤基；或c1-4烷氧基；c1-4烷氧基，其任选地经一个或多个独立选择的卤基取代；c3-7环烷基，其任选地经一个或多个独立选择的r5基团取代；-c(＝o)nr10ar10b；以及包含1或2个独立地选自由o、s及n组成的组的杂原子的4元至6元单环杂环，其中该单环杂环任选地经一个或多个独立选择的r5基团取代；每个r10a和r10b独立地选自由h及c1-4烷基组成的组；每个r11a及r11b独立地选自由以下组成的组h；以及c1-4烷基；r12a和r12b独立地选自下组，该组由以下组成h；c1-4烷基；以及c3-7环烷基；并且r13独立地是任选地经一个或多个独立选择的以下基团取代的c1-4烷基-oh；卤基；或c1-4烷氧基。在一个更具体的实施例中，p增效剂是具有下式的化合物：如本文使用的术语c校正剂意指不是通读校正剂是任何校正剂分子。如本文使用的术语“通读校正剂”意指作用于rna水平从而允许通读提前终止密码子(ptc)的任何分子。特别地，c校正剂可以是如本文所定义的c1校正剂或c2校正剂。如本文使用的术语“c1校正剂”或“c1”意指细胞加工和/或定位的调节剂。更具体地，c1校正剂不是通读校正剂。在特定的实施例中，c1校正剂选自具有式(iii)的化合物。将具有式(iii)的化合物以及制备和使用该化合物的方法披露于美国专利申请号14/925,649中，通过引用将该完整披露并入本文中。具有式(iii)的化合物如下所示：其中x是cr2，并且y是cr3；或x是n，并且y是cr3；或x是cr2，并且y是n；m是0、1、2、或3；r”是环丙基环上的任选的取代基，并且在每次出现时各自独立地是卤素、c1-c6卤代烷基、或c1-c6烷基；r1和r2各自独立地是氢、卤素、c1-c6卤代烷基、c1-c6烷基、-or1a、-c(o)or1b、-nr1ar2a、或-c(o)nr1ar2a；r1a和r2a在每次出现时各自独立地是氢、c1-c6卤代烷基、g1a、或c1-c6烷基；其中该c1-c6卤代烷基和该c1-c6烷基各自任选地被1或2个独立地选自下组的取代基取代，该组由以下组成：-orza、-srza、-s(o)2rza、-c(o)rza、-c(o)orza、-c(o)n(rza)2、-n(rza)2、-n(rza)c(o)rzb、-n(rza)s(o)2rzb、-n(rza)c(o)orzb、-n(rza)c(o)n(rza)2、-cn、和g1a；或r1a和r2a与其所附接的氮原子一起形成4元至6元杂环，其中该4元至6元杂环任选地被1、2、或3个独立地选自下组的取代基取代，该组由以下组成：卤素、c1-c6烷基、c1-c6卤代烷基、-orj、和n(rj)2；其中rza在每次出现时独立地是氢、c1-c6卤代烷基、c1-c6烷基、g1a、或-(c1-c6亚烷基)-g1a；并且rzb在每次出现时独立地是c1-c6卤代烷基、c1-c6烷基、g1a、或-(c1-c6亚烷基)-g1a；r1b是氢、c1-c6卤代烷基、或c1-c6烷基；r3和r14各自独立地是氢、卤素、c1-c6卤代烷基、c1-c6烷基、-oh、或-o-(c1-c6烷基)；r4是氢、c1-c6卤代烷基、或c1-c6烷基；r5是氢、-c(o)ri、-c(o)oh、-c(o)o(c1-c6烷基)、-c(o)n(rh)2、c1-c6卤代烷基、c1-c6烷基、或g2a；其中该c1-c6卤代烷基和该c1-c6烷基各自任选地被1或2个独立地选自下组的取代基取代，该组由以下组成：-orh、-oc(o)n(rh)2、-c(o)rh、-c(o)orh、-c(o)n(rh)2、-n(rh)2、-n(rh)c(o)ri、-n(rh)s(o)2ri、-n(rh)c(o)o(ri)、-n(rh)c(o)n(rh)2、和g2a；或r4和r5与它们所附接的碳原子一起形成c3-c6环烷基或4元至6元杂环；其中该c3-c6环烷基和该4元至6元杂环各自任选地被1、2、或3个独立地选择的rp基团取代；g2a在每次出现时独立地是环烷基、环烯基、杂环、芳基、或杂芳基，其各自独立地是未经取代的或被1、2、或3个独立地选择的rq基团取代的；rp和rq在每次出现时各自独立地是c1-c6烷基、卤素、c1-c6卤代烷基、-cn、氧代、no2、-orh、-oc(o)ri、-oc(o)n(rh)2、-srh、-s(o)2rh、-s(o)2n(rh)2、-c(o)rh、-c(o)orh、-c(o)n(rh)2、-c(o)n(rh)s(o)2rh、-n(rh)2、-n(rh)c(o)ri、-n(rh)s(o)2ri、-n(rh)c(o)o(ri)、-n(rh)c(o)n(rh)2、或ga，其中该c1-c6卤代烷基和该c1-c6烷基各自任选地被1或2个独立地选自下组的取代基取代，该组由以下组成：-orh、-oc(o)ri、-oc(o)n(rh)2、-srh、-s(o)2rh、-s(o)2n(rh)2、-c(o)rh、-c(o)orh、-c(o)n(rh)2、-c(o)n(rh)s(o)2rh、-n(rh)2、-n(rh)c(o)ri、-n(rh)s(o)2ri、-n(rh)c(o)o(ri)、-n(rh)c(o)n(rh)2、-cn、和ga；rh在每次出现时独立地是氢、c1-c6卤代烷基、c1-c6烷基、或ga，其中该c1-c6卤代烷基和该c1-c6烷基各自任选地被1或2个独立地选自下组的取代基取代，该组由以下组成：-orj、-oc(o)n(rj)2、-srj、-c(o)orj、-c(o)n(rj)2、-n(rj)2、-cn、和ga；ri在每次出现时独立地是c1-c6卤代烷基、c1-c6烷基、或ga，其中该c1-c6卤代烷基和该c1-c6烷基各自任选地被1或2个独立地选自下组的取代基取代，该组由以下组成：-orj、-oc(o)n(rj)2、-srj、-c(o)orj、-c(o)n(rj)2、-n(rj)2、-cn、和ga；r6是氢、卤素、c1-c6卤代烷基、或c1-c6烷基；r7是氢、卤素、-orj、-n(rj)2、-n(rj)c(o)rk、c1-c6卤代烷基、c1-c6烷基、c2-c6烯基、或-(c1-c6亚烷基)-g3a；r8是氢、c1-c6卤代烷基、或c1-c6烷基；r9、r10、和r13各自独立地是氢、卤素、-orj、c1-c6卤代烷基、或c1-c6烷基；r11和r12各自独立地是氢、c1-c3烷基、或卤素；g1a、g3a、和ga在每次出现时各自独立地是环烷基、环烯基、杂环、芳基、或杂芳基，其各自独立地是未经取代的或被1、2、或3个独立地选择的rs基团取代的；其中rs在每次出现时独立地是c1-c6烷基、c2-c6烯基、c2-c6炔基、卤素、c1-c6卤代烷基、-cn、氧代、no2、-orj、-oc(o)rk、-oc(o)n(rj)2、-srj、-s(o)2rj、-s(o)2n(rj)2、-c(o)rj、-c(o)orj、-c(o)n(rj)2、-n(rj)2、-n(rj)c(o)rk、-n(rj)s(o)2rk、-n(rj)c(o)o(rk)、-n(rj)c(o)n(rj)2、-(c1-c6亚烷基)-orj、-(c1-c6亚烷基)-oc(o)rk、-(c1-c6亚烷基)-oc(o)n(rj)2、-(c1-c6亚烷基)-srj、-(c1-c6亚烷基)-s(o)2rj、-(c1-c6亚烷基)-s(o)2n(rj)2、-(c1-c6亚烷基)-c(o)rj、-(c1-c6亚烷基)-c(o)orj、-(c1-c6亚烷基)-c(o)n(rj)2、-(c1-c6亚烷基)-n(rj)2、-(c1-c6亚烷基)-n(rj)c(o)rk、-(c1-c6亚烷基)-n(rj)s(o)2rk、-(c1-c6亚烷基)-n(rj)c(o)o(rk)、-(c1-c6亚烷基)-n(rj)c(o)n(rj)2、或-(c1-c6亚烷基)-cn；rj在每次出现时独立地是氢、c1-c6烷基、或c1-c6卤代烷基；并且rk在每次出现时独立地是c1-c6烷基或c1-c6卤代烷基。如本文使用的，术语“c2校正剂”或“c2”意指细胞加工和/或定位的调节剂。更具体地，c2校正剂不是通读校正剂。在本发明的一个特定的实施例中，c2校正剂是具有式(iv)或式(v)的化合物。具有式(iv)和式(v)的化合物以及制备和使用所述化合物的方法分别披露于美国专利申请号15/287,911和美国专利申请号15/287,922中，通过引用将其完整披露并入本文中。在一些实施例中，该c2校正剂是具有式(iv)的化合物或其药学上可接受的盐，其中r1是g1a、c1-c6卤代烷基、或c1-c6烷基；其中该c1-c6卤代烷基和c1-c6烷基各自任选地被一个g1a取代；g1a，在每次出现时，独立地是苯基、5元至6元单环杂芳基、4元至7元单环杂环、5元至11元稠合二环杂环、或c3-c6单环环烷基；其中每个g1a任选地被1、2、3、或4个取代基取代，所述取代基独立地选自由r1a和g1b组成的组；g1b，在每次出现时，独立地是4元至7元单环杂环，其任选地被1、2、3、或4个独立地选择的r1b基团取代；r2是氢、c2-c4烯基、c1-c6烷基、c1-c6卤代烷基、-or2xa、-n(r2xa)(r2xb)、或g2a；r2xa，在每次出现时，独立地是c1-c6烷基、c1-c6卤代烷基、或g2b；r2xb是氢、c1-c3烷基、或c1-c3卤代烷基；g2a和g2b各自独立地是4元至7元单环杂环或c3-c6单环环烷基；其中g2a和g2b各自任选地被1、2、或3个独立地选择的r2a基团取代；r3是g3a、-g3b-l1-g3c、-g3b-l3-g3c-g3e、-(c1-c6亚烷基)-g3d、-or3a、或-n(r3a)(r3b)；r3a，在每次出现时，独立地是g3d、c1-c6卤代烷基、或c1-c6烷基；其中该c1-c6卤代烷基和该c1-c6烷基各自任选地被1或2个独立地选自下组的取代基取代，该组由以下组成：g3d、-or3xa、和-n(r3xb)2；r3xa和r3xb，在每次出现时，各自独立地是氢、c1-c6卤代烷基、c1-c6烷基、或g3d；r3b是氢、c1-c6烷基、或c1-c6卤代烷基；l1是键、c1-c6亚烷基、(c1-c6亚烷基)r-l2-(c1-c6亚烷基)s或o-(c1-c6亚烷基)-c(o)，其中该l1部分的左端附接至g3b；l2是o、n(rx)、c(o)、n(rx)c(o)、或c(o)n(rx)；其中每个rx独立地是氢、c1-c6烷基、或c1-c6卤代烷基；l3是键或c1-c6亚烷基；r是0或1；s是0或1；g3a、g3b、和g3c各自独立地是c3-c11环烷基、苯基、5元至6元单环杂芳基、或4元至11元杂环；其中g3a、g3b、和g3c各自任选地被1、2、3、或4个独立地选择的re基团取代；g3d，在每次出现时，独立地是c3-c8单环环烷基、4元至7元单环杂环、5元至11元稠合的二环杂环、或5元至11元螺杂环；其中每个g3d任选地被1、2、3、或4个取代基取代，所述取代基独立地选自由re和g3e组成的组；g3e，在每次出现时，独立地是c3-c8单环环烷基或4元至7元单环杂环；其中每个g3e任选地被1、2、3、或4个独立地选择的re基团取代；r4是氢、c1-c3烷基、或c1-c3卤代烷基；r5是c1-c6烷基、c2-c6烯基、c2-c6炔基、c1-c6卤代烷基、-n(r5ax)(r5bx)、-or5dx、或g5a；其中该c1-c6烷基和该c1-c6卤代烷基各自任选地被1或2个独立地选自下组的取代基取代，该组由以下组成：g5a、-cn、-n3、-or5ax、-s(o)2r5ax、-s(o)2n(r5ax)(r5bx)、-n(r5ax)(r5bx)、-n(r5bx)s(o)2r5cx、-n(r5bx)c(o)r5cx、-n(r5bx)c(o)n(r5ax)(r5bx)、-n(r5bx)c(o)or5cx、-c(o)r5ax、-c(o)or5ax、-c(o)n(r5bx)s(o)2r5cx、和-c(o)n(r5ax)(r5bx)；r5ax和r5bx在每次出现时，各自独立地是氢、c1-c6烷基、c1-c6卤代烷基、-or5ex、-(c1-c6亚烷基)-or5ex、g5a、或-(c1-c6亚烷基)-g5a；r5cx在每次出现时独立地是c1-c6烷基、c1-c6卤代烷基、g5a、或-(c1-c6亚烷基)-g5a；r5dx是c1-c6烷基、或c1-c6卤代烷基；r5ex是氢、c1-c6烷基、或c1-c6卤代烷基；g5a，在每次出现时，独立地是c3-c11环烷基、苯基、5元至6元单环杂芳基、或4元至11元杂环；其中每个g5a任选地被1、2、3、或4个独立地选择的r5a基团取代；r5a在每次出现时独立地是c1-c6烷基、c2-c6烯基、c2-c6炔基、卤素、c1-c6卤代烷基、氧代、g5b、-cn、no2、-orb、-oc(o)rc、-oc(o)n(rd)2、-srb、-s(o)2rb、-s(o)2n(rd)2、-c(o)rb、-c(o)orb、-c(o)n(rd)2、-c(o)n(rd)s(o)2rc、-n(rd)2、-n(rd)c(o)rc、-n(rd)s(o)2rc、-n(rd)c(o)o(rb)、-n(rd)c(o)n(rd)2、-n(rd)s(o)2n(rd)2、-(c1-c6亚烷基)-cn、-(c1-c6亚烷基)-g5b、-(c1-c6亚烷基)-orb、-(c1-c6亚烷基)-oc(o)rc、-(c1-c6亚烷基)-oc(o)n(rd)2、-(c1-c6亚烷基)-srb、-(c1-c6亚烷基)-s(o)2rb、-(c1-c6亚烷基)-s(o)2n(rd)2、-(c1-c6亚烷基)-c(o)rb、-(c1-c6亚烷基)-c(o)orb、-(c1-c6亚烷基)-c(o)n(rd)2、-(c1-c6亚烷基)-c(o)n(rd)s(o)2rc、-(c1-c6亚烷基)-n(rd)2、-(c1-c6亚烷基)-n(rd)c(o)rc、-(c1-c6亚烷基)-n(rd)s(o)2rc、-(c1-c6亚烷基)-n(rd)c(o)o(rc)、-(c1-c6亚烷基)-n(rd)c(o)n(rd)2、或-(c1-c6亚烷基)-n(rd)s(o)2n(rd)2；rb和rd在每次出现时，各自独立地是氢、c1-c6烷基、c1-c6卤代烷基、烷氧基烷基、g5b、或-(c1-c6亚烷基)-g5b；rc在每次出现时独立地是c1-c6烷基、c1-c6卤代烷基、烷氧基烷基、g5b、或-(c1-c6亚烷基)-g5b；g5b，在每次出现时，独立地是c3-c6单环环烷基、苯基、5元至6元单环杂芳基、或4元至7元单环杂环；其中每个g5b任选地被1、2、3、或4个独立地选择的r5b基团取代；re在每次出现时独立地是c2-c6烯基、c2-c6炔基、c1-c6烷基、c1-c6卤代烷基、卤素、氧代、-cn、-n3、no2、-orf、-oc(o)rg、-oc(o)nrfrh、-srf、-s(o)2rf、-s(o)2nrfrh、-c(o)rf、-c(o)orf、-c(o)nrfrh、-c(o)n(rh)s(o)2rf、-n(rf)2、-n(rh)c(o)rh、-n(rh)s(o)2rg、-n(rh)c(o)o(rg)、-n(rh)c(o)nrfrh、或-n(rh)s(o)2nrfrh；其中该c1-c6卤代烷基和该c1-c6烷基各自任选地被1个或2个独立地选自下组的取代基取代，该组由以下组成：-cn、no2、-orf、-oc(o)rg、-oc(o)nrfrh、-srf、-s(o)2rf、-s(o)2nrfrh、-c(o)rf、-c(o)orf、-c(o)nrfrh、-c(o)n(rh)s(o)2rf、-n(rf)2、-n(rh)c(o)rg、-n(rh)s(o)2rg、-n(rh)c(o)o(rg)、-n(rh)c(o)nrfrh、和-n(rh)s(o)2nrfrh；rf，在每次出现时，独立地是氢、c1-c6烷基、c2-c6烯基、c2-c6炔基、c1-c6卤代烷基、-(c1-c6亚烷基)-cn、-(c1-c6亚烷基)-orm、-(c1-c6亚烷基)-oc(o)rn、-(c1-c6亚烷基)-oc(o)n(rm)2、-(c1-c6亚烷基)-srm、-(c1-c6亚烷基)-s(o)2rm、-(c1-c6亚烷基)-s(o)2n(rm)2、-(c1-c6亚烷基)-c(o)rm、-(c1-c6亚烷基)-c(o)orm、-(c1-c6亚烷基)-c(o)n(rm)2、-(c1-c6亚烷基)-c(o)n(rm)s(o)2rn、-(c1-c6亚烷基)-n(rm)2、-(c1-c6亚烷基)-n(rm)c(o)rn、-(c1-c6亚烷基)-n(rm)s(o)2rn、-(c1-c6亚烷基)-n(rm)c(o)o(rn)、-(c1-c6亚烷基)-n(rm)c(o)n(rm)2或-(c1-c6亚烷基)-n(rm)s(o)2n(rm)2；rg，在每次出现时，独立地是c1-c6烷基、c2-c6烯基、c2-c6炔基、c1-c6卤代烷基、-(c1-c6亚烷基)-cn、-(c1-c6亚烷基)-orm、-(c1-c6亚烷基)-oc(o)rn、-(c1-c6亚烷基)-oc(o)n(rm)2、-(c1-c6亚烷基)-srm、-(c1-c6亚烷基)-s(o)2rm、-(c1-c6亚烷基)-s(o)2n(rm)2、-(c1-c6亚烷基)-c(o)rm、-(c1-c6亚烷基)-c(o)orm、-(c1-c6亚烷基)-c(o)n(rm)2、-(c1-c6亚烷基)-c(o)n(rm)s(o)2rn、-(c1-c6亚烷基)-n(rm)2、-(c1-c6亚烷基)-n(rm)c(o)rn、-(c1-c6亚烷基)-n(rm)s(o)2rn、-(c1-c6亚烷基)-n(rm)c(o)o(rn)、-(c1-c6亚烷基)-n(rm)c(o)n(rm)2或-(c1-c6亚烷基)-n(rm)s(o)2n(rm)2；rh，在每次出现时，独立地是氢、c1-c6烷基、c1-c6卤代烷基、或-(c1-c6亚烷基)-orm；r1a、r1b、r2a、和r5b在每次出现时各自独立地是c1-c6烷基、c2-c6烯基、c2-c6炔基、卤素、c1-c6卤代烷基、氧代、-cn、no2、-orm、-oc(o)rn、-oc(o)n(rm)2、-srm、-s(o)2rm、-s(o)2n(rm)2、-c(o)rm、-c(o)orm、-c(o)o(苄基)、-c(o)n(rm)2、-c(o)n(rm)s(o)2rn、-n(rm)2、-n(rm)(烷氧基烷基)、-n(烷氧基烷基)2、-n(rm)c(o)rn、-n(rm)s(o)2rn、-n(rm)c(o)o(rn)、-n(rm)c(o)n(rm)2、-n(rm)s(o)2n(rm)2、-(c1-c6亚烷基)-cn、-(c1-c6亚烷基)-orm、-(c1-c6亚烷基)-oc(o)rn、-(c1-c6亚烷基)-oc(o)n(rm)2、-(c1-c6亚烷基)-srm、-(c1-c6亚烷基)-s(o)2rm、-(c1-c6亚烷基)-s(o)2n(rm)2、-(c1-c6亚烷基)-c(o)rm、-(c1-c6亚烷基)-c(o)orm、-(c1-c6亚烷基)-c(o)n(rm)2、-(c1-c6亚烷基)-c(o)n(rm)s(o)2rn、-(c1-c6亚烷基)-n(rm)2、-(c1-c6亚烷基)-n(rm)c(o)rn、-(c1-c6亚烷基)-n(rm)s(o)2rn、-(c1-c6亚烷基)-n(rm)c(o)o(rn)、-(c1-c6亚烷基)-n(rm)c(o)n(rn)2、或-(c1-c6亚烷基)-n(rm)s(o)2n(rn)2；rm，在每次出现时，独立地是氢、c1-c6烷基、或c1-c6卤代烷基；rn，在每次出现时，独立地是c1-c6烷基或c1-c6卤代烷基；r6是氢、c1-c6烷基、或c1-c6卤代烷基；或r5和r6一起形成c1-c6亚烷基或-n(rz)-(c1-c6亚烷基)-，其中该n(rz)附接至式(i)的s(o)2部分；并且rz是氢、c1-c6烷基、或c1-c6卤代烷基。在一些实施例中，该校正剂c2是具有式(v)的化合物或其药学上可接受的盐，其中r1是g1a、-g1b-g1c、-g1b-l1a-g1c、c1-c6卤代烷基、c1-c6烷基、-(c1-c6亚烷基)-cn、-(c1-c6亚烷基)-g1d或-g1d-o-苄基；l1a是-o-或-o-(c1-c3亚烷基)-；其中l1a部分的左端附接至g1b；g1a是苯基、芳基、5元至6元单环杂芳基、4元至7元单环杂环、稠合双环杂环或c3-c6单环环烷基；其中每个g1a任选地被1、2、3、或4个独立地选择的r1a基团取代；g1b是苯基或5元至6元单环杂芳基；其中每个g1b任选地被1、2、3、或4个独立地选择的r1b基团取代；g1c是4元至7元单环杂环，其任选地被1、2、3或4个独立地选择的r1c基团取代；g1d，在每次出现时，是4元至7元单环杂环、5元至6元单环杂芳基或c3-c6单环环烷基；其中每个g1d任选地被1、2、3或4个独立地选择的r1d基团取代；r2是c2-c4烯基、c1-c6烷基、c1-c6卤代烷基、-or2xa、-(c1-c6亚烷基)-or2xb、-(c1-c6亚烷基)-n(r2xb)2、-c(o)or2xb、-c(o)n(r2xb)2或-g2a；r2xa是氢、c1-c6烷基、c1-c6卤代烷基、或g2b；r2xb，在每次出现时，独立地是氢、c1-c6烷基、或c1-c6卤代烷基；g2a和g2b各自独立地是4元至7元单环杂环或c3-c6单环环烷基；其中g2a和g2b各自任选地被1、2、或3个独立地选择的r2a基团取代；r3是卤素、g3a、-g3b-l1-g3c、-g3b-l3-g3c-l4-g3f、-(c1-c6亚烷基)-g3e、-or3a、-n(r3a)(r3b)、-n(r3b)c(o)g3d或-c(o)g3d；r3a，在每次出现时，独立地是g3e、c1-c6卤代烷基、或c1-c6烷基；其中该c1-c6卤代烷基和c1-c6烷基各自任选地被一个或两个取代基取代，所述取代基独立地选自下组，该组由以下组成：g3e、-or3xa、-c(o)g3d、-n(r3xb)2和-s(o)2r3xc；r3xa、r3xb和r3xc，在每次出现时，各自独立地是氢、c1-c6卤代烷基、c1-c6烷基、g3e、-(c1-c6亚烷基)-or3ya或-(c1-c6亚烷基)-n(r3ya)2；其中r3ya，在每次出现时，独立地是氢、c1-c6烷基、或c1-c6卤代烷基；r3b，在每次出现时，是氢、c1-c6烷基、或c1-c6卤代烷基；l1是键、c1-c6亚烷基、(c1-c6亚烷基)r-l2-(c1-c6亚烷基)s或o-(c1-c6亚烷基)-c(o)，其中该l1部分的左端附接至g3b；l2是o、n(rx)、c(o)、n(rx)c(o)、或c(o)n(rx)；其中每个rx独立地是氢、c1-c6烷基、或c1-c6卤代烷基；l3是键或c1-c6亚烷基；l4是键、c1-c6亚烷基、o、n(r2x)、c(o)、n(r2x)c(o)或c(o)n(r2x)；其中每个r2x独立地是氢、c1-c6烷基、或c1-c6卤代烷基；r是0或1；s是0或1；g3a、g3b和g3c各自独立地是c3-c11环烷基、苯基、5元至6元单环杂芳基或4元至11元杂环，其中g3a、g3b和g3c各自任选地被1、2、3或4个独立地选择的re基团取代；g3d，在每次出现时，是4元至7元单环杂环，其任选地被1、2、3或4个独立地选择的re基团取代；g3e，在每次出现时，独立地是c3-c8单环环烷基或4元至11元杂环；其中每个g3e任选地被1、2、3、或4个取代基取代，所述取代基独立地选自由re和g3f组成的组；g3f，在每次出现时，独立地是4元至7元单环杂环或c3-c6单环环烷基；其中每个g3f任选地被1、2、3、或4个独立地选择的re基团取代；re，在每次出现时，独立地是c2-c6烯基、c2-c6炔基、c1-c6烷基、c1-c6卤代烷基、卤素、氧代、-cn、-n3、no2、-orf、-oc(o)rg、-oc(o)nrfrh、-srf、-s(o)2rf、-s(o)2nrfrh、-c(o)rf、-c(o)orf、-c(o)nrfrh、-c(o)n(rh)s(o)2rf、-n(rf)2、-n(rh)c(o)rf、-n(rh)s(o)2rg、-n(rh)c(o)o(rg)、-n(rh)c(o)nrfrh或-n(rh)s(o)2nrfrh；其中该c1-c6卤代烷基和c1-c6烷基各自任选地被1或2个取代基取代，所述取代基独立地选自下组，该组由以下组成：卤素、-cn、no2、-orf、-oc(o)rg、-oc(o)nrfrh、-srf、-s(o)2rf、-s(o)2nrfrh、-c(o)rf、-c(o)orf、-c(o)nrfrh、-c(o)n(rh)s(o)2rf、-n(rf)2、-n(rh)c(o)rf、-n(rh)s(o)2rg、-n(rh)c(o)o(rg)、-n(rh)c(o)nrfrh和-n(rh)s(o)2nrfrh；rf，在每次出现时，独立地是氢、c1-c6烷基、c2-c6烯基、c2-c6炔基、c1-c6卤代烷基、-(c1-c6亚烷基)-cn、-(c1-c6亚烷基)-orm、-(c1-c6亚烷基)-oc(o)rh、-(c1-c6亚烷基)-oc(o)n(rm)2、-(c1-c6亚烷基)-srm、-(c1-c6亚烷基)-s(o)2rm、-(c1-c6亚烷基)-s(o)2n(rm)2、-(c1-c6亚烷基)-c(o)rm、-(c1-c6亚烷基)-c(o)orm、-(c1-c6亚烷基)-c(o)n(rm)2、-(c1-c6亚烷基)-c(o)n(rm)s(o)2rn、-(c1-c6亚烷基)-n(rm)2、-(c1-c6亚烷基)-n(rm)c(o)rn、-(c1-c6亚烷基)-n(rm)s(o)2rn、-(c1-c6亚烷基)-n(rm)c(o)o(rn)、-(c1-c6亚烷基)-n(rm)c(o)n(rm)2或-(c1-c6亚烷基)-n(rm)s(o)2n(rm)2；rg，在每次出现时，独立地是c1-c6烷基、c2-c6烯基、c2-c6炔基、c1-c6卤代烷基、-(c1-c6亚烷基)-cn、-(c1-c6亚烷基)-orm、-(c1-c6亚烷基)-oc(o)rn、-(c1-c6亚烷基)-oc(o)n(rm)2、-(c1-c6亚烷基)-srm、-(c1-c6亚烷基)-s(o)2rm、-(c1-c6亚烷基)-s(o)2n(rm)2、-(c1-c6亚烷基)-c(o)rm、-(c1-c6亚烷基)-c(o)orm、-(c1-c6亚烷基)-c(o)n(rm)2、-(c1-c6亚烷基)-c(o)n(rm)s(o)2rn、-(c1-c6亚烷基)-n(rm)2、-(c1-c6亚烷基)-n(rm)c(o)rn、-(c1-c6亚烷基)-n(rm)s(o)2rn、-(c1-c6亚烷基)-n(rm)c(o)o(rn)、-(c1-c6亚烷基)-n(rm)c(o)n(rm)2或-(c1-c6亚烷基)-n(rm)s(o)2n(rm)2；rh，在每次出现时，独立地是氢、c1-c6烷基、c1-c6卤代烷基、或-(c1-c6亚烷基)-orm；r1a、r1b、r1c、r1d和r2a，在每次出现时，各自独立地是c1-c6烷基、c2-c6烯基、c2-c6炔基、卤素、c1-c6卤代烷基、氧代、-cn、no2、-orm、-oc(o)rn、-oc(o)n(rm)2、-srm、-s(o)2rm、-s(o)2n(rm)2、-c(o)rm、-c(o)orm、-c(o)n(rm)2、-c(o)n(rm)s(o)2rn、-n(rm)2、-n(rm)(烷氧基烷基)、-n(烷氧基烷基)2、-n(rm)c(o)rh、-n(rm)s(o)2rh、-n(rm)c(o)o(rn)、-n(rm)c(o)n(rm)2、-n(rm)s(o)2n(rm)2、-(c1-c6亚烷基)-cn、-(c1-c6亚烷基)-orm、-(c1-c6亚烷基)-oc(o)rn、-(c1-c6亚烷基)-oc(o)n(rm)2、-(c1-c6亚烷基)-srm、-(c1-c6亚烷基)-s(o)2rm、-(c1-c6亚烷基)-s(o)2n(rm)2、-(c1-c6亚烷基)-c(o)rm、-(c1-c6亚烷基)-c(o)orm、-(c1-c6亚烷基)-c(o)n(rm)2、-(c1-c6亚烷基)-c(o)n(rm)s(o)2rn、-(c1-c6亚烷基)-n(rm)2、-(c1-c6亚烷基)-n(rm)c(o)rn、-(c1-c6亚烷基)-n(rm)s(o)2rn、-(c1-c6亚烷基)-n(rm)c(o)o(rn)、-(c1-c6亚烷基)-n(rm)c(o)n(rn)2或-(c1-c6亚烷基)-n(rm)s(o)2n(rn)2；rm，在每次出现时，独立地是氢、c1-c6烷基、或c1-c6卤代烷基；rn，在每次出现时，独立地是c1-c6烷基或c1-c6卤代烷基；并且r4是氢、c1-c3烷基、或c1-c3卤代烷基；条件是：当r1是c1-c6烷基或g1a，其中g1a是任选取代的苯基、任选取代的5元至6元单环杂芳基或任选取代的4元至7元单环杂环，r2是c1-c6烷基，并且r3是g3a时，则g3a不是任选取代的苯基或任选取代的5元至6元单环杂芳基。如本文使用的，术语“治疗组合”或“组合”是指p与一种或两种校正剂c1和/或c2的组合。当校正剂c1和c2一起使用时对表达水平和/或突变型cftr功能提供协同/加性效应。然而不受限于任何作用的特定模式，c1和c2校正剂可以通过不同的机制起作用。更具体地，c1和c2校正剂与细胞中的cftr蛋白结合。可以使用如本文所描述的膜片钳测定(tecc)和分子传感技术来测量这样的结合。在p增效剂与两种校正剂的组合的特定的实施例中，c2校正剂不通过cftr的msd1结构域起作用，并且c1校正剂通过cftr的msd1结构域起作用。更特别地，c1校正剂和c2校正剂与cftr蛋白的不同部分结合。具体地，c1和c2校正剂与cftr蛋白的不同结构域结合。在一些实施例中，c1校正剂是与cftr蛋白的msd1结构域结合的校正剂。在一些实施例中，c2校正剂是不与cftr蛋白的msd1结构域结合的校正剂。在一个特定的实施例中，如使用分子传感技术测量的，c2校正剂与cftr表达细胞的膜部分的结合常数(kd)高于200nm、300nm、400nm、500nm、600nm。在一个特定的实施例中，如使用分子传感技术测量的，c1校正剂与cftr表达细胞的膜部分的结合常数(kd)低于50nm、100nm、200nm、300nm。在一个特定的实施例中，如通过本文披露的跨上皮钳位电路测定(tecc测定)所测量的，p与c1和c2的组合提供了对短路(isc)电流的影响，即至少等于在相同细胞中c1校正剂和c2校正剂的单个isc的总和的85％。在特定的实施例中，isc是在相同的细胞中c1校正剂和c2的单个isc的总和的至少90％。更具体地，使用p与c1和c2的组合通过对源自f508del纯合的患者的细胞的tecc测定测量的短路(isc)电流产生至少30％、35％、40％、45％、50％、60％、75％、80％、85％、或90％的使用根据seqidno：1的cftr蛋白通过所述tecc测定测量而获得的isc。在一个特定的实施例中，在p增效剂与c1或c2的校正剂的所述组合中，所述组合产生如在w1282x费舍尔大鼠甲状腺(frt)细胞中使用跨上皮钳位电路测定所测量的另外的如下跨上皮电导(δgt)：至少2ms/cm2、至少1.5ms/cm2、至少1ms/cm2、至少0.5ms/cm2、至少0.25ms/cm2。更特别地，在p增效剂与c1或c2校正剂的所述组合中，所述组合产生如在w1282x费舍尔大鼠甲状腺(frt)细胞中使用跨上皮钳位电路测定所测量的另外的至少1ms/cm2的跨上皮电导(δgt)。在另一个实施例中，在p增效剂与c1校正剂和c2校正剂的所述组合中，所述组合产生如在w1282x费舍尔大鼠甲状腺(frt)细胞中使用跨上皮钳位电路测定所测量的另外的如下跨上皮电导(δgt)：至少3.5ms/cm2、至少3ms/cm2、至少2ms/cm2、至少1.5ms/cm2、至少1ms/cm2。可以将p增效剂、c1校正剂、和c2校正剂按药学上可接受的盐形式来使用。药学上可接受的盐已经描述于s.m.berge等人j.pharmaceuticalsciences[药物科学杂志]，1977，66：1-19中。p、c1、和c2可以含有碱性或酸性功能性或两者，并且希望时，可以通过使用适合的酸或碱而被转化为药学上可接受的盐。可以在最终分离和纯化本发明的化合物过程中原位制备这些盐。酸加成盐的实例包括但不限于：乙酸盐、己二酸盐、海藻酸盐、柠檬酸盐、天冬氨酸盐、苯甲酸盐、苯磺酸盐、硫酸氢盐、丁酸盐、樟脑酸盐、樟脑磺酸盐、二葡糖酸盐、甘油磷酸盐、半硫酸盐、庚酸盐、己酸盐、富马酸盐、盐酸盐、氢溴酸盐、氢碘酸盐、2-羟基乙磺酸盐(异硫化羟酸盐)、乳酸盐、苹果酸盐、马来酸盐、甲磺酸盐、烟酸盐、2-萘磺酸盐、草酸盐、棕榈酸盐(palmitoate)、果胶酸盐、过硫酸盐、3-苯丙酸盐、苦味酸盐、特戊酸盐、丙酸盐、琥珀酸盐、酒石酸盐、硫氰酸盐、磷酸盐、谷氨酸盐、碳酸氢盐、对甲苯磺酸盐以及十一烷酸盐。此外，碱性含氮基团可以用如下试剂季铵化：低级烷基卤化物，如但不限于甲基、乙基、丙基、和丁基的氯化物、溴化物和碘化物；二烷基硫酸盐如二甲基、二乙基、二丁基和二戊基硫酸盐；长链卤化物如但不限于癸基、月桂基、肉豆蔻基和硬脂基的氯化物、溴化物和碘化物；芳基烷基卤化物如苄基和苯乙基溴化物等。由此获得水溶性或油溶性或分散性产物。可以用于形成药学上可接受的酸加成盐的酸的实例包括下列无机酸，如盐酸、氢溴酸、硫酸及磷酸；以及下列有机酸，如乙酸、富马酸、马来酸、4-甲基苯磺酸、琥珀酸及柠檬酸。可以在最终分离和纯化p、c1、和c2过程中原位制备碱加成盐，通过含羧酸部分与适合的碱(如但不限于药学上可接受的金属阳离子的氢氧化物、碳酸盐或碳酸氢盐)反应，或与氨水或有机伯、仲或叔胺反应。药学上可接受的盐包括但不限于，基于碱金属或碱土金属的阳离子，如但不限于锂、钠、钾、钙、镁及铝盐等，以及无毒季铵和胺阳离子，包括铵、四甲铵、四乙铵、甲胺、二甲胺、三甲胺、三乙胺、二乙胺、乙胺等。其他可用在形成碱加成盐的有机胺的实例包含乙二胺、乙醇胺、二乙醇胺、哌啶、哌嗪等。本文中所述的化合物p、c1、和c2可以按非溶剂化以及溶剂化形式存在，包括水合形式，如半水合物。通常，出于本发明的目的，与药学上可接受的溶剂(尤其是如水和乙醇)形成的溶剂化形式相当于非溶剂化形式。这些组合的用途在一方面，本发明提供了在受试者中治疗囊性纤维化的方法，该方法包括以下步骤：a)对来自受试者的囊性纤维化跨膜传导调节物(cftr)蛋白的序列中提前终止密码子(ptc)或无义突变的存在进行分析，b)对具有位于seqidno：1的氨基酸残基1164-1480之间的突变的受试者进行鉴定，并且c)给予组合，该组合包含：i.囊性纤维化跨膜传导调节物(cftr)蛋白的功能调节剂(p增效剂)，ii.细胞加工和/或定位的调节剂(c校正剂)，其中所述c校正剂不是通读校正剂，其中所述组合不包含通读剂，并且其中所述组合产生如在w1282x费舍尔大鼠甲状腺(frt)细胞中使用跨上皮钳位电路测定所测量的另外的至少1ms/cm2的跨上皮电导(δgt)。在另一方面，本发明提供了在受试者中治疗囊性纤维化的方法，该方法包括以下步骤：a)对来自受试者的囊性纤维化跨膜传导调节物(cftr)蛋白的序列中提前终止密码子(ptc)或无义突变的存在进行分析，b)对具有位于seqidno：1的氨基酸残基1164-1480之间的突变的受试者进行鉴定，并且c)给予组合，该组合包含：i.囊性纤维化跨膜传导调节物(cftr)蛋白的功能调节剂(p增效剂)，ii细胞加工和/或定位的调节剂(c校正剂)，其中所述c校正剂不是通读校正剂，和iii.细胞加工和/或定位的第二调节剂(第二c校正剂)，其中所述第二c校正剂不是通读校正剂，其中所述组合不包含通读剂，并且其中所述组合产生如在w1282x费舍尔大鼠甲状腺(frt)细胞中使用跨上皮钳位电路测定所测量的另外的至少3.5ms/cm2的跨上皮电导(δgt)。本发明进一步提供了药物组合，该药物组合包含i.囊性纤维化跨膜传导调节物(cftr)蛋白的功能调节剂(p增效剂)，ii细胞加工和/或定位的调节剂(c校正剂)，其中所述c校正剂不是通读校正剂，用于在具有位于seqidno：1的氨基酸残基1164-1480之间的突变的受试者中治疗囊性纤维化中使用，其中所述组合不包含通读剂，并且其中所述组合产生如在w1282x费舍尔大鼠甲状腺(frt)细胞中使用跨上皮钳位电路测定所测量的另外的至少1ms/cm2的跨上皮电导(δgt)。本发明还提供了药物组合，该药物组合包含i.囊性纤维化跨膜传导调节物(cftr)蛋白的功能调节剂(p增效剂)，ii细胞加工和/或定位的调节剂(c校正剂)，其中所述c校正剂不是通读校正剂，和iii.细胞加工和/或定位的第二调节剂(第二c校正剂)，其中所述第二c校正剂不是通读校正剂，该组合用于在具有位于seqidno：1的氨基酸残基1164-1480之间的突变的受试者中治疗囊性纤维化，其中所述组合不包含通读剂，并且其中所述组合产生如在w1282x费舍尔大鼠甲状腺(frt)细胞中使用跨上皮钳位电路测定所测量的另外的至少3.5ms/cm2的跨上皮电导(δgt)。在又另一个实施例中，本发明提供了组合的用途，该组合包含：i.囊性纤维化跨膜传导调节物(cftr)蛋白的功能调节剂(p增效剂)，ii细胞加工和/或定位的调节剂(c校正剂)，其中所述c校正剂不是通读校正剂，或其药学上可接受的盐，用于制备用于在受试者中治疗囊性纤维化的药物，所述受试者具有位于seqidno：1的氨基酸残基1164-1480之间的突变，其中所述组合不包含通读剂，并且其中所述组合产生如在w1282x费舍尔大鼠甲状腺(frt)细胞中使用跨上皮钳位电路测定所测量的另外的至少1ms/cm2的跨上皮电导(δgt)。在又另一个实施例中，本发明提供了组合的用途，该组合包含：i.囊性纤维化跨膜传导调节物(cftr)蛋白的功能调节剂(p增效剂)，ii细胞加工和/或定位的调节剂(c校正剂)，其中所述c校正剂不是通读校正剂，和iii.细胞加工和/或定位的第二调节剂(第二c校正剂)，其中所述第二c校正剂不是通读校正剂，或其药学上可接受的盐，用于制备用于在受试者中治疗囊性纤维化的药物，所述受试者具有位于seqidno：1的氨基酸残基1164-1480之间的突变，其中所述组合不包含通读剂，并且其中所述组合产生如在w1282x费舍尔大鼠甲状腺(frt)细胞中使用跨上皮钳位电路测定所测量的另外的至少3.5ms/cm2的跨上皮电导(δgt)。提供了方法、组合物和用途的以下变体。在一个具体的实施例中，囊性纤维化由cftr蛋白中的i类突变引起，其中所述cftr蛋白包含提前终止密码子(ptc)或无义突变，并且其中所述突变位于seqidno：1的氨基酸残基1164-1480之间。在一个特定的实施例中，该提前终止密码子(ptc)或无义突变是uga密码子(或乳白密码子)。在一个更具体的实施例中，所述突变是w1282x突变。在一个实施例中，c校正剂不通过cftr的跨膜结构域1(msd1)结构域起作用。在又另一个实施例中，c校正剂通过cftr的跨膜结构域1(msd1)结构域起作用。在p增效剂与c校正剂的组合的特定实施例中，所述c校正剂与cftr蛋白的msd1结构域结合。在又另一个实施例中，所述c校正剂不与cftr蛋白的msd1结构域结合。在一个特定的实施例中，c校正剂是c1校正剂或c2校正剂。在p增效剂与c校正剂和第二c校正剂的组合的特定实施例中，所述校正剂通过不同的机制起作用。更具体地，所述校正剂与cftr蛋白结合。在更特定的实施例中，所述校正剂与cftr蛋白的不同结构域结合。在一个更具体的实施例中，其中一种校正剂与cftr蛋白的msd1结构域结合，而第二校正剂不与cftr蛋白的msd1结构域结合。在p增效剂与c校正剂和第二c校正剂的组合的特定实施例中，所述c校正剂是c1校正剂，并且所述第二c校正剂是c2校正剂，其中所述校正剂与cftr蛋白的不同部分结合。在一个更特定的实施例中，c1和c2校正剂与cftr蛋白的不同结构域结合。在一个特定的实施例中，c1校正剂是与cftr蛋白的msd1结构域结合的校正剂。在一些实施例中，c2校正剂是不与cftr蛋白的msd1结构域结合的校正剂。在一个特定的实施例中，在p增效剂与c1或c2的校正剂的所述组合中，所述组合产生如在w1282x费舍尔大鼠甲状腺(frt)细胞中使用跨上皮钳位电路测定所测量的另外的如下跨上皮电导(δgt)：至少2ms/cm2、至少1.5ms/cm2、至少1ms/cm2、至少0.5ms/cm2、至少0.25ms/cm2。更特别地，在p增效剂与c1或c2校正剂的所述组合中，所述组合产生如在w1282x费舍尔大鼠甲状腺(frt)细胞中使用跨上皮钳位电路测定所测量的另外的至少1ms/cm2的跨上皮电导(δgt)。在另一个实施例中，在p增效剂与c1校正剂和c2校正剂的所述组合中，所述组合产生如在w1282x费舍尔大鼠甲状腺(frt)细胞中使用跨上皮钳位电路测定所测量的另外的如下跨上皮电导(δgt)：至少3.5ms/cm2、至少3ms/cm2、至少2ms/cm2、至少1.5ms/cm2、至少1ms/cm2。本发明还提供了在受试者中治疗囊性纤维化的方法，该方法包括以下步骤：a)对来自受试者的囊性纤维化跨膜传导调节物(cftr)蛋白的序列中提前终止密码子(ptc)或无义突变的存在进行分析，b)对具有位于seqidno：1的氨基酸残基1164-1480之间的突变的受试者进行鉴定，并且c)给予组合，该组合包含：i.囊性纤维化跨膜传导调节物(cftr)蛋白的功能调节剂(p增效剂)，ii.细胞加工和/或定位的调节剂(c校正剂)，其中所述c校正剂不是通读校正剂，并且其中所述c校正剂不通过cftr的跨膜结构域1(msd1)结构域起作用，其中所述组合不包含通读剂。在另一个实施例中，本发明提供了在受试者中治疗囊性纤维化的方法，该方法包括以下步骤：a)对来自受试者的囊性纤维化跨膜传导调节物(cftr)蛋白的序列中提前终止密码子(ptc)或无义突变的存在进行分析，b)对具有位于seqidno：1的氨基酸残基1164-1480之间的突变的受试者进行鉴定，并且c)给予组合，该组合包含：i.囊性纤维化跨膜传导调节物(cftr)蛋白的功能调节剂(p增效剂)，ii细胞加工和/或定位的调节剂(c校正剂)，其中所述c校正剂不是通读校正剂，并且其中所述c校正剂通过cftr的跨膜结构域1(msd1)结构域起作用，其中所述组合不包含通读剂。在另一方面，本发明提供了在受试者中治疗囊性纤维化的方法，该方法包括以下步骤：a)对来自受试者的囊性纤维化跨膜传导调节物(cftr)蛋白的序列中提前终止密码子(ptc)或无义突变的存在进行分析，b)对具有位于seqidno：1的氨基酸残基1164-1480之间的突变的受试者进行鉴定，并且c)给予组合，该组合包含：i.囊性纤维化跨膜传导调节物(cftr)蛋白的功能调节剂(p增效剂)，ii细胞加工和/或定位的调节剂(c校正剂)，其中所述c校正剂不是通读校正剂，并且其中所述c校正剂不通过cftr的跨膜结构域1(msd1)结构域起作用，以及iii.细胞加工和/或定位的第二调节剂(第二c校正剂)，其中所述c校正剂不是通读校正剂，并且其中所述c校正剂通过cftr的跨膜结构域1(msd1)结构域起作用，其中所述组合不包含通读剂。本发明进一步提供了药物组合，该药物组合包含i.囊性纤维化跨膜传导调节物(cftr)蛋白的功能调节剂(p增效剂)，ii.细胞加工和/或定位的调节剂(c校正剂)，其中所述c校正剂不是通读校正剂，并且其中所述c校正剂不通过cftr的跨膜结构域1(msd1)结构域起作用，用于在具有位于seqidno：1的氨基酸残基1164-1480之间的突变的受试者中治疗囊性纤维化中使用，其中所述组合不包含通读剂。本发明进一步提供了药物组合，该药物组合包含i.囊性纤维化跨膜传导调节物(cftr)蛋白的功能调节剂(p增效剂)，ii.细胞加工和/或定位的调节剂(c校正剂)，其中所述c校正剂不是通读校正剂，并且其中所述c校正剂通过cftr的跨膜结构域1(msd1)结构域起作用，用于在具有位于seqidno：1的氨基酸残基1164-1480之间的突变的受试者中治疗囊性纤维化中使用，其中所述组合不包含通读剂。本发明还提供了药物组合，该药物组合包含i.囊性纤维化跨膜传导调节物(cftr)蛋白的功能调节剂(p增效剂)，ii细胞加工和/或定位的调节剂(c校正剂)，其中所述c校正剂不是通读校正剂，并且其中所述c校正剂不通过cftr的跨膜结构域1(msd1)结构域起作用，以及iii.细胞加工和/或定位的第二调节剂(第二c校正剂)，其中所述c校正剂不是通读校正剂，并且其中所述c校正剂通过cftr的跨膜结构域1(msd1)结构域起作用，用于在具有位于seqidno：1的氨基酸残基1164-1480之间的突变的受试者中治疗囊性纤维化中使用，其中所述组合不包含通读剂。在又另一个实施例中，本发明提供了组合的用途，该组合包含：i.囊性纤维化跨膜传导调节物(cftr)蛋白的功能调节剂(p增效剂)，ii.细胞加工和/或定位的调节剂(c校正剂)，其中所述c校正剂不是通读校正剂，并且其中所述c校正剂不通过cftr的跨膜结构域1(msd1)结构域起作用，或其药学上可接受的盐，用于制备用于在受试者中治疗囊性纤维化的药物，所述受试者具有位于seqidno：1的氨基酸残基1164-1480之间的突变，其中所述组合不包含通读剂。在又另一个实施例中，本发明提供了组合的用途，该组合包含：i.囊性纤维化跨膜传导调节物(cftr)蛋白的功能调节剂(p增效剂)，ii细胞加工和/或定位的调节剂(c校正剂)，其中所述c校正剂不是通读校正剂，并且其中所述c校正剂通过cftr的跨膜结构域1(msd1)结构域起作用，或其药学上可接受的盐，用于制备用于在受试者中治疗囊性纤维化的药物，所述受试者具有位于seqidno：1的氨基酸残基1164-1480之间的突变，其中所述组合不包含通读剂。在又另一个实施例中，本发明提供了组合的用途，该组合包含：i.囊性纤维化跨膜传导调节物(cftr)蛋白的功能调节剂(p增效剂)，ii细胞加工和/或定位的调节剂(c校正剂)，其中所述c校正剂不是通读校正剂，并且其中所述c校正剂不通过cftr的跨膜结构域1(msd1)结构域起作用，以及iii.细胞加工和/或定位的第二调节剂(第二c校正剂)，其中所述c校正剂不是通读校正剂，并且其中所述c校正剂通过cftr的跨膜结构域1(msd1)结构域起作用，或其药学上可接受的盐，用于制备用于在受试者中治疗囊性纤维化的药物，所述受试者具有位于seqidno：1的氨基酸残基1164-1480之间的突变，其中所述组合不包含通读剂。提供了以上方法、组合物和用途的以下变体。在一个具体的实施例中，囊性纤维化由cftr蛋白中的i类突变引起，其中所述cftr蛋白包含提前终止密码子(ptc)或无义突变，并且其中所述突变位于seqidno：1的氨基酸残基1164-1480之间。在一个特定的实施例中，该提前终止密码子(ptc)或无义突变是uga密码子(或乳白密码子)。在一个更具体的实施例中，所述突变是w1282x突变。在p增效剂与通过cftr的msd1结构域起作用的c校正剂的组合的特定实施例中，所述c校正剂与cftr蛋白的msd1结构域结合。在又另一个实施例中，不通过cftr的msd1结构域起作用的所述c校正剂不与cftr蛋白的msd1结构域结合。在一个特定的实施例中，通过cftr的msd1结构域起作用的c校正剂是如本文所描述的c1校正剂。在另一个实施例中，不通过cftr的msd1结构域起作用的c校正剂是如本文所描述的c2校正剂。在p增效剂与c校正剂和第二c校正剂的组合的另一个实施例中，所述校正剂通过不同的机制起作用。在具体的方面，所述校正剂与cftr蛋白结合。在更特定的实施例中，所述校正剂与cftr蛋白的不同结构域结合。在p增效剂与两种校正剂的组合的更具体的实施例中，其中一种不通过cftr的msd1结构域起作用的校正剂不与cftr的msd1结构域蛋白结合，而通过cftr的msd1结构域起作用的第二c校正剂与cftr的msd1结构域蛋白结合。在p增效剂与c校正剂和第二c校正剂的组合的特定的实施例中，所述c校正剂是c2校正剂，并且所述第二c校正剂是c1校正剂，其中所述c2校正剂不通过cftr的msd1结构域起作用，并且所述c1校正剂通过cftr的msd1结构域起作用。在p增效剂与c校正剂和第二c校正剂的组合的特定实施例中，所述c校正剂是c2校正剂，并且所述第二c校正剂是c1校正剂，其中所述校正剂与cftr蛋白的不同部分结合。在一个更特定的实施例中，c1和c2校正剂与cftr蛋白的不同结构域结合。在一个特定的实施例中，c1校正剂是与cftr蛋白的msd1结构域结合的校正剂。在一些实施例中，c2校正剂是不与cftr蛋白的msd1结构域结合的校正剂。在一个特定的实施例中，p增效剂与c1或c2校正剂的所述组合中，所述组合产生如在w1282x费舍尔大鼠甲状腺(frt)细胞中使用跨上皮钳位电路测定(tecc)所测量的另外的如下跨上皮电导(δgt)：至少2ms/cm2、至少1.5ms/cm2、至少1ms/cm2、至少0.5ms/cm2、至少0.25ms/cm2。更特别地，在p增效剂与c1或c2校正剂的所述组合中，所述组合产生如在w1282x费舍尔大鼠甲状腺(frt)细胞中使用跨上皮钳位电路测定所测量的另外的至少1ms/cm2的跨上皮电导(δgt)。在另一个实施例中，在p增效剂与c1校正剂和c2校正剂的所述组合中，所述组合产生如在w1282x费舍尔大鼠甲状腺(frt)细胞中使用跨上皮钳位电路测定所测量的另外的如下跨上皮电导(δgt)：至少3.5ms/cm2、至少3ms/cm2、至少2ms/cm2、至少1.5ms/cm2、至少1ms/cm2。在一个实施例中，p增效剂是根据式(i)或式(ii)的化合物或其药学上可接受的盐。在一个实施例中，c校正剂是根据式(iii)的化合物或其药学上可接受的盐，或可替代地是根据式(iv)或式(v)的化合物或其药学上可接受的盐。在一个实施例中，c1校正剂是根据式(iii)的化合物或其药学上可接受的盐，并且c2校正剂是根据式(iv)或式(v)的化合物或其药学上可接受的盐。在一个特定的实施例中，该p增效剂选自在一个特定的实施例中，该c1校正剂是：在一个特定的实施例中，该c2校正剂选自根据式(iv)或(v)的化合物，或其药学上可接受的盐，并且该c1校正剂是药物组合物和配制品将p、c1、和c2化合物典型地以药物组合物形式给予。这样的组合物可以按制药领域熟知的方式制备，并且包含治疗有效量的化合物p、c1、和c2或其药学上可接受的盐以及药学上可接受的载体。短语“药物组合物”是指适于给予用于医学或兽医学用途的组合物。可经口、经直肠、非经肠、经脑池内、经阴道内、经腹膜腔内、局部(如通过粉剂、软膏或滴剂形式)、经颊或以口服或鼻喷雾剂形式将包含p、c1、和c2(单独地或与另一治疗活性成分组合)的药物组合物给予受试者。如本文中使用的术语“胃肠外”是指包括静脉内、肌内、腹膜内、胸骨内、皮下及关节内注射和输注的给予方式。如本文中使用的术语“药学上可接受的载体”意指任何类型的无毒、惰性固体、半固体或液体填充剂、稀释剂、封装材料或配制助剂。可以用作药学上可接受的载体的材料的一些实例是糖，例如但不限于乳糖、葡萄糖和蔗糖；淀粉，例如但不限于玉米淀粉和马铃著淀粉；纤维素及其衍生物，例如但不限于羧甲基纤维素钠、乙基纤维素和乙酸纤维素；粉状黄芪胶；麦芽；明胶；滑石；赋形剂，例如但不限于可可脂和栓剂蜡；油，例如但不限于花生油、棉籽油、红花油、芝麻油、橄榄油、玉米油和大豆油；乙二醇；例如丙二醇；酯，例如但不限于油酸乙酯和月桂酸乙酯；琼脂；缓冲剂，例如但不限于氢氧化镁和氢氧化铝；海藻酸；无热原水；等渗盐水；林格氏溶液；乙醇和磷酸盐缓冲溶液，以及其他无毒的相容的润滑剂例如但不限于月桂基硫酸钠和硬脂酸镁，以及着色剂，脱模剂，包衣剂，甜味剂，调味剂和芳香剂，防腐剂和抗氧化剂也可以根据配方师的判断存在于组合物中。用于胃肠外注射的药物组合物包括药学上可接受的无菌水性或非水性溶液、分散体、悬浮液或乳液以及无菌粉末，以便恰在使用前重构成无菌可注射溶液或分散体。适合的水性和非水性稀释剂、溶剂或运载体的实例包括水、乙醇、多元醇(如甘油、丙二醇、聚乙二醇等)、植物油(如橄榄油)、注射用有机酯(如油酸乙酷)及其适合的混合物。可以例如通过使用包衣材料(如卵磷脂)，在分散体的情况下通过维持所需的颗粒大小以及通过使用表面活性剂来维持恰当的流动性。这些组合物还可以含有辅助剂，如防腐剂、湿润剂、乳化剂以及分散剂。可以通过加入各种抗细菌剂和抗真菌剂(例如对羟基苯甲酸酯、氯丁醇、苯酚、山梨酸等)来防止微生物的作用。还可以令人希望的是包括等渗剂，如糖、氯化钠等。可以通过加入延迟吸收的试剂(如单硬脂酸铝和明胶)来引起可注射药物形式的延长吸收。在一些情况下，为了延长药物的作用，令人希望的是减缓药物从皮下或肌内注射的吸收。这可以通过使用水溶性差的晶体或无定形材料的液体悬浮液来实现。于是药物的吸收速率取决于其溶解速率，反过来，溶解速率又可以取决于晶体尺寸和结晶形式。可替代地，胃肠外给予的药物形式的延迟吸收可以通过将药物溶解或悬浮于油运载体中而实现。可以通过在生物可降解聚合物(如聚丙交酯-聚乙交酯)中形成药物的微囊基质来制备可注射长效(depot)形式。取决于药物与聚合物的比率以及所使用的特定聚合物的性质，可以控制药物的释放速率。其他生物可降解聚合物的实例包括聚(原酸酯)和聚(酸酐)。长效可注射配制品还通过将药物包陷入和人体组织相容的脂质体或微乳液中来制备。可注射配制品可以例如通过细菌性截留过滤器过滤或通过将灭菌剂以无菌固体组合物(其可以恰在使用前溶解或分散于无菌水或其他无菌可注射介质中)形式掺入而进行杀菌。用于口服给予的固体剂型包括胶囊、片剂、丸剂、粉末以及颗粒剂。在某些实施例中，固体剂型可以含有从1％至95％(w/w)的化合物p、c1、和c2。在某些实施例中，化合物p、c1和c2，或其药学上可接受的盐可以按从5％至70％(w/w)的范围存在于固体剂型中。在这种固体剂型中，可以将活性化合物与至少一种惰性药学上可接受的载体(例如柠檬酸钠或磷酸二钙)混合，和/或a)填充剂或增量剂如淀粉、乳糖、蔗糖、葡萄糖、甘露醇、和硅酸；b)粘合剂例如羧甲基纤维素、藻酸盐、明胶、聚乙烯吡咯烷酮、蔗糖和阿拉伯胶；c)保湿剂例如甘油；d)崩解剂例如琼脂、碳酸钙、马铃薯或木著淀粉、藻酸、某些硅酸盐和碳酸钠；e)溶液阻滞剂例如石蜡；f)吸收促进剂例如季铵化合物；g)湿润剂例如鲸蜡醇和单硬脂酸甘油酯；h)吸附剂例如高岭土以及膨润土；和i)润滑剂例如滑石、硬脂酸钙、硬脂酸镁、固体聚乙二醇、月桂基硫酸钠及其混合物。在胶囊、片剂和丸剂的情况下，该剂型还可以包括缓冲剂。药物组合物可以是单位剂型。在这种剂型中，制剂被细分成含有适当量的活性组分的单位剂量。单位剂型可以是一种包装的制剂，该包装含有不连续量的制剂，如小瓶或安瓿中的包装片剂、胶囊和粉剂。此外，单位剂型本身可以是胶囊、片剂、扁囊剂或锭剂，或它可以是呈包装形式的适当数目的任何这些剂型。根据具体应用以及活性组分的效能，单位剂量制剂中的活性组分的量可以变化或被调整为从0.1mg至1000mg、从1mg至100mg或从1％至95％(w/w)的单位剂量。希望的话，组合物还可以含有其他相容治疗剂。给予有待给予给受试者的剂量可以由所用的一种或多种特定的p、c1、和c2化合物的功效和受试者的条件以及有待治疗的受试者的体重或表面积确定。也由具体受试者体内伴随具体化合物的给药的任何不良副作用的存在、性质和程度来确定剂量大小。在确定有待给予用于治疗或预防所治疗的障碍的化合物的有效量时，医师可以评估如化合物的循环血浆水平、化合物毒性和/或疾病进展等的因素。对于给予，化合物p、c1、和c2可以按由以下因素所确定的速率进行给予，按照受试者的体重和整体健康所适用的情况，这些因素可以包括但不限于，化合物的ld50、化合物的药代动力学特性、禁忌药物以及化合物在不同的浓度下的副作用。给予可以经由单次或多次剂量实现。在本发明的药物方法中所使用的这些化合物p、c1、和c2能够以每日约0.001mg/kg至约100mg/kg的初始剂量进行给予。在某些实施例中，每日剂量范围是从约0.1mg/kg至约10mg/kg。然而，这些剂量可以取决于受试者的要求、所治疗的病症的严重程度以及所使用的化合物而变化。针对具体情况来确定适当的剂量是在执业者的技能之内的。治疗可以按小于化合物的最佳剂量的更小剂量来开始。此后，逐步以小增量增加剂量直至达到该状况下的最佳效果为止。为方便起见，任选地将每日总剂量分为若干部分且每日分多次给予。类似类型的固体组合物也可以用作软填充明胶胶囊和硬填充明胶胶囊中的填充剂，这些明胶胶囊使用如乳糖(lactose或milksugar)的载体以及高分子量聚乙二醇等。片剂、糖锭剂、胶囊、丸剂以及粒剂的固体剂型可以用包衣和包壳，如肠溶包衣以及其他的在药物配制领域中熟知的包衣来制备。它们可以可任选地含有遮光剂并且还可以是这样一种组合物，该组合物在肠道的某一部分可任选地以延迟方式仅或者优先释放一种或多种活性成分。可以使用的包封组合物的实例包括聚合物质和蜡。活性化合物还可以呈微囊化形式，如果适当，具有一种或多种上述载体。用于口服给予的液体剂型包括药学上可接受的乳液、溶液、悬浮液、糖浆及酏剂。除活性化合物之外，液体剂型还可以含有本领域通常使用的惰性稀释剂，例如像水或其他溶剂、增溶剂以及乳化剂，如乙醇、异丙醇、碳酸乙酯、乙酸乙酯、苯甲醇、苯甲酸苄酯、丙二醇、1，3-丁二醇、二甲基甲酰胺、油类(具体地，棉籽、花生、玉米、胚芽、橄榄、蓖麻及芝麻油)、甘油、四氢糠醇、聚乙二醇以及山梨聚糖的脂肪酸酯及其混合物。除惰性稀释剂之外，口服组合物还可以包括辅助剂，如湿润剂、乳化剂和悬浮剂、甜味剂、调味剂以及芳香剂。除活性化合物之外，悬浮液还可以含有悬浮剂，例如像乙氧基化异硬脂醇、聚氧乙烯山梨醇和脱水山梨糖醇酯、微晶纤维素、偏氢氧化铝、膨润土、琼脂、黄芪胶及其混合物。用于直肠或阴道给予的组合物优选是栓剂，其可以通过将化合物与适合的非刺激性载体或如可可油、聚乙二醇或栓剂蜡的载体混合来制备，这些载体在室温下为固体，但在体温下为液体，并且因此在直肠或阴道腔中融化且释放活性化合物。化合物也可以按脂质体形式给予。脂质体通常可衍生自磷脂或其他脂质物质。脂质体可通过分散在水性介质中的单-或多层水合液晶形成。可使用任何可形成脂质体的生理上可接受且可代谢的无毒脂质。除本发明的化合物外，呈脂质体形式的本发明组合物可含有稳定剂、防腐剂、赋形剂等。脂质的实例包括但不限于单独或共同使用的天然和合成的磷脂和磷脂酰胆碱(卵磷脂)。用于形成脂质体的方法已经得以描述，参见例如，prescott编辑，methodsincellbiology[细胞生物学方法]，第xiv卷，纽约学术出版社，纽约(1976)，第33页及以下。用于局部给予本文所描述的化合物的剂型包括粉剂、喷雾、软膏以及吸入剂。可以将活性化合物在无菌条件下与药学上可接受的载体和可能需要的任何所需防腐剂、缓冲剂或推进剂混合。眼用制剂、眼膏、粉剂和溶液也被考虑在本发明的范围内。p、c1和c2的化合物还可以按缓释形式或从缓释药物递送系统给予。共给予如本文使用的，术语“治疗组合”或“组合”是指将p与一种或两种校正剂的组合(i)以分开的制剂或单一制剂给予对其有需要的患者；或(ii)作为治疗方案的一部分在不同时间点给予对其有需要的患者。在一个特定的实施例中，在给予c1和/或c2校正剂后随后给予p增效剂。在又另一个实施例中，同时给予c1和/或c2和p。化合物p、c1、和c2可以按其组合给予，或可以与其他治疗剂共给予，所述其他治疗剂包括显示出相同或相似治疗活性并被确定为对于这种组合给予是安全且有效的其他化合物。术语“共给予”意指将两种或更多种不同的治疗剂在单一药物组合物中或分开的药物组合物中给予受试者。因此，共给予涉及同时给予包括两种或更多种治疗试剂的单一药物组合物或在相同或不同时间向同一受试者给予两种或更多种不同组合物。可以将化合物p、c1、和c2与治疗有效量的一种或多种治疗剂共给予以治疗cftr介导的疾病，其中这些治疗剂的实例包括但不限于抗生素(例如，氨基糖苷类、粘菌素、氨曲南、环丙沙星、和阿奇毒素)、祛痰剂(例如，高渗盐水、乙酰半胱氨酸、阿尔法链道酶、和地纽福索(denufosol))、胰酶补充剂(例如，胰液素和胰脂肪酶)、cftr增效剂、以及cftr校正剂。在一个实施例中，cftr介导的疾病是囊性纤维化。在一个实施例中，化合物p、c1、和c2或其药学上可接受的盐可以与另外的增效剂以及一种或多种另外的校正剂共给予。适合用于治疗的受试者适合用本发明的方法和组合治疗的受试者包括患有由突变型-cftr的存在引起的或与突变型-cftr的存在相关的突变型-cftr蛋白介导的病症、障碍或疾病，或具有这样的病症、障碍或疾病的症状的个体。特别地，所述受试者具有突变型cftr的两个等位基因。更具体地，适合用于治疗的受试者具有在野生型cftr的氨基酸残基1164-1480之间的cftr蛋白中的突变。更特别地，所述突变是提前终止密码子(ptc)或无义突变。适合用本发明的方法或组合治疗的受试者包括任何携带所述突变的生物体。特别地，适合用于治疗的所述受试者是患有cf的人类，该cf具有在野生型cftr的氨基酸残基1164-1480之间的cftr蛋白中的突变。更特别地，所述突变是ptc或无义突变。突变型-cftr蛋白介导的病症的症状是本领域技术人员熟知的，并且包括胎粪性肠梗阻、肝病(包括胆道阻塞和狭窄)、胰功能不全、肺病(包括慢性细菌感染和肺部其他感染)。通过增加由具有位于野生型cftr的氨基酸残基1164-1480之间的突变的突变型-cftr介导的离子转运水平的降低，本发明的组合影响突变型-cftr的加工和氯离子转运能力。本发明的组合在治疗具有cftr基因中的i类缺陷的患者中是可用的，该缺陷形成突变型-cftr、或低水平的cftr、或具有由于折叠或细胞加工缺陷而降低的氯化物传导能力的cftr。特别地，本发明的组合在治疗野生型cftr的氨基酸残基1164-1480之间的cftr蛋白中的突变中是可用的。更具体地，所述突变是ptc或无义突变。更特别地，本发明的方法和组合在治疗具有cftr蛋白中的w1284x突变的受试者中是可用的。适合用本发明的方法治疗的受试者对于特定的突变型-cftr可以是纯合的。更具体地，纯合的受试者具有特定突变型-cftr的两个拷贝，该突变型-cftr具有野生型cftr的氨基酸残基1164-1480之间的突变。另外，适合用本发明的方法和组合治疗的受试者对于两种不同的cftr突变体还可以是杂合的，即其中这些受试者的基因组包括cftr的两种不同的突变体形式，其中至少所述形式的其中一种是具有在野生型cftr的氨基酸残基1164-1480之间的突变的突变型-cftr。更具体地，所述突变是ptc或无义突变。检测cftr突变的方法对于是否存在提前终止密码子(ptc)或无义突变对来自受试者的cftr蛋白序列进行的分析方法包括任何合适的方法，其中许多方法是本领域技术人员已知的。合适的方法包括测定dna序列的方法，或通过检测多态性基因的对应于这种dna序列的rna转录物。在该方法中适合使用的不同的其他检测技术对于熟悉检测、鉴定和/或区别cftr突变的技术人员将是显而易见的。这样的检测技术包括但不限于直接测序；如在marras等人，1999中描述的“分子信标”的使用；如在us5,871,918中描述的电化学检测；如在gusev等人，2001中描述的滚环扩增；和如在lieder，advanceforlaboratorymanagers[实验室管理人员进展]，70(2000)中描述的基于非pcr的检测方法。用于检测cftr基因突变的方法还描述在如下：例如，audrezet等人，“genomicrearrangementsinthecftrgene：extensiveallelicheterogeneityanddiversemutationalmechanisms[cftr基因中的基因组重排：广泛的等位异质性和不同的突变机制]”hummutat.[人类突变]2004apr；23(4)：343-57；wo2004/040013；和us7,741,028，通过引用将其并入本文中。可用于针对受试者中cftr突变的存在所分析的合适的生物样本是包括细胞和dna并包括但不限于血液或血液成分、干血斑、尿液、口腔拭子、和唾液的那些。试剂盒在另一个实施例中，本发明提供了试剂盒，该试剂盒包含：i.包含p增效剂的药物组合物；ii.包含c校正剂的药物组合物，其中所述c校正剂不是通读校正剂；iii.用于使用所述试剂盒在受试者中治疗囊性纤维化的说明书，该受试者具有位于seqidno：1的氨基酸残基1164-1480之间的突变，其中所述试剂盒不包含通读剂，并且其中所述组合产生如在w1282x费舍尔大鼠甲状腺(frt)细胞中使用跨上皮钳位电路测定(tecc测定)所测量的另外的至少1ms/cm2的跨上皮电导(δgt)。在另一个实施例中，本发明提供了试剂盒，该试剂盒包含：i.包含p增效剂的药物组合物；ii包含c校正剂的药物组合物，其中所述c校正剂不是通读校正剂，其中所述校正剂不通过cftr的跨膜结构域1(msd1)起作用；iii.用于使用所述试剂盒在受试者中治疗囊性纤维化的说明书，该受试者具有位于seqidno：1的氨基酸残基1164-1480之间的突变，其中所述试剂盒不包含通读剂。在另一个实施例中，本发明提供了试剂盒，该试剂盒包含：i.包含p增效剂的药物组合物；ii包含c校正剂的药物组合物，其中所述c校正剂不是通读校正剂，其中所述校正剂通过cftr的跨膜结构域1(msd1)起作用；iii.用于使用所述试剂盒在受试者中治疗囊性纤维化的说明书，该受试者具有位于seqidno：1的氨基酸残基1164-1480之间的突变，其中所述试剂盒不包含通读剂。在一个特定的实施例中，所述试剂盒进一步包含含有第二c校正剂的药物组合物，其中所述校正剂不是通读校正剂。在一个特定的实施例中，所述试剂盒进一步包含另外的组分。该试剂盒的这种可选的组分可以包括缓冲剂、递送运载体、递送方式等，用于给予增效剂和一种或两种校正剂化合物，和/或用于进行诊断测定。该试剂盒的不同组分可以存在于分开的容器中，或可以将某些组分合并于单个容器中。这些试剂盒还可以包含用于治疗具有突变型-cftr蛋白的受试者的一种或多种另外的药物或试剂。在又另一个实施例中，该试剂盒可以进一步包含用于表征突变型-cftr的系统。在某些实施例中，该试剂盒可以包含单一药物组合物，该药物组合物包含以一种或多种单位剂量存在的增效剂与一种或两种校正剂的组合。在又其他实施例中，这些试剂盒可以包含两种或更多种分开的药物组合物，该药物组合物含有所述增效剂和一种或两种校正剂或其组合。在一个特定的实施例中，c校正剂是如本文所描述的c1校正剂。在又另一个实施例中，所述c校正剂是如本文所描述的c2校正剂。在另一个实施例中，所述c校正剂是c2校正剂，并且所述第二c校正剂是c1校正剂。在另一个实施例中，该试剂盒可以进一步包含以单一组合物或分开的组合物存在的用于分析突变型cftr的组分和/或试剂的集合。更特别地，将这样的集合用于针对野生型cftr的氨基酸残基1164-1480之间的突变的存在，分析来自受试者的cftr蛋白序列。更特别地，将这样的集合用于分析在所述区域中提前终止密码子(ptc)或无义突变的存在。该试剂盒可以包含用于实施方法和使用本发明的组合、以及任选地用于进行诊断测定的说明书，例如描述药物在治疗cf中的用途和附带益处的信息包装说明书。这些说明书可以按各种形式存在于试剂盒中，其中一种或多种可存在于试剂盒中或试剂盒上。增强突变型cftr活性的方法本发明进一步提供了增强细胞中突变型cftr活性的方法，该突变体具有位于seqidno：1的氨基酸残基1164-1480之间的突变，该方法包括用组合接触所述细胞的步骤，该组合包含：i.囊性纤维化跨膜传导调节物(cftr)蛋白的功能调节剂(p增效剂)，ii细胞加工和/或定位分子的调节剂(c校正剂)，其中所述c校正剂不是通读校正剂，其中所述组合不包含通读剂，并且其中所述组合产生如在w1282x费舍尔大鼠甲状腺(frt)细胞中使用跨上皮钳位电路测定所测量的另外的至少1ms/cm2的跨上皮电导(δgt)。在可替代性实施例中，本发明提供了增强细胞中突变型cftr活性的方法，该突变体具有位于seqidno：1的氨基酸残基1164-1480之间的突变，该方法包括用组合接触所述细胞的步骤，该组合包含：i.囊性纤维化跨膜传导调节物(cftr)蛋白的功能调节剂(p增效剂)，ii细胞加工和/或定位分子的调节剂(c校正剂)，其中所述c校正剂不是通读校正剂，其中所述校正剂不通过cftr的跨膜结构域1(msd1)起作用，其中所述组合不包含通读剂。在可替代性实施例中，本发明提供了增强细胞中突变型cftr活性的方法，该突变体具有位于seqidno：1的氨基酸残基1164-1480之间的突变，该方法包括用组合接触所述细胞的步骤，该组合包含：i.囊性纤维化跨膜传导调节物(cftr)蛋白的功能调节剂(p增效剂)，ii细胞加工和/或定位分子的调节剂(c校正剂)，其中所述c校正剂不是通读校正剂，其中所述校正剂通过cftr的跨膜结构域1(msd1)起作用，其中所述组合不包含通读剂。在一个特定的实施例中，离体进行所述方法。在又另一个实施例中，在体内进行所述方法。在一个特定的实施例中，所述组合进一步包括细胞加工和/或定位的第二调节剂(第二c校正剂)，其中所述第二c校正剂不是通读校正剂。在另一个特定的实施例中，所述cftr蛋白包含提前终止密码子(ptc)或无义突变，并且其中所述突变位于seqidno：1的氨基酸残基1164-1480之间。在一个具体的实施例中，该提前终止密码子(ptc)或无义突变是uga密码子(或乳白密码子)。在更具体的实施例中，cftr中的所述突变是w1282x突变。在一个特定的实施例中，c校正剂是如本文所描述的c1校正剂。在又另一个实施例中，所述c校正剂是如本文所描述的c2校正剂。在另一个实施例中，所述c校正剂是如本文所描述的c2校正剂，并且所述第二c校正剂是如本文所描述的c1校正剂。在以下实例中进一步说明本发明。这些实例不应被认为是限制性的，并且被提供来帮助技术人员实施本发明。实例实例1.增效剂和校正剂组合对i类突变(“急性”方案)的影响质粒构建使用flp-intm系统(英杰公司(invitrogen))将cftrw1282x基因插入费舍尔大鼠甲状腺细胞中。简言之，将质粒pfrt/laczeo稳定地转染到frt细胞系中以产生抗博莱霉素的flp-in宿主细胞。将含有cftrw1282x的pcdna5/frt质粒与pog44共转染到宿主flp-in细胞系中。由pog44表达的flp-in重组酶催化宿主细胞和pcdna5/frt表达载体的frt位点之间的同源重组事件。表达构建体的整合允许cftrw1282x的表达，并赋予细胞潮霉素抗性和博莱霉素敏感性。哺乳动物细胞培养和转染将费舍尔大鼠甲状腺(frt)细胞在补充有5％fbs和2.68g/l碳酸氢钠(西格玛公司(sigma))的ham＇sf-12培养基(西格玛公司)中培养。frt单细胞层的跨上皮电导(gt)测量将细胞在costar24孔0.4μm可渗透支持物上生长至汇合，并用校正剂(c1(0.5um)和/或c2(3um))处理48小时。在药物处理之前，使用上皮电压计(evom2，emdmillipore)测量细胞的跨上皮电阻，该电阻在8kωcm2-10kωcm2的范围内。使用传导仪(preciseplace2300robot，精密自动化有限公司(precisionautomationinc.))测量frt细胞的跨上皮电导(“急性”方案)。简言之在24小时内用c1和/或c2和/或g418处理细胞。第二天，在37℃下将细胞置于不含碳酸氢盐的ham’sf-12coon培养基中(西格玛公司(sigma))预孵育30分钟。将上皮单细胞层的基线传导测量记录12分钟，随后通过添加100nm或10μm毛喉素刺激cftr活性，并且然后将10um增效剂添加至细胞的顶端和基底外侧表面。最后将cftrinh-172(10μm)添加至顶端表面以阻断cftr依赖性传导。结果如图2所示。实例2.原代支气管上皮细胞中的tecc测定tecc(tranepithelialclampcircuit，跨上皮箝位电路，ep设计)测定通过测量在肺上皮细胞的基底外侧及顶端膜中生成的短路电流(isc)来测量囊性纤维化跨膜传导调节物(cftr)的功能性。在tecc中，在开路中测量跨上皮电势pd及跨上皮电阻(rt)且使用欧姆定律(ohm′slaw)转变成isc。可同时测量24个孔，从而使得与尤斯(ussing)室相比具有较高通量。出于此目的，将来自对于cftrδf508突变纯合的cf患者的支气管上皮细胞(haec-cf，epithelix，瑞士日内瓦(geneva，switzerland)；麦吉尔大学(mcgilluniversity)，魁北克蒙特利尔(montreal，qc)；asterand，密歇根底特律(detroit，mi)；北卡罗来纳大学(universityofnorthcarolina)，北卡罗来那教堂山(chapelhill，nc))平铺在经iv型胶原涂覆的transwell支持物(costar)上。通过提供21天的气-液界面产生人气道上皮以形成高度分化的极化培养物，该培养物类似于体内假分层的纤毛上皮(fulcher等人，2005)。将这些分化的细胞用测试校正剂化合物(“急性”)或测试校正剂化合物和增效剂glpg1837(“慢性”)以基底外侧的方式处理24小时，从而允许在膜上适当折叠的cftr蛋白的充分表达。为进行“急性”实验的电生理学记录，将人类气道上皮安装在tecc加热板中且保持在37℃。将上皮浸渍在基底外侧及顶端侧的nacl-林格氏溶液(120mmnacl，25mmnahco3，1.2mmcacl2，1.2mmmgcl2，0.8mmkh2po4，0.8mmk2hpo4，ph7.4，5mm葡萄糖)中。在测量之前，将测试化合物重新添加至记录溶液中。使用顶端阿米洛利抑制内源性enac电流，同时将福司柯林施加至顶端及基底外侧以刺激cftr。通过在两侧添加毛喉素，随后添加增效剂glpg1837来测量cftr活性。在20分钟时间范围内进行测量且每2分钟记录一次。使用isc的增加作为增加的cftr活性的量度，可以通过测量不同浓度的化合物对原代细胞上的isc的影响来生成ec50值，出于此目的，使用不同浓度的化合物将每个transwell处理24小时。使用inh-172(cftr的特异性抑制剂)来测试所测试化合物的特异性。为进行“慢性”实验电生理学记录，将人类气道上皮安装在tecc加热板中用在电生理学测量且保持在37℃。将上皮浸渍在基底外侧及顶端侧的nacl-林格氏溶液(120mmnacl，25mmnahco3，1.2mmcacl2，1.2mmmgcl2，0.8mmkh2po4，0.8mmk2hpo4，ph7.4，5mm葡萄糖)中。在测量之前，将测试化合物(校正剂和增效剂glpg1837)重新添加至记录溶液中。使用顶端阿米洛利抑制内源性enac电流，同时将福司柯林施加至顶端及基底外侧以刺激cftr。在20分钟时间范围内进行测量且每2分钟记录一次。使用isc增加作为增加的cftr活性的量度，可通过测量不同浓度的化合物对原代细胞上的isc的影响来生成ec50值，出于此目的，使用不同浓度的化合物处理每个transwell。使用inh-172(cftr的特异性抑制剂)来测试所测试化合物的特异性。关于化合物的蛋白质结合信息可以通过在40％人血清存在下化合物的孵育得到。为此目的，将分化的细胞在含有40％人血清(西格玛公司；h4522)的培养基中用测试化合物以基底外侧的方式处理24小时。为进行电生理学记录，将人类气道上皮安装在tecc加热板中并保持在37℃。将上皮浸渍在基底外侧及顶端侧的nacl-林格氏溶液(120mmnacl，25mmnahco3，1.2mmcacl2，1.2mmmgcl2，0.8mmkh2po4，0.8mmk2hpo4，ph7.4，5mm葡萄糖)中。在测量之前，将测试化合物(校正剂和增效剂glpg1837)重新添加至记录溶液中。使用顶端阿米洛利抑制内源性enac电流，同时将福司柯林施加至顶端及基底外侧以刺激cftr。在20分钟时间范围内进行测量且每2分钟记录一次。使用isc增加作为增加的cftr活性的量度，可通过测量不同浓度的化合物对原代细胞上的isc的影响来生成ec50值，出于此目的，使用不同浓度的化合物处理每个transwell。使用inh-172(cftr的特异性抑制剂)来测试所测试化合物的特异性。实例3.使用表达cfbe细胞的hrp-标记的δf508-cftr测量cftr细胞表面水平hrp标记的δf508-cftr细胞测定测量cftr-δf508在质膜上的表达。cftr-δf508具有折叠缺陷，导致该质膜上不存在蛋白质。该测定用于评估化合物增加cftr-δf508在质膜上表达的能力。在cftr的ecl4(细胞外环4)内，用hrp(辣根过氧化物酶)标记cftr-δf508。当hrp标记的δf508-cftr存在于质膜上时，可以测量hrp酶活性。可被拯救到质膜上的cftr-δf508的量与可被测量的功能性酶的量相关。有几种方法可以测量化合物将cftr-δf508拯救到质膜上的能力；单独评估化合物本身并且测量对质膜水平的影响，或者与共校正剂(co-corrector，即将cftr-δf508拯救到质膜上的化合物)组合评估化合物，但是通过添加化合物，由于互补作用模式，拯救可被增强。与另外的校正剂组合的校正剂化合物的活性出于此目的，在嘌呤霉素(3μg/ml)和g418(0.2mg/ml)选择下，将表达cfbe41o-细胞(获得自gergelylukacs，麦吉尔大学)的多西环素诱导型δf508-cftr-hrp保持在补充有10％胎牛血清(hyclone；sv30160.03)的mem(gibco；31095)中。为了进行化合物测试，将细胞在含有0.5μg/ml多西环素的50μl培养基中以4000个细胞/孔接种于白色384孔板(greiner；781080)中，并在37℃，5％co2下孵育68小时。在第四天，将稀释于pbs中的10μl测试化合物以0.1％的最终dmso浓度添加至板中。为了测量化合物与共校正剂的协同作用，将3μm的共校正剂与测试化合物一起添加。所有化合物板均含有阴性对照(dmso)和阳性对照(3μm共校正剂)。将细胞板在33℃，5％co2孵育20小时。在第五天，将细胞用磷酸盐缓冲盐水洗涤五次，通过添加50μl/孔的hrp底物(supersignalwestpico化学发光底物，赛默科技公司(thermoscientific)；34080)测定hrp活性。在黑暗中孵育15分钟后，使用读板仪(envision，珀金埃尔默公司(perkinelmer))测量化学发光。使用以下方程将原始数据标准化为百分比活性值：100x(样品-阴性对照)/(阳性对照-阴性对照)。c1和c2的组合的结果如图3所示，其中c1的浓度保持恒定。校正剂的为其固有校正剂能力的活性出于此目的，在嘌呤霉素(3μg/ml)和g418(0.2mg/ml)选择下，将表达cfbe41o-细胞(获得自gergelylukacs，麦吉尔大学)的多西环素诱导型δf508-cftr-hrp保持在补充有10％胎牛血清(hyclone；sv30160.03)的mem(gibco；31095)中。为了进行化合物测试，将细胞在含有0.5μg/ml多西环素的50μl培养基中以4000个细胞/孔接种于白色384孔板(greiner；781080)中，并在37℃，5％co2下孵育68小时。在第四天，将稀释于pbs中的10μl测试化合物以0.1％的最终dmso浓度添加至板中。所有的化合物板包含阴性对照(dmso)和阳性对照(3μm共校正剂)。将细胞板在33℃，5％co2孵育20小时。在第五天，将细胞用磷酸盐缓冲盐水洗涤五次，通过添加50μl/孔的hrp底物(supersignalwestpico化学发光底物，赛默科技公司(thermoscientific)；34080)测定hrp活性。在黑暗中孵育15分钟后，使用读板仪(envision，珀金埃尔默公司(perkinelmer))测量化学发光。使用以下方程将原始数据标准化为百分比活性值：100x(样品-阴性对照)/(阳性对照-阴性对照)。c1和c2校正剂二者的作用结果分别如图3所示，其中100％响应对应于单独用c1获得的最大水平。实例4.cftr-δf508突变的yfp-卤化物流入测定yfp卤化物流入测定测量囊性纤维化跨膜传导调节物(cftr)通道在囊性纤维化支气管上皮细胞系cfbe41o-中的功能性。黄色荧光蛋白(yfp)变体yfph148q、i152l或变体yfph148q、i152l&f47l的荧光通过碘(通过cftr有效转运的卤化物)基本上被淬灭。因此该测定通过测量yfp信号淬灭的程度被用来评估校正剂化合物对cftr通道功能的影响(galietta等人，2001；nagai等人，2002)出于此目的，将cfbe41o-细胞接种于96孔板(6000个cfbe细胞/孔)中。在接种之后一天，使用引导cftrδf508突变体及yfp报导基因的表达的腺病毒载体转导cfbe细胞。将细胞用测试化合物在37℃下处理24h以允许校正的cftr向膜运输。第二天，通过用在1xd-pbs(来自gibco，目录号14090-091)中的camp诱导物毛喉素(10.67μm)和增效剂glpg1837(0.5μm)处理20分钟，然后添加i-溶液(137mmnai、2.7mmki、1.76mmkh2po4、10.1mmna2hpo4、5mm葡萄糖)来活化cftr通道。在注入i-7秒之后，立即记录i-诱导的荧光的淬灭。化合物增加通道数的能力，并且因此整体的卤化物流入与荧光降低直接相关，并将其表示为(1-(7秒后荧光(f)/注射前荧光(f0)))且可以从(1-f/f0)比对化合物浓度绘图得出ec50。实例5.使用分子传感技术测量结合可以使用tmbindtm背散射干涉法(bsi)(分子传感公司(molecularsensinggmbh))测定不同化合物与cftr-表达细胞的结合常数。将hek293野生型cftr和hek293对照膜部分以在50mmtris-hclph7.5、1mmedta、10％甘油+pic中100μg(总蛋白质量)的等分试样使用，并储存在-80℃下。用于测定的缓冲液是50mmtris-hclph7.5、1mmedta和1.2％dmso。测定缓冲液和化合物的折射率是匹配的，并且然后在聚丙烯稀释池中进行2x连续稀释。将hek293.cftrwt的解冻的等分试样连同hek293对照膜部分的解冻的等分试样在50mmtris-hcl(ph7.5)、1mmedta中用1.2％dmso稀释至10ml。通过向膜部分中添加水，测定缓冲液和两个膜部分的折射率是匹配的。将化合物和靶在96孔pcr微量滴定管中以1∶1混合至终体积为150μl，并用箔热密封。允许测定在室温下孵育4小时，然后在bsi仪上运行。分别对孔进行穿刺，然后注入样品并测量bsi信号(将每个孔按一式四份进行分析)。将芯片流体通道用杂化双层膜(hbm)(分子传感公司)涂覆。在每次测定之前，应用新鲜hbm层。创建适合用于捕获hbm试剂的基底层。使hbm试剂流过每个通道持续15分钟，随后注入测定缓冲液以去除松散附着的脂质层。将bsi系统按平行注入的双通道模式使用。这允许化合物和靶野生型cftr膜部分(测定)之间的结合亲和力的测量与化合物和对照膜部分(参比)之间的非特异性结合是同时的。对于每次测定，从测定数据中减去参比数据。将产生的差异信号与两种不同的对照比较，这些对照是单独化合物和单独靶的连续稀释(野生型cftr膜部分位于一个通道，并且对照膜部分位于另一个通道中)。将针对差异曲线的最终数据导出到graphpad并用单位点结合方程(one-sitebindingequation)进行分析以确定该测定的kd。成功被定义为具有至少0.7的相关系数的结合信号。已经针对c1和c2型的校正剂确定了kd值。示例性c2校正剂和示例性c1校正剂的结果如表1所示。可以看出c1校正剂具有与作用于cftr的已知校正剂类似的结合亲和力。c2校正剂对cftr的膜部分没有显示出显著的结合亲和力。表1.示例性c1和c2化合物的kd值。化合物kd(nm)r2c194.7±26.50.72c2483.6±121.20.79c28512±23090.81c2685.2±121.60.87实例6.增效剂和校正剂组合对i类突变(“慢性”方案)的影响此方案的可替代方案可以按如下(“慢性”方案)完成，使用传导仪(preciseplace2300robot，精密自动化有限公司(precisionautomationinc.))测量frt细胞的跨上皮电导。简言之在24小时内用c1和/或c2和/或g418和gp-5增效剂处理细胞。第二天，在37℃下将细胞置于不含碳酸氢盐的ham’sf-12coon培养基中(西格玛公司(sigma))预孵育30分钟。将上皮单细胞层的基线传导测量记录12分钟，随后通过添加100nm或10μm毛喉素至细胞的顶端和基底外侧表面来刺激cftr活性。最后将cftrinh-172(10μm)添加至顶端表面以阻断cftr依赖性传导。增效剂的“急性”和“慢性”效果比较的结果如图4所示。实例7.δf508/w1282x原代支气管上皮细胞中的tecc测定tecc(跨上皮箝位电路，ep设计)测定通过测量在肺上皮细胞的基底外侧及顶端膜中生成的短路电流(isc)来测量囊性纤维化跨膜传导调节物(cftr)的功能性。在tecc中，在开路中测量跨上皮电势pd及跨上皮电阻(rt)且使用欧姆定律(ohm＇slaw)转变成isc。可同时测量24个孔，从而使得与尤斯室相比具有较高通量。出于此目的，将分离自携带在一个等位基因上的f508del突变和在另一个等位基因上的w1282x的cf患者的支气管上皮细胞平铺在经iv型胶原涂覆的transwell载体(costar)上。通过提供21天的气-液界面产生人气道上皮以形成高度分化的极化培养物，该培养物类似于体内假分层的纤毛上皮(fulcher等人，2005)。将分化的细胞用测试校正剂化合物c1/c2和/或g418以基底外侧的方式处理24小时，从而允许在膜上适当折叠的cftr蛋白的充分表达。为进行电生理学记录，将人类气道上皮安装在tecc加热板中并保持在37℃。将上皮浸渍在基底外侧及顶端侧的nacl-林格氏溶液(120mmnacl，25mmnahco3，1.2mmcacl2，1.2mmmgcl2，0.8mmkh2po4，0.8mmk2hpo4，ph7.4，5mm葡萄糖)中。在测量之前，将测试化合物重新添加至记录溶液中。使用顶端阿米洛利抑制内源性enac电流，同时将福司柯林施加至顶端及基底外侧以刺激cftr。通过在两侧添加毛喉素，随后添加增效剂gp-5来测量cftr活性。在20分钟时间范围内进行测量且每2分钟记录一次。将isc的增加用作cftr活性增加的量度。使用inh-172(cftr的特异性抑制剂)来测试所测试化合物的特异性。图5显示使用与gp-5增效剂组合的校正剂分子和/或通读剂，w1282x/f508delcftr的拯救。实例8.cftr蛋白质印迹分析用于蛋白质印迹的方案基本上是披露于xue等人，2014中的方案。简言之，在24小时内用c1和/或c2和/或g418和gp-5增效剂处理frt细胞。在第1天收获细胞。为此，用冷pbs漂洗细胞并用冷pbs收集。随后将收集的细胞在4℃下以12,000rpm离心2分钟。如必要的话可以将所得球粒储存在-80℃下。第2天使用含有10％乙二胺四乙酸(edta)和10％蛋白酶抑制剂(pi，赛默科技公司(thermoscientific)，沃尔瑟姆，马萨诸塞州)的天然裂解缓冲液(50mmtris-hclph8.5、150mmnacl和1％np-40)每隔5分钟短暂涡旋，将这些球粒在冰上裂解45分钟。将裂解物以12,000rpm在4℃下离心10分钟，并转移至管中。使用bca测定试剂盒对管中的蛋白质量定量。将frt细胞裂解物标准化为蛋白质浓度并通过凝胶电泳分离。将等量的蛋白质在sds-page凝胶(英杰公司(invitrogen)，卡尔斯巴德(carlsbad)，加利福尼亚州)上进行电泳，然后转移至硝化纤维膜(伯乐实验室(bioradlaboratories)，赫拉克勒斯，加利福尼亚州)。将印迹在含有5％(w/v)奶粉和0.1％tween-20的1×pbs中阻断，然后用1：5000稀释的抗cftr抗体(570和596单克隆抗cftr抗体的1∶1混合物)(cfft治疗公司(cffttherapeuticsinc))在室温下孵育2小时，洗涤，随后用与辣根过氧化物酶(1∶10,000)缀合的次级山羊抗小鼠抗体(dako公司，卡平特里亚(carpinteria)，加利福尼亚州)在室温下孵育1小时。用高敏感性westfemto高敏感性底物(赛默科技公司)诱导化学发光。使用cemidocxrshq(伯乐公司(bio-rad)，赫库斯，加利福尼亚州，美国)将这些膜曝光不同的时间段(高达2分钟)，并且在针对一组标准稀释样品的线性范围内校准。使用该方案，在增效剂/一种或多种校正剂的不同组合的存在下，cftr蛋白水平如图6所示。可以看出，单独的c1和c2的组合产生与通读存在下细胞中产生的相同或更高水平的cftr。从之前的描述中，本领域技术人员将容易想到本发明的组合物和方法的不同修改和变化。落入所附权利要求范围内的所有的此类修改旨在被包括于其中。在本说明书中引用的所有出版物(包括但不限于专利和专利申请)通过引用并入本文中，如同每个单独的出版物被具体且单独地指出通过引用并入本文，就如同在本文中完整给出一样。参考文献audrezetetal(2004)hummutat.apr；23(4)：343-57becqf，mallma，shepparddn，conesem，zegarra-morano.(2011)jcystfibros.10：s129-45flumepa，lioutg，borowitzds，lih，yenk，ordonezcl，gellerde(2012）chestmar1gusevetal.(2001）amjpathol159：63gregory，r.j.etal.(1990)nature347：382-386；hermannt(2007)cellmollifesci.64(14)：1841-52howardm，frizzellra，bedwelldm(1996)natmed.2(4)：467-9keremb，chiba-faleko，kereme(1997)genettest.1997；1(1)：35-9.kerem，hirawat，armoni，yaakov，shoseyov，cohen，etal.(2008)lancet.372(9640)：719-727lieder(2000)advanceforlaboratorymanagers，70macdonaldkd，mckenziekr，zeitlinpl(2007)paediatrdrugs9：1-10.marrasetal.(1999)genetanal14：151rich，d.p.etal.(1990)nature347：358-362riordanjr.(2005)annurevphysiol67：701-18roeanmp，stoltzda，hornickdb.(2011)chest139：1480-1490roweandverkman(2013)coldspringharborperspectivesinmedicine3(7).roweetal，2007vangoorf，hadidas，grootenhuispd，etal.(2009)procnatlacadsciusa106：18825-18830wilschanski，yahav，yaacov，blau，bentur，rivlin，etal.(2003)nengljmed.349(15)：1433-1441；wilschanski(2012)front.pharmacol.3：117.doi：10.3389/fphar.2012.00117www.clinicaltrials.gov：studyofvx-809aloneandincombinationwithvx-770incysticfibrosis(cf)patientshomozygousorheterozygousforthef508del-cftrmutation，studycodenct01225211xueetal(2014)amjrespircellmolbi0l.50(4)：805-816.当前第1页12