本发明涉及治疗或预防口腔细菌感染的漱口液，具体涉及制霉菌素漱口液及其制备方法。
背景技术：
正常健康者口腔内寄居着10余种正常菌和致病菌，菌群之间相互制约、相互依赖，维持相互间的平衡状态。正常口腔pH值为6.6～7.1，加上饮水、刷牙等活动对细菌起到清除作用。恶性血液病患者由于自身免疫能力低下，放化疗等多种因素，定植在口腔内的真菌(尤其是念珠菌)或咽部真菌感染后易进入下呼吸道引起侵袭性肺部真菌感染。国内外对侵袭性肺部真菌感染的预防研究绝大多数为抗真菌药物口服或静脉全身用药预防研究，但对其预防效果评价不一致，同时存在不可避免的副作用、耐药和花费增加等问题。制霉菌素具有广谱抗真菌作用，是膜渗透性增强剂，通过与真菌细胞膜的同醇类物质结合，增加细胞通透性，使细胞内容物及K+外移而抑制其生长，一般不易产生耐药性，且费用低。局部用药不吸收，安全性好制霉菌素在光照、酸碱条件下都不稳定，容易被破坏降解。
目前，医院所用制霉菌素液须现配现用，一般要求在24h内用完，这不但增加了医务人员的工作量，而且在制霉菌素液的使用与保存上存在着较大局限性。
技术实现要素：
本发明目的在于提供一种溶解度高、稳定性强、抗菌效果好、易于制备和保存的制霉菌素漱口液及其制备方法。
为实现上述目的，本发明采用如下技术方案：
一种制霉菌素漱口液，由以下重量百分比的组分制成：
进一步，所述漱口液由以下重量百分比的组分制成：
进一步，所述漱口液由以下重量百分比的组分制成：
进一步，所述漱口液由以下重量百分比的组分制成：
进一步，所述漱口液由以下重量百分比的组分制成：
本发明还提供了所述制霉菌素漱口液的制备方法，包括以下步骤：
1)称取磷酸吡哆醛，溶于纯化水中，用碳酸钠调pH至6-8，得到A液；
2)称取制霉菌素，溶于二甲基甲酰胺中，得到B液：
3)将A液和B液混合后冻干，得到冻干粉；
4)将尼泊金乙酯、薄荷醇与冻干粉溶于纯化水中，过滤，分装，得到制霉菌素漱口液。
本发明采用以上技术方案，以制霉菌素为主药，以磷酸吡哆醛为助溶剂，以尼泊金乙酯为防腐剂，薄荷醇则用于增效、矫味，制备而成的制霉菌素漱口液用于预防与治疗真菌感染，特别适用于预防与治疗口腔及肺部念珠菌感染。其中，磷酸吡哆醛是水溶性的维生素，其化学结构使其有增溶效果，增加了制霉菌素的水溶性。本发明成品为溶液，可直接使用，减轻了医务人员工作量。另外本发明方法能够提高制霉菌素溶解度、稳定性与抗菌效果，是一款易于制备和保存的漱口液。
本发明中，防腐剂也可以选择尼泊金甲酯或尼泊金丙酯，增效、矫味剂也可以选择桉叶油素、水杨酸甲酯或百里香酚等，其用量进行适当调整。
具体实施方式
一种制霉菌素漱口液，由以下重量百分比的组分制成：
制霉菌素0.1-1％、磷酸吡哆醛0.1-1％、尼泊金乙酯0.1-0.3％、薄荷醇0.01-0.1％，余量为纯化水，各组分总量之和为100％。
所述制霉菌素漱口液的制备方法如下：
1)称取磷酸吡哆醛，溶于纯化水中，用pH调节剂调节pH至6-8，得到A液；
2)称取制霉菌素，溶于二甲基甲酰胺中，得到B液：
3)将A液和B液混合后冻干，得到冻干粉；
4)将尼泊金乙酯、薄荷醇与冻干粉溶于纯化水中，过滤，分装，得到制霉菌素漱口液。
实施例1
一种制霉菌素漱口液，由以下重量百分比的组分制成(总量100％)：
所述制霉菌素漱口液的制备方法如下：将磷酸吡哆醛溶于纯化水中，用碳酸钠调节pH至7，得到A液；将制霉菌素溶于二甲基甲酰胺中，得到B液：然后将A液和B液混合后冻干，得到冻干粉；最后，将尼泊金乙酯、薄荷醇与冻干粉溶于纯化水中，过滤，分装，得到制霉菌素漱口液。
实施例2
一种制霉菌素漱口液，由以下重量百分比的组分制成(总量100％)：
所述制霉菌素漱口液的制备方法如下：将磷酸吡哆醛溶于纯化水中，用碳酸钠调节pH至8，得到A液；将制霉菌素溶于二甲基甲酰胺中，得到B液：然后将A液和B液混合后冻干，得到冻干粉；最后，将尼泊金乙酯、薄荷醇与冻干粉溶于纯化水中，过滤，分装，得到制霉菌素漱口液。
实施例3
一种制霉菌素漱口液，由以下重量百分比的组分制成(总量100％)：
所述制霉菌素漱口液的制备方法如下：将磷酸吡哆醛溶于纯化水中，用碳酸钠调节pH至6，得到A液；将制霉菌素溶于二甲基甲酰胺中，得到B液：然后将A液和B液混合后冻干，得到冻干粉；最后，将尼泊金乙酯、薄荷醇与冻干粉溶于纯化水中，过滤，分装，得到制霉菌素漱口液。
实施例4
一种制霉菌素漱口液，由以下重量百分比的组分制成(总量100％)：
所述制霉菌素漱口液的制备方法同实施例1。
实施例5
一种制霉菌素漱口液，由以下重量百分比的组分制成(总量100％)：
所述制霉菌素漱口液的制备方法同实施例2。
实施例6
一种制霉菌素漱口液，由以下重量百分比的组分制成(总量100％)：
所述制霉菌素漱口液的制备方法同实施例3。
实施例7
一种制霉菌素漱口液，由以下重量百分比的组分制成(总量100％)：
所述制霉菌素漱口液的制备方法同实施例1。
实施例8
一种制霉菌素漱口液，由以下重量百分比的组分制成(总量100％)：
所述制霉菌素漱口液的制备方法同实施例1。
实施例9
一种制霉菌素漱口液，由以下重量百分比的组分制成(总量100％)：
所述制霉菌素漱口液的制备方法同实施例1。
实施例10
一种制霉菌素漱口液，由以下重量百分比的组分制成(总量100％)：
所述制霉菌素漱口液的制备方法同实施例1。
实施例11
一种制霉菌素漱口液，由以下重量百分比的组分制成(总量100％)：
所述制霉菌素漱口液的制备方法同实施例1。
实施例12刺激性试验
1急性眼刺激性试验
1.1材料：受试物为本发明产品(实施例1产品)，实验动物为健康成年白色家兔，体重为2-2.5kg。
1.2方法：选用健康成年白色家兔4只，体重为2-2.5kg，雌雄各半。左眼给该产品受试物，右眼给生理盐水，分别给予0.1mL后观察眼部反应。在给药后1、2、4、6、24、48和72h对眼部进行检查。
1.3评价：参照《化学药物刺激性、过敏性和溶血性研究技术指导原则》(国药监注[2005]106号)中的评分标准进行评分。
1.4结果：角膜和虹膜未见明显刺激，与对照相比无明显区别，刺激反应平均值均为0；结膜轻度充血、水肿，有少量分泌物，结膜的以上症状在用药48小时后基本消失。具体评分如下：
家兔眼刺激反应综合平均分值及刺激强度
由表可知，制霉菌素含漱液在各时间点眼刺激性综合平均分值在0-3.9内，即制霉菌素含漱液对家兔皮肤没有刺激性。
1.5评价：根据眼刺激评价标准，表明受试物(本发明产品)对家兔眼睛无刺激性，符合眼刺激试验要求。
2、急性皮肤刺激性试验
2.1材料：受试物为本发明产品(实施例1产品)，实验动物为健康成年白色家兔，体重为2-2.5kg。
2.2方法：选用健康成年白色家兔8只，体重为2-2.5kg，雌雄各半。实验前24h将家兔脊柱两侧脱毛，范围为左右各3cm*3cm，去毛后24h检查去毛皮肤。将家兔分为两组，每组各四只，一组为皮肤无损伤，该组家兔做完好皮肤的刺激性试验；一组为皮肤有损伤，用灭菌针尖将去毛消毒皮肤划破，见有渗血为度，此组家兔做破损皮肤的刺激性试验。采用同体自身左右对比，左侧给予受试品0.5mL，右侧给予等量生理盐水作为对照。观察时间设为14天，清除受试样品后的1h、24h、48h、72h分别观察受试部位的皮肤反应。
2.3评价：参照《化学药物刺激性、过敏性和溶血性研究技术指导原则》(国药监注[2005]106号)中的评分标准进行评价
2.4结果：受试品对完整皮肤与损伤皮肤的平均反应分值无明显差异，具体评分如下：
家兔皮肤刺激性试验结果
2.5评价：根据皮肤刺激评价标准，表明受试物(本发明产品)对家兔完整皮肤与受损皮肤无刺激性，符合皮肤刺激试验要求。
实施例13抗菌试验(最小抑菌浓度的测定)
1材料：氟康唑，本发明漱口液(实施例1产品)；菌株ATCC90028，菌株ATCC6258。
2方法：制备菌悬液和药物贮备液，在无菌有盖药敏板每行1-10号孔10级倍比稀释分别加入药液100μL，并加入白色念珠菌和克柔念珠菌菌液100μL，11号孔不加药液，只加菌悬液及RPMI1640液体培养基各100μL，12号孔不加菌悬液只加200μL RPMI1640液体培养基，用氟康唑做质量控制，放置35℃恒温箱中孵育48h。每种菌株做一个复孔，整体试验平行操作3次。
3结果
3.1氟康唑对ATCC6258的MIC值为16.00-64.00μg/mL，对ATCC90028的MIC值为0.25-2.00μg/mL，此结果在NCCLS M27-A2的MIC值范围。
3.2 2种药物对ATCC6258和ATCC90028的MIC值取值范围如下表所示。
表1 2种药物对不同菌株的MIC范围
实施例14稳定性试验
采用经典恒温法考察制霉菌素漱口液的稳定性。分别在55℃、60℃、65℃、70℃的温度中做加速试验，建立lgC-t回归方程，结果回归方程线性关系良好，说明制霉菌素漱口液人分解变化过程符合一级动力学方程。结果如下：
经典恒温法试验结果
以lgK-1/T作直线回归，表明线性关系良好，结果如下
不同温度下制霉素含漱液反应速度常数K值
根据Arrhenius规律推算制霉菌素漱口液有效期，在冷处贮藏即将T＝277(4℃)回归方程lgK＝-4167.9/T+10.9135，得k4℃＝7.359×10-5,由此可得4℃的有效期t0.9＝0.1054/k4℃＝60d，即制霉菌素含漱液在冷处贮藏时，有效期预测为2个月。