本发明属于化妆品
技术领域：
，具体涉及一种海胆多糖护肤精华液及其制备方法。
背景技术：
：海胆属于棘皮动物门（echinodermata）海胆纲(echinoidea)，生活于岩礁、砾砂石等浅海海底。一般以褐藻、绿藻和红藻等为食，同时也杂食一些小型底栖生物如贝类、多毛类等，在我国沿海均有分布，具一定经济价值可食用的大型海胆约10种。近几年，随着海胆的关注度和认可度的提高，其需求量不断增加。雌海胆的生殖腺即海胆黄为名贵的海产营养品，含有丰富的蛋白、多糖、脂肪酸、维生素及各种微量元素，对人体十分有益。海胆的壳是一味重要的中药，具有多种药用功效，如《本草原始》谓其有“治心疼”的作用，《中药志》主载有“软坚散结，化痰消肿，治瘰疬痰核,积痰不化,胸胁胀痛等证”的功用。加工过程中，取海胆生殖腺进行加工，海胆壳用作药用，而海胆其他内脏则作为废弃物丢弃，约占海胆总重的2～5%，我国目前海胆年捕捞量约为300吨，初步估计每年有约6～15吨海胆内脏被直接丢弃，造成了大量的资源浪费。国内外对丢弃的海胆内脏研究不多，国内张忠玲等研究了海胆肠提取物的抗肿瘤作用，采用丙酮脱水、水提、醇沉、层析后，冷冻干燥获得多糖粉末，并证明其在体内和体外都有明显的抗肿瘤作用，此研究为海胆内脏的开发利用提供了一种可能，但是此研究使用了有机溶剂，不利于环保。本发明的目的一是为了提高海胆加工废弃物的利用率，使海洋资源得到充分的开发利用，提高渔民收入；二是为了制备出性能优异的海胆多糖护肤精华液。技术实现要素：本发明的目的在于将海胆加工废弃内脏进行回收利用，生产多糖化妆品。本发明的目的是通过如下措施来达到的：一种含海胆多糖护肤精华液，含有以下重量配比的原料：海胆多糖15～20份、增稠剂1～5份、防腐剂0.05～0.1份、蒸馏水70～85份。所述的增稠剂为羧甲基纤维素、十六/十八醇、海藻酸、瓜尔胶、聚乙烯吡咯烷酮、聚乙二醇中的一种以上。所述的防腐剂为苯氧乙醇、甲基异噻唑啉酮中的一种。所述海胆多糖通过以下步骤制得：a)原料收集：人工取海胆黄时，从海胆口部剪开海胆壳，移除海胆嘴，暴露出海胆内部结构，使用工具将海胆内部结构全部挖出，放入清水中，将海胆黄洗净后捞出，海胆废弃物在清水中洗净泥沙后，进行收集；b)匀浆：将收集的海胆加工废弃物使用胶体磨进行匀浆，获得匀浆液；c)匀质：为能够增加酶解作用位点而使酶解反应更充分，将匀浆液转入高压匀质机gjj-0.1/100中，设定压力60mpa，收集匀质液；d)第一次酶解：使用一种或两种蛋白酶对匀质液进行酶解，按照说明书进行温度及料液比设定，酶解至无明显残渣，灭酶，即为第一次酶解液；e)第二次次酶解：使用脂肪酶对步骤d)的第一次酶解液继续酶解，按照说明书进行温度及料液比设定，灭酶，即为第二次酶解液；f)提取：将第二次酶解液与15～20%na2co3溶液等比例混合，使用hsct-g超声波提取设备，设定提取温度50℃，提取30～60min，获得超声提取液；g)过滤：使用200目尼龙网对超声提取液进行过滤，保留滤出液；h)超滤：使用截留量为500kd中空纤维超滤膜对步骤g）中的滤出液进行超滤，添加其2倍体积的蒸馏水到超滤液中，至超滤液体积为原滤出液体积1/5～1/2时，停止超滤，保留滤出液；i)浓缩：使用截留量为100kd中空纤维超滤膜对步骤h）中的滤出液进行浓缩，以除去大部分氨基酸和脂肪酸，添加其2倍体积的蒸馏水到超滤液中，浓缩至其体积的1/20～1/10时停止浓缩，获得浓缩液；j）干燥：冷冻干燥；k）纯化：将冷冻干燥干粉配置成100mg/ml的水溶液，上平衡好的deaesepharosefastflow离子交换柱，进行蒸馏水洗脱，后用0～1.0mol/l的nacl梯度洗脱，流速20ml/min，对120min之后的洗脱液进行收集，收集至150min止，获得收集液；l)除盐：使用截留量为10kd中空纤维超滤膜对步骤k）中的收集液进行超滤浓缩及脱盐，向超滤液中添加其2～5倍体积蒸馏水，浓缩至原体积1/3～1/2时止；m）干燥：冷冻干燥。一种海胆多糖护肤精华液的制备方法，包括以下步骤：n)将海胆多糖、增稠剂使用蒸馏水充分溶胀，搅拌加温至80℃，保温备用；o)将步骤n）中的混合物转入真空匀质乳化机中，转速为2000～2800r/min，温度70℃，匀质30～60min，备用；p）待步骤o）中的匀质乳冷却至50℃时，加入防腐剂，保持温度为50℃，2000～2800r/min，匀质30～60min，即为海胆多糖护肤精华液。本发明反应条件温和可控，便于大规模工业化生产，获得的海胆废弃内脏多糖分子量为100kd～500kd，致敏性低。使用总抗氧化能力（t-aoc）检测试剂盒对其抗多糖氧化能力进行了检测，其抗氧化能力为15.20u/ml，表明海胆多糖存在一定的抗氧化能力。使用苯酚-硫酸法对多糖成分进行检测，结果其多糖肽含量为93.4%，纯度较高。本发明的有益效果在于，将海胆加工废弃内脏高值化再利用，不使用有机溶剂，生产出的海胆多糖护肤精华液具有无异味、高保湿、抗氧化的优点，具有很好的护肤效果。具体实施方式下面结合具体实施例对本发明作进一步说明，以便本领域的技术人员更了解本发明，但并不因此限制本发明。实施例1步骤一：海胆多糖制备于养殖场厂购买马粪海胆500kg，人工取海胆黄时，从海胆口部剪开海胆壳，移除海胆嘴，暴露出海胆内部结构，使用工具将海胆内部结构全部挖出，放入清水中，将海胆黄洗净后捞出，海胆废弃物在清水中洗净泥沙后，进行收集，称量共17.3kg。对其使用胶体磨进行匀浆处理，获得匀浆液17.2kg。将匀浆液转入高压匀质机gjj-0.1/100中，设定压力60mpa，收集到匀质液17.2kg。向匀质液中添加蒸馏水20kg，转入酶解罐，加入诺维信风味蛋白酶粉150g，50℃原始ph值酶解24h，90℃灭酶10min，降温至50℃时加入诺维信碱性内切酶粉150g，酶解24h，90℃灭酶10min。降温至45℃时加入诺维信435脂肪酶150g,酶解24h，90℃灭酶10min，加入37.2kg浓度为20%的na2co3溶液，使用hsct-g超声波提取设备，设定提取温度50℃，提取30min,使用200目尼龙网对提取液进行过滤，保留滤出液71.3l，使用截留量为500kd中空纤维超滤膜对过滤液进行超滤，添加142.6l蒸馏水到超滤液中，至超滤液体积为16l时停止超滤，保留滤出液197.6l。使用截留量为100kd中空纤维超滤膜对197.6l滤出液进行浓缩，以除去na2co3和大部分氨基酸，向浓缩液中加入蒸馏水395.2l，浓缩至12l时停止浓缩，获得浓缩液，冷冻干燥获得干粉217.6g，加蒸馏水2176ml配置成100mg/ml的水溶液，上平衡好的deaesepharosefastflow离子交换柱，流速20ml/min，加入蒸馏水500ml，后用0～1.0mol/l的nacl梯度洗脱，流速20ml/min，对120min之后的洗脱液进行收集，收集至150min止，获得收集液600ml，使用截留量为10kd中空纤维超滤膜进行浓缩脱盐，加入蒸馏水1.5l，浓缩至200ml停止超滤，获得浓缩液，对其进行冷冻干燥，获得海胆多糖干粉121.5g。步骤二：海胆多糖护肤精华液的制备方法上述海胆多糖干粉100g、十六/十八醇10g、海藻酸10g、苯氧乙醇0.25g、蒸馏水400g。将海胆多糖、十六/十八醇、海藻酸、蒸馏水加入不锈钢容器内搅拌加温至80℃，保温24h溶胀备用，将混合物转入真空匀质乳化机中，转速为2500r/min，温度70℃，匀质40min，待其冷却至40℃时，加入苯氧乙醇，保持温度为40℃，2500r/min，匀质30min，既为海胆多糖护肤精华液。对比例1与实施例1相比，海胆多糖以黄芪多糖为替换，其余同实施例1，制备护肤精华液。对比例2与实施例1相比，海胆多糖以透明质酸为替换，其余同实施例1，制备护肤精华液。对比例3与实施例1相比，未加入海胆多糖，其余同实施例1，制备护肤精华液。实验例1随机选取女性志愿者100名，年龄20～50岁，随机分成4组，每组25人，实验期间，停用任何外物或化妆品，将实施例和对比例分别涂于不同组志愿者面部，每天一次，连涂8周，采用硅橡胶覆膜方法复制受试者的脸颊及眼角部位的皮肤皱纹，肉眼观察，按照规定的评估标准对皱纹改善进行评分，评分小组由2人组成，采用双盲法。皱纹深度改善人数为使用前后皱纹抚平的使用者。皱纹深度改善%=（使用前皱纹深度-使用后皱纹深度）/使用前皱纹深度×100%结果如下表：组别受试人数皱纹深度改善人数皱纹深度改善%实施例1252341.4对比例1251415.9对比例2252030.4对比例32555.6从以上比较中可以看出，本发明的护肤精华液抗皱纹效果最显著，明显优于3例对比例。实施例2步骤一：海胆多糖制备于养殖场厂购买光棘球海胆500kg，人工取海胆黄时，从海胆口部剪开海胆壳，移除海胆嘴，暴露出海胆内部结构，使用工具将海胆内部结构全部挖出，放入清水中，将海胆黄洗净后捞出，海胆废弃物在清水中洗净泥沙后，进行收集，称量共20.8kg。对其使用胶体磨进行匀浆处理，获得匀浆液20.7kg。将匀浆液转入高压匀质机gjj-0.1/100中，设定压力60mpa，收集到匀质液20.6kg。向匀质液中添加蒸馏水21kg，转入酶解罐，加入诺维信风味蛋白酶粉150g，50℃原始ph值酶解24h，90℃灭酶10min，降温至50℃时加入诺维信碱性内切酶粉150g，酶解24h，90℃灭酶10min。降温至45℃时加入诺维信435脂肪酶150g,酶解24h，90℃灭酶10min，加入42kg浓度为20%的na2co3溶液，使用hsct-g超声波提取设备，设定提取温度50℃，提取50min,使用200目尼龙网对提取液进行过滤，保留滤出液80.3l，使用截留量为500kd中空纤维超滤膜对过滤液进行超滤，添加160.6l蒸馏水到超滤液中，至超滤液体积为18l时停止超滤，保留滤出液222.5l。使用截留量为100kd中空纤维超滤膜对222.5l滤出液进行浓缩，以除去na2co3和大部分氨基酸，向浓缩液中加入蒸馏水445l，浓缩至12l时停止浓缩，获得浓缩液，冷冻干燥获得干粉276.5g，加蒸馏水2765ml配置成100mg/ml的水溶液，上平衡好的deaesepharosefastflow离子交换柱，流速20ml/min，加入蒸馏水500ml，后用0～1.0mol/l的nacl梯度洗脱，流速20ml/min，对120min之后的洗脱液进行收集，收集至150min止，获得收集液600ml，使用截留量为10kd中空纤维超滤膜进行浓缩脱盐，加入蒸馏水1.5l，浓缩至200ml停止超滤，获得浓缩液，对其进行冷冻干燥，获得海胆多糖干粉126.5g。步骤二：海胆多糖护肤精华液的制备方法上述海胆多糖干粉100g、瓜尔胶5g、聚乙二醇15g、甲基异噻唑啉酮0.3g、蒸馏水400g。将海胆多糖、瓜尔胶、聚乙二醇、蒸馏水加入不锈钢容器内搅拌加温至80℃，保温24h溶胀备用，将混合物转入真空匀质乳化机中，转速为2800r/min，温度70℃，匀质40min，待其冷却至40℃时，加入苯氧乙醇，保持温度为40℃，2800r/min，匀质40min，既为海胆多糖护肤精华液。对比例4与实施例2相比，海胆多糖以黄芪多糖为替换，其余同实施例2，制备护肤精华液。对比例5与实施例2相比，海胆多糖以透明质酸为替换，其余同实施例2，制备护肤精华液。对比例6与实施例2相比，未加入海胆多糖，其余同实施例2，制备护肤精华液。实验例2随机选取女性志愿者100名，年龄20～50岁，随机分成4组，每组25人，实验期间，停用任何外物或化妆品，将实施例和对比例分别涂于不同组志愿者面部，每天一次，连涂8周，采用硅橡胶覆膜方法复制受试者的脸颊及眼角部位的皮肤皱纹，肉眼观察，按照规定的评估标准对皱纹改善进行评分，评分小组由2人组成，采用双盲法。皱纹深度改善人数为使用前后皱纹抚平的使用者。皱纹深度改善%=（使用前皱纹深度-使用后皱纹深度）/使用前皱纹深度×100%结果如下表：组别受试人数皱纹深度改善人数皱纹深度改善%实施例2251928.9对比例425915.6对比例5251319.4对比例62533.1从以上比较中可以看出，本发明的护肤精华液抗皱纹效果最显著，明显优于3例对比例。当前第1页12