一种熟地黄的炮制方法与流程

本发明属于中药炮制技术领域，具体地说，涉及一种熟地黄的炮制方法。

背景技术：

中药地黄为玄参科植物地黄新鲜或干燥块根，始载于《神农本草经》，在我国具有悠久的药用历史。经过不同的炮制方法加工得到的炮制品，其性味、功效不同，临床上常用鲜地黄、生地黄、熟地黄、生地炭以及熟地炭。鲜地黄清热生津、凉血止血，用于热病伤阴、舌绛烦渴；生地黄清热凉血、养阴生津，用于舌绛烦渴、阴虚内热；熟地黄滋阴补血、益精填髓，用于肝肾阴虚、血虚萎黄。生熟之品药性迥异主要归因于加工炮制过程中化学成分的变化。

2010版《中华人民共和国药典》规定熟地黄为生地黄的炮制加工品，照酒炖法或蒸法(通则0213)炮制，但现有的熟地黄炮制工艺多数不稳定，导致炮制出的熟地黄质量参差不齐，部分炮制工艺炮制出的熟地黄成品甚至达不到《药典》的基本要求。例如，中国专利申请号为：201210071275.5，公开日为：2013年9月25日的专利文件，公开了一种熟地黄炮制工艺，包括以下步骤：生地黄的净选、清洗、浸润、蒸制、干燥。所述蒸制，采用袋装法或盘装法，用水蒸汽蒸，蒸制时间为2～6h，温度为105～109℃，压力为0.15mpa；所述浸润，辅料黄酒为生地黄药材重量的30.0％～50％，浸润24h；所述干燥分为4个阶段，在不同湿度下进行干燥。但是该炮制工艺仅给出蒸制温度为105～109℃，并未给出升温速度，采用不同的升温速度进行蒸制时，加热过程中，药材一段时间内受热温度不同，因而工艺存在差异性，得到的炮制品质量参差不齐，不具有参照性，尤其是很多情况下毛蕊花糖苷指标达不到规定的要求。

又如，中国专利申请号为：201610587754.0，公开日为：2016年11月16日的专利文件，公开了一种熟地黄的炮制方法，包括以下步骤：清洗：将重量份为100份的直径3cm以上的鲜地黄和重量份为10～30份的直径1cm以下的鲜地黄用清水清洗干净；干燥：将洗净的直径3cm以上的鲜地黄于微波真空干燥设备中干燥；切片：将干燥的鲜地黄切成4～6mm厚的切片；捣绞取汁：将洗净的直径1cm以下的鲜地黄，捣绞取其汁；将鲜地黄汁加入地黄切片中，置于蒸锅内蒸制1-2h；将蒸制的地黄切片干燥，成熟地黄；但发明的炮制方法依然存在得到的地黄质量不稳定，很多情况下毛蕊花糖苷指标达不到规定的要求的问题。

技术实现要素：

1.要解决的问题

针对现有的熟地黄炮制工艺得到的地黄质量不稳定，尤其是很多情况下毛蕊花糖苷指标达不到规定的要求的问题，本发明提供一种熟地黄的炮制方法，对炮制过程中的每一过程都进行了科学计算，得到的地黄质量稳定，成品率高。

2.技术方案

为了解决上述问题，本发明所采用的技术方案如下：

一种熟地黄的炮制方法，将浸润后的地黄放置在密闭容器中蒸制，所述的蒸制分为4个阶段进行升温和降温。

进一步优选地，所述的熟地黄的炮制方法完整步骤为：

(1)清洗：称取生地黄，用清水冲洗去除其表面的杂质；

(2)生地黄干燥：将清洗后的生地黄在温度为20～30℃、风速为1.2～2.5m/s下干燥1.5～2.5h，在较低的温度下，使用软风对洗净的生地黄进行风干，以便后续进行浸润，效率较高，又不会对生地黄原料的成分药效产生影响；

(3)浸润：向干燥后的生地黄中加入黄酒，黄酒的质量为生地黄质量的25％～40％，浸润至黄酒吸尽；

(4)蒸制：将浸润后的地黄放置在密闭容器中蒸制，蒸制过程中采用更为精确的控温方式，改变传统的直接加热的粗放做法，所述的蒸制分为4个阶段进行升温和降温，极大的提高了产品合格率：

第1阶段：升温速度为1～3℃/min，直至温度为40±4℃，保温0.5～1.5h，这一阶段采用的升温速度低于现有技术方案，是因为我们发现这个升温速度可防止表面温度高，内部温度低，表层水分蒸发过快，而内部水分来不及排出，导致发生干皮，影响药效以及后续内部水分的排出，进行一定时间的保温，可以使药材内外温度充分达到一致；

第2阶段：升温速度为5～8℃/min，直至温度为70±3℃，保温0.5～1.5h，地黄经过第一阶段的加热之后孔隙发生了变化，渗透能力提高，逐渐增加升温速度，蒸制效率较高，药材表面又能始终保持湿润，不会发生干燥开裂；

第3阶段：升温速度为6～10℃/min，直至温度为105±3℃，保温5～7h，经过前两个阶段处理之后，地黄出现大孔径孔隙，渗透能力进一步得到提高，而且有效成分渗出量逐渐增加，进一步修正了升温速度，但需要注意的时候，本发明的方法没有过度增加升温速度，这是为了防止黄酒大量被蒸出，避免降低黄酒的提升之力，达不到引药上行，清上焦邪热的效果；

第4阶段：降温，降温速度为2～10℃/min，直到温度为25±4℃，保温11～13h，经过前三阶段处理后，地黄有效成分大量渗出，此时降温回收蒸出的地黄汁和黄酒，有利于充分保证药效，在此阶段并不进行刻意加压，加压虽能加快汁液的吸收，提高炮制效率，但常压下缓慢吸收，更有利于保持药效，得到的炮制品品质更高；

再重复以上4个阶段3次，能有效改善生地黄的苦寒之性，最大化发挥其增强滋阴补血，益精填髓的功能，在重复以上阶段时，不打开密封容器，直接加热，这种方式能极大的节约黄酒和能源消耗，尤其是缩短了整个加工时间，便于工业化操作；

(5)将步骤(4)处理过的地黄取出，进行干燥处理：50～70℃干燥20～30h。

进一步优选地，所述的步骤(1)中干燥温度为25℃，风速为2m/s，时间为2h；所述的步骤(3)中黄酒的质量为生地黄质量的25％～40％；所述的步骤(5)中干燥温度为60℃，时间为24h。

进一步优选地，所述的步骤(4)中第1阶段的升温速度为2℃/min，直至温度为40℃，保温1h；第2阶段的升温速度为6℃/min，直至温度为70℃，保温1h；第3阶段的升温速度为8℃/min，直至温度为105℃，保温6h；第4阶段降温速度为5℃，直至温度为25℃，保温12h。

进一步优选地，所述的步骤(3)中在负压状态浸润，生地黄单层放置，黄酒分2次加入，负压状态下，地黄内部组织的气体排出，有利于黄酒浸入地黄内部，浸润效率较高，黄酒分批加入，避免生地黄与黄酒浸润过程中出现黄酒沉底现象，导致浸润不均匀。

进一步优选地，浸润时的压强为0.06～0.08mpa。

进一步优选地，所述的步骤(2)中的黄酒指干黄酒，干黄酒中的含糖量较少，糖分都发酵变成了酒精，既能最大程度保证地黄特有的风味，又能借黄酒的升提之力。

进一步优选地，所述的密闭容器的顶盖内表面设置有尖端朝下的水滴状结构。

进一步优选地，所述的水滴状结构尖端尺寸为0.5～2mm，密度为80～120个/dm²。

3.有益效果

相比于现有技术，本发明的有益效果为：

(1)本发明熟地黄炮制工艺各个步骤都进行了科学计算，说明详尽，工艺过程比较明确、清晰，炮制品的质量较为稳定；

(2)本发明熟地黄炮制工艺得到的熟地黄表面黑亮如漆，质地滋润柔软而带有韧性，断面乌黑色，气微，味甘如饴，还原糖含量较高。

附图说明

图1为本发明熟地黄炮制工艺的流程图；

图2为本发明熟地黄炮制工艺蒸制容器顶盖的结构示意图；

具体实施方式

下面结合具体实施例对本发明进一步进行描述。

实施例1

如图1的流程图所示，一种熟地黄的炮制方法，包括以下步骤：

(1)清洗：称取5kg生地黄(由安徽亳州某饮片厂提供，批号：1505322)，采用循环水冲洗去除其表面的杂质，直至无泥沙水流出；

(2)生地黄干燥：将清洗干净的生地黄置于电热恒温干燥箱中，在温度为20℃、风速为1.2m/s下干燥2.5h；

(3)浸润：向干燥后的生地黄中加入1.25kg的黄酒，浸润至黄酒吸尽；

(4)蒸制：将浸润后的地黄放置在密闭容器中蒸制4次，所述的蒸制分为4个阶段：

第1次蒸制：第1阶段：升温速度为1℃/min，直至温度为36℃，保温0.5h；第2阶段：升温速度为5℃/min，直至温度为67℃，保温0.5h；第3阶段：升温速度为6℃/min，直至温度为102℃，保温7h；第4阶段：降温，降温速度为2℃/min，直到温度为21℃，保温13h；

第2次蒸制：第1阶段：升温速度为1℃/min，直至温度为37℃，保温0.5h；第2阶段：升温速度为5℃/min，直至温度为68℃，保温0.5h；第3阶段：升温速度为6℃/min，直至温度为102℃，保温7h；

第3次蒸制：第1阶段：升温速度为1℃/min，直至温度为36℃，保温0.5h；第2阶段：升温速度为5℃/min，直至温度为68℃，保温0.5h；第3阶段：升温速度为6℃/min，直至温度为103℃，保温7h；

第4次蒸制：第1阶段：升温速度为1℃/min，直至温度为38℃，保温0.5h；第2阶段：升温速度为5℃/min，直至温度为67℃，保温0.5h；第3阶段：升温速度为6℃/min，直至温度为104℃，保温7h；

(5)成品干燥：将步骤(4)处理过的地黄取出，在50℃干燥30h。

最终得到的熟地黄炮制品表面黑亮如漆，富有光泽，黏性强，断面呈乌黑色，质地滋润柔软而带有韧性，味甘如饴，气微，无刺激性气味，完全可媲美严格按照九蒸九晒法得到的熟地黄，但用时大大缩短。

采用1-苯基-3-甲基-5-吡唑啉酮(pmp)柱前衍生高效液相色谱法测定炮制品提取液中还原糖的含量，实验内容如下：

仪器：waters高效液相色谱仪，kq-250de型数控超声波清洗器(昆山市超声仪器有限公司)；mh型电子调温电热套；超声波清洗仪(200w，40khz，昆山市超声仪器有限公司)；离心机(multifugex-3r，thermo)；hh数显恒温水浴锅(常州国宇仪器制造有限公司)，低温冷却液恒温循环泵dlsb-10/20(郑州英峪予华仪器制造有限公司)，分析天平(mettler-teledo，ml203t)

对照品与试剂：d-无水葡萄糖(供定量测定用，质量分数99.5％，批号110833-201205)、蔗糖(供定量测定用，质量分数99％，批号111507-20001)、果糖(供定量测定用，质量分数99.4％，批号100231-121305)，购自中国食品药品检定研究院；密二糖(质量分数99％，批号c1301015)、棉子糖(质量分数99％，批号e1222007)、水苏糖(质量分数98％，批号g1316008)，购自aladdinindustrial公司；甘露三糖(质量分数＞99％)，由中国食品发酵工业研究所赠送；毛蕊花糖苷(质量分数＞95％，批号120801)，购于megazyme公司。

乙酸铵(质量分数99％，购于阿拉丁试剂上海有限公司)；1-苯基-3-甲基-5-吡啉酮(质量分数99.5％，购于阿拉丁试剂上海有限公司)；乙腈(色谱纯，fisher公司)；纯净水(娃哈哈纯净水有限公司)；二氯甲烷(500ml分析纯，国药集团)；盐酸(500ml分析纯，国药集团)；氢氧化钠(500g分析纯，国药集团)；无水甲醇(500ml分析纯，国药集团)。

色谱条件：色谱柱为watersc18分析柱(4.6mm×250mm，5μm)，流动相：20mmol/l乙酸铵(a)-乙腈(b)，梯度洗脱(0～15min，15％～20％b；15～20min，20％b；20～30min，20％-25％b；30～35min，25％-15％b；35～43min，15％b)；流速：1ml/min；检测波长：230nm；柱温：25℃；进样量：10μl。

方法与结果：

①对照品混合溶液制备

计算后，分别精密称取果糖等，加25％甲醇制成含果糖362.7μg/ml、葡萄糖180.7μg/ml、蔗糖160.8μg/ml、密二糖133.4μg/ml、棉子糖168.0μg/ml、甘露三糖752.5μg/ml、水苏糖687.0μg/ml的混合对照品溶液。

②对照品溶液的衍生

精密量取对照品溶液100μl，pmp甲醇溶液600μl(0.5mol/l)，naoh溶液400μl(0.3mol/l)，三者混合于2ml离心管中，均匀震荡3～5min。60℃水浴加热60min。待反应液冷却至室温，加hcl溶液450ml(0.3mol/l)，均匀震荡。将反应液转移至50ml离心管中，加入二氯甲烷30ml，4000r/min离心15min，重复两次。取上层溶液，定容至25ml，得到对照品衍生溶液。

③炮制品提取液的制备

取炮制品适量，剪碎，精密称定，加入等量硅藻土，研匀，取粉末约2g，置锥形瓶中，加入25％甲醇溶液25ml，超声处理1h，放冷，加25％甲醇补足减失的质量，摇匀，4000r/min离心10min后用0.45μm微孔滤膜滤过，待用。

④炮制品提取液的衍生

精密量取中药水煎溶液1ml、pmp甲醇溶液600μl(0.5mol/l)、naoh溶液400μl(0.3mol/l)，三者混合并均匀震荡3～5min，60℃水浴加热60min，待反应溶液冷却至室温，加入hcl溶液450μl(0.3mol/l)，并震荡均匀。将该反应液转移至50ml离心管中，加入二氯甲烷30ml，4000r/min离心15min，重复2次并取上层溶液，定容至10ml，即得炮制品衍生溶液。

采用高效液相色谱法测定炮制品提取液中毛蕊花糖苷的含量，色谱条件：色谱柱为watersc18分析柱(4.6mm×250mm，5μm)，体积流量为1ml/min，柱温为25℃；流动相为乙腈-0.1％磷酸水溶液(16∶84)，检测波长为334nm。

测定3个批次的熟地黄炮制品，检测结果如下表1所示：

表1(单位：mg/g)

由上表可知得到的炮制品还原糖含量较高，毛蕊花糖苷的含量达到0.035％，远高于《药典》规定的0.02％，对比3个批次的炮制品检测结果可知，其质量较稳定，各批次熟地黄中各种糖类及毛蕊花糖苷的含量无明显差别。

实施例2

如图1的流程图所示，一种熟地黄的炮制方法，包括以下步骤：

(1)清洗：称取5kg生地黄(由安徽亳州某饮片厂提供，批号：1505322)，采用循环水冲洗去除其表面的杂质，直至无泥沙水流出；

(2)生地黄干燥：将清洗干净的生地黄置于电热恒温干燥箱中，在温度为30℃、风速为2.5m/s下干燥1.5h；

(3)浸润：向干燥后的生地黄中加入1.25kg的黄酒，浸润至黄酒吸尽；

(4)蒸制：将浸润后的地黄放置在密闭容器中蒸制4次，所述的蒸制分为4个阶段：

第1次蒸制：第1阶段：升温速度为3℃/min，直至温度为44℃，保温1.5h；第2阶段：升温速度为8℃/min，直至温度为73℃,保温1.5h；第3阶段：升温速度为10℃/min，直至温度为108℃，保温7h；第4阶段：降温，降温速度为10℃/min，直到温度为29℃，保温11h；

第2次蒸制：第1阶段：升温速度为3℃/min，直至温度为43℃，保温1.5h；第2阶段：升温速度为8℃/min，直至温度为73℃,保温1.5h；第3阶段：升温速度为10℃/min，直至温度为106℃，保温7h；第4阶段：降温，降温速度为10℃/min，直到温度为28℃，保温11h；

第3次蒸制：第1阶段：升温速度为3℃/min，直至温度为42℃，保温1.5h；第2阶段：升温速度为8℃/min，直至温度为72℃,保温1.5h；第3阶段：升温速度为10℃/min，直至温度为107℃，保温7h；第4阶段：降温，降温速度为10℃/min，直到温度为29℃，保温11h；

第4次蒸制：第1阶段：升温速度为3℃/min，直至温度为44℃，保温1.5h；第2阶段：升温速度为8℃/min，直至温度为72℃,保温1.5h；第3阶段：升温速度为10℃/min，直至温度为107℃，保温7h；第4阶段：降温，降温速度为10℃/min，直到温度为27℃，保温11h；

(5)成品干燥：将步骤(4)处理过的地黄取出，在70℃干燥20h。

采用实施例1中所述方法测定3个批次炮制的熟地黄中还原糖及毛蕊花糖苷的含量，结构如下表2所示：

表2(单位：mg/g)

由上表可知得到的炮制品毛蕊花糖苷的含量达到0.036％以上，远高于《药典》规定的0.02％，3个批次的熟地黄有效成分含量差别不大，质量较稳定，用时也较短。

实施例3

如图1的流程图所示，一种熟地黄的炮制方法，包括以下步骤：

(1)清洗：称取5kg生地黄(由安徽亳州某饮片厂提供，批号：1505322)，采用循环水冲洗去除其表面的杂质，直至无泥沙水流出；

(2)生地黄干燥：将清洗干净的生地黄置于电热恒温干燥箱中，在温度为25℃、风速为2m/s下干燥2h；

(3)浸润：将干燥后的地黄单层铺展在润药池中，在负压状态下(压强为0.06～0.08mpa，优选0.07mpa)，先加入625g的干黄酒，密封浸润至黄酒吸尽后再加入625g的干黄酒，浸润过程中每30分钟翻动一次；

(4)蒸制：将浸润后的地黄放置在密闭容器中蒸制4次，密闭容器的顶盖内表面设置有如图2所示尖端朝下的水滴状结构，水滴状结构尖端尺寸为0.5～2mm，优选1mm，密度为80～120个/dm²，优选100个/dm²。所述的蒸制分为4个阶段：

第1次蒸制：第1阶段：升温速度为2℃/min，直至温度为40℃，保温1h；第2阶段：升温速度为6℃/min，直至温度为70℃，保温1h；第3阶段：升温速度为8℃/min，直至温度为105℃，保温6h；第4阶段：降温，降温速度为5℃/min，直到温度为25℃，保温12h；

第2次蒸制：第1阶段：升温速度为2℃/min，直至温度为40℃，保温1h；第2阶段：升温速度为6℃/min，直至温度为71℃，保温1h；第3阶段：升温速度为8℃/min，直至温度为104℃，保温6h；第4阶段：降温，降温速度为5℃/min，直到温度为25℃，保温12h；

第3次蒸制：第1阶段：升温速度为2℃/min，直至温度为41℃，保温1h；第2阶段：升温速度为6℃/min，直至温度为69℃，保温1h；第3阶段：升温速度为8℃/min，直至温度为106℃，保温6h；第4阶段：降温，降温速度为5℃/min，直到温度为26℃，保温12h；

第4次蒸制：第1阶段：升温速度为2℃/min，直至温度为39℃，保温1h；第2阶段：升温速度为6℃/min，直至温度为72℃，保温1h；；第3阶段：升温速度为8℃/min，直至温度为104℃，保温6h；第4阶段：降温，降温速度为5℃/min，直到温度为25℃，保温12h；

(5)成品干燥：将步骤(4)处理过的地黄取出，在60℃干燥24h。

地黄汁液有一定的黏度，不易流动，在炮制时，采用的密闭容器顶盖设置有尖端朝下的水滴状结构，降温过程中，液化的地黄汁和黄酒沿着水滴结构滑下在尖端处滴落，值得一提的是极少量的液体即可落下，而若为传统的盖子，则需要凝结成较大体积的液珠，才能在重力作用下滴落，顶盖内表面的水滴结构的尺寸不宜过大，经反复实践发现尺寸在0.5～2mm时，有利于汁液迅速滑下滴落在容器中，增加水滴结构的密度，虽有利于增加汁液滴落点，但却会增加制造难度，提高成本，我们发现密度为80～120个/dm²已能够满足生产需要。

采用实施例1中所述方法测定3个批次得到的熟地黄炮制品中还原糖及毛蕊花糖苷含量，检测结果如下表3所示：

表3(单位：mg/g)

由上表可知得到的炮制品毛蕊花糖苷的含量达到0.04％以上，远高于《药典》规定的0.02％，且各个批次的炮制品中糖类及毛蕊花糖苷含量差别不大，在负压状态下浸润，地黄内部组织的气体逐渐排出，有利于黄酒浸入地黄内部，浸润效率较高，大大节约了浸润时间。