技术领域：
本发明涉及角膜障碍的治愈促进效果以及滴眼剂中的有效成分的稳定性得到改善的滴眼剂，所述滴眼剂含有氨基酸序列由Ser-Ser-Ser-Arg表示的肽(以下称为“SSSR”)或其药学上允许的盐和氨基酸序列由Phe-Gly-Leu-Met-NH2表示的肽(以下称为“FGLM”)或其药学上允许的盐，该滴眼剂通过规定SSSR或其药学上允许的盐和FGLM或其药学上允许的盐的配合浓度比、SSSR或其药学上允许的盐和FGLM或其药学上允许的盐各自的配合浓度、及该滴眼剂的pH范围而得到。
背景技术：
：SSSR是胰岛素样生长因子-I(以下称为“IGF-I”)的部分肽，此外，FGLM是物质P的C末端侧的四肽(专利文献1、专利文献2)。在专利文献1中公开了：关于创伤治愈促进作用，发现SSSR为IGF-I的最小活性表达单元，此外，将SSSR等IGF-I的部分肽与FGLM或物质P并用时，具有促进治愈角膜的障碍以及治愈皮肤的创伤的效果。而且，专利文献1是关于作为IGF-I的部分肽的SSSR等的新物质、及并用了SSSR等IGF-I的部分肽和FGLM或物质P的医药用途的发明，但是对于并用SSSR和FGLM的滴眼剂的配合处方没有进行充分研究。专利文献1：日本特开2003-231695号专利文献2：日本特开平10-17489号技术实现要素：因此，在并用SSSR和FGLM两药剂的滴眼剂的配合处方中，在详细研究了SSSR以及FGLM的各化学特性的基础上，确定配合剂的配合浓度比、各药物的配合浓度等，使配合剂的药效最大化，同时使副作用的发生最小化，而且考虑滴眼剂的流通过程或滴眼剂的使用方式的改变，改善滴眼剂的保存稳定性是意义深远的课题。本发明人等进行了深入研究，结果发现在含有SSSR或其药学上允许的盐和FGLM或其药学上允许的盐的滴眼剂中，如果1)使SSSR或其药学上允许的盐和FGLM或其药学上允许的盐的配合浓度比为1/15～1/50，2)使SSSR或其药学上允许的盐的配合浓度为0.001～0.3％(w/v)，3)使FGLM或其药学上允许的盐的配合浓度为0.015～1.5％(w/v)，4)使该滴眼剂的pH在2.5～6.5的范围内，就能够使药效即促进角膜障碍的治愈效果最大化，并且能够长期稳定地保存滴眼剂等，从而完成了本发明。即，本发明通过研究在含有SSSR或其药学上允许的盐和FGLM或其药学上允许的盐的滴眼剂中，SSSR或其药学上允许的盐和FGLM或其药学上允许的盐的配合浓度比，能够使配合剂的药效最大化，此外，通过降低SSSR或其药学上允许的盐和FGLM或其药学上允许的盐各自的配合浓度，能够避免由药物引起的副作用的发生，进而，通过研究由该滴眼剂的pH造成的影响，能够使滴眼剂长期稳定地保存。在本发明中，作为药学上允许的盐，例如，可以列举出盐酸盐、硫酸盐、磷酸盐、乳酸盐、乙酸盐、三氟乙酸盐、甲酸盐、马来酸盐、富马酸盐、草酸盐、甲磺酸盐、对甲苯磺酸盐等，对于SSSR，更优选乙酸盐，对于FGLM，更优选盐酸盐。在本发明的滴眼剂中，SSSR或其药学上允许的盐和FGLM或其药学上允许的盐的配合浓度比为1/5～1/50，更优选的配合浓度比为1/15～1/50，进一步优选的配合浓度为1/15～1/20。从后述的药理效果试验的结果可知，本发明的滴眼剂中的并用了SSSR或其药学上允许的盐和FGLM或其药学上允许的盐的配合剂的角膜上皮创伤治愈效果在配合浓度比为1/15～1/50的范围内得以促进，特别是在配合浓度比为1/15～1/20的范围内得以最大化。本发明的滴眼剂中的SSSR或其药学上允许的盐的配合浓度为0.001～0.3％(w/v)，更优选为0.005～0.1％(w/v)。此外，本发明的滴眼剂中的FGLM或其药学上允许的盐的配合浓度为0.015～1.5％(w/v)，更优选为0.1～1％(w/v)。从后述的稳定性试验的结果可知，本发明的滴眼剂中的SSSR乙酸盐和FGLM盐酸盐的配合浓度分别为0.001％(w/v)以上和0.015％(w/v)以上时，作为配合剂发挥良好的药效，但是通常药物浓度变高时，有时发生副作用，因此优选将药物浓度设定得尽可能低。本发明的滴眼剂的pH在2.5～6.5的范围内，更优选在3.0～6.0的范围内，进一步优选在3.5～5.5的范围内。从后述的稳定性试验的结果可知，含有SSSR乙酸盐的水溶液在pH6.5以下(2.5～6.5的范围)时稳定，此外，含有FGLM盐酸盐的水溶液在pH2.5以上(2.5～7.0的范围)时稳定，所以本发明的含有SSSR或其药学上允许的盐和FGLM或其药学上允许的盐滴眼剂在pH为2.5～6.5的范围内能够长期稳定地保存。本发明的滴眼液可以通过通用的方法进行配制，根据需要可以添加等渗剂、pH调节剂等。作为等渗剂，例如可以列举出浓甘油、丙二醇、聚乙二醇、海藻糖、蔗糖、山梨糖醇、甘露醇、氯化钠、氯化钾、氯化钙、氯化镁等，更优选为氯化钠、浓甘油。作为pH调节剂，例如可以列举出盐酸、柠檬酸、柠檬酸钠、磷酸、磷酸一氢钠、磷酸二氢钠、磷酸二氢钾、冰醋酸、乙酸、乙酸钠、氢氧化钠、氢氧化钾、硼酸、硼砂、乙醇胺、硫酸、碳酸钠、碳酸氢钠等。本发明的滴眼剂用作角膜障碍的治疗剂，作为角膜障碍，例如可以举出角膜溃疡、角膜上皮缺损、角膜炎、干眼症等。本发明的滴眼剂的滴加次数可以根据症状、年龄、剂型等进行适当选择，可以每日滴加1～多次(例如1～6次)，每次1～数滴。通过后述的试验项目进行详细说明，本发明的滴眼剂在使SSSR乙酸盐和FGLM盐酸盐的配合浓度比为1/15～1/50时，能够促进配合剂的角膜上皮创伤治愈效果，特别是在配合浓度比为1/15～1/20的范围内时，能够使上述效果得以最大化，此外，使SSSR乙酸盐的配合浓度为0.001％(w/v)以上、FGLM盐酸盐的配合浓度为0.015％(w/v)以上时，能够发挥优异的药效，进而，将本发明的滴眼剂的pH保持在2.5～6.5的范围内时，还能够长期稳定地保存SSSR乙酸盐及FGLM盐酸盐。本发明涉及下述的项：1、一种滴眼剂，含有氨基酸序列由Ser-Ser-Ser-Arg表示的肽或其药学上允许的盐和氨基酸序列由Phe-Gly-Leu-Met-NH2表示的肽或其药学上允许的盐，其中，1)氨基酸序列由Ser-Ser-Ser-Arg表示的肽或其药学上允许的盐和氨基酸序列由Phe-Gly-Leu-Met-NH2表示的肽或其药学上允许的盐的配合浓度比为1/15～1/50，2)氨基酸序列由Ser-Ser-Ser-Arg表示的肽或其药学上允许的盐的配合浓度为0.001～0.3％(w/v)，3)氨基酸序列由Phe-Gly-Leu-Met-NH2表示的肽或其药学上允许的盐的配合浓度为0.015～1.5％(w/v)，4)所述滴眼剂的pH在2.5～6.5的范围内。2、一种滴眼剂，含有氨基酸序列由Ser-Ser-Ser-Arg表示的肽的乙酸盐和氨基酸序列由Phe-Gly-Leu-Met-NH2表示的肽的盐酸盐，其中，1)氨基酸序列由Ser-Ser-Ser-Arg表示的肽的乙酸盐和氨基酸序列由Phe-Gly-Leu-Met-NH2表示的肽的盐酸盐的配合浓度比为1/15～1/20，2)氨基酸序列由Ser-Ser-Ser-Arg表示的肽的乙酸盐的配合浓度为0.005～0.1％(w/v)，3)氨基酸序列由Phe-Gly-Leu-Met-NH2表示的肽的盐酸盐的配合浓度为0.1～1％(w/v)，4)所述滴眼剂的pH在3.0～6.0的范围内。3、一种角膜障碍的治愈促进效果优异的滴眼剂的稳定化方法，在含有氨基酸序列由Ser-Ser-Ser-Arg表示的肽或其药学上允许的盐和氨基酸序列由Phe-Gly-Leu-Met-NH2表示的肽或其药学上允许的盐的滴眼液中，1)使氨基酸序列由Ser-Ser-Ser-Arg表示的肽或其药学上允许的盐和氨基酸序列由Phe-Gly-Leu-Met-NH2表示的肽或其药学上允许的盐的配合浓度比为1/15～1/50，2)使氨基酸序列由Ser-Ser-Ser-Arg表示的肽或其药学上允许的盐的配合浓度为0.001～0.3％(w/v)，3)使氨基酸序列由Phe-Gly-Leu-Met-NH2表示的肽或其药学上允许的盐的配合浓度为0.015～1.5％(w/v)，4)使所述滴眼液的pH在2.5～6.5的范围内。4、一种角膜障碍的治愈促进效果优异的滴眼剂的稳定化方法，在含有氨基酸序列由Ser-Ser-Ser-Arg表示的肽的乙酸盐和氨基酸序列由Phe-Gly-Leu-Met-NH2表示的肽的盐酸盐的滴眼剂中，1)使氨基酸序列由Ser-Ser-Ser-Arg表示的肽的乙酸盐和氨基酸序列由Phe-Gly-Leu-Met-NH2表示的肽的盐酸盐的配合浓度比为1/15～1/20，2)使氨基酸序列由Ser-Ser-Ser-Arg表示的肽的乙酸盐的配合浓度为0.005～0.1％(w/v)，3)使氨基酸序列由Phe-Gly-Leu-Met-NH2表示的肽的盐酸盐的配合浓度为0.1～1％(w/v)，4)使所述滴眼剂的pH在3.0～6.0的范围内。具体实施方式以下给出各种试验结果，这些例子用于更好地理解本发明，并不限定本发明的范围。1、药理效果试验使用以下所示的受试制剂实施药理效果试验。1-1药物的配制i)SSSR乙酸盐使用H-Arg(NO2)-OBzl作为C-末端氨基酸原料，通过Boc法使用Boc-Ser(OBzl)-OH进行肽链延长，由此来合成保护四肽(Z-Ser(OBzl)-Ser(OBzl)-Ser(OBzl)-Arg(NO2)-OBzl)。在乙酸的存在下，使用钯通过催化氢化将该保护四肽进行脱保护，由此得到SSSR乙酸盐。ii)FGLM盐酸盐使用缩合剂由氨基酸衍生物Boc-Phe-OH和H-Gly-OBzl、以及Boc-Leu-OH和H-Met-NH2分别形成肽键，由此合成保护二肽(Boc-Phe-Gly-OBzl以及Boc-Leu-Met-NH2)。将这些保护二肽使用钯进行催化氢化来脱苄基、并且使用Boc法进行肽合成，从而衍生成保护四肽(Boc-Phe-Gly-Leu-Met-NH2)。使用氯化氢将该保护四肽进行脱保护，由此得到FGLM盐酸盐。1-2受试制剂的配制受试制剂1使SSSR乙酸盐和FGLM盐酸盐溶解在磷酸缓冲生理食盐溶液中，配制含有0.01％(w/v)的SSSR乙酸盐和0.005％(w/v)的FGLM盐酸盐的受试制剂1(滴眼液)。受试制剂2～8改变受试制剂1的SSSR乙酸盐的配合量和FGLM盐酸盐的配合量，使其为表1所示的各受试制剂的配合浓度、配合浓度比，除此之外，进行与受试制剂1同样的操作，配制受试制剂2～8。1-3试验方法及结果使用按照Nagano等的方法(Invest.Ophthalmol.Vis.Sci.,44,3810-3815(2003))制作的神经麻痹性角膜症模型大鼠，研究对于剥离角膜上皮后的角膜上皮创伤治愈的影响。具体地按照以下的方法进行评价。剥离角膜上皮后，以1.5小时间隔滴入各受试制剂，1日6次(5μl/次)。测定创伤面积时，进行荧光素染色并拍摄角膜的照片，使用图像分析系统计算出荧光素染色的面积。[表1]表1◎：有显著的伸展角膜上皮的效果○：有促进角膜上皮创伤治愈的效果△：有促进角膜上皮创伤治愈的趋势×：无促进角膜上皮创伤治愈的效果1-4结论从表1中可知，对于受试制剂4～6的配合剂，通过并用SSSR乙酸盐和FGLM盐酸盐，促进角膜上皮创伤治愈效果，特别是在SSSR乙酸盐和FGLM盐酸盐的配合浓度比为1/15和1/17时(受试制剂4和受试制剂5)得以最大化。因此，使SSSR乙酸盐和FGLM盐酸盐的配合浓度比为1/15～1/50、使SSSR乙酸盐的配合浓度为0.001％(w/v)以上、使FGLM盐酸盐的配合浓度为0.015％(w/v)以上时，能够期待发挥优异的药效。2、滴眼液的稳定性试验2-1试样的制作和试验方法配制含有0.003％(w/v)的SSSR乙酸盐和0.05％(w/v)的FGLM盐酸盐的pH2.5～7.0的各试样100ml(滴眼液)，在40℃下保存。通过HPLC法测定保存2个月后、保存3个月后、保存6个月后的SSSR浓度和FGLM浓度，计算出SSSR和FGLM的各自残留率。2-2试验结果表2表示SSSR的残留率，此外，表3表示FGLM的残留率。[表2]表2[表3]表32-3结论由表2可知，对于SSSR，即使在40℃下保存6个月，在pH2.5～6.5的范围内也残留50％以上，此外，由表3可知，对于FGLM，在pH2.5～7.0的范围内也残留50％以上。因此，本发明的含有SSSR乙酸盐和FGLM盐酸盐的滴眼剂，保持pH在2.5～6.5的范围内时，SSSR乙酸盐和FGLM盐酸盐中的任意一种均能够长期稳定地保存。3、制剂例如表4和表5所示，使用通用的方法配制滴眼剂1～8(各100ml)。[表4]表4滴眼剂1滴眼剂2滴眼剂3滴眼剂4(A)SSSR乙酸盐0.03g0.009g0.01g0.01g(B)FGLM盐酸盐0.5g0.15g0.2g0.5g氯化钠0.85g0.87g0.87g0.85g氢氧化钠适量适量适量适量盐酸适量适量适量适量灭菌精制水适量适量适量适量配合比[(A)/(B)]1/171/171/201/50pH4445[表5]表5滴眼剂5滴眼剂6滴眼剂7滴眼剂8(A)SSSR乙酸盐0.02g0.04g0.03g0.1g(B)FGLM盐酸盐0.6g0.8g1.2g1.5g氯化钠0.84g0.81g浓甘油2.2g1.9g氢氧化钠适量适量适量适量盐酸适量适量适量适量灭菌精制水适量适量适量适量配合比[(A)/(B)]1/301/201/401/15pH53.53.54产业上的可利用性本发明提供了含有SSSR或其药学上允许的盐和FGLM或其药学上允许的盐的滴眼剂，所述滴眼剂使滴眼剂的药效最大化、使副作用的发生最小化、且改善了保存稳定性。当前第1页1 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