本发明属于鱼类药物技术领域，具体涉及一种治疗大菱鲆纤毛虫病的中药组合物。
背景技术：
大菱鲆，又称“多宝鱼”，俗称欧洲比目鱼，是原产于欧洲沿海的一种名贵比目鱼，隶属于硬骨鱼纲，鲽形目鲆科菱鲆属，是一种冷水底栖海洋鱼类。其身体扁平近似圆形，双眼位于身体的左侧，有眼侧呈青褐色，有点状黑色素和少量的皮刺。无眼侧光滑呈白色，背鳍与臀鳍无硬刺，很长，头部与尾鳍均较小，身体中部肉厚，内脏团小。大菱鲆具有生长速度快，肉质好，营养价值高等优点。近年来，大菱鲆已在山东、河北、辽宁等环渤海地区形成大规模养殖，其产值高达几十亿元，产生了很好的经济效益和社会效益。但是，随着养殖密度的增加，大菱鲆的病害问题日趋严重，特别是由纤毛虫引起的病害，纤毛虫传染力强，危害性强，给大菱鲆养殖业造成巨大的损失。
纤毛虫，具有纤毛的单细胞生物，是海水养殖中主要的一类病原体。一般情况下，营自由生活、水生生活及寄生生活。纤毛虫可以通过多种途径感染海洋鱼类，尤其是大菱鲆、牙鲆、虾等多种经济动物。大菱鲆纤毛虫病一年四季均可发生，尤其是春夏两季为发病高峰，大菱鲆的苗期、养成期、亲鱼培育期均可发生感染，发病范围广，死亡率高。患病大菱鲆常见的病变部位是皮肤、腮、脑和鳍等。体表、鳍、腮盖内侧发红，腮丝贫血发灰，粘液增多，有的体色变黑，眼球突出，腹部膨胀。病灶部位(一般眼球后或腮盖后)先是变灰，严重时糜烂充血。解剖检查可发现腮丝、肝脏退色，肠道松弛，腹腔积水。并且感染群体中急性死亡和慢性发作均可发生，病程拖延较长，且并发症较多，给养殖业造成极大的经济损失。
为了防止该疾病的发生，许多养殖业者盲目且大剂量的使用抗生素和化学类消毒剂，导致鱼体出现大量药物残留的现象，严重威胁着人类的健康与环境安全。而应用中草药治疗大菱鲆纤毛虫病不但可以解决抗生素、化学消毒剂等引发的化学药物残留等问题，而且符合发展无公害渔业、生产绿色水产品的需求。
技术实现要素：
本发明的目的是提供一种治疗大菱鲆纤毛虫病的中药组合物，及用该中药组合物制备的制剂。通过该药物可以有效的治疗大菱鲆纤毛虫病，且本发明制备的中药组合物成本低、纯中药制剂、无药物残留，对大菱鲆不会产生毒害，具有较好的应用前景。
本发明治疗大菱鲆纤毛虫病的中药组合物，包含有如下重量份的原料药：大黄12-18份，乌梅2-8份，黄芩12-18份，石榴皮7-13份，野菊花12-18份，蛇床子7-13份。
作为本发明进一步的方案，所述治疗大菱鲆纤毛虫病的中药组合物，具体由以下重量份的原料制备而成：大黄15份，黄芩15份，野菊花15份，蛇床子10份，石榴皮10份，乌梅5份。
本发明的中药组合物用于制备治疗大菱鲆纤毛虫病的制剂；
所述的制剂，为粉状、液体或膏状制剂；
其中一种制剂，其具体制备步骤如下：
(1)取上述各原料，清洗干净后，自然晾干，粉碎，过30-40目筛；
(2)按配比将各原料混合，全药材浸泡30min，加入原料药总重量10倍的水，加热煮沸1h，过滤；再次加入原料药总重量8倍的水，加热煮沸1h，再次过滤；
(3)合并两次水煎煮过滤液，减压浓缩成浓缩液。
本发明所选用的药材价廉易得，可以有效的降低鱼苗的治疗成本。本发明中药组合物制剂可以用于治疗大菱鲆纤毛虫病，且不会降低大菱鲆的生长速率，从而可以提高大菱鲆的成活率，降低养殖户的经济损失。
附图说明
图1：大菱鲆腮部组织切片图(原始放大倍数是400倍)，其中：(A)是空白对照组，(B)是20ppm组，(C)是60ppm组，(D)是100ppm组。标尺是50μm。
图2：大菱鲆胃组织切片图(原始放大倍数是400倍)，其中：(A)是空白对照组，(B)是20ppm组，(C)是60ppm组，(D)是100ppm组。标尺是50μm。
图3：大菱鲆肠道组织切片图(原始放大倍数是400倍)，其中：(A)是空白对照组，(B)是20ppm组，(C)是60ppm组，(D)是100ppm组。标尺是50μm。
图4：大菱鲆肝脏组织切片图(原始放大倍数是400倍)，其中：(A)是空白对照组，(B)是20ppm组，(C)是60ppm组，(D)是100ppm组。标尺是50μm。
图5：大菱鲆脾脏组织切片图(原始放大倍数是400倍)，其中：(A)是空白对照组，(B)是20ppm组，(C)是60ppm组，(D)是100ppm组。标尺是50μm。
具体实施方式
下面结合本发明实施例，对本发明实施例中的技术方案进行清楚、完整地描述。
实施例1
处方一：称取十大功劳20份，黄柏20份，半枝莲15份，苦参15份，百部10份，槟榔10份配制成治疗大菱鲆纤毛虫病的中草药复方。
治疗大菱鲆纤毛虫病的中药组合物处方一及其制备步骤如下：
(1)取上述各原料，清洗干净后，自然晾干，粉碎，过30目筛；
(2)按配比将各原料混合，全药材浸泡30min，加入原料药总重量10倍的水，加热煮沸1h，过滤；再次加入原料药总重量8倍的水，加热煮沸1h，再次过滤；
(3)合并两次水煎煮过滤液，减压浓缩至相对密度为1的浓缩液。
处方二：称取大黄15份，黄芩15份，野菊花15份，蛇床子10份，石榴皮10份，乌梅5份配制成治疗大菱鲆纤毛虫病的中草药复方。
治疗大菱鲆纤毛虫病的中药组合物处方二及其制备步骤如下：
(1)取上述各原料，清洗干净后，自然晾干，粉碎，过40目筛；
(2)按配比将各原料混合，全药材浸泡30min，加入原料药总重量10倍的水，加热煮沸1h，过滤；再次加入原料药总重量8倍的水，加热煮沸1h，再次过滤；
(3)合并两次水煎煮过滤液，减压浓缩至相对密度为1的浓缩液。
处方三：称取地丁15份，蒲公英15份，野菊花10份，地锦草10份，败酱草10份，龙胆草10份，鱼腥草10份，青蒿10份配制成治疗大菱鲆纤毛虫病的中草药复方。
治疗大菱鲆纤毛虫病的中药组合物处方三及其制备步骤如下：
(1)取上述各原料，清洗干净后，自然晾干，粉碎，过40目筛；
(2)除鱼腥草和青蒿外，按配比将其它各原料混合，全药材浸泡30min，加入原料药总重量10倍的水，加热煮沸1h，过滤；再次加入原料药总重量8倍的水，加热煮沸1h，再次过滤；
(3)合并两次水煎煮过滤液，减压浓缩至相对密度为1的浓缩液；
(4)用6倍80％的乙醇浸泡鱼腥草和青蒿，获得的绿汁低温回收乙醇后，兑入上述(3)浓缩液中。
试验方法：
1、中草药药物配置及筛选试验
(1)把上述中草药配制成0ppm、10ppm、20ppm、30ppm、40ppm、50ppm、60ppm共7个不同的浓度，配置方法如表1：
(2)试验在96孔板中进行，共分为7组，每组3个重复，每孔加入90μL中药提取液和10μL离心后的虫液，分组情况如表2：
(3)在显微镜下观察试验结果，前12h连续观察，之后每12h观察一次至48h，记录试验结果；
(4)根据上述(3)的试验结果进一步缩小中草药的药物浓度范围，筛选出最佳的药物浓度，把中草药配制成0ppm、5ppm、10ppm、15ppm、20ppm、25ppm、30ppm共7个不同的浓度，配制方法如表3：
(5)试验步骤同(2)所述；
(6)显微镜下观察试验结果，前12h连续观察，之后每12h观察一次至48h，记录试验结果。
试验结果：
1、中草药对盾纤毛虫的毒性试验
表4：各种药物在不同浓度下对海洋伪丝虫的作用效果
表5各种药物在不同浓度下对水滴伪康纤虫的作用效果
表6：各种药物在不同浓度下对海洋伪丝虫的作用效果
表7：各种药物在不同浓度下对水滴伪康纤虫的作用效果
表4、表5、表6和表7结果显示，当处方二的浓度为20ppm时，1小时即可杀死海洋伪丝虫和水滴伪康纤虫。
实施例2处方二组成筛选正交试验
对影响处方二药效的主要中草药及其组分份数进行优选。根据实施例1处方二的剂量上下各设一个剂量水平进行正交试验。因素水平设计见表8.
表8正交因素试验水平
试验结果：
通过正交试验结果，考虑生产成本及节约资源，优选组方A2B2C2D2。
实施例3：处方二对大菱鲆的毒性试验
对选择出的药物进行大菱鲆的毒性试验，试验分为3个试验剂量组，分别为推荐剂量(20ppm)、三倍推荐剂量(60ppm)、五倍推荐剂量(100ppm)，另设1个空白对照组(0ppm)，每组3个重复，每个重复12尾大菱鲆(20g左右)。每组大菱鲆每天药浴2次，每次3小时，共药浴7天。试验开始时和试验结束时对大菱鲆空腹称重，并且测量大菱鲆的体长。同时，试验结束时，采集大菱鲆的全血和血清，检测全血血常规指标和血清生化指标；并采取大菱鲆的腮、肠、肝、脾器官，制作组织石蜡切片，进行组织病理学检查。检测处方二对大菱鲆的影响。
试验数据采用SPSS 20.0软件进行统计分析。
2、中草药对大菱鲆的毒性试验
(1)处方二对大菱鲆生长性能的影响
表9处方二对大菱鲆生长性能的影响
注：肩标字母相同或无字母，表示差异不显著(P>0.05)；肩标字母不同，表示差异显著(P<0.05)。
如表9所示，各试验组与对照组相比，处方二对大菱鲆的生长性能没有显著的影响，表明本药物不会降低大菱鲆的生长速率。
(2)处方二对大菱鲆血液学指标的影响
表10：处方二对大菱鲆血液学指标的影响
注：肩标字母相同或无字母，表示差异不显著(P>0.05)；肩标字母不同，表示差异显著(P<0.05)。
如表10所示，与对照组相比，本药物对大菱鲆的血液学指标没有显著影响。
(3)处方二对大菱鲆血液生化指标的影响
表11处方二对大菱鲆血液生化指标的影响
注：肩标字母相同或无字母，表示差异不显著(P>0.05)；肩标字母不同，表示差异显著(P<0.05)。
如表11所示，60ppm组天冬氨酸氨基转移酶的酶活力显著低于对照组和其它试验组，但是天冬氨酸氨基转移酶范围广，该组天冬氨酸氨基转移酶的值处于正常范围。处方二对大菱鲆其它血液生化指标无显著影响。
(4)组织病理学检查
对菱鲆腮部组织(图1)、胃组织(图2)、肠道组织(图3)、肝脏组织(图4)和脾脏组织(图5)进行组织切片，结果表明处方二的中药组合物制备的制剂对大菱鲆各重要脏器组织无病理损伤作用。
结果表明，本发明药物可以治疗大菱鲆纤毛虫病，使用本发明药物过程中，不会对大菱鲆产生毒性，而且不会影响大菱鲆的生长速率。可见，本发明的药物具有较高的应用价值，在鱼类行业具有良好的竞争力。本发明药物应用前景广阔。