本发明属于医药技术领域，具体地，涉及一种不含有机溶剂的虎杖苷药物组合物及其制备方法。
背景技术：
虎杖苷(polydatin，pd)是从蓼科蓼属植物虎杖(polygonumcuspidatumsieb.etzucc)的干燥根茎中提取获得的单体，可称为白藜芦醇苷。pd在植物中分布广，含量高，具有较强的生物活性。现代药理学研究表明，pd对心肌细胞、血管平滑肌细胞、抗血小板聚集、改善微循环等有显著作用，此外还能减轻多种因素造成的组织器官损伤，具有保护肝细胞，抗氧化，降血脂及抗脂质过氧化等作用。
虎杖苷的化学结构为3,4',5-三羟基二苯乙烯-3-β-d葡萄糖苷(3,4',5-trihydroxy-transstilbene-3-β-d-glucoside)，为反式二苯乙烯类化合物，其结构式如下所示。
专利cn1709269a中指出，虎杖苷基础药理学研究文献中，在体试验研究多采用静脉内途径给予虎杖苷，试验样品多采用水或生理盐水配制2～5mg/ml浓度的虎杖苷溶液，但文献对溶液的可行配制方法均无进一步说明。根据文献计算，虎杖苷临床有效剂量(成人)应在112mg/次以上，在1～20ml常规注射剂规格下，临床用注射剂中虎杖苷浓度应不低于5.6mg/ml。室温下，虎杖苷在水或生理盐水溶液中饱和浓度均低于0.5mg/ml，远低于上述2～5mg/ml给药浓度。而研究表明，采用提高化合物溶解度的常用方法，难以制备出稳定且浓度较高的虎杖苷药物组合物。该专利发现混合溶剂在一定比例范围内可大大提高化合物的溶解度，起到潜溶的作用。发明了一种以乙醇和/或丙二醇作为溶剂的含高浓度虎杖苷的注射用溶液及其制备方法，解决了虎杖苷注射液贮存稳定性及临床使用剂量较大的问题。但该方法所指的注射液由于含高浓度的有机溶剂而在安瓿灌封过程中容易产生泡头，从而影响产品外观，且高浓度有机溶剂不适合直接注射，需经注射用水或生理盐水稀释至一定程度后方可用于注射给药，给医院用药带来不便。
因此，不含有机溶剂且含有高浓度虎杖苷的注射用制剂对于实现虎杖苷的临床应用价值具有至关重要的现实意义。
技术实现要素：
本发明的目的在于提供一种不含乙醇及其他有机溶剂的高浓度虎杖苷的药物组合物，该药物组合物可使活性成分即虎杖苷获得较大溶解度，同时可以解决虎杖苷注射液在灌封过程中产生的泡头问题及高温灭菌过程中易出现的溶液颜色加深等问题，具有稳定活性成分的作用，并且适合放大生产及临床直接注射给药。
本发明所述的一种不含有机溶剂的虎杖苷药物组合物采用聚乙二醇十二羟基硬脂酸酯作为增溶剂，可以大幅提高虎杖苷的溶解度。具体为将虎杖苷和聚乙二醇十二羟基硬脂酸酯溶于适宜的溶剂制成。相关研究表明，ph调节剂可用于提高虎杖苷的水溶性，但是，单用常规酸碱调节剂难以在临床允许注射剂ph值范围(4.0～9.0)内制备高浓度的虎杖苷溶液。如专利申请cn1709269a所述，虎杖苷在ph7～10的naoh水溶液中的溶解度均低于0.5mg/ml。本发明人发现，室温条件下，在ph5～9的溶剂中，5mg/ml的聚乙二醇十二羟基硬脂酸酯缓冲溶液中，虎杖苷的饱和溶解度可达15.3mg/ml；10mg/ml的聚乙二醇十二羟基硬脂酸酯缓冲溶液中，虎杖苷的饱和溶解度可达22.6mg/ml；20mg/ml的聚乙二醇十二羟基硬脂酸酯缓冲溶液中，虎杖苷的饱和溶解度可达40.6mg/ml。由此可见，聚乙二醇十二羟基硬脂酸酯的增溶效果十分显著，可以极大的增强虎杖苷的溶解作用。聚乙二醇十二羟基硬脂酸酯已收载于美国药典、欧洲药典、英国药典和德国药典，可用于注射剂的增溶剂。
本发明中所述聚乙二醇十二羟基硬脂酸酯的用量为5～25mg/ml，优选为10～15mg/ml。
本发明中所述的溶解虎杖苷的溶剂为为注射用水、柠檬酸-柠檬酸钠缓冲液、碳酸钠-碳酸氢钠缓冲液、氯化钠溶液、葡萄糖溶液。
本发明所述的一种不含有机溶剂的虎杖苷药物组合物，其剂型为注射液或临用前用水或生理盐水配制成水溶液的冻干制品等要学上可接受的常规剂型。所述的虎杖苷溶液以及用冻干制品配制的溶液中，虎杖苷浓度可达20mg/ml以上。
本发明所述的一种不含有机溶剂的虎杖苷药物组合物的制备方法包括以下步骤：
(1)配制溶解虎杖苷所用的溶剂，调ph值至5.0～9.0；
(2)称取处方量的聚乙二醇十二羟基硬脂酸酯和虎杖苷溶于部分处方量的溶剂中，室温下搅拌使其完全溶解，补加溶剂至全量；
(3)将步骤2)所得药液过由1万分子量超滤膜包组成的超滤系统除热原；
(4)取超滤后的药液进行中间体检验，检验项目为含量、ph值、细菌内毒素等项目，检验结果符合要求后，过0.22μm除菌滤膜进行除菌过滤；
(5)除菌过滤后的按照规定灌封体积进行灌封、灭菌、灯检。即得。
或者
本发明所述的一种不含有机溶剂的虎杖苷药物组合物的制备方法还包括以下步骤：
(1)配制溶解虎杖苷所用的溶剂，调ph值至5.0～9.0；
(2)称取处方量的聚乙二醇十二羟基硬脂酸酯和虎杖苷溶于部分处方量的溶剂中，室温下搅拌使其完全溶解，补加溶剂至全量；
(3)将步骤2)所得药液过由1万分子量超滤膜包组成的超滤系统除热原；
(4)取超滤后的药液进行中间体检验，检验项目为含量、ph值、细菌内毒素等项目，检验结果符合要求后，过0.22μm除菌滤膜进行除菌过滤；
(5)除菌过滤后药液根据中间体含量调整灌装体积进行灌装、冷冻干燥，即得。
综上所述，本发明的有益效果是：本发明的一种不含有机溶剂的虎杖苷药物组合物中，聚乙二醇十二羟基硬脂酸酯的用量为5～25mg/ml，优选为10～15mg/ml时可以极大的增加虎杖苷的溶解度，且在高温灭菌及贮藏过程中能够有效保证产品质量，解决了虎杖苷注射液采用有机溶剂作为溶剂时所存在的安瓿灌封过程易产生泡头的问题，适合放大生产并能更好地满足临床用药的需求。
具体实施方式
现通过以下实施例来进一步描述本发明的技术效果，应理解为这些实施例仅用于例证的目的，不限制本发明的范围，同时本领域普通技术人员根据本发明所做的显而易见的改变和修饰也包含在本发明范围之内。
为保证试验结果的一致性，本发明实施例使用了相同来源和批次的原料、辅料、安瓿、管制注射剂瓶。
实施例1：
制备工艺：配制碳酸钠-碳酸氢钠缓冲液备用；称取处方量的聚乙二醇十二羟基硬脂酸酯及虎杖苷加入部分处方量的碳酸钠-碳酸氢钠缓冲液中，室温下搅拌使之完全溶解，补加碳酸钠-碳酸氢钠缓冲液至全量；超滤除热原；取超滤后药液检含量、ph值、细菌内毒素等项目；中间体检验结果合格后过0.22μm除菌滤膜进行除菌过滤；灌封；灭菌；灯检，即得虎杖苷注射液。
实施例2：
制备工艺：配制碳酸钠-碳酸氢钠缓冲液备用；称取处方量的聚乙二醇十二羟基硬脂酸酯及虎杖苷加入部分处方量的碳酸钠-碳酸氢钠缓冲液中，室温下搅拌使之完全溶解，补加碳酸钠-碳酸氢钠缓冲液至全量；超滤除热原；取超滤后药液检含量、ph值、细菌内毒素等项目；中间体检验结果合格后过0.22μm除菌滤膜进行除菌过滤；灌封；灭菌；灯检，即得虎杖苷注射液。
实施例3：
制备工艺：配制碳酸钠-碳酸氢钠缓冲液备用；称取处方量的聚乙二醇十二羟基硬脂酸酯及虎杖苷加入部分处方量的碳酸钠-碳酸氢钠缓冲液中，室温下搅拌使之完全溶解，补加碳酸钠-碳酸氢钠缓冲液至全量；超滤除热原；取超滤后药液检含量、ph值、细菌内毒素等项目；中间体检验结果合格后过0.22μm除菌滤膜进行除菌过滤；灌装、冷冻干燥，即得虎杖苷冻干粉针。
实施例4：
制备工艺：配制碳酸钠-碳酸氢钠缓冲液备用；称取处方量的聚乙二醇十二羟基硬脂酸酯及虎杖苷加入部分处方量的碳酸钠-碳酸氢钠缓冲液中，室温下搅拌使之完全溶解，补加碳酸钠-碳酸氢钠缓冲液至全量；超滤除热原；取超滤后药液检含量、ph值、细菌内毒素等项目；中间体检验结果合格后过0.22μm除菌滤膜进行除菌过滤；灌装、冷冻干燥，即得虎杖苷冻干粉针。
利用本发明所制得的虎杖苷注射液或者虎杖苷冻干粉针的稳定性较好，处方工艺适用于大生产。本发明解决了含有高浓度有机溶剂的虎杖苷注射液在安瓿灌封过程中出现的泡头及临床应用不便等问题。利用本发明所制得的虎杖苷注射液及虎杖苷冻干粉针按照《中国药典》2015版第四部《原料药物与制剂稳定性试验指导原则》，分别进行了加速试验及长期试验，考察了在制剂在温度40℃士2℃、相对湿度75％士5％的条件下放置6个月，在30℃士2℃、相对湿度65％士5％的条件下放置24个月的药物稳定性。结果在上述试验条件下产品质量稳定，各项检测指标均符合本品质量标准的规定。
药理实验结果表明：利用本发明制得的虎杖苷注射液及虎杖苷冻干粉针无溶血性、无过敏性、无刺激性，符合注射给药的要求。
研究结果如下：
表1含不同用量的聚乙二醇十二羟基硬脂酸酯的虎杖苷药物组合物成品质量考察结果
取4个实施例所得样品，置于温度为40℃±2℃、相对湿度为75％±5％的条件下放置6个月，分别于第0、1、2、3、6个月取样检测相关项目，结果详见表2。
表2加速试验测定结果
结果表明，上述试验条件下存放的4个实施例的虎杖苷药物组合物，分别于1、2、3、6个月取样分析，与0月数据和图谱结果比较。本品加速条件下放置6个月，其性状、ph值、有关物质、不溶性微粒、可见异物及含量与0月数据和图谱比较无明显变化，各项指标均比较稳定。说明在本试验条件下，本品质量较为稳定。
取4个实施例所得样品，置于温度为30℃±2℃、相对湿度为65％±5％的条件下放置24个月，分别于第0、3、6、9、12、18、24个月取样检测相关项目，结果详见表3。
表3长期试验测定结果
结果表明：上述试验条件下存放的四个实施例的虎杖苷药物组合物，分别于3、6、9、12、18、24、36个月取样分析，与0月数据和图谱结果比较。本品室温条件下放置24个月，其性状、ph值、有关物质、不溶性微粒、可见异物及含量与0月数据和图谱比较无明显变化，各项指标均比较稳定。说明在本试验条件下，本品质量较为稳定。