本发明涉及一种dir-peg-plga荧光纳米囊的制备方法。
背景技术：
纳米载药系统（nano-drugdeliverysystem）是指药物与载体材料一起构成的粒径为1～1000nm的纳米级药物输送系统，包括纳米囊、纳米粒、纳米球、纳米乳等。其中，纳米囊是一种药库膜壳型载体，由高分子材料外壳与液状内核构成，药物分散于外壳材料或溶解于液状内核中，其稳定性好，对亲水或亲脂性药物均适用。但纳米囊进入血液循环后大部分被肝、脾等器官快速摄取，在循环系统中停留时间较短。而在纳米级尺寸下，对载体材料进行表面修饰后，所制得的载药系统可呈现长循环效果，具有靶向给药、缓/控释释药、提高生物利用度、降低毒副作用等特点。
聚乳酸-羟基乙酸共聚物（plga）具有毒性小、生物相容性好的特点，是被美国fda批准的注射剂药用辅料，广泛用于抗肿瘤药物的载药系统中。聚乙二醇（peg）是一种无毒的水溶性聚合物，具有高度亲水性、良好的生物相容性及血液相容性；与plga共聚后，能够有效阻止调理素在plga纳米粒表面的吸附，使纳米粒不被网状内皮系统（res）识别为异物，从而实现长循环。peg-plga用于静脉注射给药，可以调节纳米粒的生物降解行为和释药方式。1,1′-二十八烷基-3,3,3′,3′-四甲基吲哚三羰花青碘（1,1′-dioctadecyl-3,3,3′,3′-tetramethylindotricarbocyanine，简称dir）是一种亲脂性的羰花青荧光染料，常用于细胞或亚细胞的染色及结构成像；其光吸收在近红外区域，且荧光强度较大、光稳定性好、可穿透动物组织、背景干扰小，因此目前也用于动物活体成像的示踪。但dir疏水性较强限制了其在生物活体内的广泛应用，近年来以其作为纳米示踪剂的研究还较少；而采用纳米技术可以增强dir的水溶性，制成纳米制剂后注射给药可对载药系统进行吸收分布的示踪研究。
技术实现要素：
本发明的目的在于提供一种dir-peg-plga荧光纳米囊的制备方法。
本发明通过下面技术方案实现：
一种dir-peg-plga荧光纳米囊的制备方法，包括如下步骤：将10-20份plga溶于40-50份含有5-9份dir的乙酸乙酯中，加入2-4份去离子水，在避光冰浴条件下，超声40-50s，功率为90-100w，频率为17-19khz，形成油包水初乳；将初乳加入25-35份含有7-9份peg-plga的乙酸乙酯中，超声5-7s，功率为75-85w，频率为17-19khz，形成乳液；将乳液加入25-35份质量分数为0.4％的pva溶液，超声60-80s，功率为60-70w，频率为17-19khz，形成水包油包水复乳；将复乳用70-80份去离子水稀释，于通风橱内避光搅拌23-25h，挥去乙酸乙酯，最后将所得乳液以6500r/min离心15-20min，收集沉淀，再以水洗涤并同法离心3次，收集得蓝绿色乳液即得；各原料均为重量份。
优选地，所述的制备方法中，超声45s，功率为95w。
优选地，所述的制备方法中，超声6s，功率为80w。
优选地，所述的制备方法中，超声70s，功率为65w。
优选地，所述的制备方法中，于通风橱内避光搅拌24h。
优选地，所述的制备方法中，将所得乳液以6500r/min离心18min。
本发明技术效果：
该方法简便、快捷、易操作，成功制备了具有荧光特性的dir-peg-plga纳米囊，所制纳米囊体外生物相容性较好，有望成为一种安全的药物光学示踪载体。
具体实施方式
下面结合实施例具体介绍本发明的实质性内容。
实施例1
一种dir-peg-plga荧光纳米囊的制备方法，包括如下步骤：将15份plga溶于45份含有7份dir的乙酸乙酯中，加入3份去离子水，在避光冰浴条件下，超声45s，功率为95w，频率为18khz，形成油包水初乳；将初乳加入30份含有8份peg-plga的乙酸乙酯中，超声6s，功率为80w，频率为18khz，形成乳液；将乳液加入30份质量分数为0.4％的pva溶液，超声70s，功率为65w，频率为18khz，形成水包油包水复乳；将复乳用75份去离子水稀释，于通风橱内避光搅拌24h，挥去乙酸乙酯，最后将所得乳液以6500r/min离心18min，收集沉淀，再以水洗涤并同法离心3次，收集得蓝绿色乳液即得；各原料均为重量份。
实施例2
一种dir-peg-plga荧光纳米囊的制备方法，包括如下步骤：将10份plga溶于40份含有5份dir的乙酸乙酯中，加入2份去离子水，在避光冰浴条件下，超声40s，功率为90w，频率为17khz，形成油包水初乳；将初乳加入25份含有7份peg-plga的乙酸乙酯中，超声5s，功率为75w，频率为17khz，形成乳液；将乳液加入25份质量分数为0.4％的pva溶液，超声60s，功率为60w，频率为17khz，形成水包油包水复乳；将复乳用70份去离子水稀释，于通风橱内避光搅拌23h，挥去乙酸乙酯，最后将所得乳液以6500r/min离心15min，收集沉淀，再以水洗涤并同法离心3次，收集得蓝绿色乳液即得；各原料均为重量份。
实施例3
一种dir-peg-plga荧光纳米囊的制备方法，包括如下步骤：将20份plga溶于50份含有9份dir的乙酸乙酯中，加入4份去离子水，在避光冰浴条件下，超声50s，功率为100w，频率为19khz，形成油包水初乳；将初乳加入35份含有9份peg-plga的乙酸乙酯中，超声7s，功率为85w，频率为19khz，形成乳液；将乳液加入35份质量分数为0.4％的pva溶液，超声80s，功率为70w，频率为19khz，形成水包油包水复乳；将复乳用80份去离子水稀释，于通风橱内避光搅拌25h，挥去乙酸乙酯，最后将所得乳液以6500r/min离心20min，收集沉淀，再以水洗涤并同法离心3次，收集得蓝绿色乳液即得；各原料均为重量份。
该方法简便、快捷、易操作，成功制备了具有荧光特性的dir-peg-plga纳米囊，所制纳米囊体外生物相容性较好，有望成为一种安全的药物光学示踪载体。