用于改善血脂、脂肪肝、脂肪肝炎及血糖调节的组合物的用途及制备方法与流程

本发明提供一种具改善血脂、脂肪肝、脂肪肝发炎及血糖调节的薏仁萃取物及其相关组合物，及制备该组合物方法与用途。

背景技术：

肥胖和胰岛素失调造成的肝脏疾病，已经是近年来全球不容忽视的健康问题。脂肪肝为非酒精性脂肪肝疾病的初始阶段，是一种常见的代谢症状，也就是由脂质代谢失衡而造成。目前已有不少的临床数据显示，「脂肪肝」亦会步入「肝硬化」一途，而发生脂肪性肝炎及肝坏死的症状。

有鉴于此，如何开发源自植物的机能性原料或制备物等萃取物或组合物来有助于降血糖、降血脂与抗脂肪肝及脂肪肝发炎、缓解慢性炎症等症状，特别是藉由食品原料的萃取物来解决现有技术的缺失，实为相关技术领域者目前所迫切需要解决问题。

技术实现要素：

因此，本发明的目的是以解决目前并无特定药物、天然物或萃取物具有同时可改善脂肪肝、肝炎以及调控血糖、血脂的现有技术问题。

本发明为解决习知技术问题所采用的技术手段是提供一种薏仁萃取物在用于制备改善肝炎及血糖调节的组合物中的用途，其中所述组合物由薏仁(coixlacryma-jobi)萃取物及其活性成分所组成，所述薏仁萃取物是选自薏仁(coixlacryma-jobi)水萃物或薏仁(coixlacryma-jobi)酒水萃物，其中所述组合物是以有效剂量施予所需个体。

本发明提供一种用于改善血脂、脂肪肝、脂肪肝炎及血糖调节的组合物的用途，所述组合物由薏仁(coixlacryma-jobi)萃取物及其活性成分所组成，所述薏仁萃取物选自薏仁(coixlacryma-jobi)水萃取物、或薏仁(coixlacryma-jobi)酒水萃取物，其中所述组合物以有效剂量施予所需个体。

本发明提供一种组合物在制备用于改善血脂、脂肪肝、脂肪肝炎及血糖调节的药物或/和食品或/和膳食补充物中的用途，所述组合物由薏仁(coixlacryma-jobi)萃取物及其活性成分所组成，所述薏仁萃取物选自薏仁(coixlacryma-jobi)水萃取物、或薏仁(coixlacryma-jobi)酒水萃取物，其中所述组合物以有效剂量施予所需个体。

在本发明的一实施例中，所述施予方式包含口服给药。

在如上文所述的本发明的实施例中，其中所述组合物每次施予所需个体的有效剂量为750～2250毫克/公斤体重，其中所述薏仁萃取物的重量百分比为0.05％～5％。

在本发明的一实施例中，所述的所需个体选自健康个体、高血脂个体、肝炎个体、脂肪肝个体或高血糖个体中的一种或多种。

在如上文所述的本发明的实施例中，所述组合物具有改善该所需个体葡萄糖耐受性、降低该所需个体空腹血糖值的效果。

较佳地，前述脂肪肝个体更包括非酒精性脂肪肝个体。

较佳地，前述肝炎个体更包括脂肪性肝炎个体、非酒精性脂肪肝炎个体。

在如上文所述的本发明的实施例中，所述组合物具有降低麸草酸转氨脢(即谷草转氨酶，ast)指数、麸丙酮酸转氨脢(即谷丙转氨酶，alt)指数的功效。

在本发明的一实施例中，所述组合物具有降低血浆总胆固醇(tc)值、降低低密度脂蛋白胆固醇(ldl-c)值的功效。

在本发明的一实施例中，所述组合物具有治疗或/和预防脂肪肝(steatosis)、脂肪性肝炎(steatohepatitis)的功效。

较佳地，所述组合物具有有效降低肝脏三酸甘油酯(即甘油三酯)达14％～18％、减少肝脏脂肪堆积、改善脂肪肝症状的效果。

由上述必要技术手段所衍生的附属技术手段为，更包括医药上可接受的载剂，所述组合物是用于制备药品、膳食补充物、食品、保健食品。

在如上文所述的本发明的实施例中，所述薏仁萃取物是以萃取液通过超音波辅助萃取而获得该组合物。

在本发明的一实施例中，所述超音波辅助萃取是选自脉冲式超音波辅助萃取或连续震荡超音波辅助萃取。

较佳地，所述超音波辅助萃取的功率为50w～800w，温度为20℃～80℃，时间为5秒～60分钟。

较佳地，所述薏仁萃取物是以薏仁与萃取液的比例范围为1:3～1:20，，进行萃取而获得。

由上述必要技术手段所衍生的附属技术手段为，其中薏仁萃取物是以水为萃取液，进行萃取而获得。

由上述必要技术手段所衍生的附属技术手段为，其中薏仁萃取物是以稀醇为萃取液，进行萃取而获得，其中稀醇萃取液中醇与水的体积比例范围为1～99：99～1。

附图说明

图1为本发明一实施例的动物体重变化图。

图2为本发明实施例的动物喂食食物有效使用率图。

图3为本发明实施例的脂肪重量量测图。

图4为本发明实施例的肝脏重量量测图。

图5为本发明实施例的肝脏三酸甘油酯(tg)值。

图6为本发明实施例的肝脏胆固醇(cholesterol)值。

图7为本发明实施例的血浆麸草酸转氨脢(got)值。

图8为本发明实施例的血浆麸丙酮酸转氨脢(gpt)值。

图9为本发明实施例的肝脏苏木紫-伊红染色图。

图10为本发明实施例的脂肪苏木紫-伊红染色图。

图11为本发明实施例的血浆三酸甘油酯(tg)值。

图12为本发明实施例的血浆总胆固醇(tc)值。

图13为本发明实施例的血浆高密度脂蛋白胆固醇(hdl-c)值。

图14为本发明实施例的血浆低密度脂蛋白胆固醇(ldl-c)值。

图15为本发明实施例的葡萄糖耐受性试验图。

图16为本发明实施例的个体服用薏仁萃取物的血糖变化量测图。

图17为本发明实施例的血浆血浆尿素氮(bun)值。

图18为本发明实施例的血浆肌酸酐(creatinine)值。

具体实施方式

以下藉由特定的具体实施形态说明本发明的技术内容，熟悉此技艺的人士可由本说明书所揭示的内容而了解本发明的优点与功效。然本发明亦可藉由其他不同的具体实施形态加以施行或应用。

于本发明的一实施例中，薏仁是选自，但不限于红薏仁、精白薏仁与大薏仁，其中红薏仁是指薏苡籽实去除薏苡壳而得到者，另一方面红薏仁再去掉麸皮则得到精白薏仁。再者，前述薏仁品种可选自，但不限于大粒种薏仁(coixlacryma-jobivar.lacryma-jobi,var.major)、马援种薏仁(coixlacryma-jobivar.ma-yuan)、薏苡台中1号、薏苡台中2号、薏苡台中3号、薏苡台中4号、薏苡台中5号。

于本发明的一具体实施例中，该组合物可包括薏仁水萃物、薏仁酒水萃物。其中萃取液可选自水萃取液或酒水萃取液，于本发明另一实施例中，酒水萃取液亦可称为稀醇萃取液，其中酒水萃取液中的酒、水体积比例范围为1～99：99～1，亦即醇水体积比例范围为1～99：99～1。进一步，前述水萃物、酒水萃物可通过超音波辅助萃取(ultrasound-assistedextraction，uae)。于本发明的另一具体实施例中，活性成分是选自多糖体、中高极性成分与中低极性成分。

再者，于本发明另一实施例中，其中超音波辅助萃取可利用脉冲式或连续震荡等方式进行。举例而言，超音波震荡的功率为50w～800w，温度为20℃～80℃，时间为5秒～60分钟，薏仁与萃取液的比例范围为1:3～1:20。

于本发明的一具体实施例中，该组合物可包括医药上可接受的载剂、佐药或赋形剂；于本发明的另一具体实施例中，该组合物可用于制备药品、膳食补充物、食品、保健食品。

本文中所使用的术语「医药上可接受的载剂」是指为了药物制造过程的需要、便于药物剂量调配，或不同投药剂型等需求，根据习知医药组合技术将医药组合物与医药可接受载剂混合，合适的医药可接受载剂为此项技术领域中所熟知，其中该载剂可有广泛的形式。某些医药可接受载剂的处方可见于由美国医药协会及英国医药协会(americanpharmaceuticalassociationandthepharmaceuticalsocietyofgreatbritain)所出版的医药赋形剂手册(thehandbookofpharmaceuticalexcipients)中。举例而言，锭剂、胶囊、凝胶、溶液或悬浮液亦可包含下述成分：医药可接受赋形剂或载剂，其为无毒性、惰性固体或半固体、稀释剂、封装物质(encapsulatingmaterial)、凝胶基剂或任何形式的配方佐剂，例如：微晶纤维素(microcrystallinecellulose)、葡萄糖、乳糖、脱脂奶粉、淀粉、糊精、环状糊精、硅石、无水磷酸氢钙、磷酸镁、硬脂酸、硬脂酸镁，或人工香料等物质。另一方面，亦可将该萃取物与其他食品或饮料组合，以适于食用的样态，供生物体以口服方式服用。

再者，本文中所使用的术语「个体」是指为，举例而言，但不限于，包括人类、牛、猪、马、羊、狗、小鼠、大鼠、兔子及禽类，如鸡、鸭、鹅及火鸡。当然，本发明不限于此，于本发明另一实施例中，其中所述个体是选自健康个体、高血脂个体、肝炎个体、脂肪肝个体、高血糖个体。进一步，其中所述脂肪肝个体更包括非酒精性脂肪肝个体，其中所述肝炎个体更包括脂肪性肝炎个体、非酒精性脂肪肝炎个体

当然，本发明不限于此，「有效剂量」是指提供促进对于个体的具有改善脂肪肝，特别是改善非酒精性脂肪肝(steatosis/nafld)症状、改善肝炎，特别是改善脂肪性肝炎(steatohepatitis)症状、非酒精性脂肪肝炎(hapatitis/nash)症状、显著降低血浆的总胆固醇(tc)值及低密度脂蛋白胆固醇(ldl-c)值、降低麸草酸转氨脢(ast)指数与麸丙酮酸转氨脢(alt)指数、可显著改善血糖调控、可改善肝细胞损伤而维持肝细胞及肝细胞核完整性的有效果的量，而施予的方式可为口服、注射、鼻内、吸入、局部或经皮肤给药。其中，于本发明另一实施例，施予薏仁萃取物的有效剂量可选自0.01％薏仁萃取物、0.03％薏仁萃取物、0.05％薏仁萃取物、0.07％薏仁萃取物、0.09％薏仁萃取物、0.1％薏仁萃取物、0.3％薏仁萃取物、0.5％薏仁萃取物、0.7％薏仁萃取物、0.9％薏仁萃取物、1％薏仁萃取物、3％薏仁萃取物、5％薏仁萃取物、7％薏仁萃取物、9％薏仁萃取物、11％薏仁萃取物、13％薏仁萃取物、15％薏仁萃取物、17％薏仁萃取物、19％薏仁萃取物、21％薏仁萃取物、23％薏仁萃取物、25％薏仁萃取物。其中1％薏仁萃取物是可藉由酒水萃取液而获得薏仁酒水萃取物，3％薏仁萃取物是可藉由水萃取液而获得薏仁水萃取物。

实施例

实施例一、高脂肪饮食小鼠的动物模式

实验动物是选自c57bl/6雄性小鼠，年龄4周，其购自乐斯科公司(中国台湾)。其中实验动物是依美国「实验动物管理及使用指南(guideforthecareanduseof.laboratoryanimals)」与我国动物保护法(animalwelfareact)来进行养育与照顾。小鼠经适应环境与食物1周后，将它们随机分成对照组、控制组与至少一试验组，其中每组小鼠只数为大于或等于8只，高脂饮食的动物饲料热量如表一。动物饲料可分为正常饮食(ncd)饲料与高脂肪饮食(hfd)饲料。薏仁萃取物分别以高剂量(如3％)与低剂量(如1％)分别混入正常饮食(ncd)饲料(即1％薏仁萃取物混合饲料)与高脂肪饮食(hfd)饲料(即3％薏仁萃取物混合饲料)而喂食小鼠。其中薏仁萃取物每次施予小鼠个体的剂量为750～2250毫克/公斤体重。换言之，薏仁萃取物施予小鼠个体的剂量的重量百分比约为0.05％～5％。小鼠于此动物模式中喂食前述饲料8～12周。食物消耗和体重增加将分别每周测量。所有小鼠禁食18小时，并在牺牲前2天进行葡萄糖耐量试验(ipgtt)。

表一、高脂饮食的动物饲料热量

实施例二、动物体重变化及食物有效使用率(fer)

如图1，于本发明的一实施例中，不同组别的小鼠个体分别喂食正常饮食(ncd；wt)饲料、高脂肪饮食(hfd)饲料、1％薏仁萃取物混合饲料与3％薏仁萃取物混合饲料，其中1％薏仁萃取物为酒水萃取，3％薏仁萃取物为水萃取。其中小鼠个体体重自第0周(w0)至第10周(w10)通过电子磅秤进行量测记录与统计。再者，前述不同组别的小鼠饮食量(如图2)亦可藉由电子磅秤而进行量测。

实施例三、动物个体施予薏仁萃取物的脂肪重量及肝脏重量变化

如图3、图4，前述不同组别的小鼠牺牲后，其脂肪重量(如图3)及肝脏重量(如图4)可直接用电子磅秤进行测量。

实施例四、动物个体施予薏仁萃取物的肝脏三酸甘油酯(肝脏甘油三酯)和胆固醇的生化分析

如图5、6，小鼠个体经喂食薏仁萃取物后可有效降低肝脏三酸甘油酯(甘油三酯)达14％～18％(如图5所示，其中「**」代表降低程度极为显著p<0.01)，其中喂食3％薏仁萃取物混合饲料组动物个体的肝脏三酸甘油酯相较其它组别明显降低具统计学意义。再者，前述不同组别的小鼠个体肝脏胆固醇(cholesterol)值则如图6所示。

实施例五、肝脏脂肪性发炎指数

如图7、8，于本发明一实施例中，藉由量测小鼠血浆的麸草酸转氨脢(又称谷草转氨酶、got或ast)值(如图7，其中「*」，「**」代表降低程度显著，分别达p<0.05、0.01水平)及麸丙酮酸转氨脢(又称谷丙转氨酶，gpt或alt)值(如图8所示，其中「*」代表降低程度显著，p<0.05)，而可量测不同组别的小鼠经喂食不同的动物饲料后的肝脏脂肪性发炎指数。其中，小鼠经由喂食本发明的薏仁水萃物和/或薏仁酒水萃物均可显著改善因喂食高脂饲料导致的肝炎现象，降低麸草酸转氨脢(ast)指数与麸丙酮酸转氨脢(alt)指数。

实施例六、肝脏与及脂肪组织的苏木紫-伊红染色(hematoxylinandeosinstaining)

如图9、10，于本发明一实施例中，不同组别的小鼠牺牲后，取出肝脏及脂肪组织浸泡在4％paraformadehyde(多聚甲醛)固定处理，之后进行石蜡包埋及切片，肝脏组织型态进而以苏木紫-伊红(h&e)而染色(如图9所示)。其中图9a为喂食正常饮食(ncd；wt)饲料组的小鼠肝脏组织切片图。图9b为喂食高脂肪饮食(hfd)饲料的小鼠肝脏组织切片图，其中可观察到小鼠喂食高脂饲料而产生肝细胞病变现象，包括脂肪堆积、细胞增大呈不规则形状及皱褶、细胞核增大、产生气泡等病理现象。图9c为喂食含有本发明酒水萃取物的动物饲料的小鼠肝脏组织切片图，其中酒水萃取物虽无法减少油滴累积，但可维持肝细胞健康正常。图9d为喂食含有本发明水萃取物的动物饲料的小鼠肝脏组织切片图，可观察到水萃取物不仅可减少油滴累积，亦可同时维持肝细胞健康正常型态。换言之，动物因喂食高脂饲料导致脂肪肝及肝细胞损伤，藉由喂食本发明全谷薏仁的酒水萃物和/或薏仁的水萃物可维持细胞及细胞核完整性。

综合而言，生物个体经服用本发明的薏仁水萃取物和/或薏仁酒水萃取物可有效减少肝脏脂肪堆积、改善脂肪肝症状的效果。

另外，图10a为正常饮食(ncd；wt)组的小鼠脂肪组织切片图。图10b为高脂肪饮食(hfd)组的小鼠脂肪组织切片图。图10c为1％薏仁萃取物组的小鼠脂肪组织切片图。图10d为3％薏仁萃取物组的小鼠脂肪组织切片图。

实施例七、血清生化分析

如图11-14，小鼠的血清生化分析是使用fujidri-chem生化仪搭配的生化试片而量测血浆的三酸甘油酯(tg)值(如图11所示)、总胆固醇(tc)值(如图12所示，其中「*」，「**」分别代表降低程度达p<0.05，0.01显著水平)、高密度脂蛋白胆固醇(hdl-c)值(如图13所示)和低密度脂蛋白胆固醇(ldl-c)值(如图14所示，其中*，**代表降低程度具统计学上明显差异，分别达p<0.05，0.01)。其中，藉由喂食本发明全谷薏仁的酒水萃物具有改善因喂食高脂饲料而导致高血脂的症状，显著降低血浆的总胆固醇(tc)值及低密度脂蛋白胆固醇(ldl-c)值。

实施例八、葡萄糖耐受性试验

如图15，ipgtt腹腔注射葡萄糖耐受性试验。小鼠经由隔夜空腹后，给予注射葡萄糖溶液(3g/kgbodyweight)后于0、30、60、90与120分(min)利用聿新生物科技公司(bioptiktechnology,inc)如易立测血糖机进行小鼠血糖测量。其中auc是代表血糖浓度-时间曲线下的面积(areaundercurve)。小鼠经由喂食本发明的薏仁水萃取物和/或薏仁酒水萃取物均可显著改善因喂食高脂饲料导致的血糖调控不佳和/或高血糖(hyperglycermia)的现象。

实施例九、个体服用薏仁萃取物的血糖变化

如图16，个体服用薏仁萃取物的血糖变化量测值。于本发明一实施例中，不同组别的小鼠个体分别喂食正常饮食(ncd；wt)饲料、高脂肪饮食(hfd)饲料、1％薏仁萃取物混合饲料与3％薏仁萃取物混合饲料，小鼠个体血糖值自第0周(w0)至第10周(w10)进行量测记录与统计。其中小鼠个体喂食1％薏仁萃取物混合饲料与3％薏仁萃取物混合饲料组别者相较喂食高脂肪饮食(hfd)饲料组别者自第4周(w4)开始即具降低个体血糖值的趋势直到第10周动物牺牲，显示本发明揭露的薏仁萃取物可长期稳定动物血糖值且具统计上显著性差异。

综合言之，生物个体经服用本发明的薏仁水萃取物和/或薏仁酒水萃取物可有效改善葡萄糖耐受性与空腹血糖值(如图15、16所示)。

实施例十、肾脏安全性分析

如图17、18，小鼠的肾脏安全性分析系使用fujidri-chem生化仪搭配的芯片试片而量测血浆尿素氮(bun)值(如图17所示)及肌酸酐(creatinine)值(如图18所示)。

换句话说，藉由前述实施例可得本发明薏仁萃取物的功效如表二所示。

表二、薏仁萃取物的功效

综上，本发明所述的薏仁萃取物具有改善血脂、改善非酒精性脂肪肝(steatosis/nafld)症状、改善肝发炎，特别是改善脂肪性肝炎(steatohepatitis)症状、非酒精性脂肪肝发炎(hapatitis/nash)症状、显著降低血浆的总胆固醇(tc)值及低密度脂蛋白胆固醇(ldl-c)值、降低麸草酸转氨脢(ast)指数与麸丙酮酸转氨脢(alt)指数、可显著改善血糖调控、可有效改善葡萄糖耐受性与空腹血糖值、可改善肝细胞损伤而维持肝细胞及肝细胞核完整性等功效。

换言之，本发明所述的薏仁萃取物可同时具有改善脂肪肝、肝发炎及血脂、血糖调控功能。

上述实施例仅为说明本发明的原理及其功效，其目的在使熟习前述技术者能了解本发明的内容并据以实施，并非限制本发明。因此习于此技术的人士对上述实施例进行等效修饰、修改及变化仍不脱本发明的精神。本发明的权利范围应如所述权利要求所要求保护范围。