本发明涉及家畜养殖技术领域,具体涉及一种用于家畜产后补血的中药组合物配方及其制备工艺。
背景技术：
贫血多见于女性，其引起的主要原因有三,一为女性月经，二为女性怀孕时对生血物质的需求，三为产时失血，三者引发的贫血病往往需要较长的治疗过程。在治疗上，中西医的理念不同，治疗方式也不同。西医更讲究对症治疗，尽快恢复正常水平，中医则偏重整体观念，从根本出发，解决问题本源；且中药价廉易得，在解决哺乳家畜的产后补血问题上采用中药进行治疗，成本更低、整体效果更好，为此发明人开发了生血饮组方，该方以补气、补血为主,具有极佳的产后补血效果。
技术实现要素：
本发明的目的在于提供一种用于家畜产后补血的中药组合物配方，具有补气，补血，化瘀之效，能够抑制血小板聚集，改善造血功能。
为实现上述发明目的，本发明所采用的技术方案是：一种用于家哺乳家畜产后补血的中药组合物，包括如下重量份的原材料：黄芪1份、白芍1份、当归0.5份、川芎0.5份。
优选的，四种所述原材料中，以当归、川芎为一组，黄芪、白芍为另一组，分别采用乙醇溶液作为溶媒对两组原材料进行冷凝回流提取，提取完成后，合并提取液即得生血饮。
优选的，所述当归、川芎组采用40％浓度的乙醇作为溶媒，溶媒倍数为12倍，提取两次，每次的提取时间为2h。
优选的，所述黄芪、白芍组采用60％浓度的乙醇作为溶媒，溶媒倍数为3倍，提取四次，每次的提取时间为2h。
本发明的有益效果集中体现在：
一、通过黄芪、当归、川芎、白芍四种药物进行合理配伍，相较于传统的四物汤、当归补血汤、归脾汤、八珍汤等配方，补血、补气效果更好。
二、采用中草药作为原材料，材料易得，无毒副作用，更加的安全健康。
三、成本低，便于制取，提高了整体的经济效益。
具体实施方式
下面，将结合实施例的方式对本发明的具体内容进行详细的阐释。
实施例一
生血饮的制备方法：
按重量份分别称取当归0.5份、川芎0.5份、黄芪1份、白芍1份四种原材料，以当归、川芎为一组，黄芪、白芍为另一组，分别采用乙醇溶液作为溶媒对两组原材料进行冷凝回流提取，提取完成后，合并提取液即得生血饮，为了便于后续的销售生血饮原液可再进行消毒灭菌、灌装包装等后续补充工序。当然，也可以在现场直接进行投喂。
实施例二
生血饮的制备方法：与实施例一相同，其不同之处在于，所述当归、川芎组采用40％浓度的乙醇作为溶媒，溶媒倍数为12倍，提取两次，每次的提取时间为2h。
实施例三
生血饮的制备方法：与实施例一相同，其不同之处在于，所述黄芪、白芍组采用60％浓度的乙醇作为溶媒，溶媒倍数为3倍，提取四次，每次的提取时间为2h。
实施例四
以下将通过正交试验的方式对本发明所述的制备方法的进行验证。
以提取乙醇浓度(a)、提取溶媒倍数(b)、提取时间(c)为考察因素，每个因素三个水平进行优选实验，以指标成分阿魏酸、毛蕊异黄酮葡萄糖苷、芍药苷含量和固含物量的综合评分为评价指标，l9(34)正交试验对提取工艺进行验证，其中固定当归、川芎组提取次数为两次，黄芪、白芍组提取次数为四次。
(1)指标成分的测定：
1)色谱条件与系统适用性实验:照高效液相色谱法测定。色谱条件与系统适用性试验以十八烷基硅烷键合硅胶为填充剂；以乙腈-0.1％磷酸17:83为流动相，检测波长为250nm；柱温25℃。
2)对照品溶液的制备：分别取阿魏酸、毛蕊异黄酮葡萄糖苷、芍药苷对照品适量，精密称定，加甲醇制成每1ml含12.44μg、31,472ug、21.8ug的对照品溶液。
3)供试品溶液的制备:取提取液1ml于10ml容量瓶中用相应溶媒定容，经0.45μm微孔滤膜滤过，即得。
(2)固含物量测定：
精密量药材的提取液50ml，置已干燥至恒重的蒸发皿中，在水浴锅上蒸干后，于干燥箱中105℃干燥3h，置干燥器中冷却30min，迅速精密称定重量。
(3)综合评分的计算：
测定阿魏酸、毛蕊异黄酮葡萄糖苷、芍药苷的含量和固含物量，结果按阿魏酸量：固含物量＝70∶30，毛蕊异黄酮葡萄糖苷：芍药苷：固含物量＝35:35:30进行综合评分计算。
试验因素及水平设计见表1,2,3,4。试验结果及统计结果分别见表5,6。
表1当归、川芎组l9(34)因素水平表
表2当归、川芎组正交实验结果
表3黄芪、白芍l9(34)因素水平表
表4黄芪、白芍组正交实验结果
表5当归、川芎组正交方差分析
表6黄芪、白芍组正交方差分析
试验结果及统计结果分别见表2,4,5，6。由表5,6可见，乙醇浓度(a)、提取倍数(b)、提取时间(c)对综合评分的影响不显著。根据k值并结合工业生产实际，确定当归、川芎组a1b1c1为最佳生产工艺，即12倍40％乙提取2次，每次2h。黄芪、白芍组最佳提取工艺为a1b1c1，即3倍60％乙提取4次，每次2h。
表7正交实验验证结果
由表7可知，当归、川芎组综合评分rsd％为1.28％，黄芪、白芍组综合评分rsd％为1.06％，表明所选工艺稳定可行。结果表明，本发明所述的生血饮提取工艺重复性好，拟合结果合理、可靠稳定。
实施例五
生血饮的药效验证
生血饮由当归、川芎、黄芪、白芍组成，该方药材组分具有补气，补血，化瘀之效，在有关研究中表明该方具有抑制血小板聚集，改善造血功能的效果，为验证其在哺乳家畜产后补血上的效果，特开展相关药理实验，为该方的有效性提供依据。
1试剂及仪器设备
hemavet950fs动物血细胞分析仪；光学显微镜。
2药理模型的构建
选健康产后雌鼠常规饲养7d,然后按照体质量利用均衡随机法随机分为正常组、模型组、生血饮低剂量组、生血饮中剂量组、生血饮高剂量组,每组10只。除正常组外,其余组均采用尾部放血的方式连续放血三天构建失血产后雌鼠模型，随后每组各随机取1只造模小鼠,查外周血象、骨髓象,验证是否成模。证实成模后,正常组、模型组小鼠每天给予0.2ml生理盐水灌胃1次；生血饮低、中、高剂量组分别每天给予40mg/kg、200mg/kg、400mg/kg灌胃1次。各组均连续灌胃14d,第15天定为取材时间。
3检测指标
外周血象：于造模后第15天,各组小鼠采用摘眼球法取血,利用动物血细胞分析仪检测外周血细胞数量。(外周血白细胞(wbc)、血红蛋白(hb)、血小板(plt)、bmmncs)
bmmncs分离提取:将小鼠麻醉后至死,无菌条件下提取分离小鼠的股骨、胫骨,无菌d-hank,s液冲洗附着骨表面的软组织,剪去骨两端暴露骨髓腔,用含肝素l-dmem液反复冲洗骨髓腔并吹打骨髓液,将其制成单细胞悬液；在离心管底部置入淋巴细胞分离液,按照1:1的比例将单细胞悬液缓慢加在分离液表面,2000r/min离心200min后,制备单细胞悬液,40×10倍显微镜下计数bmmncs。运用spss22.0软件进行统计学分析研究。计数资料采用均数±标准差(xˉ±s)(xˉ±s)表示,比较采用t检验,p<0.05为差异有统计学意义。实验结果见表8。
4实验结果
模型组小鼠外周血白细胞(wbc)、血红蛋白(hb)、血小板(plt)和bmmncs计数均明显低于正常组(p均<0.05)；生血饮各剂量组各指标均明显高于模型组(p均<0.05)。
表8生血饮药理实验结果
注：①与正常组相比，p<0.05,②与模型组相比，p<0.05，③与生血饮低剂量组相比，p<0.05
结果表明生血饮在在治疗哺乳家畜的产后补血上相较模型组，生血饮各剂量组最有显著性，但中剂量组与高剂量组无显著性。综上，生血饮组方对治疗产后补血具有疗效。
实施例六
生血饮组方与其他经典补血处方药效对比研究。
1药理模型的构建
选健康产后雌鼠常规饲养7d,然后按照体质量利用均衡随机法随机分为正常组、模型组、生血饮组、四物汤组、当归补血汤组、归脾汤组、八珍汤组，每组10只。除正常组外,其余组均采用尾部放血的方式连续放血三天构建失血产后雌鼠模型，随后每组各随机取1只造模小鼠,查外周血象、骨髓象,验证是否成模。证实成模后,正常组、模型组小鼠每天给予0.2ml生理盐水灌胃1次；生血饮组、四物汤组、当归补血汤组、归脾汤组、八珍汤组组分别每天给予400mg/kg(水提浸膏)灌胃1次。各组均连续灌胃14d,第15天定为取材时间。
2检测指标
外周血象：于造模后第15天,各组小鼠采用摘眼球法取血,利用动物血细胞分析仪检测外周血细胞数量。(外周血白细胞(wbc)、血红蛋白(hb)、血小板(plt)、bmmncs)
bmmncs分离提取:将小鼠麻醉后至死,无菌条件下提取分离小鼠的股骨、胫骨,无菌d-hank,s液冲洗附着骨表面的软组织,剪去骨两端暴露骨髓腔,用含肝素l-dmem液反复冲洗骨髓腔并吹打骨髓液,将其制成单细胞悬液；在离心管底部置入淋巴细胞分离液,按照1:1的比例将单细胞悬液缓慢加在分离液表面,2000r/min离心200min后,制备单细胞悬液,40×10倍显微镜下计数bmmncs。运用spss22.0软件进行统计学分析研究。计数资料采用均数±标准差(xˉ±s)(xˉ±s)表示,比较采用t检验,p<0.05为差异有统计学意义。
3、实验结果
结果见表9。
表9各组方药理效果的比较
表9各组方药理效果的比较
注：①与正常组相比，p<0.05；②与模型组相比，p<0.05；③与四物汤组相比，p<0.05；④与当归补血汤相比，p<0.05；⑤与归脾汤相比，p<0.05；⑥与八珍汤相比，p<0.05。
四物汤：当归15g、川芎8g、白芍10g、熟地黄15g。
当归补血汤：黄芪30g，当归6g。
归脾汤：白术9g,黄芪、党参各12g,当归、远志、茯苓、酸枣仁、龙眼肉各10g,木香、甘草各5g、大枣3枚。
八珍汤：人参、白术、白茯苓、当归、川芎、白芍药、熟地黄、甘草(炙)各30g。
生血饮：黄芪：白芍：当归：川芎为1：1：0.5：0.5。
综合分析，生血饮相对四物汤、当归补血汤、归脾汤、八珍汤在治疗哺乳家畜后补血方面具有显著性疗效，可见生血饮在该方面具有一定的优势，也体现了该方在这一方面具有创新性。