一种酒炒黄芩的炮制方法及应用与流程

本发明涉及中药饮片炮制领域，尤其涉及一种酒炒黄芩的炮制方法及应用。

背景技术：

黄芩scutellariabaicalensisgeorgi.为唇形科黄芩属多年生草本植物，以根入药。作为我国传统中药材，产地遍布内蒙古、辽宁、河北、山西等地，且以河北承德地区药材质量最佳。随着近年来对黄芩药理作用研究的不断深入，现已明确药材中的黄酮类成分在利尿降压、抗菌消炎、抗病毒、保肝利胆、抗过敏镇静等方面具有一定作用。药理学研究结果为黄芩在临床的应用提供了可靠的科学依据，但不同炮制方式对药材中化学成分的影响也具有一定差异。

目前黄芩的炮制方式包括炒黄芩、姜黄芩、生黄芩、蜜黄芩、酒黄芩和黄芩炭六种，其中生黄芩、酒黄芩和黄芩炭的应用最为广泛。黄芩的传统加工方式为去除杂质后放晾，一般不进行蒸煮处理，直至应用于临床治疗前再进行二次加工。由于黄芩栓皮厚度较大，透气性不佳，且易受到环境温度和湿度的影响，均增强了药材中酶的活性，加速黄芩苷类成分的酶解，严重影响药材质量。

目前酒炒黄芩炮制工艺种样繁多，但是缺乏确切的炮制参数，过于依赖操作者的经验，始终没有形成统一的工艺标准，特别是缺乏炮制工艺对饮片中有效成分含量影响的研究，导致酒炒黄芩中有效成分黄芩苷、黄芩素的含量损耗较大，且含量极不稳定，进而导致其制备药品质量的稳定性和临床疗效难以控制。

本研究旨在探讨酒炒黄芩炮制工艺对黄芩化学成分及产品质量的影响，以期指导临床中药材炮制加工，提高药材的安全性和治疗效果。

技术实现要素：

基于以上现状，本发明的目的是针对现有技术中的不足，从中医药角度提供一种有效提高酒炒黄芩中黄芩苷和/或黄芩素含量的炮制方法，减少炮制过程中有效成分的损耗。本发明技术方案如下：

本发明的第一个目的是提供一种酒炒黄芩的炮制方法，所述方法包括取黄芩药材，润透，切薄片烘干后，加入黄酒，所述黄芩药材与黄酒的料液质量比为1:1，闷润20min后炒制，炒制温度为170℃，炒干为止。

进一步的，所述切片厚度为1～2mm。

进一步的，所述炒制时间为15～20min。

本发明的第二个目的是提供前述的炮制方法制备所得的酒炒黄芩。

本发明的第三个目的是提供前述的酒炒黄芩的炮制方法在提高酒炒黄芩中有效成分黄芩苷含量中的应用。

本发明的第四个目的是提供前述的酒炒黄芩的炮制方法在提高酒炒黄芩中有效成分黄芩素含量中的应用。

本发明的第五个目的是提供前述的酒炒黄芩的炮制方法在提高酒炒黄芩中有效成分黄芩苷和黄芩素含量中的应用。

本发明的第六个目的是提供前述的酒炒黄芩的炮制方法在减少黄芩生药炮制过程中有效成分黄芩苷含量的损耗中的应用。

本发明的第七个目的是提供前述的酒炒黄芩的炮制方法在减少黄芩生药炮制过程中有效成分黄芩素含量的损耗中的应用。

本发明的第八个目的是提供前述的酒炒黄芩的炮制方法在减少黄芩生药炮制过程中有效成分黄芩苷和黄芩素含量的损耗中的应用。

本发明技术方案相对于现有技术有益效果在于：

本发明提供一种酒炒黄芩科学合理炮制工艺，通过大量实验筛选发现，在本发明提供的参数组合下，能够有效减少黄芩生药在炮制过程中有效成分黄芩苷、黄芩素的损耗，相对于其他酒炒黄芩炮制工艺，本发明制备得到的酒炒黄芩中黄芩苷和/或黄芩素含量显著提升，且黄芩苷含量显著高于《中国药典》2015版规定的“酒炒黄芩中黄芩苷含量不得少于8％”。本发明炮制方法能够保证酒炒黄芩制备药品的质量稳定性、临床疗效的稳定。

附图说明

图1为实施例1中制备的黄芩苷标准曲线。

图2为实施例1中制备的黄芩素标准曲线。

图3为实施例2正交试验中最佳工艺a1b1c1样品的高效液相检测图谱。

具体实施方式

下面的实施例可以使本领域的技术人员更加全面地理解本发明，但不以任何方式限制本发明。使用的原料、设备均为已知产品，均可通过商业途径获得。

实施例1分析方法

1.1色谱条件

hamiltonprp-x100c18色谱柱(4.1x250mm10um)，流动相为甲醇(a)-0.2％磷酸水(b)，洗脱梯度：

0～10min，流动相a为20％等度，流动相b为80％；

10～30min，流动相a由20％变为30％，流动相b由80％变为70％；

30～40min，流动相a由30％变为40％，流动相b由70％变为60％；

40～40.1min，流动相a由40％变为5％，流动相b由60％变为95％；

40.1～45min，流动相a为20％等度，流动相b为80％。

流速为1ml/min，柱温30℃，检测波长276nm，进样量10μl。

1.2黄芩供试品的制备

分别取黄芩生品和实施例2所示方法炮制得到的炮制品各0.5g，取0.5ml氨水润湿，加入50ml氯仿，超声(40kw，100khz)回流2h，补足失重，抽滤，滤液至于水浴锅上蒸干，后用50％甲醇溶解，再定容至20ml容量瓶中。作为样品液。过0.45um微孔滤膜，得供试品溶液。

1.3黄芩混合对照品的制备

取约2.5mg黄芩苷、黄芩素对照品至25ml容量瓶中，用50％甲醇溶解。得到约100ug/ml的黄芩混合对照品溶液。

1.4标准曲线的制备

将1.3中黄芩供对照品溶液(100ug/ml)依次稀释成浓度为2ug/ml，5ug/ml，10ug/ml，20ug/ml，30ug/ml，40ug/ml，50ug/ml，60ug/ml，70ug/ml，80ug/ml，90ug/ml的对照品溶液，分别进样10μl，测定黄芩苷黄芩素的峰面积，以浓度(ug/ml)为横坐标，以黄芩苷、黄芩素峰面积为纵坐标绘制两条标准曲线。黄芩苷见表1和图1，黄芩素见表2和图2。

表1黄芩苷对照品标准曲线数据

通过计算得出黄芩苷标准曲线为y＝9721.8x-553.6，r²＝0.9998

表2黄芩素对照品标准曲线数据

通过计算得黄芩素标准曲线y＝9493.5x-5950.9，r²＝0.9997

1.5精密度实验

黄芩生品供试品连续进样6次，每次10μl，测定供试品溶液中黄芩苷黄芩素的保留时间和峰面积，计算黄芩苷，黄芩素保留时间和峰面积的rsd。

表3黄芩苷精密度实验数据

表4黄芩素精密度实验数据

1.6稳定性实验

黄芩生品供试品分别在0,2,4,6,8,12h进样10μl，测定供试品溶液中黄芩苷黄芩素的保留时间和峰面积，计算黄芩苷，黄芩素保留时间和峰面积的rsd。

表5黄芩苷稳定性实验数据

表6黄芩素稳定性实验数据

1.7重复性实验

取黄芩生药(产地山西，批号：1812015，南京中山制药有限公司)六份，每份0.5g，按1.2方法制备供试品六份，分别测定六份平行供试品溶液中黄芩苷、黄芩素的保留时间和峰面积，计算保留时间和峰面积的rsd。

表7黄芩苷重复性实验数据

表8黄芩素重复性实验数据

1.8加样回收率实验

取实施例2所示方法炮制得到的酒炒黄芩各6份，每份约0.25g，加入0.5ml浓氨水润湿，在每份样品瓶中加入约0.05mg的黄芩苷、黄芩素，加入50ml氯仿，超声(40kw，100khz)回流2h，补足失重，抽滤，滤液至于水浴锅上蒸干，后用50％甲醇溶解，再定容至20ml容量瓶中。作为样品液。过0.45um微孔滤膜，得供试品溶液。

表9加样回收率实验数据

1.9黄芩生药含量测定

取黄芩生药(产地山西，批号：1812015，南京中山制药有限公司)，按1.2方法制备供试品，按照1.1色谱条件测定得到黄芩生药供试品溶液中黄芩苷含量为14.78％、黄芩素含量为1.512％。

实施例2酒炒黄芩的正交实验设计

酒炒黄芩炮制品炮制方法如下：

取黄芩药材，润透，切1～2mm薄片，烘干后，以一定料液质量比加入黄酒，闷润，炒制15-20min至炒干。确定以闷润时间(min)，炒制温度(℃)，料液比为考察因素，以黄芩苷、黄芩素的含量百分比为指标，分别设立三个水平，选用l9(33)正交实验。

分别取9份生黄芩药材(产地山西，批号：1812015，南京中山制药有限公司)每份50g，按正交表进行炮制，按1.2供试品制备方法制备供试品和1.3对照品，按照“1.1”中记载的色谱条件考察黄芩苷、黄芩素含量。实验因素和水平，正交实验结果及其方差分析等见表10、表11、表12。

表10正交因素水平表

表11正交实验结果表

表12方差分析表

由正交表实验及方差分析表得，酒炒黄芩的三个影响因素影响大小为b(炒制温度)＞c(料液比)＞a(闷润时间)。确定最佳工艺为a1b1c1，即闷润20min，170℃炒制，料液比1:1，相对于1.9测得的黄芩生药中，黄芩苷含量14.78％、黄芩素含量1.512％，经本发明方法炮制后，黄芩苷含量损失仅为(14.78-13.02)/14.78*100％＝11.91％，黄芩素含量损失仅为(1.512-1.232)/1.512*100％＝18.52％，且黄芩素含量远高于《中国药典》2015版规定的酒炒黄芩中黄芩苷含量不得少于8％。同时也可以看出，并非任意参数组合都能取得提高酒炒黄芩中黄芩苷和/或黄芩素含量的效果。

结果显示：

酒炒黄芩的正交工艺实验考察中，以黄芩苷、黄芩素的含量百分比为指标，根据此结果确定正交工艺实验的三因素三水平，经正交实验得出的结果确定最佳工艺为闷润时间20min，炒制温度170℃，料液比1:1，与单因素考察结果仅料液比不一样，考虑为三因素互相影响或实验药材个体差异的作用。

以上仅是本发明的优选实施方式，应当指出的是，上述优选实施方式不应视为对本发明的限制，本发明保护范围应当以权利要求所限定的范围为准。对于本技术邻域的普通技术人员来说，在不脱离本发明精神和范围内，还可以做出若干改进和润饰，这些改进和润饰也应视为本发明保护范围。