外泌体制剂及其制备方法和应用与流程

文档序号:25993481发布日期:2021-07-23 21:06阅读:来源:国知局

技术特征:

1.一种外泌体制剂的制备方法,其特征在于,包括以下步骤:

培养基因组中外源转入人成纤维细胞生长因子2基因的诱导多能干细胞,并收集细胞培养液;

从所述细胞培养液中提取得到外泌体溶液;

在所述外泌体溶液中加入3-羟基丁酸的可溶性盐,得到所述外泌体制剂。

2.根据权利要求1所述的制备方法,其特征在于,所述诱导多能干细胞的培养环境为:36℃~38℃恒温箱内,且气体环境中氧气浓度不高于1%。

3.根据权利要求1所述的制备方法,其特征在于,所述3-羟基丁酸的可溶性盐为3-羟基丁酸钠,所述3-羟基丁酸钠的终浓度为5μm~50μm。

4.根据权利要求1所述的制备方法,其特征在于,还包括以下步骤:在所述外泌体溶液中加入透明质酸和维生素c。

5.根据权利要求4所述的制备方法,其特征在于,所述透明质酸与所述外泌体溶液的体积比为(1~3):1,所述维生素c的终浓度为5ng/ml~50ng/ml。

6.根据权利要求1所述的制备方法,其特征在于,从所述细胞培养液中提取外泌体溶液包括以下步骤:去除所述细胞培养液中的细胞碎片,然后转移至截留分子量为10kda的超滤管中进行离心浓缩,得到所述外泌体溶液。

7.根据权利要求1~6任一项所述的制备方法,其特征在于,所述基因组中掺有人成纤维细胞生长因子2基因的诱导多能干细胞通过以下步骤制备得到:取诱导多能干细胞,转染含有人成纤维细胞生长因子2基因的慢病毒载体,然后进行单细胞培养和筛选,得到所述基因组中掺有人成纤维细胞生长因子2基因的诱导多能干细胞。

8.根据权利要求7所述的制备方法,其特征在于,所述含有人成纤维细胞生长因子2基因的慢病毒载体通过prlenti-puro载体与成纤维细胞生长因子2基因片段连接得到。

9.一种外泌体制剂,其特征在于,根据权利要求1~8任一项所述的制备方法制备得到。

10.一种护肤品,其特征在于,含有权利要求9所述的外泌体制剂。


技术总结
本发明涉及一种外泌体制剂及其制备方法和应用,制备方法包括以下步骤:培养基因组中外源转入人成纤维细胞生长因子2基因的诱导多能干细胞,并收集细胞培养液;从所述细胞培养液中提取得到外泌体溶液;在所述外泌体溶液中加入3‑羟基丁酸的可溶性盐,得到所述外泌体制剂。本发明制备得到的外泌体制剂可以显著提高皮肤的抗衰能力,在去皱、美白、淡斑、增加弹性等方面都具有很好的效果,而且成分比较天然,不易过敏和引起免疫反应,成分也容易被人体吸收和降解,临床应用非常安全有效。

技术研发人员:吴海涛;沈政;尤臻;程顺巧;侯怀信;黄春艳;刘廷翔;何敏仪
受保护的技术使用者:北昊干细胞与再生医学研究院有限公司;冠昊生物科技股份有限公司
技术研发日:2021.03.17
技术公布日:2021.07.23
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