专利名称：抗hiv三联组合的制作方法
技术领域：
本发明涉及治疗学组合应用齐多夫定，lamivudine和loviride，用于治疗人类免疫缺陷病毒(HIV)感染，并特别用于治疗AIDS或AIDS有关征候群(ARC)。
自从获得性免疫缺陷综合征(AIDS)作为一种免疫系统的致死性疾病开始引起医学界和公众注意至今已13年。3百万以上的人患了完全发病的AIDS，其中多数已死亡。对2000年可能发生的HIV感染病例数的可靠估计为4千万至多于1亿1千万。
现在一般认为人类免疫缺陷病毒(HIV)是AIDS和AIDS有关征候群(ARC)的发病原因。据信不仅HIV是AIDS的主要原因，而且单独HIV感染通常会随时间推移而引起极度的免疫缺陷，使病人致死。由于公众注意，AIDS已成为研究最深入的疾病之一，HIV也成为历史上研究最深入的病毒。尽管作了这些科学上的努力，仍然对此致命疾病无法有效治愈甚至没有满意的治疗方法。
已在美国被批准用于治疗HIV感染的抗病毒药物，即3′-叠氮基-3′-脱氧胸苷(AZT)，双脱氧胞苷(ddC)和双脱氧次黄苷(ddI)，均通过阻断逆转录发生作用。然而，HIV显示高突变率并且在几个月内就可在体内出现逆转录酶变体，即使在所述逆转录酶抑制因子存在下也能生产病毒DNA。换而言之，即HIV对这些药物变得具有抗性。这种抗性，以及核苷类逆转录酶抑制剂的毒性是AZT这类药物作用短暂的原因。
“集中三联治疗”被设计用于克服抗性问题。一项研究显示联合使用齐多夫定，双脱氧次黄苷，以及另一种药物nevirapine或pyridinone，在体外产生了与HIV复制不相容的病毒分离体(Chow Y-K等，Nature，volume 361，(1993))。然而，此实验的结果是不正确的，因为在非活性病毒的逆转录酶抑制因子中也发现了意外的突变(Chow Y-K等，Nature，Volume 364，(1993))。
WO 93/23021描述了一种用于治疗HIV感染的治疗学结合物，包含齐多夫定和另一种用于增强齐多夫定针对HIV种群的抗病毒活性的制剂，如不加入该制剂，则这种种群对齐多夫定抵抗。这项专利申请显示通过将所述病毒在体外暴露于“chloro-TIBO”(9-氯-4，5，6，7-四氢-5-甲基-6(3-甲基-2-丁烯基)-5-咪唑[4，5，i-jk]苯并二氮杂-2(1H)-硫酮)，或FTC((-)-2′，3′-双脱氧-5-氟-3′-thiacytidine)和lamivudine，可使齐多夫定抗性病毒变得齐多夫定再敏感。
EP-A-0513917描述了二联组合Lamivudine和一种HIV复制抑制因子。所述专利申请包括了体外研究资料，这些资料显示，当lamivudine与齐多夫定，双脱氧次黄苷，Ro 31-8539(N′-苯甲基-3[4a(S)，8a(S)-3(S)-(叔-丁氨基甲酰)十氢异喹啉-2-基]-2(R)-羟丙基]-N″-(喹啉-2-基-氨基甲酰)-L-天冬酰胺)，或TIBO((+)-S-4，5，6，7-四氢-5-甲基-6-(3-甲基-2-丁烯基)咪唑(4，5，i-jk)(1，4)-苯并二氮-2-(1H)硫酮)联合使用时，具有一定的协同抗HIV活性。
要解决的问题是希望找到一种相容制剂的组合，即显示对体内HIV感染有效，又能被HIV感染患者所耐受。术语“相容”含义是一种制剂(下文中称为“成分”)不对另一制剂的药代动力学曲线产生负性影响。
出乎意料地我们发现三联组合齐多夫定，lamivudine和loviride显示协同活性于重要的临床“替代标记”试验，即CD4细胞计数和p24抗原计数中。而且此种合用被病人良好耐受并且各成分互相兼容。更令人惊异的是接受三联用药的病人的临床状况显著改善。
本三联组合的各成分在本领域中是公知的。
齐多夫定，化学名为3′-叠氮基-3′-脱氧胸苷(AZT)，已确定可作为化疗制剂治疗HIV感染。齐多夫定也用于治疗具有无症状HIV感染的病人或抗-HIV-抗体阳性者。齐多夫定可被制备，如，按美国4,724,232中所述。
Lamivudine，化学名为(-)-2′，3′-双脱氧-3′-thiacytidine(3TC)，在欧州专利说明书No.0,382,526中详细描述。Lamivudine是一种抗病毒核苷类似物，含有一个oxathiolane残基取代糖残基。
Loviride，化学名为(±)-α-[(2-乙酰基-5-甲基苯基)氨基]-2，6-二氯代苯乙酰胺，详述于欧州专利申请EP-A-0,538,301中。Loviride是α-苯胺基苯乙酰胺(α-APA)类型的抗病毒非核苷逆转录酶抑制因子。
如已在上文中所述，出乎意外地发现合用这三种成分显示显著的体内协同抗HIV活性。
第一个显著的特征是中数CD4细胞计数从基线增加达约60％并在至少5个月后维持在高于基线25％以上。(基线是开始治疗时的CD4计数)。接受已确定的抗HIV药物如齐多夫定或lamivudine的病人的CD4计数通常显示增加约20％，并且随后所述CD4计数就又下降。即使是接受齐多夫定和loviride二联用药的病人也仅显示CD4增加约30％，并在数周后下降。
CD4细胞计数是重要的生物医学参数，即所谓的“替代标记”(以便不与在细胞表面呈递的标记混淆)，用于确定HIV感染病人免疫系统的状况并预测所述病人的临床状况。在T淋巴细胞细胞膜上和内部存在数种标记。这种标记，多数是糖蛋白，使T-淋巴细胞能被鉴定。对于大多数这些标记已制备了单克隆抗体，从而可用现代生物医学技术检测具有这些标记的细胞。单克隆抗体OKT4识别T辅助/诱导细胞，根据“分化簇”(Clusters of Differentiation)(CD).命名法，被OKT4抗体识别的标记称为CD4标记，具有这种标记的细胞称为CD4细胞。带有CD4标记的T-淋巴细胞也称为T4-细胞。CD4细胞记数之所以重要是因为CD4细胞特别是T4-细胞受HIV感染和损害。事实上，HIV-病毒颗粒(一种HIV-病毒颗粒)的外壳带有能紧密结合于上述CD4标记的病毒蛋白“突起”(spike)。这正使这种CD4携带细胞易受HIV感染。当病毒颗粒的“突起”结合于CD4携带细胞时，病毒的和细胞的膜融合。病毒核及其内容物于是被带进细胞内。一旦HIV病毒颗粒进入细胞，即随后发生一系列事件，如果这些事件得以完成，即导致新病毒颗粒从被感染细胞上出芽。通过不同的细胞病理机制，CD4细胞在HIV感染过程中逐渐被杀死或破坏。CD4细胞的丢失是免疫系统广泛损害的第一步。因此，CD4细胞总数是免疫系统状况的重要参数。
另一用于测定感染的阶段的“替代标记”是测定p24抗原总量。p24是HIV-病毒颗粒的核心蛋白。因此，测定血浆中p24抗原总量可给出病毒荷载量即存在于体内的病毒数目的估计。
然而，病人的唯一真实标记当然是，他的临床状况和他的健康状况。虽然这些参数难于定量，但下文所示的结果足以支持本发明。
可用本发明治疗或防止的病毒感染和相关临床状况的实例包括人类逆转录病毒感染如HIV，如，HIV1或HIV2，和人类T细胞lymphotropic病毒(HTLV)，如HTLV-I或HTLV-II感染。本发明的联合用药特别有用于治疗AIDS和相关临床状况如AIDS有关征候群(ARC)，进展性系统性淋巴腺病(PGL)，AIDS相关神经学症状如多发性硬化。本发明的组合特别可应用于由HIV引起或与HIV相关的无症状感染，原发感染或疾病。
应指出按照本发明，联合用药的各成分可同时，协同(concurrently)或依次给药。
根据本发明使用的化合物可以常规方法应用于病人。如上所述，上述联合用药的各成分可同时应用(如，在单一的药物配方中)或分开应用(如，在分开的药物配方中)。通常，联合用药可经局部，口服，经直肠或胃肠外(如，静脉内，皮下或肌肉内)途径施用。应指出，用药途径可根据要治疗的病人的病情的严重性不同而不同。
各成分各自的剂量在每日0.5～120mg/kg，优选1～90mg/kg并最优选每日3～20mg/kg。优选将所希望的剂量在全天中以合适的间隔以2，3，4，5，6或更多的分剂量给药。这些分剂量可以单位剂量形式施用，如每单位剂量形式含总量10～1500mg，优选20～1000mg，并最优选50～700mg的成分。
优选的治疗方案是200mg齐多夫定t.i.d.，lamivudine 300mg b.i.d.和loviride 100mg t.i.d.。
三联组合每两种成分每日总量的重量比可为1/10至10/1。最好每两种成分的重量比在1/2和2/1之间。
齐多夫定/lamivudine/loviride的重量比是1/1/0.5。实验部分三联组合齐多夫定(200mg t.i.d.)，lamivudine(300mg b.i.d.)和loviride(100mg t.i.d.)对二联组合齐多夫定(200mg t.i.d.)和loviride(100mg t.i.d.)在开放病例对照研究中进行分析。21名在基线测定p24抗原阳性的HIV-I感染病人包括在内。两组组合均被病人良好耐受。未观察到严重的药物诱导的安全相关的异常。在lamivudine和齐多夫定或loviride间未发现临床相关的药代动力学相互作用。
表1中比较了三联治疗病人组中治疗期间的中数CD4计数(％，相对于基线)，与二联治疗病人组中的中数CD4计数。
表2中比较了三联治疗病人组中的中数p24抗原计数(％，相对于基线)与二联治疗病人组中的中数p24抗原计数。临床评价10名病人开始了三联组合治疗。9名进行三联用药治疗的病人完成了20周的治疗。一名病人因为间发的感染而退出研究。
接受三联组合治疗的10名病人中7名临床上改善。治疗后，在基线时有ARC症候群并且临床状况很差的数名病人感染临床情况良好，并开始工作或旅游。两名其它病人维持稳定的临床状况。
表1
表权利要求
1.一种包含齐多夫定，lamivudine和loviride的组合。
2.权利要求1的组合，其中齐多夫定/lamivudine/loviride的重量比是1/1/0.5。
3.一种组合物，包含药物可接受载体和作为有效成分的有效量的齐多夫定，lamivudine和loviride。
4.权利要求3的组合物，其中齐多夫定/lamivudine/loviride的重量比是约1/1/0.5。
5.一种制备权利要求3或4中要求的组合物的方法，其中药物学可接受的载体与齐多夫定，lamivudine和loviride密切混合。
6.权利要求1中要求的组合作为药物的应用。
7.权利要求1中要求的组合的应用，用于制备治疗受HIV感染的病人的药物。
8.权利要求6或7要求的应用，其中各成分同时给药。
9.权利要求6或7要求的应用，其中各成分协同给药。
10.权利要求6或7要求的应用，其中各成分依次用药。
全文摘要
本发明涉及包含齐多夫定，lamivudine和loviride的治疗学组合，用于治疗人类免疫缺陷病毒(HIV)感染，并特别用于治疗AIDS或AIDS有关征候群(ARC)。
文档编号A61P37/04GK1151697SQ95193943
公开日1997年6月11日 申请日期1995年6月23日 优先权日1994年7月1日
发明者P·A·M·施托费尔斯, K·J·L·M·安德里斯 申请人:詹森药业有限公司