治疗狗的疼痛和炎症的cox－2选择性咔洛芬的制作方法

专利名称：治疗狗的疼痛和炎症的cox－2选择性咔洛芬的制作方法
技术领域：
本发明涉及用抗炎剂治疗狗的疼痛和炎症，这些抗炎剂是非类固醇性抗炎药(NSAID)，特别是这些药剂具有减少发生胃肠道副作用的功效，而这些副作用是狗中流行且具有潜在严重危害的问题。
背景技术：
正如本领域普通技术人员如兽医所熟知的那样，犬科动物，即狗，特别是老龄狗，非常容易患慢性炎症，如关节变性疾病。由于大量狗被视为宠物，或者出于利用的目的，如警卫犬或导盲犬，人们一直在努力寻找一种药剂，以阻止或消除终止这些炎症在狗身上的发展，或者至少减缓炎症的症状，如疼痛和水肿。近来专门用作抵抗人体，更用于狗体的消炎镇痛药是非类固醇性抗炎药(NSAID)，这一类型的抗炎药已被广泛使用，且此类型的用于人体的、新的、改进的药剂已被发现和发展了几十年。
但是，将NSAID用于狗体受到了限制，例如，美国食品药品管理局兽药委员会(FDA/CVM)在美国只批准了两种NSAID用于狗的治疗，即ARQUEL，甲氯芬那酸，和RIMADYL，咔洛芬。因此，对NSAID用于狗身上的治疗的安全性和有效性还缺乏经验和知识。在兽药方面，例如，NSAID的最常见的适应证是治疗关节变性疾病(DJD)，它在狗群中经常源于各种发育性疾病，例如，髋部发育异常，和骨软骨病，以及对关节的外部创伤。除了治疗慢性疼痛和炎症外，NSAID还可用于治疗狗的手术后的急性疼痛，以及与骨关节炎相关的临床症状。
对犬类作NSAID治疗的需求，连同不准许NSAID用于此目的，导致了被批准用于人体的NSAID在未批准情况下大量用于狗体，有时带来灾难性的后果。兽医学文献充满了用经批准用于人体的NSAID，例如吲哚美辛、萘普生、阿斯匹林、布洛芬、和保泰松，用在狗身上导致胃肠出血、穿孔和腹膜炎的报道。尽管用于人也会发生这些胃肠副作用而使病人苦恼，但狗还是经常接受不合适的高剂量，这是因为缺少合适剂量的信息，以及犬类固有的易发生这种胃肠副反应的特性。因此，迫切需要用于治疗狗的疼痛和炎症的安全而有效的NSAID。
用于治疗狗的安全有效的NSAID药剂的研究，必须处理严重的胃肠副反应、其他副反应，包括肾和肝的毒性的可能性。但是，最为严重的副反应是胃肠作用，例如单发或多发性溃疡，包括食道、胃、十二指肠或大、小肠的穿孔和出血。这些副反应通常较弱，但也可能是严重的，偶尔甚至会导致生命危险。实际上，用NSAID治疗狗的指数如此低，以致于成为该治疗的禁忌。
“治疗指数”有时一般是指药品的LD50对ED50的比例，旨在描述药品在产生其所欲达到的疗效时的可选择性。但是在这里所使用的“治疗指数”与动物健康领域中所使用的定义更为一致，即，动物的最大耐受剂量与最小有效剂量的比例。当然，在本发明中，“动物”是指狗。特别是犬类受试体的最大耐受剂量通常将利用大量不同的试验和技术来确定。例如，胃肠出血可以利用常用于检测粪便样品中潜血的试验方法来测定，同时可以用内窥镜检查来检测溃疡或穿孔的发生。当作为研究的一部分将动物处死时，尸检也能提供有价值的信息。
现有技术中迄今仍估计任何一种NSAID试用的药品，特别是用于犬类治疗的，其治疗指数都很低。人们总是希望这类药品的治疗指数不会低到不能用在狗身上的程度。因此，本发明的一个重要方面是令人惊奇地发现，这里所描述的抗炎组合物在用于治疗狗的疼痛和炎症时具有相当高的治疗指数，此外，唯独该抗炎组合物才具有这一未曾预料的特性而实际上排除了其他所有NSAID。
近年来，积累了大量的有关用NSAID治疗获得抗炎疗效的资料，同时也积累了产生严重胃肠副作用的作用机理的知识。尽管这些知识大部分是涉及NSAID用于人体上的情形，它们在很大程度上同样适用于在狗身上的作用机理，虽然有些明显的种类特异性。下文将对此作进一步的阐述。关于NSAID的治疗有效性，很长时间以来，人们就知道其作用机理是NSAID能减少炎症，是因为它们具有打断花生四烯酸级联的能力，花生四烯酸级联会导致前列腺素、血栓烷和白三烯的外原性生成。这些脂质化合物被统称为“类二十烷酸”，因为它们通常源于C20多不饱和脂肪酸和二十碳烯酸，其中最丰富的成分是花生四烯酸。花生四烯酸是cis-Δ5、cis-Δ8、cis-Δ11、cis-Δ14十二碳四烯酸，这是许多前列腺素和白三烯等炎症介体的主要前体。
在花生四烯酸级联的第一阶段，花生四烯酸作为被激素或蛋白酶、或被膜扰乱所导致的组织特异性刺激的结果而释放，并牵涉到特异性磷脂酶A2的作用。游离花生四烯酸盐在该级联的第二阶段作为双功能酶前列腺素内切过氧化物合成酶，也称之为前列腺素H合成酶(以后简称PGH合成酶)。其第一活性是作为环加氧酶，其第二活性涉及两电子还原。多数NSAID是作为PGH合成酶的环加氧酶活性的抑制剂，因此，阻碍各种前列腺素生成，局部地作为激素通过结合在特定细胞受体上而发挥它们的作用。前列腺素是非常强有力的，但也会很快异化。这些前列腺素中，有些是炎症过程的介体；但是，有些前列腺素也具有胃肠保护功能。阻断这些有益的前列腺素的生成是导致在用NSAID治疗时产生胃肠副反应的主要因素。因此，人们在不断寻找作为环加氧酶抑制剂的药剂，同时通过一些其他作用方式，实质上减少了胃肠副反应和产生的副作用。
近期已经研究发现，在人体和所有其他哺乳动物上，环加氧酶(COX)包含两种同功酶，组成酶(COX-1)和诱导酶(COX-2)，它们在不同的系统具有不同的活性。COX-2同功酶的确定导致以前猜想它可能引起前列腺素排他地或主要地在炎症部位产生。由于现在已显示这是事实，COX-2同功酶的选择性抑制将减少炎症，而不产生胃肠毒副作用。COX-1和COX-2具有60％同源性、类似的Km值、和相同的花生四烯酸结合部位，但是COX-2比COX-1可接受更广范围的底物。
另一种代谢途径是从上述花生四烯酸盐通过脂氧合酶作用产生白三烯。有一些白三烯也是炎症的介体，因此，很多努力是在寻找具有环加氧酶和脂氧合酶双重抑制的药剂上。
一种特定的已用于治疗狗的炎症的、已经美国食品和药品管理局兽医委员会(FDA/CVM)审批通过目前可在美国使用的两种NSAID药品之一是上述咔洛芬。咔洛芬，外消旋6-氯-α-甲基咔唑-2-乙酸，属于NSAID中的芳基丙酸类。该类中的其他成员是，例如，苯洛芬、环洛芬、非诺洛芬、氟比洛芬、苯呋丙酸、吲哚洛芬、酮洛芬、吡洛芬和舒洛芬。尽管这些化合物结构上很相近，它们仍然拥有不同的抗炎和其他生物特性，例如，咔洛芬显示出它是相对较弱的环加氧酶抑制剂，但是，它在人体和不同动物模型中显示能够显著地减少疼痛和肿胀，以及其他炎性症状。在技术文献中，对咔洛芬的这些评估作了记载，下文对此作了一些引述和讨论。咔洛芬在大鼠中也显示出不与脂氧合酶反应，推测上，也不阻断白三烯的生成。尽管咔洛芬的作用模式仍不被人所知，它已经显示了具有某些对抗磷脂酶A2的活性。
现有技术描述本领域中目前的认识，正如下面所讨论的参考文献公开显示的那样，对于咔洛芬能在狗身上拥有良好的抗炎活性而同时又显示出低的胃肠和其他负反应的现象，而当试图解释其作用机理时产生了极大的困惑。现有技术中描绘咔洛芬的特性是具有弱到无的环加氧酶抑制剂活性，并因此得出结论认为它必定与一些不同的作用机理一起起作用。
如上文已提及的，近来已报道存在组成酶COX-1和诱导酶COX-2同功酶，包括它们分别在保护胃肠粘膜和介导炎症中的不同作用。自然，这导致了人们去研究那些用于狗以及其他动物和人时有可能仅抑制诱导型COX-2同功酶的化合物，即选择性COX-2抑制剂。这些研究具体包括对各种NSAID，尤其是酮洛芬、酮咯酸和氟比洛芬的对映体的抑制活性的评估。检测这些特定的NSAID的一种对映体与另一种对映体之间抑制效力的差异，以及分别用每一种对映体治疗时的抑制效力，它们抗COX-1酶与抗COX-2酶的抑制效力的比较。这些研究的结果显示，对于这三种NSAID，它们的对映体抗COX-1和抗COX-2酶的效力相等。因此，这些NSAID的任何一种R-和S-对映体对COX-1或COX-2都没有选择性。虽然各对映体之间的效力确实有差异，在每种情况下S-对映体更有效，但对COX-1的抑制与对COX-2的抑制相比，每种对映体显示出相等的抑制效力，即，两种对映体都不能把这两种同功酶区别开来。
因此，由于现有技术中的这些研究，该领域的目前状态是，无论是咔洛芬，还是任何其他具有羧酸部分的典型的NSAID，都未发现是狗或任何其他动物的选择性COX-2抑制剂。在现有技术中有关与各种抑制剂复合的COX-1同功酶以及COX-2同功酶的序列结构的构象，在基本官能分子构型水平上，这些结论已得到证实。这些研究报道的结果是，现今在该领域中认为，含有羧酸基的抑制剂如咔洛芬本来就不能是选择性COX-2抑制剂。迄今为止，只有含有磺酰部分的化合物和那布米酮，一种萘-2-丁酮化合物被认为是COX-2同功酶的选择性抑制剂。
近来在本领域中，随着上面所提到的发现了有组成型COX-1和诱导型COX-2同功酶存在，已利用各种种类的动物进行了研究，为的是查明是否存在对一种或多种所述种类的动物具有特异性的立体选择性抑制。对于某些NSAID的R-和S-对映体在不同种类动物身上对COX-1的抑制与对COX-2的抑制的单独活性的研究已显示，在所研究的所有手性NSAID的R-和S-对映体之间存在一致的效力差异。但是，这些研究也显示，所研究的手性NSAID的任何R-或S-对映体对于COX-1比COX-2均没有种类特异性的选择性。例如，当S-对映体在所给种类动物身上对于COX-1和COX-2同功酶的抑制效力是R-对映体的三倍时，对于这两种同功酶中任一种来说，S-对映体显示出相等的抑制COX-1和COX-2同功酶的效力，即，在该种类动物身上S-对映体没有显示出对COX-2的选择性抑制。
从该领域的上述状况来看，尤其是当狗是已研究过的动物种类时，人们根本不能预料的是，本发明已研究出的咔洛芬是狗的令人惊奇的COX-2同功酶的强抑制剂；并且它是狗的选择性COX-2抑制剂。另外，咔洛芬对COX-2的选择性事实上比其他所有NSAID、包括含有羧酸部分的NSAID和声称的COX-2选择性含有磺酰部分的NSAID的大两倍。排除所有其他NSAID而选择咔洛芬作为狗的卓越的COX-2同功酶的选择性抑制剂，不仅与本领域中的现有教导相反，而且在所达到的惊奇结果方面是完全出乎意料的。本文中评估的所有其他代表性NSAID在美国均已批准可作为人用，包括甚至目前在商业上可购得的那些，这进一步肯定了这些结论的公正。咔洛芬从本文中评估的所有NSAID中突出出来，包括那些已批准用于人或已进行了临床试验评估的。
从上述的现有技术状况看，尤其是当狗是已研究过的动物种类时，更加未预料到的是，按照本发明，已发现咔洛芬的S-对映体是狗的COX-2同功酶比COX-1同功酶的高选择性抑制剂，并且对于所有其他NSAID或它们的S-对映体，包括含有羧酸部分的NSAID和表示的COX-2选择性含有磺酰部分的NSAID来说，这种情况达到显著高的程度。排除所有其他NSAID而选择咔洛芬的S-对映体作为狗的COX-2同功酶的极强的和选择性的抑制剂，同时还显示出狗的胃肠或其他负反应较小或是没有，不仅与本领域中的现有教导相反，而且在所达到的惊奇结果方面是完全出乎意料的。本文中评估的所有其他代表性NSAID均已在美国批准可用于人，包括甚至目前在商业上可购得的那些，这进一步肯定了这些结论的公正。
从上述的现有技术状况看，尤其当狗是已研究过的动物种类时，更加未预料到的是，按照本发明，已发现由于咔洛芬的S-对映体是COX-2同功酶的高选择性抑制剂，所以它与所有其他NSAID、包括具有羧酸部分的那些、或它们的S-对映体相比，具有令人惊奇的改善的抗炎、镇痛和退热活性，以及与所有其他NSAID、包括具有羧酸部分的那些、或它们的S-对映体相比的、令人惊奇地减少的胃肠和其他负反应。
如上所述，咔洛芬属于芳基丙酸类NSAID，并且是被取代的咔唑乙酸这样一些化合物的子类中的一员。美国专利3,896,145中描述了这些化合物和它们作为抗炎、镇痛和抗风湿剂的用途。McKellar等人于1990年在《小型动物实践杂志》(Jourmal of Small Animal Practice)31卷第443-448页上发表的文章“咔洛芬在狗身上的药动学、耐受性和血清血栓烷抑制作用”中报道了有关咔洛芬在狗身上的抗炎活性的研究情况。McKellar等人对咔洛芬的单独的(-)(R)和(+)(S)对映体以及外消旋咔洛芬在狗身上的生物活性作了进一步研究，并在《兽医药理学与治疗杂志》(J.Vet.Pharmacol.Therap.)1994年17卷第447-454页上发表的文章“咔洛芬在狗身上的立体有择药效学和药动学”中作了报道。根据该研究的结果，作者得出结论“CPF[咔洛芬]的作用方式仍不清楚……CPF以外消旋混合物或(+)(S)或(-)(R)对映体的形式给药都没有显著抑制血液中TxB2的产生和炎性渗出液中PGE2和12-HETE的产生，提议它不能用作常规NSAID。
已知多数NSAID作用的主要方式是在从花生四烯酸生成炎性前列腺素的过程中抑制该酶的环加氧酶。……现今已知的与炎症有关的大量介体提供了许多抗炎药物的可能的靶子，并且很有可能，CPF对一个或许多尚未确定的介体具有其主要作用活性。”因此，本领域中的这些研究者得出结论，咔洛芬具有一种“主要不是由于”环加氧酶抑制的作用方式；并且的确，“咔洛芬对环加氧酶、脂氧合酶和磷脂酶的低活性提示了其主要作用方式可能是通过类二十烷酸抑制以外的机理。”除了本发明的令人惊奇的发现以外，这些发现和结论也提示本领域中的其他研究者，狗服用咔洛芬显示出几乎完全抑制了PGE2的合成，这在下文的实施例中也得到进一步证明。
Holtsinger等人在V.C.O.T.1992年第5卷第140-4页上发表的文章“咔洛芬(Rimadyl-VTM)对209例临床犬关节变性疾病的疗效”中也报道了咔洛芬在狗身上的研究。作者从体外研究结果推论，咔洛芬可能是通过抑制嗜中性白细胞的迁移而发挥其抗炎作用，至少部分是如此。并且这也可能解释为何咔洛芬与吲哚美辛的抗炎作用是相等的，然而致溃疡可能性却比其小16倍。但是，作者也声称关于他们的结论有许多保留，因此并没有指明本发明所基于的发现的方向。
Vasseur等人在《美国兽医学协会杂志》(J Am Vet Med Assoc)206(6)807-811，1995上的文章“非类固醇性抗炎药咔洛芬治疗狗的骨关节炎的功效的随机对照试验”中报道了有关用咔洛芬治疗狗的骨关节炎的研究情况。这些研究者也没能解释咔洛芬的活性。另一方面，他们得出结论，前列腺素是胃肠粘膜的保护剂，并且“咔洛芬，与其他NSAID一样，抑制前列腺素合成酶，阻断前列腺素的生物合成”。然而，这一结论与他们的研究结果不一致，这就确定了“咔洛芬对狗的胃肠粘膜有最小或者是没有有害作用。”Lascelles等人在《兽医记录》134187-191，1994上的文章“咔洛芬和哌替啶对狗的手术后镇痛和镇静作用”中报道了用咔洛芬治疗狗的急性手术后疼痛的研究情况。这些研究者同样对咔洛芬的作用方式感到迷惑，一方面写道“咔洛芬……以治疗剂量，似乎是前列腺素合成酶(或环加氧酶)的不良抑制剂，该酶引起由组织破坏产生的炎症介体的合成”，同时另一方面又承认“无论如何，研究已显示，它是急性和慢性疼痛的良好镇痛剂。”更早期的关于吲哚美辛与咔洛芬的立体异构体和外消旋体对人的生物活性的对比研究在Gaut等于《前列腺素》1995年7月第10卷第1期上的文章“抗炎活性、血小板聚集的抑制、和前列腺素合成酶的抑制中的立体异构关系”中作了报道。该研究的结论是，咔洛芬的外消旋体与吲哚美辛不同，对血小板聚集不起作用，因此具有抗炎活性的剂量可能不会导致出血时间延长。该研究的数据也提示，咔洛芬外消旋体和[S]异构体的抗炎活性具有更大的特异性，并且比吲哚美辛具有更小的致溃疡性。
在1994年召开的前列腺素及相关化合物的第9次国际研讨会上发表的部分有关前列腺素研究进展的论文，其焦点是COX-2选择性。Battistini等的题为“COX-1和COX-2更多选择性NSAID的开发”的会议报告，其于1994年10月发表在DN&P第7卷第8期上，其中回顾并引用了由Battistini等在技术文献中报道过的利用不同的刺激针对大量不同类型的细胞、包括人、小鼠或大鼠类型得到的对比数据。数据显示了多数抗炎化合物包括咔洛芬抗COX-1和COX-2的IC50值，并用COX-2/COX-1的比值来确定COX-2选择性。将Battistini等报道的比值颠倒，使其与本文中所用的一致，以利于进行对比，大多数COX-2选择性化合物的比值为1428.57至50,000.00。咔洛芬对COX-1和COX-2同功酶的IC50(μM)值显示是完全相同的(10.96)，比值为1.00，这清楚地证明，咔洛芬没有COX-2选择性。Battistini等引用的值最初是由Akarasereenont等在《英国药理学杂志，会议论文增刊》1994年1月第183P，5-7上的文章“非类固醇性抗炎药作为环加氧酶-1或环加氧酶-2的抑制剂的相对效能”中报道的；以及Mitchell等在《美国国家科学院院报》9011693-7，1993上的文章“非类固醇性抗炎药作为组成和诱导环加氧酶的抑制剂的选择性”中报道的。咔洛芬对COX-1(来自牛主动脉内皮细胞)和COX-2(源于脂多糖刺激的J774.2巨噬细胞)抑制的IC50(μg/mL)值(n＝9)分别为3±0.41和3±1.72，比值为1.00。这与显示对COX-2具有1000至4000倍选择性的数种化合物的数据完全相反。该报告注意到，所描述的选择性COX-2抑制剂没有一种是羧酸，如大多数现存的NSAID，包括咔洛芬。的确，所有COX-2选择性抑制剂的分子中都有磺酰基，在美洛昔康的情况下，该磺酰基加入到它的1，2-苯并噻嗪-1，1-二氧化物环结构中。报告推测，如果这种关系保持的话，COX蛋白质的Arg 150残基可能不是COX-2的选择性抑制剂的必需结合部位。Arg是CXO活性必需的，因为它结合到花生四烯酸的末端羧基上，因此是多数现存NSAID的羧酸官能团的最有可能的结合部位。因此，人们期望对COX-2具有选择性的抑制剂只能结合到COX-2同功酶蛋白质结构的专有位置上，而不结合到COX-1和COX-2同功酶蛋白质结构二者共有的部位上。
对于有PGH合成酶、更常称之为环加氧酶蛋白质结构的经典NSAID和COX-2选择性抑制剂的分子相互作用的更具体的解释，Kurumbail等在《自然》1996年12月第384卷644-648页上的文章“抗炎药对环加氧酶-2的选择性抑制的结构基础”中作了报道。该解释是基于所报道的未配体化的(unliganded)鼠COX-2以及其与氟比洛芬、吲哚美辛、和SC-558的络合物的结构，选择性COX-2抑制剂具有苯磺酰氨基，而没有羧酸基，这是在3.0至2.5分离度下确定的。
该主题报道显示，人和鼠COX-2同功酶可预期是非常类似的，因为在环加氧酶活性部位有87％特性和严格序列保存。氟比洛芬，COX-1和COX-2的一种慢结合竞争性抑制剂，它结合在长疏水通道上，并排斥环加氧酶活性部位的底物。SC-558是一种二芳基杂环抑制剂，它具有中心吡唑环，并有一个磺酰氨基附着在其中一个芳环上。在COX-2中，从膜到环加氧酶活性部位的通道在SC-558结合部位分岔，一个分支形成接受SC-558的溴苯基环的腔，另一个分支形成口袋状，它事实上在COX-1结构中是不可进入的，而在COX-2中可容纳整个苯磺酰胺部分。这个口袋在COX-2中是更易进入的，是因为缬氨酸被取代为异亮氨酸，它在523位上具有更长的侧链。434位上的另一个异亮氨酸改变为缬氨酸可促进苯磺酰氨基进入COX-2中的这个新口袋，这种改变形成了一个穿过该新的亲水性口袋延伸的分子门。最终，在COX-1中513位的组氨酸被替换为COX-2中的精氨酸，这两种酶的叠加提示，COX-1酶中组氨酸的咪唑环不会延伸到足以与SC-558的磺酰氨基直接起作用，而与COX-2酶中的精氨酸却是这样的。该主题报告提到，在上述三种情况的每一种下，单一氨基酸的变化都显著改变了COX-2的抑制曲线。
该主题报告得出的结论，看来有可能在SC-558所属的二芳基杂环类抑制剂中COX-2的主要决定簇是苯磺酰胺部分。但是，没有羧酸基也是重要的。120位上的精氨酸与其胍基是疏水性环加氧酶通道中少数带电残基之一，它通过电荷间的相互作用使经典NSAID如氟比洛芬的羧酸基稳定。在SC-558中不存在这样的羧酸基，这也有可能是其COX-2选择性的重要组分。试图通过在该二芳基杂环结构的吡唑上加入酸基来改善其对COX-2的效能的研究结果也支持了上述结论，此研究也始终得到了不好的选择性。
该主题报告具体体现在第一个实施例，膜蛋白被成功地研究作为基于结构的药物设计的靶子，并粗略估计了本领域中有关NSAID与环加氧酶同功酶的结构/活性关系和它们的所得抗炎活性对比它们的胃肠负反应的目前的状况。在本领域中目前的这种背景下，将看到本发明是完全未预料到的一种发展，它令人惊奇地提供了治疗狗炎症的一种最佳功效/安全性的方案。
Carabaza等在《临床药理学杂志》1996年第36卷505-512页上的文章“手性非类固醇性抗炎药对诱导环加氧酶的立体选择性抑制”中研究并报道了COX-2同功酶的对映选择性抑制的可能性。在三个不同体外系统中研究了酮洛芬、氟比洛芬、和酮咯酸对COX-2的立体选择性抑制，所得结果在三个平行体外模型中与对COX-1的抑制作了对比。结果发现，所有三种NSAID的S-对映体以相等的效力抑制了这两种同功酶；但是它们的R-对映体对这两种同功酶的抑制的效力显著地且相应地减少。换句话说，所有三种R-对映体在COX-1和COX-2的抑制方面显示出相等的效力，但是在所有情况下，它们的效力水平都比相应的S-对映体低得多。在所报道的此研究中提到的“对映选择性的显著程度”仅是指R-与S-的对比，而不是指本发明咔洛芬的S-对映体独特具有的COX-2选择性。
发明概述本发明提供了对需要进行治疗的家犬种成员的疼痛和炎症病变以及与诱导环加氧酶-2(COX-2)的活性有关的疾病的治疗或预防方法，同时通过相对于COX-1活性而选择性抑制COX-2活性使得与组成环加氧酶-1(COX-1)的活性的同时抑制有关的不期望的副作用降低或消除，其中COX-2∶COX-1活性抑制的选择性比值至少为3∶1，这是基于以产生≥80％COX-2抑制、优选≥90％COX-2抑制的剂量在全血中测量的来自体外的抑制水平，该方法包含给所述这种家犬成员服用按照上述限制的治疗疼痛和炎症的治疗有效量的抗炎选择性COX-2抑制化合物，该化合物包含一种独立地选自以下成员的抗炎化合物水杨酸衍生物；对氨基苯酚衍生物；吲哚和茚乙酸；杂芳基乙酸；芳基丙酸；邻氨基苯甲酸；烯醇酸；和链烷酮。
在本发明的范围内，也可能通过给予一种以上选自上述抗炎化合物组的成员来实现上述治疗或预防疼痛和炎性疾病和过程的方法。任何一种这样复合的抗炎活性药剂可能均需要以有关的单独药剂的药动学性能得到良好平衡为基础。例如，迅速起作用可以与延长治疗半存留期平衡，或者在某些组织中形成大细胞贮液槽的倾向可以用血浆蛋白结合的较高速率来平衡。所有这样的复合物都被考虑在本发明的范围内。
本发明提供了满足上述限制的任何抗炎选择性COX-2抑制剂。其中这样的选择性抑制化合物是式(I)表示的、用于治疗或预防一种家犬成员的疼痛和炎症病变和疾病的咔洛芬化合物优选的亚属
其中R2是
其中A是羟基、(C1-C4)烷氧基、氨基、羟基-氨基、一-(C1-C2)烷基氨基、二-(C1-C2)烷基氨基；X和Y独立地为H或(C1-C2)烷基；n为1或2；R6是卤素、(C1-C3)烷基、三氟甲基、或硝基；R9是H；(C1-C2)烷基；苯基或苯基-(C1-C2)烷基，其中苯基可选地被氟或氯一取代；-C(＝O)-R，其中R是(C1-C2)烷基或苯基，可选地被氟或氯一取代；或-C(＝O)-O-R1，其中R1是(C1-C2)烷基；当X和Y不同时，其(-)(R)和(+)(S)对映体；以及具有治疗或预防疼痛和炎症的治疗活性的其所有药学上可接受的盐形式、药物前体和代谢物。当式(I)的抑制剂作为(-)(R)和(+)(S)对映体存在时，本发明提供单独的(+)(S)对映体，或者当两种对映体一起存在时，提供其外消旋或非外消旋混合物。
本发明进一步提供了上述治疗或预防需要这种治疗的家犬成员的疼痛和炎症病变和疾病的方法优选的一个方面，是通过给予所述家犬成员治疗疼痛和炎症的有效量的抗炎选择性COX-2抑制化合物，它对所述家犬成员的COX-2体外IC50效价比其对COX-1的体外IC50效价至少大30倍，优选至少大40倍，更优选至少大50倍，更优选至少大60倍，甚至更优选至少大80倍，最优选至少大100倍，其中所述抑制剂选自以下本质上由水杨酸衍生物；对氨基苯酚衍生物；吲哚和茚乙酸；杂芳基乙酸；芳基丙酸；邻氨基苯甲酸；烯醇酸；和链烷酮组成的抗炎化合物组中。
本发明进一步提供了上述治疗或预防需要这种治疗的家犬成员的疼痛和炎症病变和疾病的方法的另一个优选方面，是通过给予所述家犬成员治疗疼痛和炎症的有效量的抗炎选择性COX-2抑制化合物，该化合物能实质上仅选择性地抑制诱导型COX-2，而实质上不抑制相应的组成型COX-1。
本发明还提供了上述方法，其中所述治疗有效量的如式(I)定义的抗炎化合物，尤其是所述6-氯-α-甲基-9H-咔唑-2-乙酸的(+)(S)-对映体，以全身给药方式用予所述家犬成员，其中所述全身给药包含(1)将含有合适的液体形式的所述抑制剂的药物组合物注射或输入合适的身体组织或腔中，以使所述抑制剂通过系统给药而释放，该系统给药是动脉内给药、真皮内或经真皮给药、皮下给药、肌内给药、脊柱内给药、鞘内给药、或静脉给药，其中所述抑制剂是(a)作为溶质包含在溶液中；(b)包含在乳剂的不连续相中，或包含在注射或输注时反转的反向乳剂的不连续相中，所述乳剂含有合适的乳化剂；或(c)作为胶态或微粒形式的悬浮固体包含在悬浮液中，所述悬浮液含有适当的悬浮剂；(2)将含有合适的液体形式的所述抑制剂的药物组合物注射或输入合适的身体组织或腔中，以作为贮存用于通过系统给药释放所述抑制剂，其中所述组合物贮存所述抑制剂，并随后将所述抑制剂延迟、缓慢、和/或控制释放以达到系统分布；(3)将含有合适的固体形式的所述抑制剂的药物组合物滴注、吸入或吹入到合适的身体组织或腔中，其中所述抑制剂是(a)包含在一个固体植入组合物中，该植入组合物安置在合适的身体组织或腔中，所述组合物提供了所述抑制剂的延迟、缓慢、和/或控制释放；(b)包含在吸入到肺里的颗粒组合物中；或(c)包含在吹入到合适的身体组织或腔中的颗粒组合物中，其中所述组合物可选地提供所述抑制剂的延迟、缓慢、和/或控制释放；或者(4)摄取含有适当的固体或液体形式的所述抑制剂的药物组合物，以将所述抑制剂口服释放，其中所述抑制剂是(a)包含在固体剂型中；或(b)包含在液体剂型中。栓剂可以认为是一种特殊型式的植入物，因为它们包含在室温下为固体而在体温下熔解的基质，缓慢地将活性成分释放，同时它们浸渗到身体的周围组织中，在此活性成分被吸收并转输为有效的系统给药。允许经皮和经粘膜给药以实现系统释放的剂型也包括在本发明内，尤其包括经皮贴片技术。
上述治疗或预防疼痛和炎症的方法还包含固体口服剂型的摄食和给药，所述剂型选自延迟释放的口服片剂、胶囊剂、丸剂、锭剂、糖锭、和多颗粒剂，防止在胃中释放和吸收的肠溶片剂和胶囊剂以便于远离狗的胃释放，缓释口服片剂、胶囊剂和微粒剂，它们可使活性成分以可控制的方式系统释放至少10小时，速溶片剂，密封溶液，口服糊剂，给予所治疗的狗或加入到其食物中的颗粒剂型，以及可咀嚼剂型，其中所述活性成分可以在所治疗的狗的咀嚼过程中，与美味的咀嚼物一起被消耗，或者也可以通过不会被消耗的咀嚼物中浸提而释放。与上述剂型一起使用的还包括活性成分的微胶囊制剂，它们可以加入到片剂、胶囊剂或其他最终制剂中。另外，所述方法还包含液体口服剂型的摄食，这些剂型选自溶液、悬浮液、乳剂、反向乳剂、酏剂、提取液、酊剂、和浓缩液，可加入到所治疗的狗的饮用水中。这些液体剂型中的任何一种，当按照本领域中的熟知方法配制时，既可以直接给予所治疗的狗，也可以加入到所治疗的狗的饮用水中。另一方面，浓缩液体剂型配制成首先加入到一定量的水中，然后取出等分数量直接给予狗或加入到狗的饮用水中。
本发明进一步提供的上述方法是其中所述治疗有效量的如式(I)定义的抗炎化合物局部应用到所述家犬成员的炎症部位。还提供了所述局部给药方法，其中所述局部给药包含(1)将含有合适的液体形式的所述抑制剂的药物组合物注射或输入局部炎症部位以通过局部给药释放所述抑制剂，所述局部给药是动脉内给药、关节内给药、软骨内给药、肋内给药、囊内给药、真皮内或经真皮给药、束内给药、韧带内给药、髓内给药、肌内给药、神经内给药、骨内给药、骨盆内给药、心包内给药、脊柱内给药、胸骨内给药、滑膜内给药、跗骨内给药、或鞘内给药；包括将所述抑制剂延迟释放、控制释放、和/或缓慢释放到所述局部炎症部位的组分；其中所述抑制剂是(a)作为溶质包含在溶液中；(b)包含在乳剂的不连续相中，或包含在注射或输注时转化的反向乳剂的不连续相中，所述乳剂含有合适的乳化剂；或(c)作为胶态或微粒形式的悬浮固体包含在悬浮液中，所述悬浮液含有适当的悬浮剂；(2)将含有合适的液体形式的所述抑制剂的药物组合物注射或输入作为贮存用于将所述抑制剂释放到所述局部炎症部位；其中所述组合物贮存所述抑制剂，并随后将所述抑制剂延迟、缓慢、和/或控制释放到所述局部炎症部位；或者(3)将含有合适的固体形式的所述抑制剂的药物组合物滴注、吸入或吹入以将所述抑制剂释放到所述局部炎症部位，其中所述抑制剂是(a)包含在一个固体植入组合物中，该植入组合物安置在所述局部炎症部位，所述组合物可选地将所述抑制剂延迟、缓慢、和/或控制释放到所述局部炎症部位；(b)包含在吸入到包括肺在内的局部炎症部位的颗粒组合物中；或(c)包含在吹入到局部炎症部位的颗粒组合物中，其中所述组合物可选地将所述抑制剂延迟、缓慢、和/或控制释放到所述局部炎症部位。在本发明范围内还可包括用于局部给药的其他特定剂型。例如，应用于皮肤的组合物，优选通过机械方法用力增强吸收，通过摩擦将该组合物涂布在皮肤上，这样就可以在需要这种治疗时，用该组合物将抑制剂活性成分释放到局部区域，例如发炎的关节处。这样的组合物可以是凝胶、洗液、软膏、油膏、以及其他设计用于局部应用的制剂的形式。
本发明还提供上述方法，其中治疗有效量的抗炎抑制剂是以这样的量给予所述家犬成员，该量表示为mg/kg所述犬的体重/天，范围是从约0.01mg/kg/天至约20.0mg/kg/天，优选从约0.1mg/kg至约12.0mg/kg/天，更优选从约0.5mg/kg至约10.0mg/kg/天，最优选从约0.5至约8.0mg/kg/天。6-氯-α-甲基-9H-咔唑-2-乙酸一般是以约4.0mg/kg/天的剂量给药。
按照本发明，还提供了一种用于治疗或预防需要治疗的家犬成员的疼痛和炎症病变和疾病的药物组合物，它包含药学上可接受的载体以及治疗疼痛和炎症有效量的环加氧酶-2(COX-2)的抗炎选择性抑制剂，其中基于以得到≥80％COX-2抑制、优选得到≥90％COX-2抑制的剂量在全血中测量的来自体外的抑制水平，COX-2与COX-1的选择性比值至少为3∶1。在所述用于治疗或预防疼痛和炎症病变和疾病的药物组合物的优选方面，所述治疗有效的抗炎选择性COX-2抑制剂的体外IC50效能比环加氧酶-1(COX-1)的体外IC50效能大至少30倍，优选大至少40倍，更优选大至少50倍，更优选大至少60倍，甚至更优选大至少80倍，最优选大至少100倍；其中所述抑制剂选自以下基本上由水杨酸衍生物；对氨基苯酚衍生物；吲哚和茚乙酸；杂芳基乙酸；芳基丙酸；邻氨基苯甲酸；烯醇酸；和链烷酮组成的抗炎化合物组中。
本发明还提供了上述药物组合物，其中所述抑制剂选自芳基丙酸；并且所述抑制剂仍是上文定义的式(I)化合物。还提供了上述药物组合物，其中式(I)表示的抑制性化合物的环加氧酶-2(COX-2)的体外IC50效能比其环加氧酶-1(COX-1)体外IC50效能大至少100倍；且其中X和Y之一是H，另一个是甲基；且其中当所得两种对映体都存在时，(+)(S)对映体的量至少占75％。特别是，本发明提供了上述药物组合物，其中在式(I)中，对于R2，n＝1，X和Y之一为H，另一个为甲基，且A为羟基、(C1-C2)烷氧基、或氨基；R6是氯或三氟甲基；R9是H、甲基、乙酰基、苯甲酰基、或乙酸基；且其中当所得两种对映体一起存在时，(+)(S)对映体的量至少占85％，优选至少占90％，更优选至少占95％，最优选至少占99％。
本发明进一步提供了上述药物组合物，其中所述的抑制剂包含6-氯-α-甲基-9H-咔唑-2-乙酸；其中当两种所得对映体都存在时，(+)(S)对映体的含量至少为85％，优选地至少为90％，更优选地至少为95％，最优选地至少为99％。特别是本发明提供了上述和下述药物组合物，其中所述的抑制剂包含的完全是6-氯-α-甲基-9H-咔唑-2-乙酸的(+)(S)对映体。
本发明也提供了上述药物组合物，其中在所用剂量制度和给药参数的背景下，治疗有效量的抗炎抑制剂足以提供动物一定量的所述抑制剂，以mg每kg所述动物体重每天表示，其范围为约0.01mg/kg至约20.0mg/kg/天，优选为约0.1mg/kg至约12.0mg/kg/天，更优选为约0.5mg/kg至约10.0mg/kg/天，最优选为约0.5mg/kg至约8.0mg/kg/天。6-氯-α-甲基-9H-咔唑-2-乙酸的给药一般是以4.0mg/kg/天的速率进行。
本发明药物组合物的进一步优选方面提供了抗炎的选择性COX-2抑制剂，该抑制剂选择性地基本上仅抑制诱导COX-2，而基本上不抑制相应的组成COX-1。特别优选的实施方式包含一种药学上可接受的载体以及有效治疗疼痛和炎症所需量的抗炎的选择性COX-2抑制剂，该抑制剂包含一种式(1)化合物，其中对R2来说，n＝1，X与Y之一为H，另一个为甲基，A为羟基、C1-C2烷氧基或氨基；R6为氯或三氟甲基；R9为H、甲基、乙酰基、苯甲酰基或甲氧基羰基；(+)(S)对映体的含量为至少99％。所述抑制剂尤其是，其包含的完全是6-氯-α-甲基-9H-咔唑-2-乙酸的(+)(S)对映体。优选地，在所述药物组合物中，在所用剂量制度和给药参数的背景下，所述治疗有效量的所述抑制剂足以提供动物一定量的所述抑制剂，以mg每kg所述动物体重每天表示，其范围为约0.5mg/kg至约8.0mg/kg/天。
本发明进一步提供了以一种剂型存在的上述药物组合物，该剂型能够在一种适当制度中提供所需的治疗疼痛和炎症所需有效量的抗炎的选择性COX-2抑制剂。不过，许多上述和下述药物组合物用来具有长效作用，也就是说，提供长于几小时或一天的抑制活性，即提供长达几天至一周或更长的抑制活性。这种长效药物组合物特别例如植入物和药库，一部分这些例子用来提供长达一个月或更长的抑制活性。在治疗学上对治疗或预防疼痛和炎症来说所必需的有效量的抑制剂以mg每kg所述家犬体重每天表示，其范围为约0.01mg/kg至约20.0mg/kg/天，优选为约0.1mg/kg至约12.0mg/kg/天，更优选为约0.5mg/kg至约10.0mg/kg/天，最优选为约0.5mg/kg至约8.0mg/kg/天。6-氯-α-甲基-9H-咔唑-2-乙酸的给药一般是以4.0mg/kg/天的速率进行。
特别是本发明进一步提供了上述药物组合物，其中所述的治疗疼痛和炎症所需有效量的抗炎抑制剂是以适合于对所述家犬进行全身给药的剂型提供的，其中所述药物组合物含有液体形式的所述抑制剂，这种液体形式适合于通过下列方法释放所述的抑制剂(1)注射或输入，其方式为动脉内、真皮内或经真皮、皮下、肌内、脊柱内、鞘内或静脉内，其中所述抑制剂(a)作为溶质包含在溶液中；(b)包含在乳剂的不连续相中，或者包含在经过注射或输入发生反转的反乳剂的不连续相中，所述乳剂含有适当的乳化剂；或者(c)作为被悬浮的固体以胶体或微粒形式包含在悬浮液中，所述悬浮液含有适当的悬浮剂；(2)作为药库注射或输入适当的身体组织或体腔中，其中所述组合物提供了所述抑制剂的储藏以及其后的所述抑制剂的延迟释放、缓释和/或控释，用于全身分布；(3)将所述药物组合物以适当的固体形式滴注、吸入或吹入适当的身体组织或体腔中，其中所述抑制剂(a)包含在固体植入组合物中，该组合物提供了所述抑制剂的延迟释放、缓释和/或控释；(b)包含在用于吸入肺中的微粒组合物中；或者(c)包含在用于吹入适当身体组织或体腔中的微粒组合物中，其中所述组合物可选地提供了所述抑制剂的延迟释放、缓释和/或控释；或者(4)以适当固体或液体形式摄取所述药物组合物，用于所述抑制剂的经口释放，其中所述抑制剂(a)含在固体剂型中；或者(b)含在液体剂型中。
在尤其优选的提供了所述抗炎的选择性COX-2抑制剂的延迟释放、缓释和/或控释的上述药物组合物中，包括了所有这样的剂型，它们对COX-2同功酶活性产生≥80％的抑制作用，并使所述抑制剂至少为10μg/ml的血浆浓度保持至少4小时，优选地至少为8小时，更优选地至少为12小时，还更优选地至少为16小时，进而更优选地至少为20小时，最优选地至少为24小时。优选地，所包括的上述剂型对COX-2同功酶活性产生≥80％的抑制作用，并使所述抑制剂至少为15μg/ml的血浆浓度保持至少4小时，优选地至少为8小时，更优选地至少为12小时，还更优选地至少为20小时，最优选地至少为24小时。更优选地，所包括的上述剂型对COX-2同功酶活性产生≥90％的抑制作用，并使所述抑制剂至少为20μg/ml的血浆浓度保持至少4小时，优选地至少为8小时，更优选地至少为12小时，还更优选地至少为20小时，最优选地至少为24小时。
上述药物组合物的具体剂型包括栓剂，作为植入物的一种特殊类型，所包含的基质在室温下为固体，但在体温下熔化，缓慢释放充满其中的活性成分进入身体的周围组织，其中活性成分被吸收和转运，实现全身给药；固体经口剂型，选自由下列剂型组成的组延迟释放的口服片剂、胶囊剂、caplet、糖锭、锭剂和多颗粒剂，防止在狗胃中释放和吸收以促进在胃远端释放的肠衣片剂和胶囊剂，以控制方式提供活性成分长达24小时全身释放的缓释口服片剂、胶囊剂和微粒剂，速溶片剂，包封溶液，口服糊剂，加入或待加入受治疗狗食物中的颗粒状剂型，可咀嚼剂型、其中所述抑制活性成分是同可口的咀嚼物一起被消耗的，或者另一种选择是在受治疗狗的咀嚼过程中，通过自不被消耗的咀嚼物中过滤出活性成分来进行释放；液体经口剂型，选自由下列剂型组成的组溶液、悬浮液、乳剂、反乳剂、酏剂、浸膏剂、酊剂和浓缩液，可选地将其加入到受治疗狗的饮水中。当按照本领域熟知的方法进行配制后，任意这些液体剂型能够直接对受治疗狗给药，或者可以加入到受治疗狗的饮水中。另一方面，浓缩液在配制时首先向其中加入一定量的水，从中可以取出可分量用于直接对狗给药，或者加入到狗的饮水中。
本发明进一步提供了上述药物组合物，其中所述治疗疼痛和炎症所需有效量的所述抗炎抑制剂是以适合于对所述家犬炎症部位进行局部给药的剂型提供的，其中所述药物组合物含有液体形式的所述抑制剂，这种液体形式适合于通过下列方法释放所述的抑制剂(1)注射或输入局部炎症部位，其方式为动脉内、关节内、软骨内、肋内、囊内、真皮内或经真皮、束内、韧带内、髓内、肌内、鼻内、神经内、眼内-眼部给药-、骨内、骨盆内、心包内、脊柱内、胸骨内、滑膜腔内、跗骨内或鞘内；包括提供所述抑制剂延迟释放、控释和/或缓释进入所述局部炎症部位的组分；其中所述抑制剂包含在(a)在溶液中，作为一种溶质；(b)乳剂的不连续相中，或经过注射或输入发生反转的反乳剂的不连续相中，所述乳剂含有适当的乳化剂；或者(c)悬浮液中，作为被悬浮的固体以胶体或微粒形式，所述悬浮液含有适当的悬浮剂；或者(2)作为用于释放所述抑制剂的药库，注射或输入所述的局部炎症部位；其中所述组合物提供了所述抑制剂的储藏以及其后的所述抑制剂的延迟释放、缓释和/或控释，进入所述的局部炎症部位，其中所述组合物也包括确保所述抑制剂显著具有局部活性、几乎没有遍及全身的活性的组分；或者，其中所述药物组合物含有固体形式的抑制剂，这种固体形式适合于通过下列方法释放所述抑制剂(3)滴注、吸入或吹入所述的局部炎症部位，其中所述抑制剂包含在(a)固体植入组合物中，该组合物被安装在所述的局部炎症部位中，所述组合物可选地提供了所述抑制剂的延迟释放、缓释和/或控释，进入所述的局部炎症部位；(b)微粒组合物中，用于吸入包括肺在内的局部炎症部位；或者(c)用于吹入局部炎症部位的微粒组合物中，其中所述组合物包括确保所述抑制剂具有显著的局部活性和不明显的留在全身活性的组分，并可选地提供了所述抑制剂的延迟释放、缓释和/或控释，进入所述的局部炎症部位。
按照本发明，提供了一种或几种其他的治疗活性剂与活性成分的复合物，用于治疗疼痛和炎症，该复合物形成了上述本发明的药物组合物。当关节严重发炎并同时被微生物感染时，例如细菌、真菌、原生动物、病毒等，需要将本发明的活性成分与一种或几种抗菌剂、抗真菌剂、抗原生动物剂、抗病毒剂或类似治疗剂复合给药。并且，本发明的活性成分不仅可以与其他NSAID复合给药，也可以与其他炎症介质的抑制剂复合给药，包含一种或几种选自基本上由这样几类抑制剂组成的组的成分，其例子包括H1受体拮抗剂；激肽B1和B2受体拮抗剂；前列腺素抑制剂，如PGD、PGF、PGI2和PGE受体拮抗剂；血栓烷A2(TXA2)抑制剂；5-及12-脂氧合酶抑制剂；白三烯LTC4、LTD4/LTE4和LTB4抑制剂；PAF受体拮抗剂；以金硫基与不同亲水性基团形式存在的金；免疫抑制剂，例如环孢菌素、硫唑嘌呤和甲氨蝶呤；抗炎糖皮质激素；青霉胺；羟氯喹；抗痛风剂，例如秋水仙碱；黄嘌呤氧化酶抑制剂，例如别嘌呤醇；排尿酸剂，例如丙磺舒、磺吡酮和苯溴马隆。进一步提供了将本发明的抗炎剂与用来治疗老年狗疾病病症、综合征和症状的治疗剂结合给药，包含一种或几种选自基本上由治疗剂和所治疗病症组成的组的要素，包括认知治疗剂，用来阻碍记忆丧失和减退；抗高血压剂和其他心血管药物，用来抵销动脉粥样硬化的后果，包括高血压、心肌局部缺血包括绞痛、充血性心力衰竭、和心肌梗塞，选自利尿剂、血管舒张剂如肼苯哒嗪、β-肾上腺素受体拮抗剂如普萘洛尔，血管紧张素II转化酶抑制剂(ACE抑制剂)如用于治疗二尖瓣闭锁不全的老年狗的依那普利、以及单用和与中性内肽酶抑制剂结合使用的依那普利、血管紧张素II受体拮抗剂如losartan、肾素抑制剂、钙通道阻滞剂如硝苯地平、抗交感神经剂如甲基多巴、α2-肾上腺素激动剂如可乐定、α-肾上腺素受体拮抗剂如哌唑嗪、和HMG-CoA-还原酶抑制剂(抗血胆甾醇过多剂)、如洛伐他丁或atorvastatin；抗肿瘤剂，尤其是抗有丝分裂药，包括长春花属生物碱如长春碱和长春新碱；生长激素促分泌剂；强止痛剂；局部和全身麻醉剂；以及H2受体拮抗剂和其他胃保护剂。进一步提供了上述治疗剂的复合物用于治疗狗的急性病症，包括细菌感染，同时伴发变性关节疾病；治疗狗的慢性病症，其中用于此目的的制度包含本发明抗炎剂的给药结合其他药物疗法，其他药物疗法是在规则制定的基础上，用于治疗慢性病症，包括骨关节炎；将本发明抗炎剂与一种或几种用来形成组合的其他治疗剂配制成适当剂型，剂型中含有全部形成该复合的药物，包括其中所述不同的药物具有不同的半衰期，通过产生所述具有不同释放时间的药物的控释剂型，实现相对均匀的给药；含药饲料剂型，其中所述的复合使用的药物在所述饲料组合物中一起以混合物存在。按照本发明，进一步提供了并合给药，其中通过以复合方式给出的所述药物的同时给药，实现药物的复合；包括以不同剂型和给药途径方式的并合给药；按照不同的但也是有规则和连续的给药程序的各种复合物的用途，由此保持了受治疗狗体内所涉及药物的所需血浆水平，即使组成所述组合的各种药物没有对所述的狗同时给药。
令人瞩目的还有按照本发明，提供了工业上适用的包装，在家犬需要接受该治疗时，用于疼痛和炎症病变和疾病的治疗处理或预防，该包装包括一个适当的容器，该容器的形式可以是一层外包装和一个可移动的固定其中的内部容器；包封在所述容器中的是适当剂型的活性成分，该活性成分包含选择性COX-2抑制剂，其中根据体外抑制水平，COX-2对COX-1的选择比至少为3∶1，正如本文另有所述，该抑制水平是在全血中、在产生≥80％COX-2抑制作用的剂量下测量得到的，优选为在产生≥90％COX-2抑制作用的剂量下；和关于所述容器的指导性和介绍性印刷资料，可以附在所述容器上，并且它们包封在所述容器中，或者作为所述容器的固有部分显示出来，所述指导性和介绍性资料在开头传达给读者的是所述活性成分在对受治疗狗给药时，在所述狗的现有或预期产生疼痛和炎症的部位有效地抑制所诱导的COX-2，其中根据体外抑制水平，COX-2对COX-1的选择比至少为3∶1，该抑制水平是在全血中、在产生≥80％COX-2抑制作用的剂量下测量得到的，因此治疗或预防所述的疼痛和炎症，否则将从此导致疼痛和炎症。在一种优选的适用于商业用途的所述包装中，所述指导性和介绍性资料在叙述上将传达给读者的是所述活性成分在对受治疗狗给药时，将在所述狗体内有效提供对所诱导的COX-2的完全抑制作用，因此治疗或预防那里的疼痛和炎症；而且当所述成分对所述的狗给药时，将在所述狗体内基本上不产生对组成COX-1的抑制作用，因此将在多数狗体内有效地避免因实质上抑制所述的COX-1而导致的不良胃肠副作用及其他副作用。
令人瞩目的还有按照本发明，进一步提供了即如上述类型的包装，包含一个所述的适当的容器；包封在所述容器中的是口服剂型的式(1)化合物，该剂型可以是可咀嚼的或可摄取的口服片剂、称之为小药囊的单位剂量小包、由单位剂量小包制得的悬浮液、用于口服悬浮液的粉末、或口服悬浮液本身，它不会不利地起到食物的作用；和如上所述的关于所述容器的指导性和介绍性印刷资料，其中没有任何关于所述口服剂型是否能够与食物一起摄取的表述或含蓄的限制。
发明的详细说明本发明的目的是找到一个数十年来兽医领域所面临的严重问题的解决办法，该问题是有关对狗的有效而安全的抗炎治疗的需求。该问题的严重性和难操作性来自这样一个事实，所有抗炎剂、尤其是已在狗体内试用过的NSAID，事实上在狗体内都具有不可接受的、有时是危险的副反应，这就大为减少了它们的用途。迄今为止，最普遍存在的和最具威胁性的副反应是胃肠粘膜功能失调和刺激作用，导致溃疡、出血，最终是穿孔和腹膜炎。这些不良副反应是由不同前列腺素的抑制作用介导产生的，该抑制作用是由NSAID抑制剂引起的，从而导致对保护性胃肠粘膜的有限血液供应，进而严重减少了胃肠粘膜的总量和保护功能。
由NSAID带来的胃损伤至少具有两种明显的机理。口服给药的NSAID产生局部刺激作用，使酸逆扩散进入胃粘膜，诱发组织损伤。另一方面，胃肠外给药也能导致损伤和出血，这与抑制胃前列腺素的生物合成有相互关系， 胃前列腺素在胃粘膜中起到细胞保护功能。这些前列腺素、尤其是PGI2和PGE2，抑制胃酸分泌，增加粘膜血流量，促进肠中细胞保护粘液的分泌。NSAID的其他不良副作用包括血细胞功能失调、延长妊娠或自然分娩、改变肾脏功能、和过敏反应。
所有上述NSAID的不良副作用很可能取决于内源性前列腺素的合成阻滞。因此，发现不会导致全身产生该不良副作用的NSAID引起了人们的浓厚兴趣。狗不仅尤其易受炎症病变和疾病的伤害，如变性关节炎，而且特别易患来自继发的不利胃肠反应的并发症。
本文所用的“狗”一词表示任意家犬，其中有大量不同的品种。尽管可以使用特定的品种进行生物活性的实验室检测，不过令人瞩目的是将发现本发明的抑制性化合物可用于治疗任意这些众多品种的疼痛和炎症。
从广义上说，本发明的要点是令人惊奇地发现了一小类抗炎剂，其中咔洛芬是最好的例子，即6-氯-α-甲基-9H-咔唑-2-乙酸，它具有犬环加氧酶-2(COX-2)高度的选择性，还发现这种选择性在一大类羧基C1-C4烷基芳基和/或杂芳基抗炎剂中是独特的，咔洛芬类化合物也属于这类抗炎剂。这种在狗中独特和意外的选择性对安全而有效地治疗患有任意一种大量炎症病变和疾病的狗来说具有深远的含义。
现在已被尤其是狗的炎症病变和疾病治疗领域所充分接受的是，在体内产生不同前列腺素化合物的内源反应级联开始于花生四烯酸，并通过一种名为环加氧酶的必需酶的作用进行下去。已经确定，这种酶以两种同功酶的形式存在，它们是分离的，也是独立地发挥作用，一种是组成环加氧酶-1(COX-1)同功酶，另一种是环加氧酶-2(COX-2)同功酶。狗中COX-1同功酶负责产生在胃、肠、肾和血小板中发挥重要功能的前列腺素，其中一部分在本质上是保护性的，尤其是对胃肠粘膜来说。狗中COX-2同功酶负责产生在嗜中性白细胞、巨噬细胞、内皮细胞和成纤维细胞内介导急性和慢性炎症的前列腺素，如PGE2，其中COX-2基因被表达。COX-2能够被内毒素、脂多糖(LPS)、各种细胞活素(例如IL-1和TNF)、生长因子(例如EGF和PDGF)和很多其他试剂所诱导。例如，在大鼠角叉菜胶诱发胸膜炎模型中，胸膜渗出物的单核细胞的免疫印迹法能够检测到COX-2同功酶。
最终，本领域把目标针对于发现能够在100％基础上有效抑制狗COX-2同功酶活性的化合物，与此同时在0％基础上有效抑制COX-1同功酶活性。实际情况是，这等同于寻找选择性地抑制COX-2同功酶的化合物，也即通过相对较高水平的COX-2同功酶抑制作用提供最佳抗炎疗效的化合物，而其剂量也通过相对较低水平的COX-1同功酶抑制作用产生最少不良副作用。直到本发明所述的发现为止，唯一表现出COX-2选择性的化合物具有磺酰基或亚磺酰氨基，而不是羧基，这是经典NSAID的最主要特征。从这些观察结果推测，COX-1同功酶的Arg 150残基对选择性COX-2抑制剂来说不是必要的键合部位，而Arg 150残基对COX-1活性来说才是必要的，因为它键合了花生四烯酸的末端羧基，类似地也束缚了上文所指的经典NSAID的羧酸功能。可以预测，COX-2选择性抑制剂将束缚犬COX-2同功酶的某种独特特征，而不是犬COX-1和COX-2同功酶的共同特征。
因此，本发明提供了一种方法，用于选择性抑制诱导环加氧酶-2(COX-2)，这是相对于抑制相应的组成环加氧酶-1(COX-1)而言的，因此还用于在家犬需要接受该治疗时，治疗或预防与之有关的疼痛和炎症病变和疾病，其中根据体内和体外抑制水平，COX-2对COX-1的选择比至少为3∶1，该抑制水平是在全血中、在产生≥90％COX-2抑制作用的剂量或剂量范围下测量得到的，该方法包括将一定量的抗炎化合物对所述动物给药，按照上文叙述的限制，该给药量在治疗学上对治疗疼痛和炎症有效。
本发明进一步提供了上述治疗或预防家犬疼痛和炎症病变和疾病的方法，其中所述抗炎的选择性COX-2抑制剂包含下式化合物
其中R2为
，其中A为羟基、C1-C4烷氧基、氨基、羟基氨基、一C1-C2烷基氨基、二C1-C2烷基氨基；X和Y独立为H或C1-C2烷基；n为1或2；R6为卤素、C1-C3烷基、三氟甲基或硝基；R9为H；C1-C2烷基；苯基或苯基C1-C2烷基，其中苯基是可选被氟或氯单取代的；-C(＝O)-R，其中R为C1-C2烷基或苯基，且是可选被氟或氯单取代的；或-C(＝O)-O-R1，其中R1为C1-C2烷基；若X和Y是不同的，则包含该化合物的(-)(R)与(+)(S)对映体；及其所有药学上可接受的盐形式、前体药物和代谢产物，它们在治疗学上具有治疗或预防疼痛和炎症的活性。当式(1)抑制剂以(-)(R)与(+)(S)对映体存在时，按照本发明，提供了单独的(+)(S)对映体，或者当两种对映体一起存在时，提供了它们的外消旋混合物或非外消旋混合物。
相当令人惊奇的是，以α-甲基乙酸官能度为特征的优选的咔洛芬类化合物所具有的犬COX-2选择性比任意含羧基经典NSAID高出很多倍，也比本领域所接受的作为高COX-2选择性化合物的某些含磺酰基与亚磺酰氨基NSAID高出很多倍。本发明的这方面内容体现在治疗或预防狗的炎症病变和疾病的方法上，该方法包括对其给以抗炎治疗上有效量的犬环加氧酶-2(COX-2)抑制剂，COX-2在所述狗中的体外IC50效价至少比犬环加氧酶-1(COX-1)在狗中的体外IC50效价高50倍；其中所述的抑制剂是选自一组抗炎化合物的一种，这组化合物的组成基本上是水杨酸衍生物；对氨基苯酚衍生物；吲哚和茚乙酸；杂芳基乙酸；芳基丙酸；邻氨基苯甲酸；烯醇酸；和烷酮；特别是选自由羧基C1-C4烷基芳基和/或杂芳基抗炎剂组成的组。特别是所述的抑制剂选自由芳基丙酸类非甾体抗炎药物组成的组。
优选用在本发明方法和组合物中的咔洛芬和咔洛芬衍生物类可以按照有机化学的普通技术人员所熟知的合成方法进行制备。例如，其中R6为卤素、C1-C3烷基、三氟甲基或硝基；R9为H或甲基的式(1)化合物的制备方法可以是使一种苯肼与一种环己酮反应，其中该苯肼的苯基部分具有所需的R6取代，肼的α-氮具有所需的R9取代，该环己酮具有所需的R2取代。然后使所得1，2，3，4-四氢咔唑进行芳化反应，生成所需的式(1)咔唑。进行芳化反应的条件可以是(1)使用一种芳化剂，例如对氯醌、邻氯醌、2，3-二氯-5，6-二氰基苯醌(DDQ)、硫、钯炭或氧化铅；在(2)一种溶剂的存在下，例如二甲苯、苯、甲苯、喹啉、二甲基亚砜(DMSO)和二甲基甲酰胺(DMF)；(3)在室温至反应混合物回流温度的温度范围内，优选为后者。
若A为羟基，则式(1)化合物是酸，及其与碱所形成的盐可以转化为式(1)的酰胺，其中A为氨基、羟基氨基、一C1-C2烷基氨基和二C1-C2烷基氨基；转化方法是(1)通过用五氯化磷(PCl5)处理生成对应的酰氯；随后是(2)与适当的胺反应剂反应，生成所需的酰胺，反应在当量吡啶或三乙胺的存在下进行，后者的碱是质子传递步骤所需的，并因此除去所生成的H+Cl-。步骤(1)中生成的该酰氯可以与适当的烷醇反应，生成式(1)的酯，其中A为C1-C4烷氧基。该反应也需要在一种碱的存在下进行，例如吡啶，后者能够中和所生成的H+Cl-，使其不会干扰任何对酸敏感的烷醇反应剂。
美国专利No.3896145详细描述了上述用来制备优选用在本发明方法和组合物的咔洛芬类化合物的合成方法，该专利全文在此引用。
若在R2取代基的定义中X和Y不同时，则存在手性(不对称)碳原子。若存在两种对映体的50∶50混合物时，则得到(R)与(S)对映体的外消旋混合物。按照本发明，已经发现，优选的式(1)咔洛芬类化合物的具有一个手性碳的(S)对映体具有意外的并足以令人惊奇的犬COX-2选择性，这是一种独特的生物活性，事实上是任何具有羧酸部分的经典NSAID所不具有的，尤其是其S对映体所不具有的。因此，优选的式(1)咔洛芬类化合物的具有一个手性碳的(S)对映体与事实上所有其他具有羧酸部分的NSAID相比，尤其是与其S对映体相比，对狗具有令人惊奇的低水平的不利胃肠反应和其他反应。因此也完全令人意外的是，由于它是一种高度选择性的犬COX-2同功酶抑制剂，咔洛芬的S对映体与事实上所有其他以羧酸部分为特征的NSAID相比，对狗具有令人惊奇的高水平的抗炎、止痛和解热活性。
本发明一种尤其优选的实施方式是在本发明的方法和组合物中仅使用咔洛芬、即6-氯-α-甲基-9H-咔唑-2-乙酸的(S)对映体作为活性成分或治疗剂。不过，其他实施方式也属于这类优选的本发明范围内。例如，可以使用(R)与(S)对映体的非外消旋混合物，如果那样的话，(S)对映体的含量为至少85％，优选地至少为90％，更优选地至少为95％，最优选地至少为99％。由于(R)与(S)对映体的分子量、密度等都是相同的，也就没有必要陈述上文叙述的百分比基础。换句话说，它们可以是重量百分比、体积百分比、化学当量百分比等等。包括上文所示量的(R)对映体的原因仅在于从实际意义上来说，不需要从外消旋混合物中绝对除去每一痕量的(R)对映体。这样做的原因还可能与有益的整体生物性质有关，本领域人员还将可以理解的是，本文另有叙述的优选的咔洛芬类化合物的剂量范围是关于对映体的50∶50外消旋化合物来进行描述的，其中涉及手性化合物。这样做在很大程度上是为了方便。如果用作治疗剂的活性成分包含不同于50∶50混合物的对映体混合物，或者如果治疗剂基本上仅包含100％的(+)(S)或(-)(R)对映体，本领域的普通技术人员将能够以非常直接的方式计算所需的实际剂量，只要将所述剂量乘以一个系数即可，该系数反映了对映体的用量与所述基于对映体的50∶50混合物的含量之间的比例关系。因此，如果对50∶50外消旋混合物来说，所述剂量为4mg/kg/天，那么实际上为100％(+)(S)对映体的相应剂量使用所述剂量的一半，即2mg/kg/天。
由于含有一种优选的咔洛芬类化合物的本发明药物组合物涉及使用含有50％(S)对映体的外消旋混合物，以及含有约99％或以下(S)对映体与不到50％(R)对映体的非外消旋混合物，因此必须将具有一个手性碳的式(1)咔洛芬类化合物的外消旋物拆分为旋光活性异构体。利用本领域已知的过程和技术，这一点是易于完成的。例如，某些外消旋混合物能够以低共熔混合物形式沉淀出来，然后可以进行分离。不过，通常优选的作法是利用化学过程进行拆分，按照该过程，外消旋混合物与一种旋光活性拆分剂生成非对映体。例如，一种旋光活性的碱，如D-α-甲基苄胺，它能够与羧基反应。然后用选择结晶法分离如此生成的非对映体，再转化为相应的旋光异构体。
本发明范围内包括了优选用在本发明中的咔洛芬类化合物的所有抗炎治疗活性和药学上可接受的盐形式、前体药物和代谢产物。尤其包括它的酸加成盐，其中对A的定义是除羟基以外的任意基团，生成该盐的方法是将式(1)化合物用药学上可接受的有机与无机酸处理，例如氢卤酸盐，如盐酸盐、氢溴酸盐、氢碘酸盐；其他无机酸及其对应的盐，如硫酸盐、硝酸盐、磷酸盐等；烷基与一芳基磺酸盐，如乙磺酸盐、甲苯磺酸盐和苯磺酸盐；和其他有机酸及其对应的盐，如乙酸盐、酒石酸盐、马来酸盐、琥珀酸盐、柠檬酸盐、苯甲酸盐、水杨酸盐、抗坏血酸盐等。
如果优选用在本发明中的咔洛芬类化合物中的A定义为羟基，那么它的盐可以通过用药学上可接受的碱处理来生成。这类碱的例子是碱金属氢氧化物，包括氢氧化钾、氢氧化钠和氢氧化锂；碱土金属氢氧化物，如氢氧化钡和氢氧化钙；碱金属醇盐，例如乙醇钾和丙醇钠；和各种有机碱，如哌啶、二乙醇胺和N-甲基谷酰胺。还包括式(1)化合物的铝盐。
除了使用各种上述式(1)化合物的盐形式以外，本发明范围内还包括使用上述化合物的所有止痛和抗炎治疗活性和药学上可接受的前体药物和代谢产物作为活性成分。特别是包括这样的衍生物其中R9定义为C1-C2烷基，尤其是甲基；苯基或苯基C1-C2烷基，尤其是苄基，其中的苯基是可选被氟或氯单取代的，尤其是4-氟-苯基；-C(＝O)-R，其中的R为C1-C2烷基或苯基，尤其是乙酰基和苯甲酰基，其中的苯基是可选被氟或氯单取代的；或-C(＝O)-O-R1，其中的R1为C1-C2烷基，尤其是乙酰氧基。这些N-部分在式(1)化合物的代谢过程中是易于断裂的，使这些特定的衍生物成为所需的前体药物。
本发明在上文刚结束的段落中已经具体描述了优选的式(1)咔洛芬类化合物。不过，关于提供抗炎的选择性COX-2抑制剂，本发明涉及更宽的范围。已如所示，这种选择性COX-2抑制剂包含这样一些抑制剂，其中根据体内和体外抑制水平，COX-2对COX-1的选择比至少为3∶1，该抑制水平是在全血中、在产生≥80％COX-2抑制作用的剂量或剂量范围内测量得到的。按照下文进一步描述的药代动力学(PK)数据，已经证明，在狗对本发明抗炎的选择性COX-2抑制剂的药理或毒性反应与所述抑制剂在例如所述狗的血液或血浆中的可用浓度之间存在相互关系。出于立即阐述本发明的目的，这里将狗的所述药理反应看作是由抑制COX-2同功酶所导致的抗炎反应；将狗的所述毒性反应看作是由抑制COX-1同功酶所导致的不良副作用，例如胃肠反应。因此，抑制性药物在所述狗全身循环中的浓度将与抑制性药物在其作用部位的浓度有关。
众所周知，最重要的药代动力学参数是生物利用度，指的是所述药物被吸收进入全身循环的部分；分布体积，涉及体内有效含有所述药物的空间大小；和廓清率，涉及身体排除特定药物的能力。按照本发明，COX-2对COX-1的选择比必须至少为3∶1，这是在体外测量犬全血中每种所述同功酶的百分(％)抑制作用的基础上测定的。进行所述体外测量的程序可以简要地概括为首先将选择性抑制剂供试化合物以预定总剂量水平对预选择的狗给药，例如2mg/lb。按照预定剂量制度进行给药，例如一日一次(s.i.d.)、一日两次(b.i.d.)等，然后从每只试验动物中收集全血样本。分别用钙离子载体刺激所述血液的凝血噁烷B2(COX-1活性)或用脂多糖(LPS)刺激所述血液的前列腺素E2(COX-2活性)，在此基础上化验COX-1和COX-2的活性。下文在举例说明时，更为详细地描述了这些程序。
COX-2的选择性是用在本发明中的抗炎抑制剂的一个必要特征，并要求与COX-1活性的抑制作用相比，其比例至少为3∶1。对给定化合物来说，简单地具有3∶1选择比是不够的，这是因为给定化合物在总剂量范围内的某点上可能具有所需的选择比，但是仍然不能提供足够全面的COX-2活性抑制作用。因此，另外需要本发明范围内的抗炎抑制剂必须提供≥80％COX-2活性抑制作用，优选为≥90％COX-2活性抑制作用。在治疗和预防疼痛和炎症方面，这被视为足以提供令人满意的药理活性所需的最低抑制作用水平。
对给定化合物来说，简单地在给定剂量下具有3∶1选择比、在其他剂量下提供≥80％COX-2活性抑制作用、优选为≥90％COX-2活性抑制作用，也是不够的。但不是在给药相同时间、在一定暴露水平(level ofexposure)下必须同时满足两种标准。因此，也需要在提供≥80％COX-2活性抑制作用的同一剂量浓度或剂量浓度范围内具有3∶1选择比。
为了证明上述限制适用于潜在的选择性COX-2抑制剂，考虑下面的例子。所述候选者按照上述程序进行评价，即在全血样本中测量对COX-1和COX-2的抑制作用，s.i.d.给药的总剂量为2mg/lb，在给药后2、4和12小时测量活性水平。将COX-1、COX-2和未处理样本的数据点标绘在％抑制作用对时间的图中，发现COX-1曲线在2小时处的％抑制作用为10-15％，但在12小时则已迅速降低为没有观察到抑制作用。而另一方面，在相同的时间阶段内，COX-2曲线仅有微小降低，2小时的％抑制作用约为95％，12小时的％抑制作用约为90％。
因此，应当注意的是，在s.i.d.给药为2mg/lb的剂量下，潜在的抑制剂具有令人满意的(1)至少为3∶1的选择比，和(2)≥80％COX-2抑制作用的限制，这是属于本发明范围内的抗炎的选择性COX-2抑制剂所需的条件。因为这两张图的数据都是在相同剂量(2mg/lb)和相同的12小时时间阶段下进行比较的，所以第三个限制条件也已是令人满意的，也就是说在相同剂量或剂量范围下，前两个限制条件是令人满意的。
对所述候选化合物的大量不同剂量可以进行类似测定，并对所得数据绘图。不过，用以证明联合结果的图是COX-1和COX-2抑制作用对剂量或血浆浓度、而不是对时间所作的图。代表COX-2数据的曲线最先出现，并迅速上升，起点为产生可鉴别的％抑制作用的最小剂量浓度，随着剂量达到更高的浓度，抑制作用达到≥80％的水平，之后成为渐近的。代表COX-1数据的曲线后出现，上升得也没有COX-2数据曲线那么迅速，且是在明显更低的％抑制作用水平下成为渐近的。如果一条平行于y轴的直线在相同剂量浓度下与两条曲线相交，所得到的数据点满足3∶1的比例和≥80％抑制作用的限制，那么这样的候选化合物就是属于本发明范围内的化合物。
利用上文使用过的不同的、但在本质上是相同的术语，可以看待或表述所包括的有关抗炎的选择性COX-2抑制剂这方面内容的本发明范围。例如，本发明可以被认为是确切地提供了一种方法，用于治疗或预防需要接受该治疗的家犬的疼痛和炎症病变和疾病，该方法包括对所述动物给以治疗疼痛和炎症所需有效量的抗炎的环加氧酶-2(COX-2)抑制剂，该抑制剂对所述动物的体外IC50效价比对所述动物的环加氧酶-1(COX-1)体外IC50效价至少高30倍，优选地至少为高40倍，更优选地至少为高50倍，还更优选地至少为高60倍，进而更优选地至少为高80倍，最优选地至少为高100倍；其中所述的抑制剂选自主要由下列抗炎化合物组成的组水杨酸衍生物；对氨基酚衍生物；吲哚和茚乙酸；杂芳基乙酸；芳基丙酸；邻氨基苯甲酸；烯醇酸；和烷酮。
按照上述本发明方法，更确切地提供了上述治疗或预防疼痛和炎症病变和疾病的方法，其中所述的式(1)抑制化合物的环加氧酶-2(COX-2)体外IC50效价比所述环加氧酶-1(COX-1)体外IC50效价至少高100倍；其中X和Y之一为H，另一个为甲基；其中当两种所得对映体都存在时，(+)(S)对映体的含量至少为75％。特别是提供了上述方法，其中对式(I)、对R2来说，n＝1，X和Y之一为H，另一个为甲基，A为羟基、C1-C2烷氧基或氨基；R6为卤素、尤其是氯，或为三氟甲基；R9为H、甲基、乙酰基、苯甲酰基或甲氧基羰基；其中当两种所得对映体都存在时，(+)(S)对映体的含量至少为85％，优选地至少为90％，更优选地至少为95％，最优选地至少为99％。
还进一步提供了上述方法，其中所述的抑制剂包含6-氯-α-甲基-9H-咔唑-2-乙酸；其中当两种所得对映体都存在时，(+)(S)对映体的含量至少为85％，优选地至少为90％，更优选地至少为95％，最优选地至少为99％。特别是提供了上述方法，其中所述的抑制剂完全由6-氯-α-甲基-9H-咔唑-2-乙酸的(+)(S)对映体组成。
本发明也可以被描述为提供了一种方法，该方法选择性地基本上仅抑制诱导环加氧酶-2(COX-2)，而基本上不抑制相应的组成环加氧酶-1(COX-1)，由此治疗或预防需要接受该治疗的家犬的相关疼痛和炎症病变和疾病，该方法包括对所述动物给以治疗疼痛和炎症所需有效量的上式(1)抗炎化合物，其中R2、X、Y、n、A、R6和R9是如上定义的；包括(-)(R)和(+)(S)对映体；和上述化合物所有具有抗炎治疗活性的和药学上可接受的盐形式、前体药物和代谢产物。这里再次说明，当式(I)抑制剂以(-)(R)和(+)(S)对映体存在时，按照本发明，提供了单独的(+)(S)对映体，或者当两种对映体都存在时，提供了它们的外消旋或非外消旋的混合物。
按照本质上相似于上述说明的其他方式，本发明可以进一步被描述为包括上述选择性地基本上仅抑制诱导环加氧酶-2(COX-2)的方法，其中所述的抑制剂包含6-氯-α-甲基-9H-咔唑-2-乙酸；其中当两种所得对映体都存在时，(+)(S)对映体的含量至少为85％，优选地至少为90％，更优选地至少为95％，最优选地至少为99％。特别是提供了上述方法，其中所述的抑制剂完全由6-氯-α-甲基-9H-咔唑-2-乙酸的(+)(S)对映体组成。
当使用式(I)化合物或其对映体或盐作为本发明方法和组合物中的活性成分时，可以将它们结合在标准的药物剂型中。例如，当以全身或局部、口服或胃肠外方式给药时，它们是有用的，并且为此与常用的药物赋型剂、稀释剂和助剂混合，例如有机和无机惰性载体物质，如水、明胶、乳糖、淀粉、硬脂酸镁、滑石、植物油、树胶、聚亚烷基二醇等。这些药物制剂可以以固体剂型加以利用，例如片剂、锭剂、栓剂、胶囊剂，尤其是与狗用可口食品结合或混合；或者它们可以以液体剂型给药，例如溶液、悬浮液、标准和反乳剂、和酏剂。可以加入的药物赋型剂和助剂包括防腐剂、抗氧化剂、抗微生物剂和其他稳定剂；湿润剂、乳化剂和悬浮剂，和防结块化合物；芳香和着色添加剂；用于提高压缩性的组合物，或用来为活性成分产生延迟释放、缓释或控释的组合物；改变药物制剂渗透压或起到缓冲剂作用的盐。已被成功使用过的确切剂型包括用于静脉内注射的5％咔洛芬混合微胶粒溶液，3％可口糊剂，和25mg、75mg与100mg剂量的口服片剂。
在尤其是抑制剂包含6-氯-α-甲基-9H-咔唑-2-乙酸、且两种所得对映体都存在的本发明方法和组合物中，使用非外消旋混合物是优选的实施方式。确切地说，在该优选的非外消旋混合物中，具有至少为85％的(+)(S)对映体含量是可取的，优选地至少为90％，更优选地至少为95％，最优选地至少为99％。于是在该非外消旋混合物中，(+)(S)对映体将是主要组分，不仅是因为它对环加氧酶-2(COX-2)的抑制能力显著强于(-)(R)对映体，而且因为与环加氧酶-1(COX-1)相比，它高度选择性地抑制环加氧酶-2(COX-2)。可选地包括相应更少量的(-)(R)对映体，也就是分别小于15％、小于10％和小于5％，其中环加氧酶或其他酶抑制性质的平衡被认为是可取的。当(-)(R)对映体的含量小于5％和小于1％时，包含它的原因通常反映了用于拆分对映体的方法的实用性。如果该方法消耗时间或需要原料，从实用观点来说，简单地允许该少部分的(-)(R)对映体存在到最后、即非外消旋混合物终产物中，通常是可取的。
本发明的式(1)抗炎抑制剂可以作为药物组合物的适当液体剂型，通过注射或输液对受治疗狗进行全身给药。狗身体中有大量部位和器官系统允许适当配制的药物组合物在一旦注射或输液后，散布于受治疗狗的整个身体和所有器官系统中。注射方法是将单剂量的药物组合物、通常用注射器注入有关组织中。最常见类型的注射是肌内、静脉内和皮下注射。相形之下，输液是将药物组合物逐渐地引入有关组织中。最常见类型的输液是静脉内方式。其他类型的注射或输液包括动脉内，真皮内或经真皮(包括皮下)或脊柱内、尤其是鞘内方式。在这些液体药物组合物中，抗炎抑制剂可以作为溶质包含在溶液中。这是这类组合物最常见和最优选的类型，不过它需要盐形式的抑制剂具有相当好的水溶性。水(或盐水)是目前最优选适用于这类组合物的溶剂。有时可以利用过饱和溶液，但是它们存在稳定性问题，从每天使用的基础上来看，是不实用的。
如果不可能得到具有必要程度水溶性形式的某种式(1)化合物，而这种情况有时是有可能发生的，那么就制备一种乳剂，这是在技术人员的技术范围之内的，该乳剂是作为不连续相或内相的一种液体的小液滴遍及作为连续相或外相的第二种液体的分散系，第二种液体是不能与之混合的。利用药学上可接受的乳化剂，保持两种液体处于乳化状态。于是，如果抗炎抑制剂是一种水不溶性的油，它也可以以乳剂的方式给药，其中抗炎剂是该乳剂的不连续相。如果抑制剂是水不溶性的、但是能够溶解在一种不能与水混合的溶剂中，也能够使用乳剂。尽管最常见的是用抑制剂作为被称为水包油型乳剂的不连续相或内相，也可能将抑制剂用作反乳剂的不连续相或内相，反乳剂通常被称为油包水型乳剂。这里，抗炎抑制剂是可溶于水的，能够以简单的水溶液给药。不过，一旦注射或输液到含水介质、如血液中，反乳剂发生逆转，提供了以下一个优点，使抑制剂分散到该含水介质中，且比使用水溶液所能得到的分散作用更为快速和有效。在反乳剂的制备中要用到本领域熟知的适当的药学上可接受的乳化剂。如果抗炎抑制剂具有有限的水溶性，它的给药方式也可以是以胶体或微颗粒形式悬浮在一种悬浮液中的固体，该悬浮液是用适当的药学上可接受的悬浮剂制备的。含有抑制剂的悬浮固体也可以配制成延迟释放、缓释和/或控释组合物。
尽管全身给药最经常是通过液体注射或输液的方式进行的，也有很多情况是以固体形式释放抗炎抑制剂，并且是有利的、甚至是必要的。进行固体的全身给药的方式是滴注、吸入或吹入以适当固体形式的含有抑制剂的药物组合物。将固体植入组合物安装到适当的身体组织或体腔中，可以是抑制剂的滴注法所必需的。植入物可以包含由生物相容的和生物腐蚀的材料制成的基质，并使固体抑制剂颗粒分散其中，或者还可能使液体抑制剂的液滴或孤立单元陷入其中。可取的是该基质将被破碎，并完全被身体吸收。优选地还对基质的组成进行选择，使其提供抑制剂长时间的控释、缓释和/或延迟释放，甚至长达几个月。
本文所述的大量剂型可以进行配制，以提供活性成分从所述剂型中的控释、缓释和/或延迟释放。在提供了抗炎的选择性COX-2抑制活性成分的延迟释放、缓释和/或控释的本发明尤其优选的药物组合物中，包括了所有这样的口服给药剂型，它们对COX-2同功酶活性产生≥80％的抑制作用，并使所述抑制剂至少为10μg/ml的血浆浓度保持至少4小时；优选地至少为8小时；更优选地至少为12小时；还更优选地至少为16小时；进而更优选地至少为20小时；最优选地至少为约24小时。优选地，所包括的上述剂型对COX-2同功酶活性产生≥80％的抑制作用，并使所述抑制剂至少为15μg/ml的血浆浓度保持至少4小时，优选地至少为8小时，更优选地至少为12小时，还更优选地至少为20小时，最优选地至少为约24小时。更优选地，所包括的上述剂型对COX-2同功酶活性产生≥90％的抑制作用，并使所述抑制剂至少为20μg/ml的血浆浓度保持至少4小时，优选地至少为8小时，更优选地至少为12小时，还更优选地至少为20小时，最优选地至少为约24小时。
因此按照本发明，有用的咔洛芬控释剂型在一次口服2mg/lb剂量后，保持咔洛芬血浆水平在一天的多数时间内大于2μg/ml。按照本发明，优选的咔洛芬口服控释剂型保持血浆咔洛芬浓度大于10μg/ml的时间长于保持可比较的血浆水平的咔洛芬立即释放剂型，其中所述的立即释放剂型和控释剂型的给药剂量是相等的，例如2、1.8、1.6或1.4mg/lb。例如，本发明优选的2mg/lb口服控释剂型保持血浆咔洛芬浓度大于10μg/ml的时间长于10.5小时。
含有1.8、1.6和1.4mg/lb剂量的立即释放咔洛芬剂型保持血浆咔洛芬浓度大于10μg/ml的时间分别为9.5小时、8.5小时和7.5小时。优选的1.8mg/lb口服控释咔洛芬剂型保持血浆咔洛芬浓度大于10μg/ml的时间长于9.5小时。同样，1.6mg/lb和1.4mg/lb剂量的持续时间阈值分别为8.5小时和7.5小时。利用假定的线性药代动力学，类似地可以计算剂量高于2mg/lb或低于1.4mg/lb的优选口服控释咔洛芬的性能特性。更优选的口服控释咔洛芬剂型保持血浆咔洛芬浓度大于10μg/ml的时间阶段长于或等于立即释放咔洛芬剂型以任意更高剂量给药后所观察到的结果。因此，这些控释剂型在犬血中保持至少80％COX-2抑制作用的时间阶段长于由更高剂量的立即释放剂型所获得的结果。
最优选的口服控释咔洛芬剂型能够保持血浆咔洛芬水平高于大约10μg/ml的时间阶段长于或等于立即释放的2mg/lb咔洛芬剂型所观察到的时间(10.5小时)，其中所述的口服控释咔洛芬剂型是以低于2mg/lb的剂量给药的。为了进行比较，将2mg/lb口服立即释放剂型的表现作为基本标准，这是因为按照本文所述的本发明，2mg/lb/天是目前被推荐的和被接受的有效口服剂量。
术语“植入物”一直表示含有抗炎抑制剂的固体药物组合物，术语“药库”通常指含有抗炎抑制剂的液体药物组合物，它沉积在任意适当的身体组织或体腔中，形成贮水器或水池，后者缓慢移行至周围组织和器官，最终成为全身分布。不过，本领域对这些区别不总是很严格的，所以，令人瞩目的是在本发明范围内包括了液体植入物和固体药库，和各自的甚至是混合的固体和液体形式。栓剂可以被认为是植入物的一种类型，因为它们所包含的基质在室温下为固体，但在体温下熔化，缓慢释放充满其中的活性成分进入身体的周围组织，其中活性成分被吸收和转运，实现全身给药。
通过粉末的吸入法或吹入法，也可以实现全身给药，粉末即含有抑制剂的颗粒组合物。例如，利用常规的烟雾化颗粒制剂用装置，以粉末形式的抑制剂可以被吸入肺中。作为颗粒制剂的抑制剂也可以通过吹入法给药，也就是说，通过简单的撒布或利用常规的烟雾化颗粒制剂用装置，吹入或分散到适当的身体组织或体腔中。按照充分理解的原理和已知材料，也可以将这些颗粒制剂配制成提供抗炎抑制剂的延迟释放、缓释和/或控释。
可以以液体或固体形式利用本发明抑制剂的其他全身给药方式包括经真皮、鼻内和眼用途径。特别是按照熟知的药物释放技术制备的经真皮药贴是可以制备的，并贴于受治疗狗的皮肤上，其后基于所配制的溶解度性质，活性成分移行穿过狗皮肤的表皮并进入真皮层，在那里被溶解为狗大循环的一部分，最终提供历经所需延长时间阶段的活性成分的全身分布。还包括植入物，放置于受治疗狗皮肤的表皮层下方，即皮肤的表皮和真皮之间。这样一种植入物将按照该释放技术的熟知原理和常用材料进行配制，并且可以以这样一种方式制备，以提供活性成分的控释、缓释和/或延迟释放，进入狗的全身循环。该表皮下(皮下)植入物提供了与经真皮药贴相同的安装设施和释放效率，但是不会受到因为暴露在狗皮肤顶层上而降解、损害或意外除去的限制。
也可以设计适用于对狗口服给药的特殊类型的药物组合物。适用于经口给药的药物组合物可以是固体或液体，即用嘴摄食或通过嘴给药。优选的用于全身给药的经口剂型为固体，例如可口的口用组合物，如速溶可口的薄饼、片剂、胶囊剂、caplet、锭剂、糖锭等等；和液体，例如溶液、悬浮液、乳剂、酏剂、酊剂等等。可以使用适用于对狗口服给药的特殊类型的药物组合物，包括但不限于释放到受治疗狗舌头背面的口服糊剂、通过加入到狗食中释放的颗粒形式、活性成分随着可口的咀嚼被消耗的可咀嚼形式、或者这样一种可咀嚼形式，在受治疗狗的咀嚼过程中，可以通过自不被消耗的咀嚼物中过滤出活性成分来进行释放。正如本领域中已知的那样，该可口组合物的配制考虑到了犬在对剂型的咀嚼程度上将产生的行为和所得的给药水平。
至于本文所述的其他给药途径和相应剂型，打算用来口服给药的剂型也进行适当配制，以提供活性成分的控释、缓释和/或延迟释放。一般来说，这些剂型包括延迟释放的口服片、胶囊和多颗粒，以及肠衣片和胶囊，肠衣剂型防止活性成分在狗胃中的释放和吸收，并促进在胃远侧的肠释放，即在狗的肠中。其他典型的口服剂型包括缓释口服片、胶囊和多颗粒，它们以控释方式提供活性成分历经较长时间阶段的全身释放，例如24小时。如果活性成分的快速释放是所需的或可取的，那么可以将控释口服剂型制备成速溶片的形式，其中也优选包括活性成分的高度可溶的盐形式。
在很大程度上出于方便的考虑，本文对包括在本发明范围内的剂型的说明将这些剂型分为用于口服和全身给药的，还分成固体和液体形式。不过，这些区别是相当随意的，无论如何不应被认为是对关于给药途径和剂型的本发明范围的限制。例如，本文的说明已经很明显的是，某些给药途径尽管在表面上是口服，也可以具有全身作用或结果。本文在液体和固体剂型之间的划分界线在实际应用中也可以是模糊的。例如，适用于本发明的口服剂型包括包封溶液，这是一种固体与液体的混合制剂。微乳剂也在本发明范围内，它也可以是以固体与液体的混合剂型为特征。
抗炎抑制剂可以局部给药到受治疗狗的炎症部位。局部对全身给药需要更具体对更一般的使含有抗炎抑制剂的药物组合物释放到患有疼痛和炎症的狗的方式。不过，药库和植入物以及延迟释放、缓释和/或控释制剂的使用会使这些区别变得模糊。因此，上述含有抗炎抑制剂的液体和固体药物组合物大部分也能用于局部给药，但是重点在于为所述组合物选取组分，该组合物将促进抑制剂吸收进入位于给药部位的局部组织，但是也将防止抑制剂浸润和移行进入更外侧和更远侧的组织而导致全身转运。
局部给药集中在适当的组织和体腔中，抗炎抑制剂可以注射、输液、植入、沉积、插入、滴注或吹入其中。其给药方式可以包括但不限于动脉内、关节内、软骨内、肋内、囊内、真皮内或经真皮、束内、韧带内、髓内、肌内、鼻内、神经内、眼内-即眼部给药-、骨内、骨盆内、心包内、脊柱内、胸骨内、滑膜腔内、跗骨内、鞘内或静脉内。
含有抑制剂的液体形式的药物组合物所提供的优点在于允许液体注射进入或非常接近于炎症部位。这种情况特别涉及发炎的关节和变性的关节疾病。通过将抑制剂直接注射到关节内，有可能使抑制剂在较短时间内达到较高浓度，不仅在本质上提高了抑制剂与炎症部位的接近程度，从而提高了抑制剂的治疗活性，而且与此同时，减少了事与愿违的副反应的发生，否则这些副反应是有可能发生的。结果是抑制剂的局部浓度较高，而相应地全身转运浓度较低。
也可以将含有抑制剂的药物组合物制成注射剂，其中的药物组合物是延迟释放、控释或缓释形式。这些被确认的组合物的制剂可以是固体、半固体、凝胶或其他液体/固体组合，其中可腐蚀基质或一系列包衣用来提供抑制剂以预定速率的连续释放，如果需要的话，释放速率也可是可变的。术语“延长释放”和“长效”以及其他用来描述这些制剂。所有这些使用了不同可生物腐蚀聚合物-例如各种纤维素聚合物-与天然材料-例如玉米淀粉和硬脂酸镁-的组合，以得到包含在基质内的抑制剂的缓慢和/或均匀分散。如果是适当的液体或可悬浮形式，可以将这些药物组合物注射到部位中，或者如果在性质上更接近于固体，可以通过其他方式释放之。
将用于治疗疼痛和炎症的治疗有效量的式(I)抑制剂化合物给受治疗的狗给药，给药量以每天每公斤狗体重毫克计算“毫克/公斤/天”。本文所用术语“每天”不应当理解为必须是对受治疗的狗来说任何特定剂型都以一天为基础给药。该术语“每天”只是表示为方便的但又是任意的最小时间段，以用作衡量所给药抗炎抑制剂剂量的总量单位的部分单位。该剂量，即，用于治疗疼痛和炎症的该抑制剂的治疗有效量范围通常是大约0.01毫克/公斤/天-大约20.0毫克/公斤/天，优选是大约0.1毫克/公斤/天-大约12.0毫克/公斤/天，更优选是大约0.5毫克/公斤/天-大约8.0毫克/公斤/天。例如，一只50lb.的狗重23公斤(1公斤＝2.2lb.)，因此，最好是每天用大约10毫克-大约180毫克的治疗剂进行治疗。其部分用量不是很大，而且其单剂量可以合适分成与可方便获得的单位剂量相当的数量。如果剂型是注射液，则可以更准确地获得优选剂量。另一方面，如果剂型是口服片剂，则必须制备成较为接近的优选剂量。因此，可以通过将一个25毫克的片剂分成两半而获得大致一个10毫克的单剂量，而且可以通过将一个100毫克和一个75毫克或者三个25毫克的片剂一起使用获得一个180毫克的单剂量，因为这些是用于口服片剂的典型单位剂量。正如本领域普通技术人员所公知的，如果最常用的剂型是口服片剂，而且大量的狗均以每天量为基础进行治疗，则可以通过使用一种含有全部可获得单剂量片剂，如，25毫克、75毫克和100毫克片剂的调配器可方便使用。实际上，通过这种方式利用所说片剂和/或其半片的组合可以获得任何接近的优选单剂量。
对于熟练技术人员来说，如兽医，不仅必须确定优选的给药途径和相应剂型与剂量，而且该技术人员还必须确定给药方案，即，给药次数。一般来说最常见的是在一天一次(s.i.d)和一天两次(b.i.d)之间选择，并且前者会提供更为快速和强烈的治疗，而后者会提供不太强烈但更为持续的治疗。尽管如此，这种一般的方案没有考虑进去一些重要的可变因素，如特异性的疼痛或相关炎症、所用特定治疗剂及其药代动力学、以及所治疗的特定患者(狗)。对于准许的市场上销售的产品，上述的很多信息已经由为通过批准而进行的临床研究结果所提供。在其他情况下，这种信息可以根据当时的说明书中的教导和指示参考技术人员的知识和技术而直接获得。也可以将获得结果与以相同检测方法对市场批准产品的进行相应评价所获得数据相互联系起来。
上述列举的剂量范围(这些剂量范围在本文的其他地方也有引用)是用于具有手性碳原子的式(I)化合物的外消旋混合物，或用于没有手性碳原子的式(I)单一化合物。正如本领域普通技术人员，即，执行兽医或在动物健康方面具有高级水平和经验的人所能理解的，除了涉及到式(I)化合物的外消旋混合物之外，该抗炎治疗有效量将会发生变化，例如，如果混合物的85％是(S)-对映异构体，这通常会趋向于减少所需剂量。这种考虑是基于一种假设的相同趋向，以及(S)-对映异构体比(R)-对映异构体更为有效的事实。尽管如此，对于两种对映异构体活性之间的差异程度在确定合适剂量时还必须考虑到其他方面的差异，特别是两种对映异构体药代动力学之间的差异。例如，已经发现在(+)(S)和(-)(R)对映异构体之间其清除率有很大区别。这又会对所用活性化合物的量产生一种可计算的影响。通常，是由技术人员根据不同具体情况而作出决定，但是这种决定是在本领域普通技术的范围之内，从而形成一种方法，借此可以获得为支持计算所必须的数据。
典型的剂型和用量包括(1)以4.0毫克/公斤体重/天的剂量的静脉内给药咔咯芬，注射到头右侧静脉内；(2)以4.0毫克/公斤体重/天的剂量给药，舌下口服咔咯芬口服糊剂，进食前1小时给药；和(3)以4.0毫克/公斤体重/天的剂量，给被治疗的狗舌下口服咔咯芬25毫克、75毫克和100毫克的片剂，进食前1小时给药。
本发明的活性成分还可以与其他的治疗活性成分结合使用，这对于本领域普通技术人员来说是显而易见的，而且通常根据本发明治疗剂给药环境来确定。例如，如果一个关节同时感染有多种微生物，如，细菌、真菌、原虫、病毒等，并出现严重的炎症，理想的是将本发明的活性成分与一种或多种抗菌素、抗真菌剂、杀原虫剂、抗病毒剂和类似治疗剂结合使用。本发明的活性成分不仅要与上述类型的其他NSAIDs结合使用，而且还要与炎症其他因素的抑制剂结合使用，以便获得多重抗炎抑制活性。其他类型的这种抑制剂及其例子包括，例如，H1-受体拮抗剂；激肽-B1-和B2-受体拮抗剂；前列腺素抑制剂如PGD-，PGF-PGl2-，和PGE受体拮抗剂；血栓烷A2(TXA2-)抑制剂；5-和12-脂肪氧合酶抑制剂；白三烯LTC4-，LTD4/LTE4-，和LTB4-抑制剂；PAF-受体拮抗剂；带有各种亲水基团的金硫基团形式的金；免疫抑制剂，例如，环孢菌素，硫唑嘌呤，和甲氨喋呤；抗炎糖皮质激素；青氨酶；羟氯喹；抗痛风药如秋水仙碱，黄嘌呤氧化酶抑制剂如别嘌呤醇，和利尿酸剂如羧苯磺胺，苯磺唑酮，和苯溴香豆酮。
因为炎症最主要发生于老龄狗当中，所以对于本领域普通技术人员来说可以预料到本发明的抗炎剂也可以与能够治疗老龄狗当中大量出现的疾病、综合征和症状的治疗剂联合给药。这些治疗剂以及用它们治疗的疾病包括，例如，认识治疗剂以拮抗记忆丧失或障碍。另一大类的这种治疗剂包括抗高血压药和其它心血管药物，这些药物可以缓解高血压、心肌缺血，包括心绞痛、充血性心力衰竭和心肌梗死例如利尿剂、血管扩张剂如肼苯哒嗪、β-肾上腺素受体拮抗剂如心得安、血管紧张素-II转化酶抑制剂(ACE-抑制剂)如用于治疗老龄狗左房室瓣不全的依那普利、以及依那普利单独使用和与中枢肽链内切酶抑制剂联合使用、血管紧张素-II受体抑制剂如罗撒坦(losartan)、肾素抑制剂、钙通道阻滞剂如心痛定，交感神经阻滞剂如甲基多巴、α2-肾上腺素能兴奋剂如可乐宁、α-肾上腺素受体拮抗剂如哌唑嗪、和HMG-CoA-还原酶抑制剂(抗高胆固醇血证药物)如洛伐他汀。
还有其它类型的这种治疗剂包括抗肿瘤药，尤其是抗有丝分裂药包括长春花碱如长春碱和长春新碱，用于治疗各种肿瘤；用于治疗肾功能衰竭的治疗剂；用于治疗狗体重过于肥胖的减肥药；用于治疗通常寄生在狗中的内和外寄生虫的抗寄生虫药；和用于治疗各种狗搔痒证的抗搔痒证药物。
其它可以与本发明抗炎剂结合使用的药物包括生长激素催分泌素；强力止痛药；局部和全身麻醉药；和H2-受体拮抗剂以及其它胃保护剂。本领域普通技术人员应当承认上述治疗剂的某些组合可以经常被用来治疗狗的各种急性疾病，例如，与退行性关节疾病同时发生的细菌感染。尽管如此，如果技术人员在治疗狗的慢性疾病时没有更好的方案，也可以采取同样的治疗方法。
根据用于治疗这种目的的方案，可以将本发明的抗炎剂与用于治疗慢性疾病如骨关节炎的常规其它用药结合使用。还应当认识到联合给药可以设计出几种不同的剂型，并且属于本发明的范围之内。例如，本发明的抗炎剂可以与一种或几种其它治疗剂简单地形成所需的复合，制成方便的剂型，如含有该复合全部药物的口服片剂。技术人员在制剂过程中可以通过制备具有不同释放时间的所说药物的控释剂型对各种药物的不同半衰期进行调剂，从而获得相对统一的给药剂量。也可以根据制剂领域的公知原则制备用作单位剂型的医疗饲料，其中将复合用药物简单地与饲料组合物一起混合。本发明也可以通过同时给药所需复合给药的几种药物而达到复合药物的联合给药。这种联合给药甚至可以通过不同的剂型和不同的给药途径来实现。本发明也可以根据各种不同但是常规和连续的给药方案来实现这种组合，从而保持被治疗狗的药物血浆浓度达到理想水平，即使这样，构成该药物组合的各个单独药物可以不必同时给狗给药。所有这些联合给药均属于本领域设计和给药技术的范围之内。
本发明的方法和组合物可用于治疗或预防狗的疼痛和/或炎症。疼痛是对不适、痛苦或悲痛的或多或少的局部敏感性，它源于局部神经末梢的刺激，它的发生或被认为是与炎症无关。例如，慢性疼痛或因手术引起和/或相关的疼痛，例如，手术局部周围和手术后疼痛，开始时与炎症没有联系。鸦片类止痛剂能够有效地治疗手术后疼痛，但对炎症没有影响。尽管如此，非类固醇性抗炎药在治疗某些手术后疼痛方面优于这些鸦片类止痛剂，并且它们对缓解因炎症引起的疼痛受体对正常无痛机械或化学刺激的敏感性特别有效。尽管非类固醇类抗炎药能够抑制前列腺素的生物合成和释放(前列腺素是炎症介导因素)，但是有数据表明非类固醇类抗炎药可以通过抑制前列腺素合成之外的其它机制产生止痛效果。
因此，本发明被描述为适用于治疗和预防疼痛和炎症，因为二者在组织损伤和疾病过程中以及在COX-2介导的病态中最常见的是同时出现。尽管如此，关于本发明在应用于治疗和预防疼痛和炎症时并非有意将二者必须牵强地联系在一起；而且，在本发明说明书当中疼痛和炎症二者被认为是本发明方法、组合物和其它方面的对象，可以是单独和分开的，也可以是组合在一起。
炎症过程本身有许多促发因素，包括，感染因素、局部缺血、抗原-抗体反应和热或其它物理损伤。对这些因素的每一种作出的反应具有不同的特征，但是它们都具有一个很强的共性。临床症状包括红斑、肿胀、触痛和疼痛。可以将其分为三个不同的期，但是每一期的产生机制各不相同。第一期，即短暂急性期，包括局部血管扩张和毛细血管通透性增加；第二期，即延迟期，亚急性期，包括白细胞和巨噬细胞浸润；第三期，即慢性增殖期，包括组织变性和纤维化。非类固醇类抗炎药作为一类抗炎治疗剂，似乎通过抑制酶的产生和前列腺素的释放这一炎症和发热病理机制而发挥作用。但是，非类固醇类抗炎药并不抑制二十烷类物质如白细胞三烯的形成，而它们可以引起炎症，该抗炎药也不影响许多其它炎症介导因素的形成。
根据本发明已经发现式(I)的咔咯芬类化合物，特别是咔咯芬本身，尤其是咔咯芬的(S)-对映体，是带有羧酸基团的非类固醇类抗炎药当中唯独对COX-2同工酶具有惊人的意想不到的高度选择性。虽然这种特定同工酶是炎症的一种重要介导因子，但是还有其它许多重要的炎症介导因子与非类固醇类抗炎药没有相互作用，或者说与非类固醇类抗炎药的作用之间的关系尚不清楚。这些因子包括各种白细胞；细胞粘合分子；可溶性因子包括C5a，PAF和白细胞三烯B4；细胞素如IL-1和TNF；生长因子如GM-CSF和TGF-β1；组胺，缓激肽和5-HT。尽管本申请中将式(I)的化合物表示为COX-2的特定抑制因子，但是本申请并非表示将其限定为式(I)化合物所能表现的其抗炎活性的特定作用机理。
的确，前文曾经指出咔咯芬及式(I)其它化合物的抗炎作用机理尚不清楚，而且以前也有过说明其实际作用机理可能涉及到中性白细胞，也称作多形核白细胞。PAF刺激这些细胞聚集，释放白细胞三烯和溶酶体酶，并产生过氧化物，所有这些都促使炎症的发生。
已经从整体上对咔咯芬和式(I)化合物在非类固醇类抗炎药中的独特性进行了说明。尽管式(I)化合物很清楚属于非类固醇类抗炎药，但是不容易将其分入任何已知的非类固醇类抗炎药的化学分类水杨酸......................................阿司匹林对氨基酚..................................扑热息痛吲哚/indene乙酸............吲哚美辛，苏灵大，乙哚乙酸(etodolac)乙酸杂芳酯..............甲苯酰吡酸，双氯高灭酸，酮咯酸氨丁三醇芳基丙酸..................布洛芬，奈普生，氟联苯丙酸林氨苯甲酸..............甲灭酸，甲氯灭酸烯醇酸............氧噻嗪类(oxicams)，例如，吡氧噻嗪，痛能喜康(tenoxicam)吡唑烷二酮类.............................保泰松烷基酮类(Alkanone)....................奈丁美酮咔咯芬及式(I)化合物尽管是丙酸，也不属于芳基丙酸的小类，因为咔咯芬的咔唑基团是杂芳基，而不是芳基。咔咯芬也不属于乙酸杂芳酯小类，因为咔咯芬是丙酸，而不是乙酸。在不破坏分类基础的情况下则不能将咔咯芬分入任何小类。在上述公认具有人COX-2特异选择性而证实可用于治疗人体疾病的唯一非类固醇类抗炎药是奈丁美酮，它不是一种酸，而是一种2-丁酮。尽管该活性成分是一种酸代谢物，该代谢物在狗中只有一小部分咔咯芬的COX-2选择性。
在此广泛分类中的许多传统非类固醇类抗炎药的例子列于下表，其中给出了每一化合物的通用名和IUPAC名称及其结构式。所有列举的化合物在美国药典协会(Rockville，MD.)1995年C.A.Fleeger版的美国外来名称和国际药物名称USP词典中均有记载。USAN(美国外来名称)项目对药物给出简易和适用的非专有名称，而且一旦该药物进入临床观察阶段就会启动其名称选择程序。在下表的开始给出了咔咯芬的名称和结构式以便进行比较。
表1
1注册的商标；准许用于美国以外的狗
优选实施方案的描述咔咯芬类化合物的特征是具有α-甲基-乙酸官能团，在狗体内的COX-2选择性比上表中任何含有羧基或磺基或磺酰基的非类固醇类抗炎药都大许多倍。为了说明这种意外的特性，在本发明化合物咔咯芬与选自上表中的某些化合物之间进行了COX-2选择性比较。通过下述的实施例对所得结果进行说明。
如上所述，通常将对COX-2的选择性确定为COX-1抑制率与COX-2抑制率的比，或COX-2抑制率与COX-1抑制率的比。在本发明当中，为了简便起见，使用了狗体内的COX-1抑制率与COX-2抑制率的比。两个抑制率的值是IC50值，其含义是实验化合物活性越强，其IC50值就越大小。这实际上与COX-1∶COX-2的比成反比，而实验化合物对狗COX-2具有非常大的选择性，其比率为较大数与较小数的比。因此，对狗COX-2最具选择性的实验化合物是那些具有最高比率的化合物。
实施例1咔咯芬及其它非类固醇类抗炎药对狗环氧合酶-1和-2抑制率的比较评价对狗COX-1活性评价的方案设计在测试的前一天用0.1毫升的DMSO/9.9毫升的汉格氏平衡盐溶液(HBSS)溶解并稀释测试药物化合物，并在4℃下储存过夜。在实验的当天，从供体狗抽取血液并加入构橼酸盐，在室温下以190×g离心25分钟，将获得的富集血小板的血浆转移到一只新的试管中用于进一步实验。通过在室温下以1500×g离心10分钟洗涤该血小板。用含有汉格氏缓冲液(不含Ca)和0.2％牛血清白蛋白(BSA)及20mM HEPES的血小板缓冲液洗涤该血小板。然后将血小板样品调节至1.5×107/ml，之后，将50μl钙离子载体(A23187)和氯化钙溶液加至含有50μl测试药物化合物稀释液的平皿中，得到最终浓度为1.7μMA23187和1.26mM Ca。然后，加入100μl洗涤的狗血小板，并将样本在37℃下保温15分钟，之后加入20μl的77mM EDTA终止反应，然后将平皿在4℃下以2000×g离心10分钟，之后取50μl血清通过酶联免疫测定(EIA)检测血栓素B2(TXB2)。通过每个平皿的标准曲线计算TXB2的pg/ml，从中能够计算出测试药物化合物的COX-1百分抑制率和IC50值。
对狗COX-2活性的评价方案使用来自美国典型培养物中心的保藏号为DH82的狗组织细胞瘤(巨噬细胞样)细胞系建立各种测试药物化合物的COX-2抑制活性评价方案。向含有这些细胞的烧瓶中加入10μg/mL的LPS，之后将烧瓶中的培养物孵育过夜，在测定的前一天制备并使用上述检测COX-1方案的同样测试药物化合物进行COX-2测定。从培养物烧瓶中刮取收集细胞，然后用最低伊格尔介质(MEM)和1％胎牛血清洗涤，在1500rpm下离心2分钟，并调节至浓度为3.2×105个细胞/毫升。向50μl的测试药物稀释液中加入50μl的花生四烯酸MEM液，得到最终浓度10μM，然后加入100μl细胞悬浮液获得最终浓度为1.6×105个细胞/毫升。将测试样本悬浮液孵育1小时，然后在4℃以1000rpm离心10分钟，之后将每份50μl的等份每种测试药物样本转移到EIA平皿中。进行EIA实验测定前列腺素E2(PGE2)，并从每个平皿上的标准曲线计算PGE2的pg/ml浓度。从此数据中能够计算出每种测试药物化合物的COX-2百分抑制率和IC50值。在几个月的时间内重复观察COX-1和COX-2的抑制率。将所得结果进行平均，计算单独的COX-1∶COX-2比。将所得数据与每个测试样本所进行的测试数据表示列于下表中。
表2
实施例2
用狗全血体外测定咔咯芬的COX-1和COX-2活性抑制率本实验的目的是通过体外方法测定咔咯芬在狗全血中对COX-1和COX-2活性的抑制能力。以10mg/kg外消旋6-氯-α-甲基-咔唑-2-乙酸(咔咯芬)的剂量给三只狗口服(PO)给药胶囊剂型的药物，再以2mg/kg的咔咯芬以相同方式给另外三只狗给药，还有三只狗是不给药。在实验给药前从全部狗身上采集零小时血样，在此之后的1、3、和6小时采集血样。准备试管使之含有2μl的(A)钙离子载体A23187达到最终浓度为50μM，它可以刺激血栓素B2(TXB2)的产生用于COX-1活性测定；或者(B)脂多糖(LPS)达到10μg/ml的最终浓度，它可以刺激前列腺素E2(PGE2)的产生用于测定COX-2活性。用作对照组的测试试管含有载体，在加入任何试剂时都不会产生激发。向每个上述测试试管中加入500μl血样，之后，如果试管含有钙离子载体，则在37℃下保温1小时，如果试管含有LPS，则保温过夜，保温之后，加入10μl的EDTA达到最终浓度0.3％，以便防止在融化冷冻血浆样本之后有时出现的血浆凝聚。在4℃离心保温的样本，收集-200μl的所得血浆样本并储存在-20℃的聚丙烯96-孔培养皿中。为了确定本实验的终点，使用来源于Cayman的酶联免疫测定(EIA)试剂盒，利用标记物与抗体的竞争性结合测定TXB2和PGE2的产生，并通过比色法确定终点。将血浆样本稀释到大约在诊断或研究工具试剂盒中所提供的标准用量范围之内，即，对于TXB2是1/500而对于PGE2是1/750。
在下表3中的数据表明了基于其零小时值的COX-1和COX-2活性百分抑制率。该数据表示为每样本产生的pg/ml TXB2和PGE2的处理组平均值。在所说数据值当中没有血浆稀释因素的影响。
表3中的数据表明2mg/kg剂量在所有时间点都表现出明显的COX-2抑制。与10mg/kg剂量组获得的数据比较，发现在给药后3和6小时COX-2抑制有所下降。表3中的数据还表示2mg/kg剂量在任何时间点对COX-1活性没有明显抑制。此结果与实验中观察到的狗对咔咯芬的明显耐受性相一致。10mg/kg剂量组的数据表明在每一时间点都具有完全的的COX-2活性抑制，而在1小时开始具有非常强的COX-1活性抑制，在3和6小时时间点的值较平缓。因此，表3中的数据清楚地表明在2mg/kg剂量浓度的咔咯芬具有良好的COX-2选择性。随着剂量从2mg/kg增加到10mg/kg，对COX-1活性抑制的增加表现的更为明显。
表3
当测定的百分抑制率大于对照组测得的抑制率时则观察到了COX抑制。上述表中的百分抑制率可以根据下述公式直接计算出来
实施例3用狗全血体外测定咔咯芬的COX-2活性抑制率本实验按照上述实施例2的步骤进行，只是按照下述的详细描述有所改变。
在零小时以2mg/kg外消旋6-氯-α-甲基-咔唑-2-乙酸(咔咯芬)的剂量给三只狗片剂口服(PO)给药，再以4mg/kg的咔咯芬以相同方式在零小时给另外三只狗给药，还有三只狗是不给药。在实验给药前从全部狗身上采集零小时血样，在此之后的2和4小时采集血样。准备试管使之含有2μl的脂多糖(LPS)达到10μg/ml的最终浓度。未给药组的测得试管用作对照组。向每个上述测试试管中加入500μl血样，之后，在37℃下保温过夜，保温之后，加入10μl的EDTA达到最终浓度0.3％。在4℃离心保温的样本，收集-200μl的所得血浆样本并储存在-20℃的聚丙烯96-孔培养皿中。使用来源于Cayman的酶联免疫测定(EIA)试剂盒测定PGE2的产生并通过比色法确定终点。将血浆样本稀释到用于PGE2的1/750。
还要通过使用一种带有5微米，100×4.6mm Chromtech手性AGP柱和由10∶90v/v 2-丙醇∶0.1M磷酸盐缓冲液PH6.0组成的流相及荧光检测(285nm激发光，345nm发射光)的HPLC来测定血浆样本的总血浆咔咯芬浓度。在加入(S)-甲氧奈丙酸作为内标准之后用0.05M构橼酸PH5.1配制血浆样本缓冲液，然后用4∶1v/v的乙醚∶二氯甲烷萃取。分离乙醚层，然后再用0.005M Na2CO3反萃取，之后吸出有机相弃去，用0.05M构橼酸PH5.1将水相配制成缓冲液，再用乙醚∶二氯甲烷萃取。将乙醚转移至清洁试管中，在氮气下蒸发，将在HPLC流相中再次形成残留物用于分析。
下述表4的数据表示PGE2(pg/mL/孔)的产生，基于每只狗零小时值的COX-2活性百分抑制率，以及每只狗的血浆浓度。
表4中的数据表明在给药后2和4小时，剂量组之间只有很小的差别，4mg/kg组表现出较大的COX-2抑制。体外COX-2抑制与咔咯芬血浆浓度具有很好的相关性。
表4
<p>上述表中的百分抑制率可以根据下述公式直接计算出来
实施例4在角叉菜胶诱导的狗炎症模型中测定咔咯芬的体内COX-2活性抑制率本实验目的是监测在诱导炎症过程中皮下植入腔中的COX-2活性。在角叉菜胶处理后5小时尽早通过western分析测定COX-2酶(T.Kirchner et al.，J.Pharmacol.Exp.Ther.(1997)282，1094-1101)。另外，可以通过实施例2中所述体外方法同时测定COX-1活性。在6只猎犬的肩胛骨后的皮下手术植入外径大约为4.2cm的聚乙烯可活动高尔夫球体。使这些狗手术后恢复1个月后再指定为实验组。
该实验重复进行两批。在实验的当天，有三只狗在炎症开始前30分钟口服给药2mg/kg的咔咯芬，而另外三只狗作为对照组。将球体周围的毛发剃光，确定位置以便能够找到移动球体中的一个孔。然后标记此区域，并用2％碘酊消毒。用针刺入该孔中取出1.5cc的液体，将此定义为渗出液“EF”。取出1.5cc的EF之后，向该球体内加入0.33％角叉菜胶水溶液，诱导出一种炎症。在注射角叉菜胶0、5、和24小时后，采集EF样本。而且也采集血样以便按照实施例2所述进行COX-1的体外全血测定。
由于在体内样本中发现PGE2的量较低，在测定之前要对所需要的EF样本进行纯化。这可以通过使用4mL PGE2亲和柱(Cayman Chemical)来完成。首先用10mL的0.1M磷酸盐缓冲液洗涤柱子，再用10mL水洗涤柱子。之后用0.1M磷酸盐缓冲液将EF稀释1∶5，并加到柱子上。用10mL的磷酸盐缓冲液洗涤柱子，再用10mL水洗涤柱子。最后，用2.5mL95％乙醇从柱子中取出PGE2。在氮气下挥发该样本，然后稀释，通过CaymanEIA PGE2(COX-2)试剂盒按照实施例2和3所述分析PGE2。
表5表明与背景水平相比在可移动球体中角叉菜胶诱导出了几乎4倍的PGE2合成增加。这种增加在5小时时可以观察到，并且保持至少24小时。2mg/kg咔咯芬剂量给药的动物表现出接近全部的PGE2合成抑制，该抑制在5小时和24小时时具有统计学显著性。P值分别为0.013和0.015。体外COX-1数据表明在任何时间点的测试对TXB2没有抑制。这表明咔咯芬在体内表现出COX-2抑制的同时在体外对COX-1活性没有影响。
表5<
实施例5计算出比立即释放咔咯芬剂型能够持续更长一段时间而达到狗体内COX-80％抑制率的咔咯芬控释剂型口服药物传递摄入率和剂量通过本实验获得的数据确定适用的、优选的、更优选的、和最优选的适用于本发明的口服咔咯芬控释剂型。
对上述实施例3中采集的狗体血浆样本，通过使用一种带有5微米，100×4.6mm Chromtech手性AGP柱和由10∶90v/v 2-丙醇∶0.1M磷酸盐缓冲液PH6.0组成的流相及荧光栓测(285nm激发光，345nm发射光)的HPLC来测定总血浆咔咯芬浓度。在加入(S)-甲氧奈丙酸作为内标准之后用0.05M构橼酸PH5.1配制血浆样本缓冲液，然后用4∶1v/v的乙醚∶二氯甲烷萃取。分离乙醚层，然后再用0.005M Na2CO3反萃取，之后吸出有机相弃去，用0.05M构橼酸PH5.1将水相配制成缓冲液，再用乙醚∶二氯甲烷萃取。将乙醚转移至清洁试管中，在氯气下蒸发，将在HPLC流相中再次形成残留物用于分析。
以咔咯芬血浆水平和％COX-2抑制率(来源于实施例3)绘制曲。观察此曲线发现在咔咯芬血浆浓度大约10μg/ml时表现出80％的COX-2抑制率，而在在咔咯芬血浆浓度大约2μg/ml时表现出50％的COX-2抑制率，在咔咯芬血浆浓度大约20μg/ml时表现出90％的COX-2抑制率。
以2mg/lb剂量给狗口服给药一种立即释放咔咯芬制剂之后，血浆咔咯芬浓度在10μg/ml之上的时间大约10.5小时。根据本发明，2mg/lb/天处于咔咯芬的优选剂量范围之内。
根据本发明的适用咔咯芬控释剂型应当是在单剂量口服给药2mg/lb之后咔咯芬血浆浓度大于2μg/ml的水平要保持几乎一天。
根据本发明优选的咔咯芬控释剂型应当是，在将立即释放剂型和控释剂型以相同剂量，即，2、1.8、1.6、或1.4mg/lb给药时，控释剂型所保持的血浆咔咯芬浓度大于10μg/ml水平的时间，要大于立即释放剂型的咔咯芬保持相当血浆浓度的时间。例如，本发明的优选2mg/lb口服控释剂型保持血浆咔咯芬浓度大于10μg/ml的时间大于10.5小时。
立即释放剂型的咔咯芬在1.8、1.6、和1.4mg/lb剂量时保持血浆咔咯芬浓度大于10μg/ml的时间分别是9.5小时、8.5小时、和7.5小时。
优选的1.8mg/lb剂量的口服控释咔咯芬剂型保持血浆咔咯芬浓度大于10μg/ml的时间大于9.5小时。而1.6mg/lb和1.4mg/lb剂量的相应最长时间分别是8.5小时和7.5小时。在假定为线性药物动力学情况下，可以类似的计算出优选口服控释咔咯芬剂型在大于2mg/lb或小于1.4mg/lb的剂量表现特征。
更优选的口服咔咯芬控释剂型应当是所保持的血浆咔咯芬浓度大于10μg/ml水平的时间要大于或等于在将立即释放剂型以任何较高剂量给药时所表现出的时间。因此这种控释剂型保持至少80％COX-2狗血浆抑制率的时间大于立即释放剂型在较高剂量时所达到的时间。
更优选的口服咔咯芬控释剂型应当是，在将所说口服控释咔咯芬剂型以小于2mg/lb剂量给药时，能够保持血浆咔咯芬浓度大于大约10μg/ml水平的时间要大于或等于立即释放剂型2mg/lb给药时所表现出的时间(10.5小时)。由于2mg/lb/天是根据本发明当前推荐和接受的有效口服剂量，因此为了进行这种比较，将2mg/lb口服立即释放进行的表现作为基础标准。
如下所述，计算出的控释口服剂型的咔咯芬释放率导致狗咔咯芬血浆浓度大于10μg/ml。为了计算方便，这些计算的释放率称之为“0级”释放率，因此，计算的释放率适用于能够以一个恒定释放率(即，0级)释放的控释结构。本领域的普通技术人员应当预料到实际剂型以“0级”释放的时间只是该药物释放时间的一部分，而后它们会以“1级”或者“混合级”释放。为在下面的分析中给本领域的熟练技术人员一个更为清楚的咔咯芬传递率(或释放率)定义，根据该剂型释放出80％咔咯芬的时间定义了适用的释放率，而不考虑药物释放机制。
通过Zhou和Notari的方法确定可以产生设定的血浆咔咯芬浓度大于10μg/ml的0-级释放率，参见Zhou，M和N.“使用口服给药药物动力学数据选择持续释放剂型药物的方法学以及使用模拟数据的方法有效性”，Biopharm Drug Disp，1995.16，319-331。以立即释放剂型给狗口服给药2mg/lb咔咯芬所得的平均数据适合于下述等式C=Ci(e-S2t-e-S1t)]]>其中Ci，S2和S1是参数，而t是时间。在零级释放过程中，通过下述公式得到咔咯芬血浆浓度C=(KoCi/Dref)[(e-S1t-1)/S1-(e-S2t-1)/S2]]]>其中k0是零级释放率，而Dref是参照剂量。在释放完成之后，下述等式是可适用的C=(KoCi/Dref)[[[(1-e-S1t)/S1]e-S2t-[(1-eS2t)/S2]e-S2t]]]>其中T＝DCR/k0，而DCR是对照释放剂量。
优选口服控释咔咯芬剂型下表6表明口服控释咔咯芬剂型(2mg/lb剂量)释放80％其结合的咔咯芬的时间范围为1.6-19.2小时，能够维持咔咯芬血浆浓度大于10μg/ml的时间大于10.5小时。因此，它们是剂量2mg/lb的优选剂型。
下表7表明口服控释咔咯芬剂型(1.8mg/lb剂量)释放80％其结合的咔咯芬的时间范围为1.6-19.2小时，能够维持咔咯芬血浆浓度大于10μg/ml的时间大于9.5小时。因此，它们是剂量1.8mg/lb的优选剂型。
下表8表明口服控释咔咯芬剂型(1.6mg/lb剂量)释放80％其结合的咔咯芬的时间范围为1.6-19.2小时，能够维持咔咯芬血浆浓度大于10μg/ml的时间大于8.5小时。因此，它们是剂量1.6mg/lb的优选剂型。
下表9表明口服控释咔咯芬剂型(1.4mg/lb剂量)释放80％其结合的咔咯芬的时间范围为1.6-19.2小时，能够维持咔咯芬血浆浓度大于10μg/ml的时间大于7.5小时。因此，它们是剂量1.4mg/lb的优选剂型。
更优选的口服咔咯芬控释剂型本发明的控释咔咯芬剂型特别适用是因为，即使在低于2mg/lb的优选有效使用剂量时给药它们能够保持咔咯芬血浆浓度大于10μg/ml的时间大于10.5小时。表7表明口服控释咔咯芬剂型(1.8mg/lb剂量)释放80％其结合的咔咯芬的时间范围为4.8-19.2小时，能够维持咔咯芬血浆浓度大于10μg/ml的时间大于10.5小时。因此，它们是剂量1.8mg/lb的更优选剂型。
表8表明口服控释咔咯芬剂型(1.6mg/lb剂量)释放80％其结合的咔咯芬的时间范围为4.8-19.2小时，能够维持咔咯芬血浆浓度大于10μg/ml的时间大于9.5小时，即大于1.8mg/lb立即释放剂型所能够达到的时间。因此，它们是剂量1.6mg/lb的更优选剂型。
表9表明口服控释咔咯芬剂型(1.4mg/lb剂量)释放80％其结合的咔咯芬的时间范围为4.8-19.2小时，能够维持咔咯芬血浆浓度大于10μg/m的间大于8.5小时，即大于1.6mg/lb立即释放剂型所能够达到的时间。因此，它们是剂量1.4mg/lb的更优选剂型。
最优选的口服咔咯芬控释剂型最优选的口服咔咯芬控释剂型应当是，在将所说口服控释咔咯芬剂型以小于2mg/lb剂量给药时，能够保持血浆咔咯芬浓度大于大约10μg/ml水平的时间要大于或等于立即释放剂型2mg/lb给药时所表现出的时间(10.5小时)。由于2mg/lb/天是根据本发明当前推荐和接受的有效口服剂量，因此为了进行这种比较，将2mg/lb口服立即释放进行的表现作为基础标准。用表6-9的数据定义了本发明最优选口服控释剂型的特征。
在1.6mg/lb剂量时，最优选口服控释咔咯芬剂型应当是释放80％其结合的咔咯芬的时间范围为6.4-19.2小时。在1.4mg/lb剂量时，最优选口服控释咔咯芬剂型应当是释放80％其结合的咔咯芬的时间范围为12.8小时(10-14小时)。
表6在以不同释放率释放咔咯芬的控释剂型给药后，咔咯芬血浆浓度大于10μg/ml的小时数(计算的)；剂量＝2mg/lb
表7在以不同释放率释放咔咯芬的控释剂型给药后，咔咯芬血浆浓度大于10μg/ml的小时数(计算的)；剂量＝1.8mg/lb。
表8
在以不同释放率释放咔咯芬的控释剂型给药后，咔咯芬血浆浓度大于10μg/ml的小时数(计算的)；剂量＝1.6mg/lb。
表9在以不同释放率释放咔咯芬的控释剂型给药后，咔咯芬血浆浓度大于10μg/ml的小时数(计算的)；剂量＝1.4mg/lb。
实施例6给狗植入咔咯芬利用咔咯芬植入传递咔咯芬持续一段时间，例如，3天、7天、30天或更长。下面详述的实施例描述了从含有咔咯芬的植入物中释放咔咯芬的适用和优选释放率，而且还定义了与之相关剂量。
使用来源于Gibaldi，M.和D.Perrier，“药物动力学”，第二版，药物和药物科学，ed.J.Swarbrick，Vol.15，1982，New YorkMarcel Dekker，Inc.的下述等式计算能够维持10μg/ml咔咯芬稳定血浆浓度的狗体咔咯芬摄入率。Css=R0C1]]>其中Css是稳定的咔咯芬血浆浓度，R0是摄入率，而C1是系统清除率。利用下述等式从给狗口服给药2mg/lb咔咯芬之后观察到的药物动力学计算系统清除率C1=FDAUC]]>其中F是生物利用度(假定为一个植入物为1)，D是口服剂量，而AUC是咔咯芬血浆浓度与时间曲线下的平均面积，外推至无限大。
获得的清除率C1＝5mL/小时每磅体重。利用此清除率，计算出来目标Css是10μg/ml，咔咯芬释放率R0是50μg/lb/小时，再次基础上乘以24小时/天得出每天的摄入率为1.2mg/lb/天。对于3、7、或30天的疗程，其总剂量分别为3.6mg/lb或8.4mg/lb或36mg/lb。概而言之，一个含有每磅体重8.4mg咔咯芬的植入物，以每小时每磅体重50μg释放率释放咔咯芬，保持10μg/ml的咔咯芬血浆浓度7天。这将保持80％COX-2抑制率7天。
为了获得为保持2μg/ml的咔咯芬血浆浓度(50％COX-2抑制率)所需的植入剂量和咔咯芬释放率，可以通过乘以0.2对10μg/ml目的浓度的剂量和释放率进行线性调节。因此，为了获得2μg/ml的咔咯芬血浆浓度，需要10μg/lb/小时咔咯芬释放率，或者，0.24mg/lb/天的释放率。对于3、7、或30天疗程来说，分别需要0.72mg/lb或1.68mg/lb或7.2mg/lb的总剂量。
为了获得为保持20μg/ml的咔咯芬血浆浓度(90％COX-2抑制率)所需的植入剂量和咔咯芬释放率，可以通过乘以2对10μg/ml目的浓度的剂量和释放率进行线性调节。因此，为了获得20μg/ml的咔咯芬血浆浓度，需要100μg/lb/小时的咔咯芬释放率，或者，2.4mg/lb/天的释放率。对于3、7、或30天疗程来说，分别需要7.2mg/lb或16.8mg/lb或72mg/lb的总剂量。
本发明适用的咔咯芬植入物以0.24mg/lb/天或更大的释放率向狗体内释放咔咯芬。
本发明优选的咔咯芬植入物以0.24至1.2mg/lb/天的释放率向狗体内释放咔咯芬。
本发明更优选的咔咯芬植入物以1.2至2.4mg/lb/天的释放率向狗体内释放咔咯芬。
适用的咔咯芬植入物中咔咯芬总剂量为2gm，这取决于给狗合理给药的植入物的大小。当然，同时可以植入一个以上的植入物给药。
实施例7(S)-6-氯-α-甲基-咔唑-2-乙酸的拆分将4.3克的(R)-α-甲基苯胺溶于20mL乙酮的溶液加入一种9.7克部分拆分的6-氯-α-甲基-咔唑-2-乙酸(通过过滤以前拆分的外消旋物回收)溶液中。在室温下静止24小时后，过滤混合物，用冷乙酮洗涤滤饼，干燥后得3克。在从乙酮中再进行两次重结晶后，得到1.9克(S)-6-氯-α-甲基-咔唑-2-乙酸(R)-α-甲基苯胺盐，[α]η22-13.6℃。从乙酮中再进一步重结晶则不改变其旋光性。将该盐溶于50mL的热乙酮中，将溶液过滤后到入500mL的稀盐酸中。过滤和干燥之后，得到1.4充，通过氯仿结晶得到0.9克(S)-6-氯-α-甲基-咔唑-2-乙酸，m.p.198°-201°，[α]η22+53.2°，(c1.33，CH3OH).
实施例8COX-2选择性的种特异性Canis familiaris种(狗)成员中的活性与Rattus norvegicus种(白鼠)成员和Homo sapiens种(人)成员中的活性比较在实施例1当中已经充分描述了咔咯芬在狗体内表现出的对COX-2的非常高度选择性。同样令人惊奇的是发现这种对COX-2酶的选择性抑制似乎是一种对Canis familiaris种有特异性的活性，而对其它种则不具备。这种发现是基于外消旋性咔咯芬在Rattus norvegicus种(白鼠)成员和Homosapiens种(人)成员中的抑制活性评价获得。
通过在Agent &amp; Actions，32，(1991)，313-320中所述的Griffiths et al.，的方法对环氧合酶在鼠体内的选择性进行评价。根据外消旋咔咯芬对在鼠滑液中测得的前列腺素PGE2的产生发生的影响评价COX-2抑制活性。滑液是由滑膜分泌，并储存于关节腔中。在关节炎过程中，关节组织中诱导出COX-2，并且前列腺素产物在滑液中积聚。根据外消旋咔咯芬对在鼠胃粘膜内中测得的前列腺素PGE2的产生发生的影响评价COX-1抑制活性。对这种胃同工酶的抑制可以引起不利的胃肠道副作用。COX-1的ED50是6.4mg/kg，而COX-2的ED50是0.63mg/kg。这些结果表明在鼠体内外消旋咔咯芬对COX-2只有10倍的选择性。
对于人体来说，按照J.Bio.Chem.，268，23448-23454，1993中所述的Habib等人的方法，根据外消旋咔咯芬对由IL-1和佛波醇肉豆蔻酸乙酸酯(PMA)刺激人脐静脉内皮细胞(HUVEC)产生的COX-2水平的影响评价COX-2抑制活性。这些内皮细胞在白介素-1(IL-1)和PMA的刺激下最可能含有大量的可诱导COX-2同工酶。按照Inflamm.Res.，44，253-257，1995中所述的Grossman等人的方法，根据外消旋咔咯芬对通过人洗涤血小板(HWP)TXB2生化检测所测得的COX-1水平的影响评价COX-1抑制活性。这些血小板最可能含有大量的构成性COX-1同工酶。HUVEC(COX-2)IC50(μM)是1.2，而HWPTXB2(COX-1)IC50(μM)是0.77。这些结果表明在人体内，外消旋咔咯芬对COX-2同工酶没有选择性。
实施例9
(S)-6-氯-α-甲基-咔唑-2-乙酸片剂片剂成分 每片重量(S)-6-氯-α-甲基-咔唑-2-乙酸 25.00mg乳糖，U.S.P. 64.50mg玉米淀粉 10.00mg硬脂酸镁 0.50mg实施例10(S)-6-氯-α-甲基-咔唑-2-乙酸的胶囊剂胶囊剂成分每片重量(S)-6-氯-α-甲基-咔唑-2-乙酸 50mg乳糖，U.S.P. 124mg玉米淀粉U.S.P. 30mg滑石粉U.S.P. 5mg总重量210mg实施例11(S)-6-氯-α-甲基-咔唑-2-乙酸的非肠道制剂非肠道制剂每cc安瓿成分 每片重量(S)-6-氯-α-甲基-咔唑-2-乙酸 10.2mg羟苯甲酸甲酯U.S.P. 1.8mg对羟苯甲酸丙酯U.S.P. 0.2mg氢氧化钠U.S.P.适量ph 9.0mg注射用水，U.S.P.足量加至 1.0毫升
权利要求
1.式(1)化合物在制备用于治疗或预防一种家犬与诱导环加氧酶-2(COX-2)的活性有关的疼痛和炎性病变和疾病的药物中的应用，该化合物同时降低或消除通过相对于COX-1活性而选择性抑制COX-2活性由此引起与组成环加氧酶-1(COX-1)的活性发生同步抑制有关的不希望有的副作用，其中COX-2∶COX-1活性抑制的该选择性比值至少为3∶1，这是基于以产生≥80％COX-2抑制的剂量在全血中测量的来自体外的抑制水平，该化合物包括抗炎选择性COX-2抑制化合物，由下式表示
其中R2是
其中A是羟基、(C1-C4)烷氧基、氨基、羟基氨基、一-(C1-C2)烷基氨基、二-(C1-C2)烷基氨基；X和Y独立地为H或(C1-C2)烷基；n为1或2；R6是卤素、(C1-C3)烷基、三氟甲基、或硝基；R9是H；(C1-C2)烷基；苯基或苯基-(C1-C2)烷基，其中苯基可选地被氟或氯一取代；-C(＝O)-R，其中R是(C1-C2)烷基或苯基，可选地被氟或氯一取代；或-C(＝O)-O-R1，其中R1是(C1-C2)烷基；当X和Y不同时，其(-)(R)和(+)(S)对映体；以及具有治疗或预防疼痛和炎症的治疗活性的其所有药学上可接受的盐形式、药物前体和代谢物。
2.按照权利要求1所述的应用，其中所述抗炎选择性COX-2抑制化合物是咔洛芬，6-氯-α-甲基-9H-咔唑-2-乙酸。
3.按照权利要求1所述的应用，其中所述抗炎选择性COX-2抑制化合物包含的完全是咔洛芬，6-氯-α-甲基-9H-咔唑-2-乙酸的(S)-对映体。
4.如权利要求1、2或3所述的应用，它进一步包含其中所述抑制性化合物在以下条件下与一种或多种其他治疗活性药剂联合使用A.当关节已严重发炎以及同时被细菌、真菌、原生动物、和/或病毒感染时，所述抑制化合物与一种或多种抗生素、抗真菌剂、抗原生动物剂、和/或抗病毒治疗剂联合使用；B.当疼痛和炎症需要加倍治疗时，所述抑制化合物与炎症的其他介体的抑制剂联合使用，包含一种或多种独立地选自以下组中的成员(1)NSAID；(2)H1-受体拮抗剂；(3)激肽-B1-和B2-受体拮抗剂；(4)选自PGD-、PGF-、PGl2-、和PGE-受体拮抗剂的前列腺素抑制剂；(5)血栓烷A2(TXA2-)抑制剂；(6)5-和12-脂氧合酶抑制剂；(7)白三烯LTC4-、LTD4/LTE4-、和LTB4-抑制剂；(8)PAF-受体拮抗剂；(9)加有一个或多个亲水基的金硫基形式的金；(10)选自环孢霉素、硫唑嘌呤和甲氨蝶呤的免疫抑制剂；(11)抗炎糖皮质激素；(12)青霉胺；(13)羟氯喹；(14)包括秋水仙碱的抗痛风药；包括别嘌呤醇的黄嘌呤氧化酶抑制剂；和选自丙磺舒、磺吡酮和苯溴马隆的促尿酸尿药；C.当治疗患有老年期疾病、综合征和症状的老龄狗时，所述抑制化合物与一种或多种独立地选自以下组中的成员联合使用(1)抵抗记忆丧失和障碍的认知治疗剂；(2)抗高血压药和其他用于抵销动脉粥样硬化、高血压、心肌局部缺血、咽痛、充血性心力衰竭、和心肌梗塞的结果的心血管药物，它们选自以下成员a.利尿剂；b.血管舒张药；c.β-肾上腺素能受体拮抗剂；d.血管紧张素-II转化酶抑制剂(ACE-抑制剂)，单独或可选地与中性内肽酶抑制剂一起；e.血管紧张素II受体拮抗剂；f.肾素抑制剂；g.钙通道阻滞剂；h.交感神经阻滞剂；I.α2-肾上腺素能兴奋剂；j.α-肾上腺素能受体拮抗剂；和k.HMG-CoA-还原酶抑制剂(抗高胆固醇血药)；(3)抗肿瘤剂，选自a.抗有丝分裂药，选自I.长春花生物碱，选自[1]长春花碱，和[2]长春新碱；(4)生长激素促分泌剂；(5)强镇痛剂；(6)局部和系统麻醉剂；和(7)H2-受体拮抗剂，质子泵抑制剂，以及其他胃保护剂。
5.一种用于治疗或预防一种家犬与诱导环加氧酶-2(COX-2)活性有关的疼痛和炎性病变和疾病、同时减少或消除与组成环加氧酶-1(COX-1)的活性发生同步抑制有关的不希望有的副作用的药物组合物，它包含A.一种治疗疼痛和炎症的治疗有效量的抗炎选择性COX-2抑制化合物，它选择性地抑制相对于COX-1活性的COX-2活性，其中COX-2∶COX-1活性抑制的选择性比值至少为3∶1，这是基于以产生≥80％COX-2抑制的剂量在全血中测量的来自体外的抑制水平，它包含一种抗炎选择性COX-2抑制化合物，该化合物由以下式(1)表示
其中R2是
其中A是羟基、(C1-C4)烷氧基、氨基、羟基氨基、一-(C1-C2)烷基氨基、二-(C1-C2)烷基氨基；X和Y独立地为H或(C1-C2)烷基；n为1或2；R6是卤素、(C1-C3)烷基、三氟甲基、或硝基；R9是H；(C1-C2)烷基；苯基或苯基-(C1-C2)烷基，其中苯基可选地被氟或氯一取代；-C(＝O)-R，其中R是(C1-C2)烷基或苯基，可选地被氟或氯一取代；或-C(＝O)-O-R1，其中R1是(C1-C2)烷基；当X和Y不同时，其(-)(R)和(+)(S)对映体；以及具有治疗或预防疼痛和炎症的治疗活性的其所有药学上可接受的盐形式、药物前体和代谢物；和B.药学上可接受的载体。
6.按照权利要求5所述的药物组合物，其中所述抗炎选择性COX-2抑制化合物是咔洛芬，6-氯-α-甲基-9H-咔唑-2-乙酸。
7.按照权利要求5所述的药物组合物，其中所述抗炎选择性COX-2抑制化合物包含的完全是咔洛芬，6-氯-α-甲基-9H-咔唑-2-乙酸的(S)-对映体。
8.如权利要求5、6或7所述的药物组合物，其中进一步包含所述的抗炎选择性COX-2抑制化合物通过下述方法以适合于全身给药的剂型提供A.以合适的液体形式注射或输入，包括动脉内、真皮内或经真皮、皮下、肌内、脊柱内、鞘内、或静脉注射或输入，其中所述抑制化合物(1)作为溶质包含在溶液中；(2)包含在乳剂的不连续相中，或包含在注射或输注时转化的反向乳剂的不连续相中，所述乳剂含有合适的乳化剂；或(3)作为胶态或微粒形式的悬浮固体包含在悬浮液中，所述悬浮液含有适当的悬浮剂；B.作为贮存注射或输入合适的身体组织或腔中，其中所述组合物提供了所述抑制剂的贮存处，并随后将所述抑制化合物延迟、缓慢、和/或控制释放以达到全身分布；C.以合适的固体形式滴注、吸入或吹入到合适的身体组织或腔中，其中所述抑制化合物(1)包含在一个固体植入组合物中，该组合物提供了所述抑制化合物的延迟、缓慢、和/或控制释放；(2)包含在将被吸入到肺里的颗粒组合物中；或(3)包含在将被吹入到所述合适的身体组织或腔中的颗粒组合物中，其中所述组合物可选地提供所述抑制化合物的延迟、缓慢、和/或控制释放；或者D.以适当的固体或液体形式摄食，以将所述抑制化合物经口释放，其中所述抑制化合物(1)包含在固体剂型中；或(2)包含在液体剂型中。
9.按照权利要求8所述的药物组合物，其中所述剂型包含独立地选自以下这组成员的一种或多种栓剂；选自延迟释放的口服片剂、胶囊剂、丸剂、锭剂、糖锭、和多颗粒剂的固体经口剂型；防止在所述被治疗犬的胃中释放和吸收的肠溶衣片剂和胶囊剂，以便于远离所述犬的胃释放；缓释口服片剂、胶囊剂和微粒剂，它们可使所述抑制剂以可控制的方式全身释放至少10小时；可咀嚼或可摄取的口服片剂；单位剂量装的小药囊，由所述单位剂量装的小药囊制备的悬浮液，用于口服悬浮液的粉末，或口服悬浮液本身；速溶片剂，封入胶囊的溶液，口服糊剂，给予所述犬或加入到其食物中的颗粒剂型，以及美味的可咀嚼剂型，其中所述抑制剂在所治疗的犬的咀嚼过程中与所述美味的可咀嚼剂型一起被消耗，或者通过从未被消耗的咀嚼物中浸提而释放；选自以下成员的液体经口剂型溶液、悬浮液、乳剂、反向乳剂、酏剂、提取液、酊剂、和浓缩液，以及上述含有活性成分的微胶囊制剂的固体剂型，它被加入到所述固体剂型中。
10.如权利要求9所述的药物组合物，它包含一种当以约2mg/lb或更少的剂量给药时能在大于10.5小时的期间内保持血浆咔洛芬浓度在约10μg/mL以上的口服咔洛芬控释剂型。
11.如权利要求5、6或7所述的药物组合物，它进一步包含所述抗炎选择性COX-2抑制化合物与独立地选自以下成员的一种或多种其他治疗活性药剂复合A.抗感染药，包括一种或多种抗生素、抗真菌剂、抗原生动物剂、或抗病毒治疗剂；B.炎症的其他介体的抑制剂，包含一种或多种独立地选自以下组中的成员(1)NSAID；(2)H1-受体拮抗剂；(3)激肽-B1-和B2-受体拮抗剂；(4)选自PGD-、PGF-、PGl2-、和PGE-受体拮抗剂的前列腺素抑制剂；(5)血栓烷A2(TXA2-)抑制剂；(6)5-和12-脂氧合酶抑制剂；(7)白三烯LTC4-、LTD4/LTE4-、和LTB4-抑制剂；(8)PAF-受体拮抗剂；(9)加有一个或多个亲水基的金硫基形式的金；(10)选自环孢霉素、硫唑嘌呤和甲氨蝶呤的免疫抑制剂；(11)抗炎糖皮质激素；(12)青霉胺；(13)羟氯奎；(14)包括秋水仙碱的抗痛风药；包括别嘌呤醇的黄嘌呤氧化酶抑制剂；和选自丙磺舒、磺吡酮和苯溴马隆的促尿酸尿药；C.用于治疗老龄狗的治疗剂，它包含一种或多种独立地选自以下组中的成员(1)抵抗记忆丧失和障碍的认知治疗剂；(2)抗高血压药和其他用于抵销动脉粥样硬化、高血压、心肌局部缺血、咽痛、充血性心力衰竭、和心肌梗塞的结果的心血管药物，它们选自以下成员a.利尿剂；b.血管舒张药；c.β-肾上腺素能受体拮抗剂；d.血管紧张素-II转化酶抑制剂(ACE-抑制剂)，单独或可选地与中性内肽酶抑制剂一起；e.血管紧张素II受体拮抗剂；f.肾素抑制剂；g.钙通道阻滞剂；h.交感神经阻滞剂；I.α2-肾上腺素能兴奋剂；j.α-肾上腺素能受体拮抗剂；和k.HMG-CoA-还原酶抑制剂(抗高胆固醇血药)；(3)抗肿瘤剂，选自a.抗有丝分裂药，选自I.长春花生物碱，选自[1]长春花碱，和[2]长春新碱；(4)生长激素促分泌剂；(5)强镇痛剂；(6)局部和系统麻醉剂；和(7)H2-受体拮抗剂，质子泵抑制剂，以及其他胃保护剂。
12.一种用于治疗或预防一种家犬的疼痛和炎症病变和疾病的药物在工业上适用的包装，它包含A.一种合适的容器，该容器的形式可以是一层外包装，和一个装在其中可移动的内部容器；B.一种合适剂型的、包封在所述容器中的下式表示的抗炎选择性COX-2抑制化合物
其中R2是
其中A是羟基、(C1-C4)烷氧基、氨基、羟基氨基、一-(C1-C2)烷基氨基、二-(C1-C2)烷基氨基；X和Y之一是H，另一是(C1-C2)烷基；n为1或2；R6是卤素、(C1-C3)烷基、三氟甲基、或硝基；R9是H；(C1-C2)烷基；苯基或苯基-(C1-C2)烷基，其中苯基可选地被氟或氯一取代；-C(＝O)-R，其中R是(C1-C2)烷基或苯基，可选地被氟或氯一取代；或-C(＝O)-O-R1，其中R1是(C1-C2)烷基；其中(+)(S)对映体的含量至少为75％；以及具有治疗或预防疼痛和炎症的治疗活性的其所有药学上可接受的盐形式、药物前体和代谢物；和C.关于所述容器的指导性和介绍性的资料，它附在所述容器上、包封在所述容器中、或者作为所述容器的固有部分显示出来，所述指导性和介绍性资料向作为其本领域中普通技术人员的读者简要地传达了以下内容所述包括式(I)化合物的治疗剂包含在所述包装中，当将其给予所述要进行治疗的一种家犬种成员使用时，可有效地抑制所述狗身上的已存在或预期将出现的疼痛和炎症部位所诱导的环加氧酶-2(COX-2)，从而治疗或预防否则可能会导致的所述疼痛和炎症，同时降低或消除通过选择性抑制相对于COX-1活性的COX-2活性而引起的与组成环加氧酶-1(COX-1)的活性发生同步抑制有关的不希望有的副作用，其中COX-2∶COX-1活性抑制的选择性比值至少为3∶1，这是基于以产生≥80％COX-2抑制的剂量在全血中测量的来自体外的抑制水平。
13.按照权利要求12所述的包装，其中式(I)表示的所述抗炎选择性COX-2抑制化合物包含咔洛芬，6-氯-α-甲基-9H-咔唑-2-乙酸。
14.按照权利要求12所述的包装，其中所述抗炎选择性COX-2抑制化合物包含的完全是咔洛芬，6-氯-α-甲基-9H-咔唑-2-乙酸的(S)-对映体。
全文摘要
治疗或预防狗的与诱导环加氧酶－2(COX－2)的活性有关的炎性病变和疾病,同时降低或消除通过选择性抑制相对于COX－1活性的COX－2活性而引起组成环加氧酶－1(COX－1)的活性发生同步抑制有关的不希望有的副作用,其中COX－2:COX－1活性抑制的选择性比值至少为3:1,这是基于在全血中测量的来自体外的抑制水平;该抑制剂是选自以下基本上由水杨酸衍生物,对氨基苯酚衍生物,吲哚和茚乙酸,杂芳基乙酸,芳基丙酸,邻氨基苯甲酸,烯醇酸,和链烷酮组成的抗炎化合物组中的一种;该抑制剂特别是含有6－氯－α－甲基－9H－咔唑－2－乙酸的(+)(S)一对映体。
文档编号A61P43/00GK1255059SQ98804845
公开日2000年5月31日 申请日期1998年5月1日 优先权日1997年5月5日
发明者克里斯汀·M·伦迪, 安东尼·P·里基茨 申请人:美国辉瑞有限公司