专利名称：新处方的草药组合物及其制造方法
技术领域：
本发明涉及一种新处方的牛黄清心元组合物，尤其涉及在传统处方的牛黄清心元中加入灵猫香而不加入麝香的新处方的牛黄清心元组合物及其制造方法。
随着现代生活的复杂化，心血管疾病如脑中风、高血压、心脏病、和心因性疾病的发病率有逐渐增高的趋势。
牛黄清心元是一种能够有效地治疗中央神经系统或自律神经系统相关疾病，如自律神经失调和不省人事，以及治疗上述的心血管疾病的中药。据报道它也作为一种救命药，因而它被视为在现代医学领域中极为有效的并且被广泛应用的药物。
最早的牛黄清心元处方收录于“太平惠民和剂局方”，一个中药处方集中，并且在其他的中药处方集中如“东医宝鉴”，“医学入门”和“方药合编”中有所收录。在韩国，牛黄清心元最早收录于Huh，Jun于1613年编的“东医宝鉴”中。
牛黄清心元的传统处方在不同的文献中略有变化。在韩国其组合物主要是根据“东医宝鉴”，和“方药合编”。然而最近，由于安全性问题，牛黄清心元的组合物中的朱砂和雄黄因其主要含有水银和砒霜等重金属而被去除了；而且，因野生动植物濒危物种国际贸易大会(CITES)条约的限制，犀角无法获得而也从牛黄清心元处方中删除了。现在所用的牛黄清心元分为以下三种类型牛黄清心元，原方牛黄清心元和半量原方牛黄清心元。
根据韩国卫生部1992年公布的药物重新评估结果，每100丸或100瓶牛黄清心元，原方牛黄清心元和半量原方牛黄清心元的组合物如下原方牛黄清心元山药26.3g、甘草18.8g、高丽人参9.4g、蒲黄9.4g、神曲9.4g、大豆黄卷6.6g、桂皮6.6g、明胶6.6g、芍药5.6g、麦门冬5.6g、黄芩5.6g、当归5.6g、防风5.6g、白术5.6g、柴胡4.7g、桔梗4.7g、杏仁4.7g、茯苓4.7g、川芎4.7g、牛黄4.5g、羚羊角3.8g、麝香3.8g、龙脑3.8g、白蔹2.8g、干姜2.8g。
牛黄清心元山药28.2g、甘草20.2g、高丽人参9.7g、蒲黄10.0g、神曲10.0g、大豆黄卷7.0g、桂皮7.0g、明胶7.0g、芍药6.0g、麦门冬6.0g、黄芩6.0g、当归6.0g、防风6.0g、白术6.0g、柴胡5.0g、桔梗5.0g、杏仁5.0g、茯苓5.0g、川芎5.0g、牛黄1.4g、羚羊角3.5g、麝香0.5g、龙脑4.1g、白蔹3.0g、干姜3.0g。
半量原方牛黄清心元山药13.1g、甘草9.4g、高丽人参4.7g、蒲黄4.7g、神曲4.7g、大豆黄卷3.3g、桂皮3.3g、明胶3.3g、芍药2.8g、麦门冬2.8g、黄芩2.8g、当归2.8g、防风2.8g、白术2.8g、柴胡2.3g、桔梗2.3g、杏仁2.3g、茯苓2.3g、川芎2.3g、牛黄2.3g、羚羊角1.9g、麝香1.9g、龙脑1.9g、白蔹1.4g、干姜1.4g。
各种药剂形式的牛黄清心元，如原方牛黄清心元丸剂/液剂，牛黄清心元丸剂/液剂和半量原方牛黄清心元丸剂，其适应症是一样的，包括脑中风(中风、全身不随、手足不随、语言障碍、昏睡、精神错乱、面部神经麻痹、脑溢血)、高血压、心悸、呼吸困难、精神焦虑、急性/慢性惊厥、自律神经失调、人事不省等。
传统上使用的牛黄清心元丸剂是利用各种生药的粉末和蜂蜜制造的。由于在长期储存中牛黄清心元丸剂会变硬，使得它不易服用，而不得不在需要的时候重复制造。为了防止长期储存中药丸发硬的问题，牛黄清心元的制造使用了一些赋型剂，如韩国药典中收录的羧甲基纤维素钠。
最近，牛黄清心元中的一些用水抽提的生药如山药等与含有其他生药如牛黄、麝香等的微细粉末相混合，向该混合物中加入一些悬浊剂和粘度调节剂，最终得到悬浊液剂型的牛黄清心元。
同时，牛黄清心元中的主要活性成分麝香，是麝香科麝香属的雄鹿腹部的香囊中的干燥分泌物，它具有抗菌作用，并能够刺激中央神经系统和子宫的兴奋。临床上麝香主要作为一种中央神经系统的刺激物用于发热性障碍的意识错乱、惊厥发作、脑中风等。它还能够作为活血药物有效地用于跌打损伤和腹腔肿胀的治疗。
但是，根据CITES条约的限制，从1996年10月起麝香国际贸易被完全禁止，韩国面临着作为牛黄清心元中的一种活性成分的麝香的短缺。在这种情况下，迫切需要一个针对麝香短缺的对策。
为了彻底理解本发明的性质和目的，可结合相关附图参考下列的详细描述。
图1表示用肾上腺素处理的分离的兔心脏在新处方的牛黄清心元组合物作用下对其的收缩作用。
图2表示用乙酰胆碱处理的分离的兔心脏在新处方的牛黄清心元组合物作用下对其的收缩作用。
图3示出实验例10中对实验动物给药、诱发脑缺血及固定脑组织的时间过程。
本发明人深入研究开发了一种新的处方，其能够替代麝香的药效并增强牛黄清心元的药效，在已经收录的处方中，按照中药的理论变换各种生药，形成各种新的处方。最后，本发明人发现了一个新的处方，用灵猫香来替代传统牛黄清心元组合物中的麝香，与传统的含有麝香的牛黄清心元组合物相比，它具有相当的或者更强的药效。
本发明的一个目的在于提供一种中药组合物，即在不含有麝香的传统的牛黄清心元组合物中新加入灵猫香。
本发明涉及一种新处方的牛黄清心元组合物，尤其涉及在传统处方的牛黄清心元中加入灵猫香而不加入麝香的新处方的牛黄清心元组合物及其制造方法。
本发明的这种新处方的牛黄清心元组合物含有
(1)灵猫香，和(2)除了麝香之外的牛黄清心元组合物，其含有山药、甘草、高丽人参、蒲黄、神曲、大豆黄卷、桂皮、明胶、芍药、麦门冬、黄芩、当归、防风、白术、柴胡、桔梗、杏仁、茯苓、川芎、牛黄、羚羊角、龙脑、白蔹和干姜。
本发明的组合物中，“(2)不含有麝香的牛黄清心元组合物”含有13.0-17.0重量％的山药、9.0-12.0重量％的甘草、4.0-6.0重量％的高丽人参、4.0-6.0重量％的蒲黄、4.0-6.0重量％的神曲、3.0-5.0重量％的大豆黄卷、3.0-5.0重量％的桂皮、3.0-5.0重量％的明胶、2.0-4.0重量％的芍药、2.0-4.0重量％的麦门冬、2.0-4.0重量％的黄芩、2.0-4.0重量％的当归、2.0-4.0重量％的防风、2.0-4.0重量％的白术、2.0-4.0重量％的柴胡、2.0-4.0重量％的桔梗、2.0-4.0重量％的杏仁、2.0-4.0重量％的茯苓、2.0-4.0重量％的川芎、0.6-4.0重量％的牛黄、1.0-3.0重量％的羚羊角、1.0-3.0重量％的龙脑、1.0-3.0重量％的白蔹及1.0-3.0重量％的干姜。
本发明中，灵猫香的用量为“(2)不含有麝香的牛黄清心元组合物”总重的0.4-10.5重量％，优选的为0.8-6.9重量％。
灵猫香是大灵猫(Vivera Zibetha Linne，麝香猫科)香囊的干燥分泌物，可从香囊的分泌物中获取。新鲜制取的灵猫香为黄白色蜜状粘性液体，浓缩后呈黄色膏状。气味芳香而味苦。其香味很浓。一级品为白色或浅黄色，放在纸上没有颗粒。
本发明还提供了一种含有本发明的组合物的药剂，用以治疗中央神经系统，自律神经系统和/或循环系统的相关疾病。
本发明的中药组合物可以丸剂或液剂的剂型施用。
本发明的丸剂剂型按通常的制造方法制造。更具体地，本发明的丸剂剂型的制造方法包括以下的步骤准确称量山药、甘草、高丽人参、蒲黄、神曲、大豆黄卷、桂皮、明胶、芍药、麦门冬、黄芩、当归、防风、白术、柴胡、桔梗、杏仁、茯苓、川芎、羚羊角、白蔹、干姜等生药，制成细微粉末；将单独制备的牛黄和龙脑的细微粉末剂加入到上述的粉末中形成混合物；将灵猫香均匀地混入上述的混合物中；在混合物中加入赋型剂如蜂蜜制造出丸剂剂型；并用金箔包裹药丸。
本发明还提供了根据上述组合物的牛黄清心元的液剂剂型的制造过程，其中将灵猫香溶于乙醇制成含有5重量％灵猫香酊剂(tinc)；牛黄和龙脑分别制成细微粉末或用β-环糊精制成包涵物形式；其他如山药、甘草、高丽人参、蒲黄、神曲、大豆黄卷、桂皮、明胶、芍药、麦门冬、黄芩、当归、防风、白术、柴胡、桔梗、杏仁、茯苓、川芎、羚羊角、白蔹、干姜等生药经回流抽提，或者将其细微粉末在聚乙二醇或丙二醇溶液中搅拌；然后将上述溶液和/或粉末混合。
下面提供了一种牛黄清心元的液剂剂型的制造方法1)将除了牛黄、龙脑和灵猫香外本发明的生药(如山药、甘草、高丽人参、蒲黄、神曲、大豆黄卷、桂皮、明胶、芍药、麦门冬、黄芩、当归、防风、白术、柴胡、桔梗、杏仁、茯苓、川芎、羚羊角、白蔹、干姜等)切碎，加入纯化的水经过回流制备出草药抽提液；或者将含有上述生药的细微粉末置于2％的聚乙二醇或1％的丙二醇溶液中搅拌，制备草药悬浮液；2)将牛黄包于β-环糊精，制成牛黄包涵复合物；3)将龙脑包于β-环糊精，制成龙脑包涵复合物；4)将灵猫香溶于乙醇，制成含有5重量％灵猫香的酊剂；5)在草药抽提液或悬浮液中加入黏度调节剂，加热溶解，然后加入牛黄包涵复合物、龙脑包涵复合物和灵猫香酊剂形成混合物；6)在混合物中加入蜂蜜或蔗糖，加入对羟基苯甲酸丙酯和/或对羟基苯甲酸甲酯的乙醇溶液，和/或苯甲酸钠，搅拌；然后，加入柠檬酸和/或柠檬酸盐调节pH；最后将溶液装入一个容器。
过程1)中的草药抽提液的制备是将上述的生药，经精确称量，转至一个抽提器中，加入纯水于90-100℃回流抽提，冷却并过滤。
过程1)中的草药悬浮液的制备是a)将上述每种生药制成细微粉末，经200目滤网过滤并相互混合；或者将上述生药的混合物先制成细微粉末再经200目滤网过滤；然后，b)将过滤的粉末加入到1300ml的2％聚乙二醇或1％的丙二醇溶液中强烈搅拌。
过程2)中的牛黄包涵复合物的制备是通过a)将根据组合物总体积精确称量的0.5-0.9w/v％的β-环糊精(Cydex-P)加热溶解于纯水中；b)将溶液置于室温；c)牛黄在硅胶干燥器中干燥24小时，制成粉末，经200目滤网过滤；然后d)将牛黄粉末加入到β-环糊精溶液中。
过程3)中的龙脑包涵复合物的制备是通过a)将根据组合物总体积精确称量的0.2-1.3w/v％的β-环糊精(Cydex-P)加热溶解于纯水中；b)将溶液置于室温；c)室温下将龙脑溶解于根据组合物总体积精确称量的0.2-0.4w/v％的乙醇中；然后d)将龙脑溶液加入到β-环糊精溶液中，搅拌冷却。
过程5)中的黏度调节剂可以是黄原胶、聚乙烯四氢吡咯、羧甲基纤维素和其衍生物、果胶中的一种或几种，它们的用量范围分别占组合物总体积的0.1-0.4w/v％，0.2-1.2w/v％，0.1-0.5w/v％，和0.1-0.5w/v％。
下面还提供了牛黄清心元的液剂剂型的另一种制造方法1)将除了牛黄、龙脑和灵猫香外本发明的生药(如山药、甘草、高丽人参、蒲黄、神曲、大豆黄卷、桂皮、明胶、芍药、麦门冬、黄芩、当归、防风、白术、柴胡、桔梗、杏仁、茯苓、川芎、羚羊角、白蔹、干姜等)经过回流制备出草药抽提液；2)在过程1)的草药抽提液中，加入多聚山梨酸酯、聚乙二醇、Cremophore和海藻酸钠中的一种或几种，其用量分别占组合物总体积的0.1-0.4w/v％，0.2-1.2w/v％，0.1-0.5w/v％，和0.1-0.5w/v％；然后，加入灵猫香并悬浮；3)在过程2)得到的溶液中，加入牛黄和龙脑粉剂并搅拌；4)在过程3)所得到的溶液中，加入粘度调节剂和蜂蜜或蔗糖，混合；加入对羟基苯甲酸丙酯和对羟基苯甲酸甲酯的乙醇溶液，和苯甲酸钠，搅拌；然后，加入柠檬酸和/或柠檬酸盐调节pH；最后将溶液装入一个容器。
本发明中过程2)的操作是加入灵猫香后搅拌溶液，利用超声波发生机悬浮几次，然后搅拌1小时。
本发明中过程3)的操作是将上述的生药置于硅胶干燥器中干燥1小时，再切碎。将粉碎的材料经200目滤网过滤，与牛黄和龙脑的细微粉末混合。搅拌混合物，超声波处理并再次搅拌1小时。
对于如上制造的本发明新处方的牛黄清心元组合物，检测了它的急性口服毒性，以评估其安全性。并将新处方的牛黄清心元的药学特性与传统处方的牛黄清心元相对照，检测其对中央神经系统、自律神经系统和循环系统的药学作用。
值得注意的是，与含有麝香的传统处方的组合物相比，用灵猫香替代传统处方中的麝香的新处方表现出相当的或更强的药学作用。
通过如下详细描述的实施例和实验对本发明加以说明，但并非是限定其范围。实施例1-9新处方的牛黄清心元组合物实施例1-9中的处方如表1所示。每个处方相当于100个成人剂量。比较例1-4如表1所示，比较例1，2和3分别为目前市售的牛黄清心元，原方牛黄清心元和半量牛黄清心元。表1实施例和比较例的处方
实施例10新处方牛黄清心元丸剂的制造方法制造新处方牛黄清心元丸剂的过程为，将实施例2的处方中除了灵猫香之外的其他的生药(山药28.2g、甘草20.0g、高丽人参9.7g、蒲黄10.0g、神曲10.0g、大豆黄卷7.0g、桂皮7.0g、明胶7.0g、芍药6.0g、麦门冬6.0g、黄芩6.0g、当归6.0g、防风6.0g、白术6.0g、柴胡5.0g、桔梗5.0g、杏仁5.0g、茯苓5.0g、川芎5.0g、羚羊角3.5g、白蔹3.0g、干姜3.0g、牛黄1.4g和龙脑4.1g)精确称量后混合，制成细微粉末；然后将粉末经200目的过滤网过滤并加入灵猫香1.5g，均匀混合；最后加入赋型剂如蜂蜜，压丸，再包上金箔衣。实施例11新处方牛黄清心元液剂的制造方法(1)生药抽提液的制造牛黄清心元生药抽提液的制造过程为，将实施例2的处方中除了牛黄、龙脑和灵猫香之外的其他的生药(山药28.2g、甘草20.0g、高丽人参9.7g、蒲黄10.0g、神曲10.0g、大豆黄卷7.0g、桂皮7.0g、明胶7.0g、芍药6.0g、麦门冬6.0g、黄芩6.0g、当归6.0g、防风6.0g、白术6.0g、柴胡5.0g、桔梗5.0g、杏仁5.0g、茯苓5.0g、川芎5.0g、羚羊角3.5g、白蔹3.0g、干姜3.0g)精确称量后混合，切碎，转至一个抽提器中，加入1300ml纯水于90-100℃回流抽提，冷却后经200目的过滤网过滤。
(2)牛黄包涵复合物的制造牛黄包涵复合物的制造过程为，将精确称量的18g β-环糊精(Cydex-P)加热溶解于300ml纯水中，置于室温下。将1.4g牛黄在硅胶干燥器中干燥24小时，制成粉末，经200目滤网过滤制成细微粉末。将牛黄粉末加入到β-环糊精溶液中强烈搅拌2小时。
(3)龙脑包涵复合物的制造龙脑包涵复合物的制造过程为，将精确称量的20g β-环糊精(Cydex-P)溶解于350ml纯水中，置于室温；将4.1g龙脑细微粉末溶解于30ml乙醇中的溶液加入到上述溶液中，搅拌冷却。
(4)灵猫香酊剂的制造灵猫香酊剂的制造过程为，将精确称量的1.5g灵猫香加入到27ml的乙醇中，加热溶解，冷却过滤。再加入乙醇至终体积30ml。1ml的灵猫香酊剂相当于50mg的生药。
(5)将上面(1)所制备的生药抽提液倒入一个混合器中，加入6g黄原胶，加热溶解并在室温冷却。然后，加入300g蜂蜜至冷却的溶液中，搅拌混合。将(2)，(3)和(4)制备的每种产物按顺序缓慢地加入至此溶液中，搅拌混合。
(6)将0.9g对羟基苯甲酸丙酯和1.5g对羟基苯甲酸甲酯溶解于80ml的乙醇溶液，倒入混合器(5)中，并缓慢地加入0.6g的苯甲酸钠，混合。然后用柠檬酸和/或柠檬酸盐调节混合液的pH至4。将最后的溶液强烈搅拌均匀，装入一个30ml的棕色容器中。实施例12新处方牛黄清心元液剂的制造方法除了在第(5)步中用8g的果胶替代6g黄原胶之外，这里制造新处方牛黄清心元液剂的过程与实施例11中的相同。实施例13新处方牛黄清心元液剂的制造方法除了在第(2)步中将β-环糊精用量由18g改变为16.5g，在第(3)步将β-环糊精用量由20g改变为15g，并且在第(5)步中将6g黄原胶改为10g之外，这里制造新处方牛黄清心元液剂的过程与实施例11中的相同。实施例14新处方牛黄清心元液剂的制造方法除了在第(2)步中将β-环糊精用量由18g改变为24g，在第(3)步将β-环糊精用量由20g改变为15g，并且在第(5)步中将300g的蜂蜜改为240g蔗糖之外，这里制造新处方牛黄清心元液剂的过程与实施例11中的相同。实施例15新处方牛黄清心元液剂的制造方法除了在第(3)步中将β-环糊精用量由20g改变为30g，在第(5)步中将6g的黄原胶改为8g羧甲基纤维素钠，并且在第(5)步中将300g的蜂蜜改为240g蔗糖之外，这里制造新处方牛黄清心元液剂的过程与实施例11中的相同。实施例16新处方牛黄清心元液剂的制造方法将实施例2中的组合物中不包括牛黄、龙脑和灵猫香以外的22种生药细微粉末精确称量后，在2％聚乙二醇(1300ml)水溶液中搅拌，制备成生药悬浮液，而不是将22种生药加入到抽提器中，并加入1300ml的纯水，在90-100℃回流抽提4小时制备成生药抽提液(1)。除此之外，本实施例的制造新处方牛黄清心元液剂的过程与实施例11中的相同。实施例17新处方牛黄清心元液剂的制造方法除了制备生药悬浮液时用1％丙二醇水溶液(1300ml)替代2％聚乙二醇(1300ml)水溶液之外，本实施例的制造新处方牛黄清心元液剂的过程与实施例16中的相同。实验例1新处方牛黄清心元组合物的稳定性试验I表观在此研究了实施例11制造的样本。三个编组(LOT1，LOT2和LOT3)通过相同的过程制备，从每个编组中抽取三个样品(SA-A，SA-B和SA-C)。储存条件为室温(长期储存试验1-30℃，40-55％相对湿度)，储存和观察时间间隔为制成时，制造后6个月，12个月，18个月，24个月，30个月和36个月。
a)试验标准药物为黄色的带有独特芳香的不透明悬浮液。
b)试验结果结果如下表2所示。
表2.实施例11制造的新处方牛黄清心元组合物的稳定性试验I表观试验结果
实验例2.新处方牛黄清心元组合物的稳定性试验IIpH各种参数如试验的样本、储存条件、储存及观察时间都与实验例1相同。
a)试验基准pH3.0-5.0b)试验方法按照韩国药典的一般试验方法对实施例11的组合物进行pH试验。
c)试验结果结果如下表3所示。
表3.实施例11制造的新处方牛黄清心元组合物的稳定性试验IIpH试验结果
实验例3.新处方牛黄清心元组合物的稳定性试验III比重各种参数如试验的样本、储存条件、储存及观察时间都与实验例1相同。
a)试验基准1.004-1.104b)试验方法按照韩国药典的一般试验方法对实施例11的组合物进行比重试验。
c)试验结果结果如下表4所示。
表4.实施例11制造的新处方牛黄清心元组合物的稳定性试验III比重试验结果
实验例4.新处方牛黄清心元组合物的稳定性试验IV蒸发残留物各种参数如试验的样本、储存条件、储存及观察时间都与实验例1相同。
a)试验基准20.4-27.6w/v％b)试验方法精确量取10ml实施例11的组合物，先在105℃干燥4小时。将材料置于硅胶干燥器中并冷却，然后移至一个已称重的烧杯中，水浴蒸发浓缩并于105℃干燥4小时。在干燥器中冷却后，将材料精确称重，计算测量前后的变化。
蒸发残留物以测量前后重量变化相对于样品溶液体积的百分比表示。
c)试验结果结果如下表5所示。
表5.实施例11制造的新处方牛黄清心元组合物的稳定性试验IV蒸发残留物试验结果(w/v％)
实验例5.新处方牛黄清心元组合物的稳定性试验V牛黄中结合型胆红素的含量各种参数如试验的样本、储存条件、储存及观察时间都与实验例1相同。
a)试验基准90％以上的指示量(1.68mg/30ml结合型胆红素)b)试验方法精确量取30ml实施例11的组合物，置于带有回流冷却器的300ml园底烧瓶中。加入10ml d-HCl和50ml氯仿，反应混合物水浴加热40分钟后移至分液漏斗中。氯仿层在无水硫酸钠上脱水，水相溶液再用50ml氯仿抽提三次。将氯仿层收集在一起，加入氯仿调节至200ml总体积，用作全胆红素的试验溶液。
在另一个步骤中，精确量取30ml(1.68mg结合型胆红素)实施例11的组合物，置于100ml分液漏斗中，加入30ml的氯仿，搅拌10分钟。氯仿层在无水硫酸钠上脱水，水相溶液再用50ml氯仿抽提两次。将氯仿层收集在一起，加入氯仿调节至200ml总体积，用作游离胆红素的试验溶液。
在另一个步骤中制备标准溶液，将精确称量的2.0mg的胆红素标准溶于氯仿中制成200ml溶液。
基于以上的试验溶液和标准溶液，按照下面的条件通过液相层析进行试验层析柱Shim-pak CLC-ODS检测仪紫外吸收光谱仪(波长436nm)流动相甲醇∶2％乙酸(90∶10)流速1.2ml/min计算结合型胆红素(C33H36N4O6)的量(mg)＝[总的胆红素量(mg)-游离的胆红素量(mg)]×1.25各个胆红素的量(mg)
c)试验结果结果如下表6所示。每个编组进行了三次试验，记其平均值。
表6.实施例11制造的新处方牛黄清心元组合物的稳定性试验IV牛黄中结合型胆红素的含量试验结果
实验例6.新处方牛黄清心元组合物的稳定性试验VI甘草中甘草次酸的含量各种参数如试验的样本、储存条件、储存及观察时间都与实验例1相同。
a)试验基准90％以上的表示量(4.04mg/30ml甘草次酸)。
b)试验方法精确量取60ml实施例11的组合物(8.08mg甘草次酸)，置于带有回流冷却器的园底烧瓶中。加入3M硫酸(50ml)，反应液在水浴中水解1小时。冷却后加入50ml氯仿，水浴加热30分钟，回流抽提。冷却后将抽提物转移至分液漏斗中收集氯仿层，再用30ml氯仿抽提三次。将氯仿层收集在一起，经无水硫酸钠过滤。剩余的溶液经减压浓缩，然后将残留物溶于甲醇并精确至50ml。另外精确称重约8.08mg用于分析的甘草次酸，然后按照上述试验溶液相同的程序配制标准溶液。基于以上的试验溶液和标准溶液，按照下面的条件通过液相层析进行试验，测量每个样品的甘草次酸的峰面积(AT，AS)层析柱装于不锈钢管中的十八烷基-sylinized硅胶(5-10μm)(内径4-6mm；长15-20mm)。
检测仪紫外吸收光谱仪(波长254nm)流动相甲醇∶水∶冰乙酸(78∶19∶3)流速1.0ml/min上样量10μl计算甘草次酸(C42H62O16)的含量(％)
c)试验结果结果如下表7所示。每个编组进行了三次试验，记其平均值。
表7.实施例11制造的新处方牛黄清心元组合物的稳定性试验VI甘草中甘草次酸的含量
实验例7.新处方牛黄清心元组合物的稳定性试验VII龙脑中总莰醇的含量各种参数如试验的样本、储存条件、储存及观察时间都与实验例1相同。
a)试验基准90％以上的表示量(30.58mg/30ml总莰醇)b)试验方法精确量取30ml实施例11的组合物(8.08mg甘草次酸)，置于300ml分液漏斗中。加入50ml氯仿震荡抽提，氯仿层在无水硫酸钠上脱水并过滤，用50ml氯仿抽提三次。将氯仿层收集在一起，再加入氯仿至精确的200ml总体积，用作试验溶液。
另外精确称量14.2mg异莰醇标准和22.8mg正莰醇标准，溶于200ml氯仿，用作标准溶液。基于以上的试验溶液和标准溶液，按照下面的条件通过气相层析进行试验层析柱10％PEG-20M Chromosorb(WAW-DMCS)60-80目。
层析温度140-180℃(以5℃/分钟升高)上样温度230℃检测温度230℃检测仪电离检测仪流动气体N2流速40ml/min计算总莰醇的(C10H16O)的含量(％)
c)试验结果结果如下表8所示。每个编组进行了三次试验，记其平均值。
表8.实施例11制造的新处方牛黄清心元组合物的稳定性试验VII龙脑中总莰醇含量(％)
实验例8.新处方牛黄清心元组合物的稳定性试验VIII灵猫香中灵猫香酮的含量各种参数如试验的样本、储存条件、储存及观察时间都与实验例1相同。
a)试验基准90％以上的表示量(0.3mg/30ml灵猫香酮)b)试验方法精确量取450ml实施例11的组合物(4.5mg灵猫香酮)，置于分液漏斗中。加入600ml氯仿震荡抽提，将氯仿层收集在一起，在无水硫酸钠上脱水并过滤，剩余的溶液减压浓缩，然后将残留物溶于氯仿至精确的50ml，用作试验溶液。
另外精确称量20mg灵猫香酮标准(Firmenich Co.)，溶于200ml氯仿，用作标准溶液。
基于以上的试验溶液和标准溶液，按照下面的条件通过气相层析进行试验层析柱10％OV-17 Chromosorb WHP/120，不锈钢填充柱(6ft，2mm)检测仪火焰电离检测仪上样温度230℃检测温度240℃层析柱温度210-224℃开始时间20分钟升温速度0.5℃/分钟最终时间2分钟流动气体N2流速60psi空气流速40psiH2流速30psi计算灵猫香酮的(C17H30O)的含量(％)
c)试验结果结果如下表9所示。每个编组进行了三次试验，记其平均值。
表9.实施例11制造的新处方牛黄清心元组合物的稳定性试验VIII龙脑中总莰醇含量(％)<
从实验例1-7中，各种试验的结果(如，表观，pH，比重，蒸发残留物，结合型胆红素含量、甘草中甘草次酸含量、龙脑中总莰醇的含量、以及灵猫香中灵猫香酮的含量)都充分地证明了本发明的新处方牛黄清心元组合物的稳定性。所有的样本都同样是从制造开始直至制造后36个月保存在室温下的。实验例9新处方牛黄清心元组合物的急性毒性试验1.试验方法本试验方法基于韩国食品医药品安全本部1996年4月16日的1996-8号文告公布的“药品等的毒性试验标准”。
(1)实验动物购买雌性和雄性Sprague-Dawley SPF大鼠(7周龄)并使之适应实验室环境(温度24±2℃，湿度55±5％)两周。在适应期内，通过观察一般性状选择出健康的动物用于本实验。在整个实验期间，充分供应大鼠的食物和饮水。
(2)试验样本在实施例2制备的组合物(表1)中，将除牛黄、龙脑和灵猫香之外的其他22种生药精确称量，切碎，并加入10倍的纯水，在90-100℃回流抽提4小时。冷却后，抽提液通过200目的过滤网，然后将剩余的溶液冻干。形成细微粉末后，将其经过200目过滤网过滤，得到第一种生药粉末。同时，将分别制备的牛黄、龙脑和灵猫香细微粉末混合，经过200目过滤网过滤，再与第一种生药粉末充分混合。将混合物根据实验所需的剂量悬浮于羧甲基纤维素钠溶液。
(3)用药对大鼠施用新处方牛黄清心元组合物，采用5个用药组(2100mg/kg，700mg/kg，233mg/kg，78mg/kg和26mg/kg)，还包括一个实验中的对照组；最高和最低剂量组分别施用2100mg/kg和26mg/kg的新处方牛黄清心元组合物。采用5倍的剂量比。以使用前制备的药剂，对每一组进行单次口服用药。
(4)一般观察a)临床性状和死亡动物用药开始后6小时内的每一小时观察所有大鼠的临床性状和死亡率。此后，用药的第2至11天，每天观察大鼠的一般状态、中毒症状和死亡率。
b)体重在用药开始前和用药后的第1，3，6，9，12和14天，测量所有大鼠的体重。
c)剖检试验完成后，测量体重，将所有大鼠用乙醚麻醉，且开舌下动脉和腹部主动脉致死，然后粗略检查其病理变化。样品组织和器官保存于10％的福尔马林中用以显微观察。
2.结果在所有的用药组的雌性和雄性大鼠中，贯穿整个实验期间，没有观察到临床症状和动物死亡。
与对照组相比较，在所有的用药组的雌性和雄性大鼠中，贯穿整个实验期间，没有观察到明显的体重变化。最后的剖检也没有发现肉眼可见的异常。
以上的结果表明，对于大鼠，新处方牛黄清心元的口服LD50值大于最高剂量水平2100mg/kg(约310倍的临床剂量)。因此，此药物可认为是一种安全的药物，而2100mg/kg以上的再高剂量水平的评估是不可能的。
表10.口服新处方牛黄清心元组合物的SD大鼠的死亡率
实验例10新处方的牛黄清心元组合物的治疗效力试验I试验药物对脑缺血的效果
1.实验动物在带有空调的动物房中分笼饲养体重60-100g的蒙古沙鼠一周(温度23±3℃，相对湿度50±10％，通风10-12次，荧光灯12小时周期，亮度150-160lux)。供给其充分的噬咬食品和饮水。适应实验室环境后，选出健康状态的动物。
2.给药在本实验中施用以下的试验药物AT(实施例2制备的含有灵猫香的处方)；AF(实施例5制备的含有灵猫香的处方)；BT(比较例1制备的含有麝香的处方)；和BF(比较例2制备的含有麝香的处方)。上述的试验药物悬浮于羧甲基纤维素钠溶液，使用前新鲜制备。
3.试验方法(1)诱发缺血在蒙古沙鼠(体重60-100g)上用颈动脉结扎法诱发脑缺血。用3％isoflurane麻醉动物，在试验中降低isoflurane的浓度至1-2％以维持麻醉效果。剥离颈部周围的皮肤，分离肌肉。将颈动脉与迷走神经及其周围组织分离。然后，将两侧的颈动脉用钳子(microaneurysm clip)截流10分钟。为了确定入脑血液的阻断，使用一个检眼镜检测作为中央脑动脉的一部分的眼动脉的厚度是否减小了。在整个诱发脑缺血的过程中，用一个直肠探头测量体温并用一个连接探头的加热垫维持体温在37℃。假手术对照组也用同上面相同的方法麻醉，分离颈动脉但是不结扎。麻醉苏醒后的动物隔离饲养，供应给充分的食物和饮水。
(2)给药每天两次每次间隔12小时，以150μl的剂量对动物口服施用试验药物。对照组以同样量的蒸馏水替代药物口服摄入。在开始用药前的上午，测量对照组和给药组的动物体重。给药后的第7天，在上午给药后的3-4小时诱发缺血。诱发脑缺血后的12小时，重新对动物施药。诱发脑缺血后的第5天，在上午给药后的3-4小时处死动物，然后往心脏中注射固定液，固定脑组织。
(3)组织的处理诱发缺血后的第5天，心脏用5％ isflurane麻醉，打开胸腔，通过主动脉注入固定液固定脑组织。加入固定液之前注射50ml无钙的蒂罗德溶液从组织中完全去除全血。然后，脑用含有4％对-甲醛和2％苦味酸的0.4M PBS(Lana′s固定液)固定。固定的组织用同样的固定液再处理4小时，随后用含有20％和30％的蔗糖的TPBS溶液在4℃依次沉淀，以防冷冻时的组织损伤。将蔗糖处理的组织用组织冷冻机在至少-65℃的干冰上冷冻。在低温恒温切片机上以80μm的间隔制备10个切片(前囟点从-2.34mm至-3.14mm，40μm厚)。
(4)MAP2的免疫组织化学试验制备的组织在含有3％过氧化氢的TPBS(Tris磷酸缓冲盐)中反应30分钟，以降低内源性过氧化物酶。然后，进一步用含有1％正常兔血清和0.3％Triton-X的TPBS处理。将组织与小鼠的MAP2(微管相关蛋白2)抗血清(Sigma，1∶80000)在4℃反应12小时。这样与第一抗体反应的组织再在室温下与第二抗体兔抗鼠IgG(Vector，1∶200)反应1小时，与抗生物素蛋白-生物素复合物(Elite kit，Vector，1∶250)反应30分钟。经处理的组织再与生物素酰酪胺(BT1μl BT/ml PBS+0.005％H2O2)室温下反应20分钟，然后，室温下用抗生物素蛋白-生物素复合物(1∶250)诱导反应1小时。以上各步处理之后，用TPBS清除组织中残余的抗体5分钟，共6次。然后，与ABC(抗生物素蛋白-生物素复合物)反应之后，在室温下通过与DAB(二氨基苯胺)反应对组织染色。染色后置于载玻片上使组织干燥完全，提高酒精浓度脱水并用二甲苯处理，盖上盖玻片密封。
(5)组织的观察及统计分析使用图像分析仪(Metamorph，universal imaging Co.)染色，50倍放大测量10张组织切片中海马部分的缺血区。与假手术对照相比较，低染色区为缺血区。计算出低染色区与MAP2染色的总面积(着色纤维区)的比值。从假手术对照中观察到的纤维的平均染色密度的平均面积中，计算出染色的神经纤维的平均面积比。从诱发缺血和给药组观察到的缺血区与假手术对照的纤维的平均染色密度的对比中，计算出MAP2面积比百分数，然后，t-测验确定其显著性。给药组的纤维平均染色密度对对照组的纤维平均染色密度的百分比通过下面的公式计算
对给药期间动物体重的检测，计算出第7天(手术前)的体重与第12天体重的变化百分比，并对给药组和对照组的体重差异作t-测验分析。
4.结果(1)体重给药后第7天(诱发缺血日)，各个给药组的体重没有显著变化。但是，诱发缺血后第5天，对照组和BT组体重与开始时和第7天测量的体重相比显著下降(表11)。另一方面，在BF，AT，和AF组中，与开始时和第7天测量的体重相比较，没有明显的体重变化，第12天，对照组和BT组与其他组相比体重显著降低。从以上的结果中可以注意到，诱发缺血的体重下降在BF组，AT组和AF组中被有效地抑制了，而在BT组中诱发缺血的体重下降未能被有效地抑制。
表11.给药期间体重的变化(％)<
>1)平均值±S.D.
(2)缺血区域的测量表12中显示了诱发缺血的蒙古沙鼠的海马区的免疫染色结果(1)缺血区域的平均值，(2)MAP2免疫染色区域的平均值，和(3)缺血区域和染色区域的面积百分比。与对照相比，给药组的海马区CA-1和CA-2位点的与缺血显著相关的MAP2染色发生变化，并且神经纤维对缺血的抗性都增加了。而给药组与对照组相比，由于缺血导致的MAP2免疫染色降低，总的损伤区域没有显著的差异。因此可知给药对于缺血造成的总损伤区域没有作用。表12.在每组中由双颈动脉闭合所影响的海马区<
1)平均值±S.D.
2)(染色区域/缺血区域)×1003)每组中的实验动物数4)与对照组相比显著性的概率5)AT和BT或者AF和BF之间的显著性的概率*p＜0.05，**p＜0.01与对照组有显著差异(3)缺血区域的MAP2染色变化神经纤维的总区域，表现为缺血区域的MAP2染色，在三个组中(BF，AT和AF)与对照组相比明显增加，而在BT组中与对照组则几乎没有差异。另一方面，假手术对照平均染色密度为86.32％。从给药组和对照组获得的各个染色密度，对所说的平均染色密度计算出比率，在三个组中(BF，AT和AF)与对照组相比，染色密度的比率显著提高，而在BT组中与对照组则几乎没有差异。给药组中缺血区的MAP2染色比率与BF和BT组之间存在显著差异，而与AF和AT组之间几乎没有差异。实验例11.新处方的牛黄清心元组合物的治疗效力试验II对高血压的作用1.实验动物除了以SHR大白鼠(体重180-220g)替代蒙古沙鼠之外，选取和饲养方法与实施例10中相同。
2.材料材料与与实施例10中相同。
3.试验方法每组选用平均体重270-280g的7只SHR大白鼠。在两个组中(AF，BF)试验药物以0.85ml/200的剂量，在另两个组中(AT，BT)试验药物以0.5ml/200的剂量，每日两次口服施用，在给药前测量尾动脉的血压。用一个血压监测仪(Multi-channel 8000，Technical andScientific Equipment)监测尾动脉的血压，同时测量脉搏。在测量血压前，将大白鼠置于一个37℃恒温器中15分钟，以维持恒定的体温。
4.结果测量每组7只SHR大白鼠的尾动脉血压，每日两次口服施用试验药品，结果除了BT组之外的各给药组的血压与对照组相比都有下降的趋势(表13)。尤其是，在AT，BF两组再给药过程中血压持续下降；从统计分析中可知，与对照组相比给药组的血压显著下降(P＜0，05，P＜0.01)记录了尾动脉的血压变化和脉搏，但是在给药组和对照组之间没有明显的脉搏变化(表14)。
表13给药期间对尾动脉血压的影响
1)平均值±S.D.2)(测定时的血压/给药前的血压)×1003)与对照相比显著性的概率4)AT和BT或者AF和BF之间显著性的概率表14给药期间对尾动脉脉搏的影响
1)平均值±S.D.2)(测定时的心搏率/给药前的心搏率)×1003)与对照相比显著性的概率4)AT和BT或者AF和BF之间显著性的概率实验例12.新处方的牛黄清心元组合物的治疗效力试验III对心悸的作用1.实验动物除了以兔(体重2.5-3.5kg)替代蒙古沙鼠之外，选取和饲养方法与实施例10中相同。
2.材料材料与与实施例10中相同。
3.试验方法经过30天的长期给药之后，将给药组的兔子麻醉，以仰卧位置固定。然后，从兔子的胸腔下部至头部切开，并且开暴露的横隔膜。胸腔开至头部并固定后，将周围的组织如脂肪与心脏分离，暴露主动脉。将丝线从主动脉底下穿过，横切主动脉并插管，然后将灌注液注入冠状动脉并用已有的丝线固定。分离固定好的心脏并连接到Langedorf仪上，小心防止任何空气的流入。用Kreb′s溶液完全注满Langedorf仪上部的水箱。同时通过充入95％O2+5％CO2控制60mmHg以上的注入压和580mmHg以上的pO2。将压力传感器(MyoGraph F60，Narco biosystem)连接于左心室底部并稳定30分钟。然后，用physiograph MKIII(Narco biosystem)测量心跳次数和心脏收缩力。在心跳次数和心脏收缩力的测量过程中，在注入液中加入各10ml 20μM的肾上腺素和20μM的盐酸乙酰胆碱，它们可诱导心脏病，用以检测给药组和对照组之间心跳次数和心脏收缩力的变化。通常，心跳次数以次/分钟来表示，但考虑到对肾上腺素和盐酸乙酰胆碱总的反应时间在1-2分钟内，所以本实验中心跳次数以次/10秒来表示。
4.结果分离给药组和对照组动物的心脏，连接到Langedorf仪器上，仪器稳定后，AF和BT两个组心脏收缩力大于对照组(表15)。另外，对分离的心脏施用肾上腺素和乙酰胆碱诱导心律不齐和缺血。通过计算心脏收缩力和心跳次数纪录心脏工作结果(表16)。当注射肾上腺素，心脏刺激剂后，对照组的心脏工作比注射前的状态增加了约418％(表17)。相反，BF组的心脏工作显著地低于对照组(P＜0.05，P＜0.01)。
表15.肾上腺素或乙酰胆碱处理对分离的心脏的收缩力的影响
1)平均值±S.D.2)(测定时的收缩力/对照的收缩力)×100表16.对分离的心脏的心搏率的影响
1)平均值±S.D.
2)(测定时的心搏率/对照的心搏率)×100表17.肾上腺素处理前后机械性参数的变化百分比
1)EPI＝肾上腺素2)(处理后的收缩力/处理前的收缩力)×1003)(处理后的心搏率/处理前的心搏率)×1004){(处理后的心搏率×处理后的收缩力)/(处理前的心搏率×处理前的收缩力)}×1005)与对照组相比的p值6)与B组相比的p值当施用乙酰胆碱时，对照组的心脏工作约为17％，低于给药组(表18，图2)与对照组不同，长期给药的两组(AF，BT)心脏工作的降低非常小(P＜0.05，P＜0.01)。
表18.乙酰胆碱处理前后机械性参数的变化百分比
1)乙酰胆碱2)(处理后的收缩力/处理前的收缩力)×1003)(处理后的心搏率/处理前的心搏率)×1004){(处理后的心搏率×处理后的收缩力)/(处理前的心搏率×处理前的收缩力)}×1005)与对照组相比的p值6)与B组相比的p值表19表示在肾上腺素和乙酰胆碱处理后60秒内心脏收缩力的强烈变化。用肾上腺素处理，与对照组相比，BF组的心脏收缩力变化较小。而且，用乙酰胆碱处理，与对照组相比，AF和BF两个组的心脏收缩力变化都较小(P＜0.05，P＜0.01)。表19处理后60秒内心脏收缩力的变化
实验例13.新处方的牛黄清心元组合物的治疗效力试验IV对中央神经系统和自律神经系统的作用1.实验动物除了以ICR小鼠(体重20-30g)替代蒙古沙鼠之外，选取和饲养方法与实施例10中相同。
2.材料材料与与实验例10中相同。
3.试验方法
(1)对环己烯巴比妥诱导的睡眠时间的影响每组10只ICR小鼠。在口服试验药物(AT，AF，BT和BF)和对照药物(盐酸氯丙嗪，4mg/kg)后30分钟，腹膜内注射50mg/kg环己烯巴比妥钠。睡眠时间由失去正位反射的时间来确定。
(2)对马钱子碱诱导的死亡率的影响每组10只ICR小鼠。在口服试验药物(AT，AF，BT和BF)和对照药物(苯巴比妥钠，100mg/kg)后30分钟，皮下注射1.5mg/kg硝酸马钱子碱。纪录小鼠的死亡数目和诱导的抽搐时间。
(3)对自发运动活力的影响将小鼠单独放入一个运动笼(Ugo Basile)中适应30分钟。每组8只小鼠。在口服试验药物(AT，AF，BT和BF)和对照药物(盐酸氯丙嗪，4mg/kg)1小时后，以15分钟间隔确定小鼠的自发运动活力。
4.结果(1)对环己烯巴比妥诱导的睡眠时间的影响表20表示测量出的环己烯巴比妥诱导的睡眠时间结果。作为阳性对照的盐酸氯丙嗪组的睡眠时间(2089.2秒)远远超过了对照组(992.5秒)。试验药物组(含有麝香的BF，含有灵猫香的AT和AF)的睡眠时间分别超过阳性对照组41％，34％和66％。
表20.对环己烯巴比妥诱导的睡眠时间的影响
1)平均值±S.D2)与对照组相比的p值3)与B组相比的p值*p＜0.05，**p＜0.01(2)对马钱子碱诱导的死亡率的影响表21表示马钱子碱诱导的死亡率的结果，皮下注射马钱子碱后诱导的抽搐时间与对照组的时间234.8秒相比显著延迟了，分别为290.7秒(BT组)，321.7秒(BF组)和305.6秒(AT组)。
表21.对马钱子碱诱导的死亡率的影响
1)平均值±SD2)与对照组相比的p值3)与B组相比的p值*p＜0.05，**p＜0.01(3)对自发运动活力的影响表22表示了口服试验药物后小鼠自发运动活力的变化。相比于对照组纪录的1369.3的自发运动活力，所有给药组的自发运动活力都下降了。表22对自发运动活力的影响
1)平均值±S.D2)与对照组相比的p值3)与B组相比的p值*p＜0.05，**p＜0.01实验例14.新处方的牛黄清心元组合物的治疗效力试验V对应激反应的作用1.实验动物除了以SHR大鼠(体重180-220g)替代蒙古沙鼠之外，选取和饲养方法与实施例10中相同。
2.材料材料与与实验例10中相同。
3.试验方法每组使用10只SHR大鼠。大鼠禁食24小时，然后口服试验药物(AT，AF，BT和BF)。口服药物之后2小时，将大鼠限制于金属管道限制器(Natsume)中，置于水浴(20±2℃)中24小时，对大鼠给以浸水压力刺激。用乙醚麻醉受到刺激的大鼠，切开腹腔，取出脾和肾上腺。从分离的器官上彻底清除脂肪和膜并称重。肾上腺用5％三氯乙酸(TCA)溶液匀浆，测量肾上腺中抗坏血酸和蛋白质的含量。更具体地，将匀浆液离心(13,000rpm，10分钟)，加入悬浮液(0.5ml)，TCA溶液(0.5ml)，联吡啶(0.8ml)，H3PO4(0.1ml)和氯化铁(0.1ml)，于525nm测量吸收值。用Bradford法以牛血清白蛋白作标准溶液测量肾上腺中的蛋白质。
4、结果表23给出试验药物对受到限制于水浴中24小时刺激的大鼠的作用。这些结果表明，虽然没有观察到任何与应激反应相关的肾上腺增大，但是肾上腺中的抗坏血酸含量，与其他没有应激反应的正常组相比，在对照组中减少了52％，而BF组和AT组中分别减少了约17％和32％。因此，应激反应的大鼠中，在口服施用各种试验药物之后，肾上腺中的抗坏血酸的减少显著地被抑制了。另外，与其他没有应激反应的正常组相比，对照组中脾脏的重量减小了45％，AT组和BT组分别减小了32％和29％，因此，大鼠中受到刺激的脾脏减小被抑制了。表23.对受到限制于水浴中24小时刺激的大鼠的作用
1)平均值±S.D2)与对照组相比的p值3)与B组相比的p值*p＜0.05，**p＜0.01在中央神经系统、自律神经系统和循环系统相关疾病的治疗中，与传统的含有麝香的牛黄清心元组合物相比，本发明的新处方的牛黄清心元组合物具有相当的或者更强的效用。
权利要求
1.一种组合物，其包括(1)灵猫香，和(2)除了麝香之外的牛黄清心元组合物，其包括山药、甘草、高丽人参、蒲黄、神曲、大豆黄卷、桂皮、明胶、芍药、麦门冬、黄芩、当归、防风、白术、柴胡、桔梗、杏仁、茯苓、川芎、牛黄、羚羊角、龙脑、白蔹和干姜。
2.如权利要求1所述的组合物，其中所说的除了麝香之外的牛黄清心元组合物包括13.0-17.0重量％的山药、9.0-12.0重量％的甘草、4.0-6.0重量％的高丽人参、4.0-6.0重量％的蒲黄、4.0-6.0重量％的神曲、3.0-5.0重量％的大豆黄卷、3.0-5.0重量％的桂皮、3.0-5.0重量％的明胶、2.0-4.0重量％的芍药、2.0-4.0重量％的麦门冬、2.0-4.0重量％的黄芩、2.0-4.0重量％的当归、2.0-4.0重量％的防风、2.0-4.0重量％的白术、2.0-4.0重量％的柴胡、2.0-4.0重量％的桔梗、2.0-4.0重量％的杏仁、2.0-4.0重量％的茯苓、2.0-4.0重量％的川芎、0.6-4.0重量％的牛黄、1.0-3.0重量％的羚羊角、1.0-3.0重量％的龙脑、1.0-3.0重量％的白蔹及1.0-3.0重量％的干姜。
3.如权利要求1或2所述的组合物，其中所述灵猫香的比例为(2)除了麝香之外的牛黄清心元组合物的总重量的0.4-10.5重量％。
4.一种治疗中央神经系统、自律神经系统和循环系统相关疾病的药剂，其包括权利要求1所述的组合物。
5.一种制造权利要求1所述的组合物的丸剂的方法，其包括以下的步骤(1)准确称量生药，即山药、甘草、高丽人参、蒲黄、神曲、大豆黄卷、桂皮、明胶、芍药、麦门冬、黄芩、当归、防风、白术、柴胡、桔梗、杏仁、茯苓、川芎、羚羊角、白蔹和干姜，制成细微粉末；(2)将单独制备的牛黄和龙脑的细微粉末剂加入到上述的粉末中形成混合物；(3)将灵猫香均匀地混入上述的混合物中；(4)在混合物中加入赋型剂如蜂蜜制造出丸剂剂型；并(5)用金箔包裹药丸。
6.一种制造权利要求1所述的组合物的液剂的方法，其包括以下的步骤1)将山药、甘草、高丽人参、蒲黄、神曲、大豆黄卷、桂皮、明胶、芍药、麦门冬、黄芩、当归、防风、白术、柴胡、桔梗、杏仁、茯苓、川芎、羚羊角、白蔹和干姜切碎，加入纯水经过回流制成一种草药抽提液；2)将牛黄包于β-环糊精，制成一种牛黄包涵复合物；3)将龙脑包于β-环糊精，制成一种龙脑包涵复合物；4)将灵猫香溶于乙醇，制成含有5w/v％的灵猫香酊剂(tinc)；5)向所述草药抽提液中加入粘度调节剂，加热溶解，再加入牛黄包涵复合物、龙脑包涵复合物和灵猫香酊剂形成一种混合物；并6)在此混合物中加入蜂蜜或蔗糖，并加入苯甲酸钠，和/或对羟基苯甲酸丙酯和/或对羟基苯甲酸甲酯的乙醇溶液，搅拌；然后，加入柠檬酸和/或柠檬酸盐调节pH；最后将溶液装入一个容器。
全文摘要
本发明涉及一种新处方牛黄清心元组合物及其制造方法,其中将灵猫香加入到除麝香之外的传统的牛黄清心元组合物中,即山药、甘草、高丽人参、蒲黄、神曲、大豆黄卷、桂皮、明胶、芍药、麦门冬、黄芩、当归、防风、白术、柴胡、桔梗、杏仁、茯苓、川芎、牛黄、羚羊角、龙脑、白蔹和干姜。在中央神经系统、自律神经系统和循环系统相关疾病的治疗中,与传统的含有麝香的牛黄清心元组合物相比,本发明的组合物具有相当的或更强的效用。
文档编号A61K9/20GK1241434SQ99107860
公开日2000年1月19日 申请日期1999年6月3日 优先权日1999年6月3日
发明者崔秀夫, 申相德, 安柱勲 申请人:广东制药株式会社