山茱萸纳米粉抗2型糖尿病的应用
【技术领域】
[0001] 本发明属于生物医药技术领域，具体涉及山茱萸纳米粉抗2型糖尿病的应用。
【背景技术】
[0002] 糖尿病是一种广泛分布的流行性疾病，由于胰岛素缺乏、胰岛素分泌减少或胰岛 β细胞功能受损所致。研宄表明，全球约有15亿糖尿病患者并预计到2025年糖尿病发病 率将翻倍。因此，糖尿病药物的研发成为一个迫在眉睫的任务，而西药仍是目前治疗糖尿病 的主要药物，如，磺脲类、噻唑烷酮类、二甲双胍类和α葡萄糖苷酶抑制剂等，尽管这些西 药在治疗糖尿病方面具有显著地疗效，但西药会引发各种副作用、耐药性且价格昂贵，尤其 是大多西药仅针对单一通路控制高血糖，而糖尿病是一种具有多种病因的疾病，单纯的降 糖疗法只能缓解症状，却不能解决其他诸如脂代谢紊乱，炎症等症状。因此，从天然中草药 中寻找更安全、更有效、多途径、多靶点的口服降糖药物，已成为糖尿病药物开发的方向。
[0003] 中药山茱萸（Cornus officinalis Sieb. et Zucc.)为山茱萸科植物山茱萸的干 燥成熟果实，其味酸、涩，性微温，归肝、肾经，具有补益肝肾、涩精固脱、眩晕耳鸣、内热消渴 等功效。
【发明内容】
[0004] 本发明的目的在于提供一种山茱萸纳米粉抗2型糖尿病的应用，本发明以山茱萸 纳米粉入药，从降糖、抗氧化活性及消除氧化应激等多方面进行研宄，为山茱萸的开发研宄 提供一种新思路。
[0005] 本发明是通过以下技术方案来实现：
[0006] 山茱萸纳米粉在制备抗2型糖尿病的药物和/或保健品中的应用，所述山茱萸纳 米粉是将去核的山茱萸药材果肉晒干后，先粉碎成80目细粉，然后将细粉在KTC下冷却， 再经纳米级粉碎处理后制得。
[0007] 所述的药物和/或保健品为增强机体糖耐量、升高胰岛素敏感指数及降低胰岛素 抵抗指数的药物和/或保健品。
[0008] 所述的药物和/或保健品为改善脂代谢异常的药物和/或保健品。
[0009] 所述的药物和/或保健品为降低总胆固醇、甘油三酯及低密度脂蛋白的含量的药 物和/或保健品。
[0010] 所述的药物和/或保健品为升高高密度脂蛋白胆固醇含量的药物和/或保健品。
[0011] 所述的药物和/或保健品为通过抗氧化机制发挥降血糖作用的药物和/或保健 品。
[0012] 所述的药物和/或保健品为降低肝脏组织MDA含量、升高肝脏组织中SOD含量的 药物和/或保健品。
[0013] 所述的药物和/或保健品为干预骨骼肌中胰岛素信号转导通路PI-3K改善胰岛素 抵抗的药物和/或保健品。
[0014] 所述的药物和/或保健品为升高组织中GLUT-4、INSR、PI3K及AKT的mRNA表达的 药物和/或保健品。
[0015] 与现有技术相比，本发明具有以下有益的技术效果：
[0016] 本发明用山茱萸纳米粉分别处理各组模型小鼠，结果发现山茱萸纳米粉明显改善 糖尿病小鼠的空腹血糖和糖耐量；提高糖尿病小鼠空腹胰岛素和胰岛素敏感指数，降低糖 尿病小鼠胰岛素抵抗指数，从肝脏组织和胰腺组织的病理影响显微照片结果可以看出，山 茱萸纳米粉对T2DM小鼠肝脏及胰岛组织有较好的保护作用；山茱萸纳米粉可降低与脂代 谢密切相关的总胆固醇、甘油三酯及低密度脂蛋白的含量，提高高密度脂蛋白胆固醇的含 量；升高糖尿病小鼠肝脏组织超氧化物歧化酶活性，降低丙二醛水平，从而改善其氧化应激 方面的功能；从分子水平对糖尿病小鼠骨骼肌GLUT-4、INSR、PI3K及AKT基因 mRNA表达的 测定，结果表明山茱萸纳米粉可提高GLUT-4、INSR、PI3K及AKT基因 mRNA的表达水平。因 此，山茱萸纳米粉具有明显的降血糖作用。
[0017] 与现有口服降糖药相比，本发明的山茱萸纳米粉更安全、更有效、温和持久、无毒 副作用，且作用机理多效应、多靶点、多功能，其疗效不仅在于降低血糖，同时在防治糖尿病 并发症中也具有举足轻重的地位。因此，山茱萸纳米粉在改善糖尿病方面具有可观的开发 和应用价值。
【附图说明】
[0018] 图1为山茱萸纳米粉对T2DM小鼠口服糖耐量的影响；
[0019] 图2山茱萸纳米粉对T2DM小鼠口服糖耐量曲线下面积的影响；
[0020] 图3为山茱萸纳米粉对各组小鼠胰腺组织病理影响的荧光显微照片；其中，A正常 对照组；B高剂量组；C :中剂量组；D低剂量组；E模型组；F阳性组；扩大倍数为400倍。
[0021] 图4为山茱萸纳米粉对各组小鼠肝脏组织病理影响的荧光显微照片；其中，A正常 对照组；B高剂量组；C :中剂量组；D低剂量组；E模型组；F阳性组；扩大倍数为400倍。
[0022] 图5山茱萸纳米粉对各组小鼠肝脏组织HE染色结果（HEX200);其中，A正常对照 组；B高剂量组；C :中剂量组；D低剂量组；E模型组；F阳性组；扩大倍数为200倍。
[0023] 图6山茱萸纳米粉对T2DM小鼠骨骼肌组织中INSR、PI-3K、AKT、GLUT-4mRNA表 达量的影响图表示与模型组比较，P〈〇. 05,有显著性差异；#表示与模型组比较，P〈0. 01， 有极显著性差异；Λ表示与空白组比较，P〈〇. 05,有显著性差异；ΛΛ表示与空白组比较， Ρ〈〇. 01，有极显著性差异。
【具体实施方式】
[0024] 下面结合具体的实施例对本发明做进一步的详细说明，所述是对本发明的解释而 不是限定。
[0025] 一、实验材料
[0026] 1、山茱萸：
[0027] 实验所用山茱萸均是于2012年10月采收自陕西省佛坪县，经陕西师范大学生命 科学学院王m之教授鉴定为山茱萸科植物山茱萸（Cornus officinalis Sieb. Et Zucc.) 的成熟果实。
[0028] 2、实验动物：SPF级、雄性昆明小鼠，体重15±2g，由西安交通大学医学院动物中 心提供。
[0029] 3、实验试剂：链脲佐菌素（sigma公司）；格列美脲（贵州天安药业股份有限公 司）；甘油三酯（TG)试剂盒（北京北化康泰临床试剂有限公司）；高密度脂蛋白胆固醇 (HDL)试剂盒（北京北化康泰临床试剂有限公司）；总胆固醇（TC)试剂盒（北京北化康泰 临床试剂有限公司）；低密度脂蛋白胆固醇（LDL)试剂盒（北京北化康泰临床试剂有限公 司）；超氧化物歧化酶（SOD)(南京建成生物工程研宄所）；丙二醛（MDA)(南京建成生物 工程研宄所）；小鼠胰岛素酶联免疫分析试剂盒（北京科盈美科技有限公司）；C反应蛋白 (CRP)(北京科盈美科技有限公司）；白细胞介素6 (IL-6)(北京科盈美科技有限公司）；月中 瘤坏死因子α (TNF-α)(北京科盈美科技有限公司）；PrimeScript? RT reagent Kit with gDNA Eraser (TaKaRa(宝生物），货号：RR047B) JRNzol总RNA提取试剂（天根生化科技 (北京）有限公司）DL2, 000DNA Marker (TaKaRa (宝生物），货号：3427Q) ; SYBR? Premix Ex Taq? II (Tli RNaseH Plus)，ROX plus (TaKaRa (宝生物），货号：RR82LR)。
[0030] 二、实验方法
[0031] 1、药品溶液的制备
[0032] 将采摘的山茱萸成熟果实用文火烘或置于温水中略烫后，及时去核，剩余的果肉 晒干，常规粉碎成80目细粉，KTC冷却，置于高能纳米冲击磨中，进行干法球磨处理，最终 球料过筛分离，原料经SAXS GB/T13221纳米粒度国标测试为纳米级均质超细粉末，密封备 用。
[0033] 高脂高糖饲料配比：蔗糖15% -20%，猪油5% -10%，胆固醇3% -8%，猪胆盐 0· 02 % -0· 1 %，普通饲料 62. 06-66. 98 %。
[0034] 2、T2DM模型的构建及分组
[0035] 选取SPF级雄性昆明小鼠，体重15±2g。均饲养于温度保持在18-23°C，通风良 好，保持自然光照的动