固定过程和/或以亲核体或亲电体处理之后可存在于组织 中，可以通过使组织与乙醇胺和还原剂接触使生物假体组织经历进一步的加帽过程。在优 选实施方式中，还原剂为硼氢化钠。示例性的加帽和还原剂和方法在美国专利号7, 972, 376 中描述，其全部内容通过引用被并入，如同在本文完全陈述。
[0093] 残余醛的氣化。作为上面描述的以还原剂处理的替代，残余醛还可以被氧化为羧 酸并可以使羧酸与乙醇胺反应生成更稳定的肽键并用醇加帽羧酸。与生物假体组织相关联 的羧酸基团还可以通过亲核/亲电处理被加帽或交联，如上面所描述。
[0094] 甘油处理。生物假体组织可以进一步经受无水、非水性或水性溶液处理以使生物 假体组织如果不完全也基本上脱水以干燥储存。
[0095] 在优选实施方式中，无水或非水性溶液包括甘油，更优选地75wt %的甘油和 25wt%的乙醇的溶液，并且生物假体组织被浸泡在甘油溶液中至少一个小时。然后生物假 体组织被移出并置于干净的通风橱内以允许移除过量的溶液。
[0096] 在优选实施方式中，无水或非水性溶液为甘油和C1-CJf的溶液，其中处理溶液包 括按体积计60%-95%的甘油。对生物组织合适的处理在Edwards Lifesciences Corp. 的2011年8月30日授权的美国专利号8, 007, 992中描述，其全部内容通过引用被并入本 文，如同在本文完全陈述。
[0097] 在另一个优选实施方式中，水性甘油溶液可以被用于至少部分地使组织脱水，如 The Cleveland Clinic Foundation 的 2003 年 3 月 18 日授权的美国专利号 6, 534, 004 中 所描述，其全部内容通过引用被并入本文，如同在本文完全陈述。
[0098] 如本文所使用，术语"干燥"或"脱水"被理解包括以无水、非水性或水性甘油溶液 处理后残余处理溶液或来自周围环境的水分或湿气。
[0099] 环氧乙烷消毒。在密封的包装中提供脱水的生物假体组织，优选地在双重无菌隔 离包装中，该包装由具有Tyvek盖的硬托盘（PETG)构成。包装被密封在干净的空间内，并 以100%的环氧乙烷消毒。
[0100] 应当理解的是给出的详细的描述和具体的实例，虽然表示本发明的优选实施方 式，但是意在说明而非限制。可以进行本公开内容的范围内的很多变化和修改，而不背离其 精神，并且公开内容包括所有这样的修改。
【主权项】
1. 处理生物假体组织的方法，其包括： 使所述生物假体组织在存在催化系统的情况下与亲核体或亲电体中的一种接触， 其中所述催化系统包括基于氟化物的盐、基于铯的盐、基于钾的盐、基于铷的盐和基于 碳酸盐的盐中的至少一种或组合。
2. 权利要求1所述的方法，其中执行与所述亲核体的所述接触并且其中所述亲核体包 括选自胺、羟基和巯基的一种或多种官能团。
3. 权利要求2所述的方法，其中所述亲核体为2-巯基乙醇、乙醇胺或其组合。
4. 权利要求2所述的方法，其中所述亲核体包括多胺、多元醇和多元硫醇中的一种或 组合。
5. 权利要求4所述的方法，其中所述多胺包括选自胱胺、乙二胺、1，3-二氨基丙烷、腐 胺、尸胺和六亚甲基二胺中的一种或多种。
6. 权利要求4所述的方法，其中所述多元醇包括选自乙二醇、1，3-丙二醇、1，4- 丁二 醇、1，5-戊二醇、和辛烷-1，8-二醇的一种或多种。
7. 权利要求1所述的方法，其中执行与所述亲电体的所述接触，其中所述亲电体包括 一种或多种羰基官能团。
8. 权利要求7所述的方法，其中所述亲电体包括多元醛和多元羧酸中的一种或两种， 其中所述多元醛选自戊二醛、乙二醛、丙二醛和丁二醛；和 其中所述多元羧酸选自乙二酸、丙二酸、丁二酸、戊二酸、己二酸、庚二酸、辛二酸、壬二 酸、癸二酸、丙烯三甲酸、丙烷-1，2, 3-三羧酸和5-氧代戊酸。
9. 权利要求1所述的方法，其中所述催化系统进一步包括至少一种吡啶盐。
10. 权利要求9所述的方法，其中所述吡啶盐包括选自对-甲苯磺酸2-氟-1-甲基吡 啶镦（FMPTS)、对-甲苯磺酸2_氟-1-乙基吡啶绩I (FEPTS)、对-甲苯磺酸2_氯-1-甲基 吡啶徐（CEPTS)、和碘化2-氯-1-甲基吡啶:餘（CMPI)中的一种或多种。
11. 权利要求10所述的方法，其中所述催化系统包括FMPTS和CsF。
12. 权利要求1所述的方法，其中所述催化系统包括基于氟化物的盐和基于碳酸盐的 盐中的一种或两种。
13. 权利要求1所述的方法，其中所述基于氟化物的盐为CsF、RbF和KF中的一种或组 合。
14. 权利要求1所述的方法，其中所述基于铯的盐为CsF和Cs 2C03中的一种或组合。
15. 权利要求1所述的方法，其中所述基于钾的盐为KF和K 2C03中的一种或组合。
16. 权利要求1所述的方法，其中所述基于铷的盐为RbF和Rb 2C03中的一种或组合。
17. 权利要求1所述的方法，其中在溶剂系统中执行所述接触，并且其中所述溶剂系统 包括选自醇、腈、酮、酯、酰胺、亚砜、醚、环醚、内酯、和内酰胺中的一种或多种。
18. 权利要求17所述的方法，其中所述溶剂系统包括选自乙腈、乙酸丁酯、乙酸乙酯、 N，N-二甲基甲酰胺（DMF)、二甲基亚砜（DMSO)、1，4-二Hg:烷、甘油、3-甲基-1- 丁醇、1-甲 基-2-吡咯烷酮、吡啶、四氢呋喃（THF)、和二甘醇二甲醚中的一种或多种。
19. 权利要求1所述的方法，其中在包括甘油和乙醇的溶剂系统中执行所述接触。
20. 权利要求1所述的方法，其中在溶剂系统中执行所述接触，所述溶剂系统包括选自 水、盐水、磷酸盐缓冲盐水（PBS)、具有1-13的pH的缓冲剂和有机溶剂与水或具有1-13的 pH的缓冲剂的混合物的一种或多种。
21. 权利要求2所述的方法，其中在存在溶剂系统的情况下执行与所述亲核体的所述 接触， 其中所述亲核体为胱胺； 其中所述催化系统包括CsF和FMPTS ;和 其中所述溶剂系统包括DMSO或甘油和乙醇。
22. 权利要求2所述的方法，其中在存在溶剂系统的情况下执行与所述亲核体的所述 接触， 其中所述亲核体为胱胺； 其中所述催化系统包括CsF和FMPTS ;和 其中所述溶剂系统包括缓冲水性溶液。
【专利摘要】本文描述处理生物假体组织的方法。该方法包括使生物假体组织在存在催化系统的情况下与至少一种亲核体和/或至少一种亲电体接触，该催化系统包括基于氟化物的盐、基于铯的盐、基于钾的盐、基于铷的盐和基于碳酸盐的盐中的至少一种或组合。该方法可以被用于改变生物组织上代表实际存在的和潜在的钙结合位点的官能团，还有用于交联生物假体组织的方法。两种方法可以与已知的固定技术诸如戊二醛固定结合使用，或可以被用于替代已知的固定技术。
【IPC分类】A61L27-56, C12N5-07, A61L27-38
【公开号】CN104768587
【申请号】CN201380058453
【发明人】D·徐, J·S·德夫
【申请人】爱德华兹生命科学公司
【公开日】2015年7月8日
【申请日】2013年11月8日
【公告号】CA2885935A1, EP2916882A1, US20140127804, WO2014074870A1