200 μ 1/只。组合用药，给药方案为照射前1小时腹腔给药柴 胡200mg/Kg，照射后30分钟内腹腔给药鱼腥草注射液100 μ 1/只，继而每24小时按柴胡 200mg/Kg+鱼腥草注射液200 μ 1/只继续给药，连续14天。
[0027] 检测指标：存活天数。
[0028] 实验结果见图1，柴胡和鱼腥草组合给药可显著延长C57鼠致死剂量照射后的存 活天数，优于两者分别单独给药。
[0029] 实施例二
[0030] 柴胡提取物和鱼腥草提取物口服给药对单次亚致死剂量（9Gy γ射线）照射造成 的辐射损伤救治
[0031] 鱼腥草乙醇提取工艺：将干燥的鱼腥草全草IOg研磨粉碎后，置于250ml烧瓶中， 按照料液比1 : 20 (g/ml)加入浓度70%的乙醇溶液，于80°C水浴锅中回流浸提，每次2小 时，回流2次，然后将提取液4000r/min离心20min，将上清液用旋转蒸发仪浓缩。
[0032] 柴胡提取物，可参考已公开的发明专利说明书或相关文献制备，用药剂量为lg/Kg 体重（小鼠）。鱼腥草乙醇提取物，用药剂量为1.575g/Kg体重（小鼠），以上剂量为原料 药重量。动物信息、辐照装置与实施例一相同。
[0033] 照射剂量为9Gy。
[0034] 检测指标：30天生存率。
[0035] 单独给药组，给药方案：照射前连续口服给药三天，照射后立即补充给药一次，之 后每24小时给药一次，连续30天。组合用药组，给药方案：柴胡和鱼腥草提取物混合，按照 柴胡：鱼腥草（lg/Kg :1. 575g/Kg)连续口服给药，三天后照射，照射后30分钟内补充给药， 柴胡：鱼腥草（lg/Kg :2. 5g/Kg)，继而每24小时（1 : 2. 5)给药，连续30天。
[0036] 实验结果见图2,柴胡和鱼腥草组合给药可显著提高C57鼠亚致死剂量照射后的 生存率，优于两者分别单独给药。
[0037] 实施例三
[0038] 低剂量（5Gy γ射线）照射造成的辐射损伤的造血保护作用
[0039] 药品信息、动物信息、辐照装置、给药方式与实施例一相同。
[0040] 照射剂量为5Gy。
[0041] 照射后连续给药7天，停药观察两天后处死动物，取样检测。
[0042] 检测指标：体重、外周血计数、单侧股骨计数、粒细胞巨噬细胞集落形成单位、脾脏 指数、胸腺指数。
[0043] 实验结果见图3,柴胡和鱼腥草组合给药可显著著缓解低剂量照射引起的动物的 造血系统损伤。
[0044] 实施例四
[0045] 柴胡、鱼腥草注射液对多种肿瘤细胞/正常细胞的辐射保护作用
[0046] 药品信息，辐照装置和参数与实施例一相同。
[0047] 细胞系采用乳腺癌MCF-7细胞、乳腺癌MDA-MB-231细胞、肝癌!fepG2细胞、肺癌 A549细胞、人胚肾HEK293细胞、人微血管内皮HMEC-I细胞。
[0048] 实验过程：
[0049] 1.细胞系及培养
[0050] 采用人肝癌！fepG2细胞、人肺癌A549细胞，分别用含10 % FBS (Gibico， 1?卩10099-141)，含10(^8/1111链霉素和10(^/1111青霉素，高糖01^]\1(办(31〇116,5!130243.018) 和PRMI1640(Hyclone，SH30809. 01B)培养，置于37°C，5% 0)2的恒温培养箱中常规传代培 养。
[0051] 2.药物处理及照射
[0052] 细胞培养至对数生长期，更换含不同浓度药物的培养液，继续培养24小时，接受 不同剂量γ射线照射。
[0053] 3.克隆形成实验
[0054] 细胞照射后，按不同的照射剂量接种不同细胞数量接种到60_培养皿。细胞连续 培养3周后用甲醇固定，加姬姆萨应用液染色30分钟，流水洗净，计数细胞数多50的克隆 个数。通过克隆形成率PE=(对照组克隆数/实验组细胞数）X 100%和存活分数=克隆 数八实验组细胞数ΧΡΕ)计算克隆形成率和存活分数。并按多靶单击模型拟合绘制细胞 存活曲线。
[0055] 检测指标：IC50 (杀死50 %细胞的放射剂量）
[0056] 实验结果见图4~5和表1~2,柴胡和鱼腥草分别可提高多种肿瘤细胞或正常细 胞的辐射耐受剂量，有一定的辐射保护作用。
[0057] 表1柴胡对多种肿瘤细胞/正常细胞γ射线照射γ射线照射IC5tl的影响（Gy)
[0058]
【主权项】
1. 柴胡和鱼腥草在制备预防和治疗电离辐射损伤救治药物中的应用。
2. 根据权利要求1所述的应用，其中所述的电离辐射损伤救治包括但不限于单次致死 剂量照射造成的急性电离辐射损伤救治。
3. 根据权利要求1所述的应用，其中所述的电离辐射损伤救治包括但不限于单次/多 次低剂量照射造成的造血系统损伤救治。
4. 根据权利要求1所述的应用，其中柴胡和鱼腥草的使用优选比例在1 : 2~1 : 5。
5. 柴胡和鱼腥草在制备肿瘤放射治疗辅助药物中的应用。
6. 根据权利要求4所述的应用，其中所述的肿瘤放射治疗包括但不限于乳腺癌。
【专利摘要】本发明涉及医药领域，名称为“柴胡和鱼腥草在制备预防和治疗电离辐射损伤药物方面的应用”，公开了北柴胡或狭叶柴胡的总提取物、鱼腥草提取物两种纯中药制剂组合，在制备预防和治疗电离辐射损伤药物方面的应用。本发明公开了柴胡提取物和鱼腥草提取物在细胞水平和动物活体水平发挥辐射保护作用，并且在致死剂量、亚致死剂量以及低剂量辐射的广泛剂量范围下，均有保护作用，两种活性提取物组合优于单独使用，该组合成本低廉，来源广泛，可用于制备预防和治疗电离辐射造成的相关损伤救治和疾病治疗方面的药物。
【IPC分类】A61P17-16, A61P35-00, A61P7-00, A61K36-78
【公开号】CN104784321
【申请号】CN201510075040
【发明人】樊赛军, 贺欣
【申请人】中国医学科学院放射医学研究所
【公开日】2015年7月22日
【申请日】2015年2月9日