F(PDC-2532)
[0116] 将20 % (体积％ )乙醇加至乙醇萃膏（PDC-2364)后，注入HP-20大孔隙管柱以更 进一步进行纯化。依序以20% (体积）及95% (体积）乙醇来洗提该管柱。分别浓缩该 洗出物以得到精制萃膏E(PDC-2531)及F(PDC-2532)。
[0117] I. 3 粗丙酮萃物（CrudeAcetoneExtract)
[0118] 益智仁之粗丙酮萃物是依照实施例I. 2所述之相似步骤所制备，除了将乙醇置换 为丙酮。
[0119] I. 3. 1 粗丙酮萃膏（CrudeAcetoneExtractPastes) (PDC-2479)
[0120] 在减压下，浓缩实施例I. 3所述之粗丙酮萃物，直至大致将溶剂移除后，冷冻干燥 残留物以得到粗丙酮萃膏。
[0121] 1. 4 粗乙酸乙醋萃物（CrudeEthylAcetateExtract)
[0122] 益智仁之乙酸乙酯粗萃物是依照实施例I. 2所述之相似步骤所制备，除了将乙醇 置换为乙酸乙酯。
[0123] I. 4. 1 粗乙酸乙醋萃膏（CrudeEthylAcetateExtractPastes) (PDC-2478)
[0124] 在减压下，浓缩实施例I. 4所述之粗乙酸乙酯萃物，直至大致将溶剂移除后，冷冻 干燥残留物以得到粗乙酸乙酯萃膏。
[0125] 1. 5 超临界流体萃物（SupercriticalFluidExtract,SCF)
[0126] 在此特定实施例中，益智仁是在超临界温度及压力下，以含或不含改善之共溶剂 (例如，乙醇）的超临界流体（例，二氧化碳）来进行萃取。
[0127] L5.ISCF萃物A
[0128] 将干燥且切碎的益智仁果实置于压力盘（pressurecell)，在低于5°C的温度下 打入液态二氧化碳至压力盘的热区（heatingzone)，其中压力及温度分别设置为300巴 (bar)及50°C。接着，依序扩充流体至第一及第二分离器（s印arators)，以将萃取物质 由CO2分离出，其中该第一及第二分离器的压力及温度分别设置为60及45巴，以及45及 20°C。萃取过程约耗时150分钟，且由此得到SCF萃物A。
[0129] 1.5.2SCF萃物B
[0130] SCF萃物B是依照实施例1. 5. 1所述之相似步骤所制成，除了在萃取流程中包含一 共溶剂一乙醇；藉此得到一SCF萃物B。
[0131] 实施例2制备草豈蔻萃取物
[0132] 2. 1 水萃膏（PDC-2471)
[0133] 草豈蔻之水萃膏是依序依照实施例I. 1、1.I. 1及I.I.I. 1所述之相似步骤所制 成。
[0134] 2. 2 乙醇萃膏（PDC-M72)
[0135] 草豈蔻之粗乙醇萃物是依序依照实施例1. 2、1. 2. 1及I. 2.I. 1所述之相似步骤所 制成。
[0136] 实施例3制备红豈蔻萃取物
[0137] 3.1粗水萃物
[0138] 红豈蔻之粗水萃物是依照实施例I. 1所述之相似步骤所制成。
[0139] 3.L1 粗水萃粉末（PDC-2147)
[0140] 在减压下，浓缩实施例3. 1所述之粗水萃物，直至得到一水萃粉末。
[0141] 3.L2 水萃膏（PDC-1885)
[0142] 以1:1之体积比将95% (体积％ )乙醇加至实施例3. 1所述之粗水萃物，且形成 一沈淀物。接着以10,OOOrpm离心混合物5分钟，以移除沈淀物。收集上清液，且在减压下 进一步进行离心，直至大致将溶剂移除。冷冻干燥残留物以得到水萃膏。
[0143] 3.L3 水萃膏（PDC-2469)
[0144] 于实施例3.I. 1所述之粗水萃粉分加入95% (体积％ )乙醇（1公克的粉末于30 毫升乙醇），利用超音波震荡该混合液至少1小时，并以2号滤纸过滤，在减压下浓缩该滤液 以得到一水萃膏。
[0145] 3. 2粗乙醇萃物
[0146] 红豈蔻之粗乙醇萃物是依照实施例1. 2所述之相似步骤所制成。
[0147] 3. 2.1粗乙醇萃粉末
[0148] 在减压下，浓缩实施例3. 2所述之粗乙醇萃物，直至大致将溶剂移除，且冷冻干燥 残留物以得到粗乙醇萃粉末。
[0149] 3. 2.I. 1 乙醇萃膏（PDC-2470)
[0150] 将95%乙醇加至实施例3. 2. 1所述之粗乙醇萃粉末且以2号滤纸过滤，接着浓缩 该滤液至干燥以得到一乙醇萃膏。
[0151] 实施例4制备月桃萃取物
[0152] 4. 1 水萃膏（PDC-2473)
[0153] 月桃之粗水萃膏是依序依照实施例I. 1、1. I. 1及I. I. I. 1所述之相似步骤所制 成。
[0154] 4. 2 乙醇萃膏（PDC-2474)
[0155] 月桃之乙醇萃膏是依序依照实施例I.2、1. 2. 1及I.2.I.1所述之相似步骤所制 成。
[0156] 实施例5纯化及鉴别实施例1之益智仁活性化合物
[0157] 利用层析法分离及纯化化合物，且藉由MS及NMR来确认及鉴别该些化合物个别之 结构。
[0158] 5. 1鉴别6-a-羟基-7-表-a-莎草酮（化合物PDC-2460)
[0160]将实施例I.I.I. 1所述之水萃膏注入硅胶过滤（silicagelfiltration，默克，台 湾），再以正己烷及乙酸乙酯来洗提该管柱，由此可得到7个分馏部分（FR-1、FR-2、FR-3、 FR-4、FR-5、FR-6及FR-7)。接着将7个分馏部分中的第二分馏部分（即FR-2)注入RP-18 胶管柱（RP-lSgelcolumn，默克，台湾），且以80%甲醇来洗提该管柱，由此可再得到6个分 馏部分（FR-21、FR-22、FR-23、FR-24、FR-25 及FR-26)。合并分馏FR-25 及FR-I部分后，将 该合并分馏部分注入另一RP-18胶管柱，且以80%甲醇来洗提该管柱以制得另外3个分馏 部分（FR-25 (I)I、FR-25 (1) 2及FR-25 (1) 3)。将FR-25 (1) 2分馏部分注入另一硅胶纯化以产 生另外 5 个分馏部分（FR-25 (I) 21、FR-25 (I) 22、FR-25 (I) 23、FR-25 (1) 24 及FR-25 (1) 25)。 以制备型HPLC分析（preparativeHPLCanalysis)由第三分馏部分（FR-25 (I) 23)来纯化 出化合物roc-246〇。
[0161] MS:分子量（Mw. )234?rukerMS) [M-HF(233). (C15H22O2)
[0162] 屮匪1?(0)(：13,6001取）8 1.60(111，111，11-1)、1.83(111，111，11-1)、2.42(111，111，11-2)、 2. 62 (1H，m，H-2)、4. 90 (1H，s，H-6)、2. 53 (1H，br，s，H-7)、I. 52 (1H，m，H-8)、 2. 19 (1H,m,H-8)、I. 35 (1H,m,H-9)、I. 47 (1H,m,H-9)、4. 38 (1H,s,H-12)、4. 81 (1H,s,H-12)、 1. 73 (3H,s,H-13)、I. 38 (3H,s,H-14)及I. 88 (3H,s,H-15)。
[0163] 13CNMR(O)Cl3, 150MHz)S38. 84 (C_l)、34. 17 (C_2)、199. 90 (C_3)、132. 11 (C_4)、 159. 94(C-5)、69. 60 (C-6)、47. 64(C-7)、18. 57(C-8)、35. 02 (C-9)、35. 03 (010)、 145. 25(C-11)、111. 46(C-12)、22. 96(C-13)、25. 72(C-14)、10. 43(C-15)。
[0164] 5. 2鉴别7-表-香科酮（化合物H)C-2453)
RP-18胶管柱（默克，台湾），且以70%甲醇洗提该管柱，可由此得到5个分馏部分（FR-41、FR-42、FR-43、FR-44及FR-45)。将FR-43分馏部分注入另一RP-18胶管柱，且以70%甲醇 洗提该管柱，可再得到6个分馏部分（FR-431、FR-432、FR-433、FR-434、FR-435及FR-436)。 合并FR-432及FR-433分馏部分后，将该合并分馏部分注入另一硅胶纯化，以进一步得到7 个分馏部分（FR-432 (433) 1、FR-432 (433) 2、FR-432 (433) 3、FR-432 (433) 4、FR-432 (433) 5、 FR-432(433)6及FR-432(433)7)。以制备型HPLC分析由第四分馏部分（FR-432(433)4)中 纯化出化合物H)C-2453。
[0166] MS:Mw. 234(BrukerMS) [M-H] - (233) ? (C15H22O2)
[0167] 1HNMR(CDC13, 600MHz) 8 2. 10(1H,d,J= 15Hz,H-l) , 2. 26 (1H,d,J= 15Hz,H-l)、5. 86(1H,br,s,H-3)、2. 28 (1H,br,d,J= 13Hz,H-5)、1. 52(1H,m,H-6)、 2. 34 (1H,m,H-6)、I. 75 (1H,m,H-8)、2. 05 (1H,m,H-8)、I. 42 (1H,m,H-9)、I. 45 (1H,m,H-9)、 5. 08 (2H,br,s,H-12)、I. 83 (3H,s,H-13)、0? 95 (3H,s,H-14)、I. 91 (3H,s,H-15)。
[0168] 13CNMR(CDC13, 150MHz)S54. 09 (C-I)、198. 95 (C-2)、126. 92 (C-3)、 162. 24(C-4)、44. 87 (C-5)、33. 05 (C-6)、74. 69 (C-7)、31. 55 (C-8)、37. 63 (C-9)、 37. 43(C-10)、146. 02(C-11)、114. 13(C-12)、18. 63(C-13)、16. 89(C-14)、21. 96(C-15)。
[0169] 5. 3鉴别香科酮（化合物roC-MM)
[0171] 将实施例5. 1所述之7个分馏部分中的第三分馏部分（即，FR-3)注入一RP-18胶 管柱（默克，台湾），且以70%甲醇洗提该管柱，可由此得到6个分馏部分（FR-31、FR-32、FR-33、FR-34、FR-35及FR-36)。将FR-34分馏部分注入另一RP-18胶管柱，且以70%甲醇 洗提该管柱，可再得到6个分馏部分（FR-341、FR-342、FR-343、FR-344、FR-345及FR-346)。 合并FR-343及FR-4分馏部分后，将该合并分馏部分注入另一硅胶纯化，以进一步得到7个 分馏部分（FR-341 (4)I、FR-341 (4) 2、FR-341 (4) 3、FR-341 (4) 4、FR-341 (4) 5、FR-341 (4) 6 及 FR-341 (4) 7)。将FR-341 (4) 4分馏部分注入另一以RP-18胶管柱，且以70%甲醇洗提该管 柱，以制得另外的 6 各分馏部分（FR-341 (4) 41、FR-341 (4) 42、FR-341 (4) 43、FR-341 (4) 44、 FR-341 (4) 45及FR-341 (4) 46)。再进一步将FR-341 (4) 44分馏部分注入硅胶纯化，并以制 备型HPLC由第六分馏部分（即，FR-341 (4)46)纯化出化合物H)C-2464。
[0172] MS:Mw. 234(BrukerMS) [M-H] - (233) (C15H22O2)
[0173] = 2. 93 (1H，m，H-5)、1. 64 (1H，t，J= 13. 1Hz，H-6)、1. 78 (1H，m，H-6)、1. 46 (1H，m，H-8)、I. 92 (1H，m，H-8)、I. 36 (1H，m，H-9)、I. 84 (1H，m，H-9)、4. 85 (1H，t，J=I. 4Hz，H-12)、 5. 07 (1H,s,H-12)、I. 83 (3H,s,H-13)、0? 87 (3H,s,H-14)、I. 83 (3H,s,H-15)。
[0174] 13CNMR(CDC13, 150MHz)S54. 04 (C-I)、199. 12 (C-2)、127. 12 (C-3)、 163. 27 (C-4)、42. 61 (C-5)、33. 42 (C-6)、74. 33 (C-7)、30. 89 (C-8)、35. 26 (C-9)、 37. 12(C-