g的剂量则可展现一显著的效果，其仅为口服施用的1/10剂量 (第2A至2J图）。相似地，益智仁的丙酮萃物或乙酸乙酯萃物亦能治疗肠激躁症之排便异 常（第2K及2L图）。
[0210] 在治疗肠激躁症的相关病征上，亦将实施例1所述之萃取物的抗排便异常效果 同时与另一常见之处方镇痉剂-玫若雷（m印enzolate)进行比对，且实施例I.I.I. 1及 I. 2.I. 1所述之萃取物皆较玫若雷（50mg/kg，口服施用3次）更为有效地舒缓相关病征（结 果未显示）。
[0211] 第3至6图阐述了实施例1所述之益智仁萃取物的抗脏器过度敏感效果。如第3 图及第4图所述，实施例I. 1. 2之精制水萃膏（即roC-1850)、实施例I. 1. 3之精制水萃膏 (即HXM918)、实施例I.I.L1之水萃膏（即H)C-2363)及实施例I.I.I.L1之精制水萃 膏（即TOC-2530)皆能治疗由5-HTP所引发的脏器过度敏感（即与载体组相比），且其效果 甚至较5-HT3受体拮抗剂-格拉司琼更为显著。相似地，50%的益智仁乙醇萃物（即实施 例I. 2.I. 1或PDC-2364及实施例I. 2.I. 1. 2或PDC-2532)(第5A、5B及图），以及益智 仁EA(即实施例1.4. 1或TOC-2478)及丙酮萃物（即实施例1.3. 1或TOC-2479)(第6A及 6B图）亦分别具有相同抗5-HTP所引发之脏器过度敏感的效果。
[0212] 表1及表2总结以AWR分数所评估的行为反应。
[0213]表1
[0214]
[0216] *表示施用实施例I. I. I. 1之萃取物、格拉司琼及5-HTP的大鼠组间具有显著差异 (p〈0. 05)。
[0217]表 2
[0218]
[0219] *表示施用实施例I. 2.I.I. 2之萃取物、格拉司琼及5-HTP的大鼠组间具有显著差 异（p〈0. 05) 〇
[0220] 如表1所示，施以实施例I.I.I. 1水萃膏（即PDC-2363)进行治疗的大鼠，其AWR 分数会显著地低于对照组或接受格拉司琼治疗的大鼠。由此可证，实施例I.I.I. 1的益智 仁萃取物可有效治疗5-HTP所引发的脏器过度敏感。
[0221] 相似地，于表2中，施以实施例I. 2.I. 1. 2精制乙醇萃膏（即TOC-2532)进行治疗 的大鼠，其AWR分数会显著地低于该些对照组之大鼠。由此可证，实施例I. 2.I. 1. 2的益智 仁萃取物可有效地治疗5-HTP所引发的脏器过度敏感。
[0222] 综观以上，该些结果指出由上述方法所制备的益智仁萃取物，可用以治疗肠激躁 症的相关病征，具体来说，是指排便异常及腹痛/腹部不适。
[0223] 6. 2实施例2之草豈蔻萃取物可有效治疗肠激躁症之排便异常及腹痛/腹部不适
[0224] 依据上述之相似步骤来评估实施例2所述之草豈蔻萃取物于治疗肠激躁之相关 症病征的效果。第7图及第8图阐述该些结果。于患有肠激躁症的动物中，相对于该些对 照组，草豈蔻之水萃物（即roC-2471)及乙醇萃物（即TOC-2472)皆能降低动物体之腹泻 分数及/或粪便量，以及由5-HTP所引发的脏器过度敏感（第8A及8B图）。
[0225] 6. 3实施例3之红豈蔻萃取物可有效治疗肠激躁症之排便异常及腹痛/腹部不适
[0226] 第9图及第10图阐述了实施例3所述之红豈蔻萃取物于治疗肠激躁症之相关病 征的效果。于患有肠激躁症的动物中，相对于该些对照组，草豈蔻的水萃物（即H)C-2147及 PDC-1885)能降低动物体之腹泻分数及/或粪便量（可见于第9A及9B图），以及由5-HTP 所引发的脏器过度敏感（第9C图）。红豈蔻之乙醇萃物亦展现相似的效果（第10图）。
[0227] 6. 4实施例4之月桃萃取物可有效治疗肠激躁症之排便异常及腹痛/腹部不适
[0228] 第11图阐述了实施例4所述之月桃萃取物于治疗肠激躁症之相关病征的效果。 于患有肠激躁症的动物中，相对于该些对照组，水萃物（即PDC-2473)及乙醇萃物（即 PDC-2474)皆能降低动物体之腹泻分数及/或粪便量（可见于第IlA及IlB图），以及由 5-HTP所引发的脏器过度敏感（第IIC图）。
[0229] 实施例7实施例5之化合物能有效抑制肠激躁症之排便异常
[0230] 利用实施例6所述之相似步骤来评估由实施例I. I. I. 1益智仁水萃膏所分离且纯 化的化合物（即H)C-2363)之抗排便异常的效果。第12图阐明该些结果。
[0231]纯化的化合物PDC-2453、PDC-2454、PDC-2460 及PDC-2464 皆能抑制由 5-HTP所引 发之腹泻（第12A图）且减少粪便量（第12B图）。化合物H)C-2521亦呈现相似之抗排便 异常的效果（第12C及12D图）。因此，该些化合物具有发展为治疗肠激躁症之药物的潜 力。
[0232] 实施例8实施例5之化合物可有效治疗肠激躁症之腹痛/腹部不适
[0233] 藉由AWR分数所评估的动物行为反应，可探讨实施例5所述之化合物抗脏器过度 敏感效果，且表3总结该些结果。
[0234]表 3
[0235]
[0236] *表示施用实施例5所述之化合物与5-HTP的大鼠组间具有显著差异（p〈0. 05)。
[0237] 如表3所示，施用实施例5. 3之化合物（即H)C-2464)或实施例5. 6之化合物（即 PDC-2524)的大鼠，其AWR分数显著地低于对照组之大鼠。由此可证该些由益智仁所分离的 活性化合物可有效治疗与IBS相关的腹痛/腹部不适。
[0238] 当可理解上述实施方式与实施例仅为例示，且本领域普通技术人员可对齐进行各 种修饰。上文提出之说明书、实施例与数据的目的在于使本说明书的结构完备，并作为实作 本发明之例示。虽然本揭示内容已以实施方式揭露如上，然其并非用以限定本揭示内容，任 何本领域普通技术人员，在不脱离本揭示内容之精神和范围内，当可作各种之更动与润饰， 因此本揭示内容之保护范围当视后附之申请专利范围所界定者为准。
【主权项】
1. 一种用来制造一可治疗肠激躁症之药物的山姜属（Alpiniaspp.)植物萃取物，包 含： 香科酮或伊砂黄素；以及 至少一种选自以下之活性化合物：（4S，5S，6R)-5, 6-二羟基-6-甲 基-4-丙-2-基-2, 3, 4, 5, 7, 8-六氢萘-1-酮、6-a-羟基-7-表-a-莎草酮、7-表-香 科酮或甲金黄酮。2. 如权利要求1所述之萃取物，其中该山姜属植物可以是益智仁（Alpinia oxyphylla)、月桃（Alpiniazerumbet)、草豈蔻（Alpiniahainanensis)或红豈蔻（Alpinia galanga)〇3. 如权利要求2所述之萃取物，其中该萃取物是由包含下述步骤的方法所制成： (a) 以一第一溶剂萃取该山姜属植物，其中该第一溶剂是选自由一超临界流体、水、 C1-4醇、丙酮、乙酸乙酯或正己烷所组成之群组；以及 (b) 干燥步骤（a)之萃取物。4. 如权利要求3所述之萃取物，其中该超临界流体可以是二氧化碳、水、甲烷、乙烷、丙 烷、乙烯、丙烯、甲醇、乙醇或丙酮。5. 如权利要求4所述之萃取物，其中该步骤（a)更包含一超临界流体之共溶剂，该共溶 剂为甲醇或乙醇。6. 如权利要求3所述之萃取物，其中该第一溶剂可以是水、Ci_4醇、丙酮、乙酸乙酯或正 己烷；且所述萃取是藉由将该山姜属植物与该第一溶剂以重量比约为1 :1至1:50的比例 混合来进行。7. 如权利要求6所述之萃取物，其中所述方法更包含： (a-1)在执行步骤（b)前，加入一第二溶剂至该萃取物，该第二溶剂可以是水、Cp4醇、 丙酮、乙酸乙酯或正己烷。8. 如权利要求7所述之萃取物，其中所述方法更包含： (a-2)在执行步骤（b)前，对步骤（a-1)之萃取物进行管柱层析。9. 如权利要求8所述之萃取物，其中该管柱层析系依序以水、30% (体积％ )乙醇及 95% (体积％ )乙醇来洗提该管柱；且干燥该洗出物以制备出该萃取物。10. 如权利要求3所述之萃取物，其中所述方法更包含： (c) 将步骤（b)之冷冻干燥产物溶于一第二溶剂中，该第二溶剂可以是水、CV4醇、丙 酮、乙酸乙酯或正己烷；以及 (d) 浓缩或干燥步骤（C)之产物。11. 如权利要求10所述之萃取物，其中该第一溶剂为水，且该第二溶剂为95% (体 积％ )乙醇。12. 如权利要求10所述之萃取物，其中该第一溶剂为50% (体积％)乙醇，且该第二 溶剂为95% (体积％ )乙醇。13. 如权利要求12所述之萃取物，其中所述方法更包含： (e) 在执行步骤（d)前，对步骤（c)之溶液进行管柱层析，其系依序以20% (体积％) 乙醇、95% (体积％ )乙醇及丙酮来洗提该管柱。14. 如权利要求11所述之萃取物，其中所述方法更包含： (f)对步骤（d)之产物进行管柱层析，其系依序以正己烷、乙酸乙酯及70-80% (体 积％)乙醇来洗提该管柱。15. 如权利要求14所述之萃取物，其中步骤（f)之产物包含香科酮。16. -种治疗一罹患肠激躁症之个体的方法，包含对该个体施用一有效量的权利要求 1所述的山姜属植物萃取物，以改善与肠激躁症相关的排便异常及腹痛症状。17. 如权利要求16所述之方法，其中该山姜属植物可以是益智仁（Alpinia oxyphylla)、月桃（Alpiniazerumbet)、草豈蔻（Alpiniahainanensis)或红豈蔻（Alpinia galanga)〇18. 如权利要求17所述之方法，其中该萃取物是由包含下述步骤的方法所制成： (a) 以一第一溶剂萃取该山姜属植物，其中该第一溶剂是选自由一超临界流体、水、CV4 醇、丙酮、乙酸乙酯或正己烷所组成之群组；以及 (b) 干燥步骤（a)之萃取物。19. 如权利要求18所述之方法，其中该超临界流体可以是二氧化碳、水、甲烷、乙烷、丙 烷、乙烯、丙烯、甲醇、乙醇或丙酮。20. 如权利要求19所述之方法，其中该步骤（a)更包含一超临界流体之共溶剂，该共溶 剂为甲醇或乙醇。21. 如权利要求18所述之方法，其中该第一溶剂可以是水、CH醇、丙酮、乙酸乙酯或正 己烷；且藉由将该山姜属植物与该第一溶剂以重量比约为1 :1至1:50的比例混合来进行 萃取。22. 如权利要求21所述之方法，其中所述方法更包含下述步骤： (a-1)在执行步骤（b)前，加入一第二溶剂至该萃取物，该第二溶剂可以是水、Cp4醇、 丙酮、乙酸乙酯或正己烷。23. 如权利要求22所述之方法，其中所述方法更包含下述步骤： (a-2)在执行步骤（b)前，对步骤（a-1)之萃取物进行管柱层析。24. 如权利要求23所述之方法，其中该管柱层析系依序以水、30% (体积％ )乙醇及 95% (体积％ )乙醇来洗提该管柱；且干燥该洗出物以制备该萃取物。25. 如权利要求18所述之方法，其中所述方法更包含下述步骤： (c) 将步骤（b)之冷冻干燥产物溶于一第二溶剂中，该第二溶剂可以是水、CV4醇、丙 酮、乙酸乙酯或正己烷；以及 (d) 浓缩或干燥步骤（C)之产物。26. 如权利要求25所述之方法，其中该第一溶剂为水，且该第二溶剂为95% (体积％ ) 乙醇。27. 如权利要求25所述之方法，其中该第一溶剂为50% (体积％ )乙醇，且该第二溶 剂为95% (体积％ )乙醇。28. 如权利要求27所述之方法，其中所述方法更包含下述步骤： (e) 在执行步骤（d)前，对步骤（c)之溶液进行管柱层析，其系依序以20% (体积％) 乙醇、95% (体积％ )乙醇及丙酮来洗提该管柱。29. 如权利要求26所述之方法，其中所述方法更包含下述步骤： (f) 对步骤（d)之产物进行管柱层析，其系依序以正己烷、乙酸乙酯及70-80% (体 积％)乙醇来洗提该管柱。30.如权利要求29所述之方法，其中步骤（f)之产物包含香科酮。
【专利摘要】本发明在此揭示山姜属(Alpinia spp.)植物萃取物的用途，其系用于制备一种可供治疗肠激躁症(IBS)之药物。所述萃取物系萃取自山姜属植物之新鲜及/或干燥果实，并使用如超临界流体、水、10-95％(体积％)乙醇、丙酮、乙酸乙酯或正己烷等溶剂来进行萃取，以得到适用于制备肠激躁症药物之萃取物。在某些实施方式中，由山姜属植物之水萃取物中，分离出具有可改善排便异常和/或改善腹痛之活性化合物；因此该些化合物为具有发展潜力的先导化合物，可用以制备治疗肠激躁症之药物。
【IPC分类】A61K36/9062, A61P1/00, A61K31/352
【公开号】CN104902890
【申请号】CN201380068616
【发明人】陈瑞青, 林哲毅, 洪志升, 吴沛凡, 陈芬
【申请人】财团法人医药工业技术发展中心
【公开日】2015年9月9日
【申请日】2013年12月30日
【公告号】DE112013006260T5, US20150306167, WO2014101873A1