治疗杜兴氏肌营养不良的卵泡抑素的制作方法_6

LLGRSIGLAYEGKCISISEDTEEEEEDE DQDYSFPISSILEW(SEQIDN0:2)至少70%相同的氨基酸序列。10. 如权利要求9所述的方法，其中所述重组卵泡抑素蛋白包含与SEQIDN0:2至少 80 %相同的氨基酸序列。11. 如权利要求9所述的方法，其中所述重组卵泡抑素蛋白包含与SEQIDN0:2至少 90 %相同的氨基酸序列。12. 如权利要求9所述的方法，其中所述重组卵泡抑素蛋白包含与SEQIDN0:2至少 95 %相同的氨基酸序列。13. 如权利要求9所述的方法，其中所述重组卵泡抑素蛋白包含与SEQIDN0:2相同的 氨基酸序列。14. 如前述权利要求中任一项所述的方法，其中使所述重组卵泡抑素蛋白融合于Fc结 构域。15. 如权利要求15所述的方法，其中所述Fc结构域包含与 EPKSCDKTHTCPPCPAPELLGGPSVFLFPPKPKDTLMISRTPEVTCVVVDVSHEDPEVKFNWYVDGVEVHN AKTKPREEQYNSTYRVVSVLTVLHQDWLNGKEYKCKVSNKALPAPIEKTISKAKGQPREPQVYTLPPSRDELTKNQ VSLTCLVKGFYPSDIAVEWESNGQPENNYKTTPPVLDSDGSFFLYSKLTVDKSRWQQGNVFSCSVMHEALHNHYTQK SLSLSPGK(SEQIDN0:3)至少80%相同的氨基酸序列。16. 如权利要求15所述的方法，其中所述Fe结构域在对应于人IgGl的Thr250、Met 252、Ser254、Thr256、Thr307、Glu380、Met428、His433 和 /或Asn434 的一个或多 个位置处包含一个或多个突变。17. 如前述权利要求中任一项所述的方法，其中所述重组卵泡抑素蛋白是通过接头融 合于所述Fc结构域。18. 如权利要求17所述的方法，其中所述接头是包含3-100个氨基酸的肽。19. 如权利要求18所述的方法，其中所述接头包含与GAPGGGGGAAAAAGGGGGGAP(GAG接 头，SEQIDNO:5)至少80%相同的序列。20. 如权利要求18所述的方法，其中所述接头包含与GAPGGGGGAAAAAGGGGGGAPGGGGGAA AAAGGGGGGAP(GAG2 接头，SEQIDNO:6)至少 80%相同的序列。21. 如权利要求18所述的方法，其中所述接头包含与GAPGGGGGAAAAAGGGGGGAPGGGGGAA AAAGGGGGGAPGGGGGAAAAAGGGGGGAP(GAG3 接头，SEQIDNO:7)至少 80%相同的序列。22. 如前述权利要求中任一项所述的方法，其中所述重组卵泡抑素蛋白包含与SEQID NO: 8 GNCWLRQAKNGRCQVLYKTELSKEECCSTGRLSTSWTEEDVNDNTLFKWMIFNGGAPNCIPCKETCENVDC GPGKKCRMNKKNKPRCVCAPDCSNITWKGPVCGLDGKTYRNECALLKARCKEQPELEVQYQGRCKKTCRDVFCPGS STCVVDQTNNAYCVTCNRICPEPASSEQYLCGNDGVTYSSACHLRKATCLLGRSIGLAYEGKCIKAKSCEDIQCTGG KKCLWDFKVGRGRCSLCDELCPDSKSDEPVCASDNATYASECAMKEAACSSGVLLEVKHSGSCNSISEDTEEEEEDE DQDYSFPISSILEffGAPGGGGGAAAAAGGGGGGAPGGGGGAAAAAGGGGGGAPGGGGGAAAAAGGGGGGAPKTHTC PPCPAPELLGGPSVFLFPPKPKDTLMISRTPEVTCVVVDVSHEDPEVKFNWYVDGVEVHNAKTKPREEQYNSTYRV VSVLTVLHQDWLNGKEYKCKVSNKALPAPIEKTISKAKGQPREPQVYTLPPSRDELTKNQVSLTCLVKGFYPSDIA VEWESNGQPENNYKTTPPVLDSDGSFFLYSKLTVDKSRWQQGNVFSCSVMHEALHNHYTQKSLSLSPGK(SEQID NO:8)，或 SEQIDNO:9 GNCWLRQAKNGRCQVLYKTELSKEECCSTGRLSTSWTEEDVNDNTLFKWMIFNGGAPNCIPCKETCENVDC GPGKKCRMNKKNKPRCVCAPDCSNITWKGPVCGLDGKTYRNECALLKARCKEQPELEVQYQGRCKKTCRDVFCPGS STCVVDQTNNAYCVTCNRICPEPASSEQYLCGNDGVTYSSACHLRKATCLLGRSIGLAYEGKCIKAKSCEDIQCTGG KKCLWDFKVGRGRCSLCDELCPDSKSDEPVCASDNATYASECAMKEAACSSGVLLEVKHSGSCNSISEDTEEEEEDE DQDYSFPISSILEWGAPGGGGGAAAAAGGGGGGAPGGGGGAAAAAGGGGGGAPGGGGGAAAAAGGGGGGAPEPKSCD KTHTCPPCPAPELLGGPSVFLFPPKPKDTLMISRTPEVTCVVVDVSHEDPEVKFNWYVDGVEVHNAKTKPREEQYNS TYRVVSVLTVLHQDWLNGKEYKCKVSNKALPAPIEKTISKAKGQPREPQVYTLPPSRDELTKNQVSLTCLVKGFYPS DIAVEWESNGQPENNYKTTPPVLDSDGSFFLYSKLTVDKSRWQQGNVFSCSVMHEALHNHYTQKSLSLSPGK(SEQ IDN0:9)至少80%相同的氨基酸序列。23. 如前述权利要求中任一项所述的方法，其中所述重组卵泡抑素蛋白包含与SEQID NO: 10 GNCWLRQAKNGRCQVLYKTELSKEECCSTGRLSTSWTEEDVNDNTLFKWMIFNGGAPNCIPCKETCENVDC GPGKKCRMNKKNKPRCVCAPDCSNITWKGPVCGLDGKTYRNECALLKARCKEQPELEVQYQGRCKKTCRDVFCPGS STCVVDQTNNAYCVTCNRICPEPASSEQYLCGNDGVTYSSACHLRKATCLLGRSIGLAYEGKCISISEDTEEEEEDE DQDYSFPISSILEffGAPGGGGGAAAAAGGGGGGAPGGGGGAAAAAGGGGGGAPGGGGGAAAAAGGGGGGAPKTHTCP PCPAPELLGGPSVFLFPPKPKDTLMISRTPEVTCVVVDVSHEDPEVKFNWYVDGVEVHNAKTKPREEQYNSTYRVV SVLTVLHQDWLNGKEYKCKVSNKALPAPIEKTISKAKGQPREPQVYTLPPSRDELTKNQVSLTCLVKGFYPSDIAV EWESNGQPENNYKTTPPVLDSDGSFFLYSKLTVDKSRWQQGNVFSCSVMHEALHNHYTQKSLSLSPGK(SEQID NO:10)，或 SEQIDNO:11 GNCWLRQAKNGRCQVLYKTELSKEECCSTGRLSTSWTEEDVNDNTLFKWMIFNGGAPNCIPCKETCENVDC GPGKKCRMNKKNKPRCVCAPDCSNITWKGPVCGLDGKTYRNECALLKARCKEQPELEVQYQGRCKKTCRDVFCPGS STCVVDQTNNAYCVTCNRICPEPASSEQYLCGNDGVTYSSACHLRKATCLLGRSIGLAYEGKCISISEDTEEEEEDE DQDYSFPISSILEWGAPGGGGGAAAAAGGGGGGAPGGGGGAAAAAGGGGGGAPGGGGGAAAAAGGGGGGAPEPKSCD KTHTCPPCPAPELLGGPSVFLFPPKPKDTLMISRTPEVTCVVVDVSHEDPEVKFNWYVDGVEVHNAKTKPREEQYNS TYRVVSVLTVLHQDWLNGKEYKCKVSNKALPAPIEKTISKAKGQPREPQVYTLPPSRDELTKNQVSLTCLVKGFYPS DIAVEWESNGQPENNYKTTPPVLDSDGSFFLYSKLTVDKSRWQQGNVFSCSVMHEALHNHYTQKSLSLSPGK(SEQ IDNO: 11)至少80%相同的氨基酸序列。24. 如前述权利要求中任一项所述的方法，其中所述重组卵泡抑素蛋白是由哺乳动物 细胞产生。25. 如权利要求24所述的方法，其中所述哺乳动物细胞是人细胞。26. 如权利要求24所述的方法，其中所述哺乳动物细胞是HT1080细胞。27. 如前述权利要求中任一项所述的方法，其中所述重组卵泡抑素蛋白是全身性施用。28. 如权利要求27所述的方法，其中所述全身性施用选自静脉内、皮内、吸入、经皮（表 面）、眼内、皮下、肌肉内、经口和/或经粘膜施用。29. 如权利要求28所述的方法，其中所述全身性施用是静脉内施用。30. 如权利要求28所述的方法，其中所述全身性施用是皮下施用。31. 如权利要求1-26中任一项所述的方法，其中所述全身性施用是经口施用。32. 如前述权利要求中任一项所述的方法，其中所述重组卵泡抑素蛋白是每两月、每 月、每三周、每两周、每周、每日或在可变间隔下施用。33. 如前述权利要求中任一项所述的方法，其中所述重组卵泡抑素蛋白是向一种或多 种选自表1的骨骼肌递送。34. 如前述权利要求中任一项所述的方法，其中所述重组卵泡抑素蛋白是向一种或多 种选自膈肌、三头肌、比目鱼肌、胫骨前肌、腓肠肌、趾长伸肌、腹直肌和/或四头肌的靶标 组织递送。35. 如前述权利要求中任一项所述的方法，其中所述重组卵泡抑素蛋白是向心脏递送。36. 如前述权利要求中任一项所述的方法，其中所述重组卵泡抑素蛋白是向一种或多 种选自心脏和骨骼肌，包括膈肌、三头肌、比目鱼肌、胫骨前肌、腓肠肌、趾长伸肌、腹直肌和 /或四头肌的靶标组织递送。37. 如前述权利要求中任一项所述的方法，其中施用所述重组卵泡抑素蛋白会导致肌 肉再生、肌肉力量增加、灵活性增加、活动范围增加、耐力增加、易疲劳性降低、血流增加、认 知改进、肺功能改进、炎症抑制、肌肉纤维化减轻和/或肌肉坏死减轻。38. 如前述权利要求中任一项所述的方法，其中施用所述重组卵泡抑素蛋白会导致肌 肉纤维化和/或坏死减轻。39. 如前述权利要求中任一项所述的方法，其中DMD的所述至少一种症状或特征选自 由以下组成的组：肌肉消耗、肌肉无力、肌肉脆弱、肌肉坏死、肌肉纤维化、关节挛缩、骨骼变 形、心肌病、吞咽受损、肠和膀胱功能受损、肌肉缺血、认知损害、行为功能障碍、社交损害、 脊柱侧凸和呼吸功能受损。40. -种重组卵泡抑素融合蛋白，其包含 卵泡抑素多肽； Fc结构域；和 使所述卵泡抑素多肽与所述Fc结构域缔合的接头， 其中所述卵泡抑素多肽包含与野生型人卵泡抑素蛋白（SEQIDNO: 1)至少70%相同 的氨基酸序列；并且此外其中所述重组卵泡抑素融合蛋白能够结合活化素、肌抑素和/或 ⑶F-11，并且具有在约0. 5-10天的范围内的体内半衰期。41. 如权利要求40所述的重组卵泡抑素融合蛋白，其中所述卵泡抑素多肽具有与所述 野生型人卵泡抑素蛋白（SEQIDNO: 1)至少80%相同的氨基酸序列。42. 如权利要求40所述的重组卵泡抑素融合蛋白，其中所述卵泡抑素多肽具有与所述 野生型人卵泡抑素蛋白（SEQIDNO: 1)至少90%相同的氨基酸序列。43. 如权利要求40所述的重组卵泡抑素融合蛋白，其中所述卵泡抑素多肽具有与所述 野生型人卵泡抑素蛋白（SEQIDNO: 1)至少95%相同的氨基酸序列。44. 如权利要求40所述的重组卵泡抑素融合蛋白，其中所述卵泡抑素多肽具有与所述 野生型人卵泡抑素蛋白（SEQIDNO: 1)相同的氨基酸序列。45.如权利要求40所述的重组卵泡抑素融合蛋白，其中所述卵泡抑素多肽含有SEQ ID NO: 1的氨基酸残基212-288的缺失。46. -种重组卵泡抑素融合蛋白，其包含 卵泡抑素多肽； Fc结构域；和 使所述卵泡抑素多肽与所述Fc结构域缔合的接头， 其中所述卵泡抑素多肽包含与 GNCWLRQAKNGRCQVLYKTELSKEECCSTGRLSTSWTEEDVNDNTLFKWMIFNGGAPNCIPCKETCENVDC GPGKKCRMNKKNKPRCVCAPDCSNITWKGPVCGLDGKTYRNECALLKARCKEQPELEVQYQGRCKKTCRDVFCPGS STCVVDQTNNAYCVTCNRICPEPASSEQYLCGNDGVTYSSACHLRKATCLLGRSIGLAYEGKCISISEDTEEEEEDE DQDYSFPISSILEW(SEQ IDN0:2)至少70%相同的氨基酸序列， 并且此外其中所述重组卵泡抑素融合蛋白能够结合活化素、肌抑素和/或GDF-11，并 且具有在约〇. 5-10天的范围内的体内半衰期。47. 如权利要求40-46中任一项所述的重组卵泡抑素融合蛋白，其中所述Fc结构域是 IgGlFc结构域。48. 如权利要求40-46中任一项所述的重组卵泡抑素融合蛋白，其中所述Fc结构域具 有与 EPKSCDKTHTCPPCPAPELLGGPSVFLFPPKPKDTLMISRTPEVTCVVVDVSHEDPEVKFNWYVDGVEVHN AKTKPREEQYNSTYRVVSVLTVLHQDWLNGKEYKCKVSNKALPAPIEKTISKAKGQPREPQVYTLPPSRDELTKNQ VSLTCLVKGFYPSDIAVEWESNGQPENNYKTTPPVLDSDGSFFLYSKLTVDKSRWQQGNVFSCSVMHEALHNHYTQK SLSLSPGK(SEQIDN0:3)至少80%相同的氨基酸序列。49. 如权利要求48所述的重组卵泡抑素融合蛋白，其中所述Fe结构域在对应于人 IgGl的Thr250、Met252、Ser254、Thr256、Thr307、Glu380、Met428、His433和 /或 Asn434的一个或多个位置处包含一个或多个突变。50. 如权利要求40-49中任一项所述的重组卵泡抑素融合蛋白，其中所述接头是包含 3-60个氨基酸的肽。51. 如权利要求50所述的重组卵泡抑素融合蛋白，其中所述接头包含与 GAPGGGGGAAAAAGGGGGGAP(GAG接头，SEQIDNO: 5)至少 80%相同的序列。52. 如权利要求50所述的重组卵泡抑素融合蛋白，其中所述接头包含与GAPGGGGGAAAA AGGGGGGAPGGGGGAAAAAGGGGGGAP(GAG2 接头，SEQIDNO:6)至少 80%相同的序列。53. 如权利要求50所述的重组卵泡抑素融合蛋白，其中所述接头包含与GAPGGGGGAAA AAGGGGGGAPGGGGGAAAAAGGGGGGAPGGGGGAAAAAGGGGGGAP(GAG3 接头，SEQIDNO: 7)至少 80% 相同的序列。54. 如权利要求40-53中任一项所述的重组卵泡抑素融合蛋白，其中所述重组卵泡抑 素融合蛋白包含与SEQIDNO:8 GNCWLRQAKNGRCQVLYKTELSKEECCSTGRLSTSWTEEDVNDNTLFKWMIFNGGAPNCIPCKETCENVDC GPGKKCRMNKKNKPRCVCAPDCSNITWKGPVCGLDGKTYRNECALLKARCKEQPELEVQYQGRCKKTCRDVFCPGS STCVVDQTNNAYCVTCNRICPEPASSEQYLCGNDGVTYSSACHLRKATCLLGRSIGLAYEGKCIKAKSCEDIQCTGG KKCLWDFKVGRGRCSLCDELCPDSKSDEPVCASDNATYASECAMKEAACSSGVLLEVKHSGSCNSISEDTEEEEEDE DQDYSFPISSILEffGAPGGGGGAAAAAGGGGGGAPGGGGGAAAAAGGGGGGAPGGGGGAAAAAGGGGGGAPKTHTC PPCPAPELLGGPSVFLFPPKPKDTLMISRTPEVTCVVVDVSHEDPEVKFNWYVDGVEVHNAKTKPREEQYNSTYRV VSVLTVLHQDWLNGKEYKCKVSNKALPAPIEKTISKAKGQPREPQVYTLPPSRDELTKNQVSLTCLVKGFYPSDIA VEWESNGQPENNYKTTPPVLDSDGSFFLYSKLTVDKSRWQQGNVFSCSVMHEALHNHYTQKSLSLSPGK(SEQID NO:8)，或 SEQIDNO:9 GNCWLRQAKNGRCQVLYKTELSKEECCSTGRLSTSWTEEDVNDNTLFKWMIFNGGAPNCIPCKETCENVDC GPGKKCRMNKKNKPRCVCAPDCSNITWKGPVCGLDGKTYRNECALLKARCKEQPELEVQYQGRCKKTCRDVFCPGS STCVVDQTNNAYCVTCNRICPEPASSEQYLCGNDGVTYSSACHLRKATCLLGRSIGLAYEGKCIKAKSCEDIQCTGG KKCLWDFKVGRGRCSLCDELCPDSKSDEPVCASDNATYASECAMKEAACSSGVLLEVKHSGSCNSISEDTEEEEEDE DQDYSFPISSILEWGAPGGGGGAAAAAGGGGGGAPGGGGGAAAAAGGGGGGAPGGGGGAAAAAGGGGGGAPEPKSCD KTHTCPPCPAPELLGGPSVFLFPPKPKDTLMISRTPEVTCVVVDVSHEDPEVKFNWYVDGVEVHNAKTKPREEQYNS TYRVVSVLTVLHQDWLNGKEYKCKVSNKALPAPIEKTISKAKGQPREPQVYTLPPSRDELTKNQVSLTCLVKGFYPS DIAVEWESNGQPENNYKTTPPVLDSDGSFFLYSKLTVDKSRWQQGNVFSCSVMHEALHNHYTQKSLSLSPGK(SEQ IDN0:9)至少80%相同的氨基酸序列。55. 如权利要求40-53中任一项所述的重组卵泡抑素融合蛋白，其中所述重组卵泡抑 素融合蛋白包含与SEQIDNO: 10 GNCWLRQAKNGRCQVLYKTELSKEECCSTGRLSTSWTEEDVNDNTLFKWMIFNGGAPNCIPCKETCENVDC GPGKKCRMNKKNKPRCVCAPDCSNITWKGPVCGLDGKTYRNECALLKARCKEQPELEVQYQGRCKKTCRDVFCPGS STCVVDQTNNAYCVTCNRICPEPASSEQYLCGNDGVTYSSACHLRKATCLLGRSIGLAYEGKCISISEDTEEEEEDE DQDYSFPISSILEffGAPGGGGGAAAAAGGGGGGAPGGGGGAAAAAGGGGGGAPGGGGGAAAAAGGGGGGAPKTHTCP PCPAPELLGGPSVFLFPPKPKDTLMISRTPEVTCVVVDVSHEDPEVKFNWYVDGVEVHNAKTKPREEQYNSTYRVV SVLTVLHQDWLNGKEYKCKVSNKALPAPIEKTISKAKGQPREPQVYTLPPSRDELTKNQVSLTCLVKGFYPSDIAV EWESNGQPENNYKTTPPVLDSDGSFFLYSKLTVDKSRWQQGNVFSCSVMHEALHNHYTQKSLSLSPGK(SEQID NO:10)，或 SEQIDNO:11 GNCWLRQAKNGRCQVLYKTELSKEECCSTGRLSTSWTEEDVNDNTLFKWMIFNGGAPNCIPCKETCENVDC GPGKKCRMNKKNKPRCVCAPDCSNITWKGPVCGLDGKTYRNECALLKARCKEQPELEVQYQGRCKKTCRDVFCPGS STCVVDQTNNAYCVTCNRICPEPASSEQYLCGNDGVTYSSACHLRKATCLLGRSIGLAYEGKCISISEDTEEEEEDE DQDYSFPISSILEWGAPGGGGGAAAAAGGGGGGAPGGGGGAAAAAGGGGGGAPGGGGGAAAAAGGGGGGAPEPKSCD KTHTCPPCPAPELLGGPSVFLFPPKPKDTLMISRTPEVTCVVVDVSHEDPEVKFNWYVDGVEVHNAKTKPREEQYNS TYRVVSVLTVLHQDWLNGKEYKCKVSNKALPAPIEKTISKAKGQPREPQVYTLPPSRDELTKNQVSLTCLVKGFYPS DIAVEWESNGQPENNYKTTPPVLDSDGSFFLYSKLTVDKSRWQQGNVFSCSVMHEALHNHYTQKSLSLSPGK(SEQ IDNO: 11)至少80%相同的氨基酸序列。56. -种核酸，其包含编码如权利要求40-50中任一项所述的重组卵泡抑素融合蛋白 的核苷酸序列。57. -种细胞，其包含如权利要求56所述的核酸。58. -种药物组合物，其包含如权利要求40-55中任一项所述的重组卵泡抑素融合蛋 白和药学上可接受的载体。
【专利摘要】本发明尤其提供用于治疗肌营养不良，具体来说杜兴氏肌营养不良(DMD)的方法和组合物。在一些实施方案中，本发明的一种方法包括向罹患或易患DMD的个体施用有效量的重组卵泡抑素蛋白以使DMD的至少一种症状或特征在强度、严重性或频度方面得以降低，或延迟发作。
【IPC分类】A61K38/17, A61P21/00, A61K38/16
【公开号】CN104902915
【申请号】CN201480003715
【发明人】R·迈尼奥
【申请人】夏尔人类遗传性治疗公司
【公开日】2015年9月9日
【申请日】2014年1月24日
【公告号】CA2898121A1, EP2948161A1, WO2014116981A1