果，还可改善痴呆症中学习记忆低下，所以同时具有预防/治疗痴呆症的效果，且由于安全性极高，所以可长期服用。
【附图说明】
[0038]图1表示口服给予正常大鼠2，5-哌嗪二酮，3，6-双(苯基甲基)-，(3S, 6S)两周时的前额叶皮层中的血清素浓度。
[0039]图2表示口服给予抑郁状态大鼠2，5-哌嗪二酮，3，6-双(苯基甲基)-，(3S, 6S)时的在Morris水迷宫中到达逃生平台的潜伏期。
[0040]图3表示口服给予正常大鼠2，5-哌嗪二酮，3，6-双(苯基甲基)-，(3S, 6S)时的海马乙酰胆碱的浓度。
[0041]图4表示口服给予预先学习过的大鼠2，5-哌嗪二酮，3，6-双(苯基甲基)-，(3S, 6S)时的使用东莨菪碱诱导学习障碍大鼠的放射状迷宫实验的正确率。
【具体实施方式】
[0042]以下对本发明的实施方式进行详细说明。
[0043]<抗痴呆症剂及学习记忆促进剂>
[0044]本发明为含有作为有效成分的2，5-哌嗪二酮，3，6-双(苯基甲基)-，(3S, 6S)的抗痴呆症剂及含有作为有效成分的2，5-哌嗪二酮，3，6-双(苯基甲基)-，(3S, 6S)的学习记忆改善剂。
[0045]本发明的药剂含有作为有效成分的2，5-哌嗪二酮，3，6-双(苯基甲基)-，(3S，6S)，改善抑郁症状，具有学习积极性改善作用，具有预防.治疗作为伴随老年化的学习记忆障碍的健忘综合征的效果，具有预防.治疗以阿尔茨海默型痴呆症为代表的各种痴呆症的效果及具有通过改善作为痴呆症的危险因素的抑郁症状而预防向痴呆症发展的作用。即本发明的有效成分同时具有抗抑郁作用、学习积极性改善作用、抗痴呆症作用及学习记忆促进作用。
[0046]现在，作为抑郁症的治疗药或预防药，除三环类抗抑郁药及四环类抗抑郁药之外，选择性血清素再摄取抑制剂(SSRI)和血清素.去甲肾上腺素再摄取抑制剂(SNRI)也已进入临床。SSRI和SNRI是将传统三环类抗抑郁药的副作用大幅改善的抗抑郁药。已知SSRI通过抑制与SERT的结合，抑制突触间隙中血清素的再吸收，增加突触间隙的血清素浓度，从而改善抑郁症状。本发明药剂的有效成分抑制与SERT的结合。
[0047]SERT结合抑制活性例如可用已报道(Eur J Pharmacol, 368，277-283，1999)中记载的方法测定。即可测定3H标记的米帕明(imipramine)是否抑制与在CHO细胞中表达的人SERT的结合。
[0048]此外，本发明药剂的有效成分介由SERT结合抑制活性，具有提高突触间隙血清素浓度的作用。使用微透析法测定正常大鼠口服给予2，5-哌嗪二酮，3，6-双(苯基甲基)-，(3S, 6S)两周时前额叶皮层的血清素浓度时，确认剂量依赖性且显著地提高了血清素浓度。
[0049]进而，本发明药剂的有效成分具有抗抑郁作用。作为SSRI的抗抑郁作用，可用已报道的(Exp Anim, 59 (2)，191-197,2010)中记载的方法测定。即首先实施8天使用小鼠的Morris水迷宫试验，并选择在60秒以内未能到达逃生平台的小鼠(失败小鼠，上述文献中记载为劣势者(infer1r))。通过在实施Morris水迷宫试验前，将作为本发明的有效成分的2，5-哌嗪二酮，3，6-双(苯基甲基)-，(3S, 6S) 口服给予失败小鼠，由于逃避潜伏期剂量依赖性且显著地缩短了，所以可确认其具有抗抑郁作用。
[0050]进而，本发明药剂的有效成分具有学习积极性改善作用。据报道上述Morris水迷宫试验是测定空间认知的记忆学习的方法(Learn.Motiv.12, 239-260 (1981))。由于小鼠记忆周围的风景并凭借其记忆寻找目标逃生平台的位置而在放满水的池内来回游动从而到达逃生平台，所以将到逃生平台的到达时间(逃避潜伏期)作为评价参数。由于本实验中的小鼠是选择了实施了 8天Morris水迷宫实验并在60秒以内未能到达逃生平台的个体，所以使到达逃生平台的时间缩短即可看作改善了学习积极性。通过将作为本发明的有效成分的2，5-哌嗪二酮，3，6-双(苯基甲基)-，(3S, 6S)在实施Morris水迷宫试验前口服给予失败小鼠，由于逃避潜伏期剂量依赖性且显著地缩短了，所以可确认其具有学习积极性改善作用。
[0051]本发明药剂的有效成分具有AChE酶抑制作用。AChE酶抑制作用可通过对AChE具有高选择性的底物MATP+(1，1-二甲基-4-乙酰硫甲基哌啶)来测定(B1l PharmaBull, 33⑷，702-706, 2010)。S卩，使AChE与MATP+反应，以伴随着作为检测试剂的DNTB(5, 5’ - 二硫代双(2-硝基苯甲酸))的反应的412nm处的吸光度变化为指标来测定。作为本发明药剂的有效成分的2，5-哌嗪二酮，3，6-双(苯基甲基)-，(3S, 6S)的AChE酶活性的50%抑制浓度(IC5tl)为3.4 μΜ。
[0052]认为与胆碱能神经元有关而为人所知的脑海马区域具有与学习及记忆相关的功能。由于具有学习及记忆低下等症状的退行性疾病的胆碱能神经元受损，所以提高海马中乙酰胆碱的浓度可改善学习及记忆低下等症状。通过微透析法，本发明药剂的有效成分将大鼠海马的乙酰胆碱浓度提高到约2.5倍。
[0053]进而，东莨菪碱是毒蕈碱型乙酰胆碱受体的非选择性的竞争性拮抗剂，东莨菪碱诱导的学习障碍实验动物作为记忆障碍的模型被广泛使用。由于本发明药剂的有效成分在使用东莨菪碱诱导的学习障碍大鼠的放射状迷宫实验中显著地改善了正确率，所以表明其具有学习记忆促进作用。
[0054]作为本发明药剂的有效成分的2，5-哌嗪二酮，3，6-双(苯基甲基)-，(3S, 6S)在使用小鼠的单次给药急性毒性试验中，即使给予2g/kg也不显示毒性，在使用大鼠的28天重复给药毒性试验中，最大无明显作用水平为10mg/kg/day以上，进而，其为即使在Ames试验、染色体异常试验及小鼠微核试验中也未显示致突变性的安全性极优异的抗抑郁剂(向痴呆症发展的预防剂)及学习记忆促进剂(痴呆症治疗剂)。
[0055]作为有效成分的2，5-哌嗪二酮，3，6-双(苯基甲基)-，(3S, 6S)也可使用市售的合成试剂，但从安全性的观点出发，优选从天然物中提取而得到。作为从天然物中得到的方法，作为例子，可列举包含以下工序的方法:
[0056](I)以鸟兽肉类、鱼贝类或贝类为原料，通过在液体中加热而除去其中含有的水溶性蛋白质的预处理工序；
[0057](2)在该预处理后更换液体，再次进行加热的工序；及
[0058](3)过滤所得到的液体样品的工序。
[0059]在上述预处理工序(I)中使用的原料优选富含作为有效成分的2，5-哌嗪二酮，3，6-双(苯基甲基)-，(3S, 6S)的天然物，特别优选鸟兽肉类、鱼贝类或贝类。在鸟兽肉类中，包含作为畜肉的牛、猪、马、羊及山羊，作为兽肉的除畜肉以外的肉，例如野猪、鹿，作为家畜肉的鸡、火鸡、鹌鹑、鸭子及绍兴麻鸭，作为野鸟肉的除家畜肉以外的鸟类的肉，例如野鸭、雉、麻雀及斑鸫等。此外，可使用通常饮食生活中所食用的鱼贝类及贝类。另外，作为植物体还可使用咖啡、可可等。在这些鸟兽肉、鱼贝类及贝类中优选使用可高效、高浓度得到2，5-哌嗪二酮，3，6-双(苯基甲基)-，(3S, 6S)的鸡肉。
[0060]作为预处理工序(I)，只要进行减少畜肉中含有的水溶性蛋白质的工序即可，例如只要在100°C?160°C下煮30分钟?数小时(优选3?8小时左右)即可。作为加热装置，可根据条件使用压力锅、高压灭菌器等。
[0061]此外，加热工序⑵优选在高温高压(100°C以上、I个大气压以上)下进行，例如优选为100°C以上，进一步优选为120°C以上。同样地作为加热装置，可根据条件使用压力锅、高压灭菌器等。
[0062]即使连续进行预处理工序(I)及加热工序(2)的工序，也可在预处理工序后暂时取出畜肉并在进行液体更换后再进一步进行加热工序。在预处理工序(I)之后进行液体更换并在其后进行加热工序(2)的方法可得到白利度更低的样品，所以优选进行分离。
[0063]另外，为了防止植物体及动物体被烤焦，优选工序(I)及工序(2)中的加热处理在溶剂中进行。作为溶剂，优选使用水、乙醇或它们的混合物等。即通过在含有蛋白质的植物体或动物体中混合溶剂实施加热处理并采集该溶剂，可得到高含有2，5-哌嗪二酮，3，6-双(苯基甲基)-，(3S, 6S)的溶液。2，5-哌嗪二酮，3，6-双(苯基甲基)-，(3S, 6S)的浓度可用多种方法定量，例如可通过高效液相色谱法(HPLC)来定量。
[0064]也可将所得到的含有2，5-哌嗪二酮，3，6-双(苯基甲基)_，(3S, 6S)的溶液直接作为本发明的药剂使用，也可根据需要进行精制或浓缩来提高有效成分浓度后再使用。浓缩可通过蒸发器、冷冻干燥等来实施。
[0065]过滤工序可根据药剂的形态确定适当的过滤强度即可，也可用本领域技术人员所熟知的方法进行。
[0066]在本发明的抗痴呆症剂及学习记忆改善剂中，也可适当加入优选的载体、赋形剂、稳定化剂、抗氧化剂、防腐剂、表面活性剂等的添加剂。可根据疾病及其严重度、年龄、性别、体重等的不同适当选择正确的给药量，在人的情况下，例如可将有效成分按每次0.002?20mg/kg且I天数次给药来进