一种超滤和纳滤技术相结合的三七总皂苷提纯方法
【技术领域】
[0001]本发明涉及涉及生物制药技术领域，具体地说，是一种超滤和纳滤技术相结合的三七总皂苷提纯方法。
【背景技术】
[0002]三七总皂甙(三七总皂苷)，主治活血祛瘀，通脉活络。具有抑制血小板聚集和增加脑血流量的作用，用于脑血管后遗症，视网膜中央静脉阻塞，眼前房出血等。
[0003]现代药理学研宄表明，三七总皂苷是三七的主要有效成分。三七总皂苷具有以下药理、功效作用:
对高脂血症的作用:
用三七总皂苷对高脂血症患者进行降脂抗栓作用的临床研宄。结果治疗后有明显抗血小板聚集和降纤作用，临床疗效及血脂、血液流变的改善均优于对照组。研宄表明三七总皂苷对高脂血症具有明显的预防和治疗作用。
[0004]对尚粘血症的作用:
将高粘血症患者分成三七总皂苷组和肠溶阿斯匹林组，经过4周I个疗程治疗，结果表明三七总皂苷具有显著降低血小板表面活性，抑制血小板粘附和聚集、抗血栓形成、改善微循环等作用，且优于阿斯匹林。
[0005]对高血压的作用:
用三七总皂苷治疗高血压，治疗20天后，能明显降低增高的血压还能明显减慢心率，结果显示三七总皂苷能显著降低高血压患者MDA，明显升高S0D，增加红细胞变形能力，降低红细胞的聚集性。
[0006]抗心肌缺血作用:
用三七总皂苷对实验性心肌缺血作用观察发现三七总皂苷能显著改善体表心电图的缺血表现，缩小心肌梗塞范围，可逆转劳累型心绞痛病人的左室舒张功能障碍，甚至可使之恢复正常。
[0007]抗心律失常:
用三七总皂苷抗实验性心律失常的作用观察，动物实验显示三七总皂苷可使大鼠试验性室性早搏明显减少，心律失常持续时间明显缩短，明显降低大白鼠急性心肌梗塞后再灌注时心律失常的发生率。
[0008]抗动脉粥样硬化作用:
观察三七总皂苷对兔食饵性动脉粥样硬化的影响，表明三七总皂苷可以通过抗炎和抗氧化的作用，发挥抗AS的作用，对血管平滑肌细胞有保护作用，能保护细胞不受高脂血清的影响，对动脉粥样硬化的发生和发展具有一定的防治作用。
[0009]抗血栓形成，改善微循环作用:
研宄三七总皂苷对冠心病病人ET-1和血小板功能的影响，结果显示三七总皂苷具有显著降低血小板表面活性，抑制血小板聚集和黏附，抗血栓形成，改善微循环等作用。
[0010]抗心脑缺血作用:
采用三七总皂苷治疗脑梗塞和缺血性脑血管病，结果表明三七总皂苷对脑梗死急性期有较好的临床治疗效果，三七总皂苷可显著改善全脑缺血或局灶性缺血再灌注期间的脑水肿。
[0011]促进造血细胞生长:
三七总皂苷对造血祖细胞有增殖作用，研宄还发现三七总皂苷中的Rgl和Rbl是促进造血的有效单体，能不断促进人骨髓粒系、红系造血祖细胞的增殖，对粒系祖细胞的作用优于红系祖细胞。
[0012]抗纤维化:
从细胞水平研宄发现三七总皂苷能延缓肾小管一一间质纤维化进程，改善肾功能。实验发现三七总皂苷能使肺泡炎发生时间推迟，进展缓慢，程度较轻，几乎不形成肺纤维。
[0013]通过动物实验研宄三七总皂苷对实验性肝纤维化的作用，结果显示三七皂苷具有明显的抗肝纤维化作用。
[0014]对神经细胞损伤的保护作用:
通过细胞学，形态学与脂质过氧化损伤指标的检测观察三七总皂苷对模型细胞的保护作用，结果表明三七总皂苷对能量代谢障碍引起的神经细胞损伤有保护作用。
[0015]膜分离是在20世纪初出现，20世纪60年代后迅速崛起的一门分离新技术。膜分离技术由于兼有分离、浓缩、纯化和精制的功能，又有高效、节能、环保、分子级过滤及过滤过程简单、易于控制等特征，因此，目前已广泛应用于食品、医药、生物、环保、化工、冶金、能源、石油、水处理、电子、仿生等领域，产生了巨大的经济效益和社会效益，已成为当今分离科学中最重要的手段之一。
[0016]超滤是一种膜分离技术，其主件为超滤膜，用于溶液中物质大分子级别的分离，超滤过程是以膜两侧压力差为动力，以机械筛分原理为基础的一种溶液分离过程，使用压力通常为0.1Mpa-0.25Mpa，分离孔径I μπι-Ο.1 μπι截留分子量500-1000000Dalton左右。超滤与所有常规过滤及微孔过滤(均为静态过滤)不同，一是超滤分离径小，几乎能截留溶液中所有细菌、病毒及胶体微粒，蛋白质、大分子有机物。二是整个过滤过程在动态下进行，溶剂仅获得部分的分离。进入超滤组件的原料液，在膜两侧压力差的推动下，部分透过膜成为超滤液，其余则成为浓缩液不断流出，使膜表面不能透过物质仅为有限的积聚。过滤速率在稳定状态下可达到一平衡值而不致连续衰减，整个过程可长期持续。
[0017]纳滤也是一种膜分离技术，对有机物截留分子量从200?100Dalton可选，对盐类有中等程度以上的脱除率。同时具有浓缩作用。
[0018]超滤、纳滤膜分离技术已较适宜于实现现有中药提取过程中的一些工艺环节的特殊要求，有利于提高传统中药制剂的内在和外在质量。
[0019]目前以三七为原料，提取三七总皂苷的生产工艺，还不能将无机盐等小分子物质杂质以及部分大分子物质杂质除尽，使血塞通、血栓通注射液存在稳定性、安全性问题。
【发明内容】
[0020]本发明的目的在于提供一种超滤和纳滤技术相结合的三七总皂苷提纯方法，通过超滤和纳滤技术在三七提取三七总皂苷生产工艺中的应用，进一步提纯三七总皂苷，截留高分子和无机盐等低分子杂质，满足针用原料的需要。也可用于以三七总皂苷为原料，制备血塞通注射液的制剂生产工艺。
[0021]本发明通过下述技术方案实现:一种超滤和纳滤技术相结合的三七总皂苷提纯方法，包括以下工艺:二七一粉碎一乙醇浸提一上大孔树脂柱一过氧化销柱一钦棒过滤一超滤一纳滤一浓缩一干燥一粉碎一三七总皂苷；其中，超滤、纳滤工序的操作条件如下:
1)进液压力为0.15?0.4Mpa ；
2)料液流速为20?30ml/s；
3)料液温度为20?30°C;
4)当料液原液被超滤至少量时，再加纯化水稀释，重复超滤多次；
5)料液的pH值控制在6.2?7.4 ;
6)反冲洗:反冲洗周期为每批，反冲洗时间为1.2h ;
所述超滤工序的超滤膜的截留分子量采用20000?90000Da，所述纳滤工序的纳滤膜的截留分子量采用600?800Da。
[0022]为更好的实现本发明，进一步的，所述超滤工序的超滤膜材料采用聚砜类膜材料、聚丙烯、复合聚氯乙烯；所述纳滤工序的纳滤膜材料采用芳族聚酰胺复合膜。
[0023]进一步的，为更好的实现本发明，所述超滤工序中，超滤膜膜结构采用中空纤维超滤膜、卷式或管式超滤膜，在超滤时采用错流过滤或采用死端过滤。
[0024]与现有技术相比，本发明具有以下有益效果:
本发明通过超滤和纳滤技术在三七提取三七总皂苷生产工艺中的应用，进一步提纯三七总皂苷，截留高分子和无机盐等低分子杂质，满足针用原料的需要。也可用于以三七总皂苷为原料，制备血塞通注射液的制剂生产工艺。
[0025]本发明用超滤和纳滤技术对三七总皂苷进行分离、浓缩、精制，具有生产流程简单、操作简便、分离效果好、生物活性物质不被破坏等优点，是很理想的除杂方法。可有效除去大分子物质杂质以及无机盐等小分子物质杂质，能提高三七总皂苷的纯度。
【具体实施方式】
[0026]下面结合实施例对本发明作进一步说明，本发明的实施方式包括但不限于下列实施例。
[0027]实施例1:
一种超滤和纳滤技术相结合的三七总皂苷提纯