管刺激性试验。取新西兰兔5只，采 用耳缘静脉给药方式给药，采用同体左右侧自身对比法给药，左耳给予供试品原液，右耳同 法给予0. 9%氯化钠注射液用作对照。给药剂量为lg/kg，给药浓度为100mg/ml，给药容积 为10ml/kg，给药速度约为10ml/min，一日一次，连用7天。
[0027] 每天给药前和给药后，对动物和注射部位进行肉眼观察，观察血管是否清晰，有无 血管扩张、收缩，血管内是否淤血，血管周围组织有无水肿等。
[0028] 末次给药后48h，肉眼观察5只新西兰兔耳缘静脉，将新西兰兔打击头部处死。分 别于注射部位近心端I. 5cm至3cm处剪取含有血管的耳缘组织，其它部位有肉眼可见变化 一并剪取。将所取病理标本用10%福尔马林固定，常规组织切片，观察有无血栓形成、内皮 损伤及其他组织病理变化。
[0029] 结果：果糖注射液静脉给药，3号动物给药侧和6号动物对照侧自第5次给药后出 现注射部位红肿现象，停药48h恢复正常。病理组织学检查结果显示，给药侧兔耳缘静脉 结构清晰，内皮及血管壁完整，血管腔内可见数量不等的红细胞，所有动物管腔内无血栓形 成。血管周围组织未见出血、水肿及炎细胞浸润等病理改变。3号、6号动物血管腔内可见 均质红染的嗜酸性物质。
[0030] 根据组织病理学评价标准判断，果糖注射液给药侧和对照侧平均积分均为0,无刺 激性。
[0031] 结论：果糖注射液静脉给药，给药剂量为lg/kg，给药浓度为100mg/ml，给药容积 为10ml/kg，给药速度约为10ml/min，一日一次，连用7天。对新西兰兔耳缘静脉血管无明 显刺激作用。
[0032] 3?豚鼠主动全身过敏试验 果糖注射液为安徽双鹤药业有限责任公司研制的药物。我们对本品进行了豚鼠主动全 身过敏性试验研究，为临床应用提供参考。
[0033]目的：观察豚鼠给予果糖注射液后，机体免疫系统反应在全身的表现，即有无过敏 反应及过敏程度如何。
[0034] 方法：选择豚鼠作为试验系统进行主动全身过敏性试验。供试品溶液采用原液，浓 度为lOOmg/ml;选择0. 9%氯化钠注射液作为阴性对照，0. 2%卵白蛋白溶液作为阳性对照。
[0035] 取豚鼠20只，按体重随机分为3组，分别为供试品组、阴性对照组和阳性对照组。 致敏时，供试品采用原液，给药体积为Iml/只，阴性对照组给予Iml/只0. 9%氯化钠注射 液，阳性对照组给予Iml/只0. 2%的卵白蛋白溶液，隔日腹腔注射1次致敏，共致敏3次；末 次致敏后l〇d，自外侧跖静脉一次快速注射激发，供试品采用原液，给药容积2ml/只，阴性 对照组给予，2ml/只0. 9%氯化钠注射液，阳性对照组给予2ml/只0. 2%的卵白蛋白溶液。
[0036] 致敏期间每次致敏前和致敏后观察，非给药日每天观察1次动物的临床症状；激 发后立刻至30min详细观察每只动物的有无出现过敏反应，症状出现及消失的时间等。并 于初次、末次致敏和激发时称重。
[0037] 结果：供试品组、阳性对照组和阴性对照组所有动物致敏期间均未见明显异常，体 重增长正常；供试品组及0. 9%氯化钠注射液阴性对照组动物激发后，未见明显异常症状， 试验结果均为阴性。〇. 2%卵白蛋白溶液阳性对照组给药后出现躁动、竖毛、颤抖、搔鼻、喷 嚏、咳嗽、呼吸急促、排尿、排粪、流泪、呼吸困难、啸鸣音、紫癜、步态不稳、跳跃、喘息、痉挛、 旋转、潮式呼吸等表现并于2分钟内全部死亡，过敏反应为极强阳性，发生率为100%。
[0038] 结论：果糖注射液，致敏剂量为Iml原液/只，隔日腔注射致敏，共致敏三次，末次 致敏后10天，静脉注射激发，激发剂量为2ml原液/只，豚鼠未出现任何过敏反应症状，表 明：果糖注射液对豚鼠无主动全身致敏作用。
[0039] 综合上述试验结果，可以得知，本发明所制备的果糖注射液，其在溶血性、过敏性 和局部刺激性获得的试验数据弥补了果糖注射液在儿童用药安全性和有效性领域的空白。
[0040] 本发明的有益效果： 对本产品安全性和质量稳定性有效提高，对原规格中处方组成及制备工艺进行相关变 更研究，以适用于产品的处方组成及制备工艺，在溶血性、过敏性和局部刺激性获得的试验 数据弥补了果糖注射液在儿童用药安全性和有效性领域的空白，通过严格控制溶液的PH 值、充分冲氮和改变配料液温度来减少溶液中残氧含量来增加溶液的稳定性，达到去除果 糖注射液原处方组成中含有的抗氧剂或者缓冲盐的一种制备方法。
【具体实施方式】
[0041] 下面根据实施例对本发明作进一步详细说明。
[0042] 实施案例1: 一种果糖注射液的制备方法，包括步骤： (1)将果糖置浓配罐中用60°C-80°C的注射用水溶解，上述浓配罐中的钛棒打底碳 10-20g/根，控制果糖的质量浓度不大于60% ; 在上述浓配罐使用前清洗浓配罐及其管路清洁：若距上次清洗时间超过6小时，开启 注射用水淋洗阀门，淋洗浓配罐内壁5分钟，放掉淋洗水，再打开注射用水淋洗阀门，淋洗 同时放入注射用水约300L，开启循环栗，自身循环10分钟后排放；再开启注水阀，放入注射 用水300L，循环清洗10分钟后排放，再重复操作一次，排尽清洗水；若距上次清洗时间不超 过6小时：开启注射用水淋洗阀门，淋洗浓配罐内壁直至注入水量达到300L，开启循环栗， 自身循环10分钟后栗入稀配排放；再通过注水阀向浓配注入300L注射用水，直接栗入另一 稀配罐排放； (2) 加入质量浓度在0.05%-0. 15%的药用炭，搅拌使果糖完全溶解后再使用 8ym-12ym钛滤器脱碳； (3) 将浓配罐中的溶液栗入稀配罐中，上述稀配罐中的钛棒打底碳10-20g/根，通入氮 气，控制氮气的流量使得溶液中含氧量不大于3ppm; 在稀配罐使用前冲洗稀配罐及管道系统：在上述浓配罐循环清洗的第三遍水栗入稀配 时，同时开启喷淋淋洗内壁直待稀配水量约500L，清洗10分钟后从稀配罐排放清洗水，另 一稀配罐采取开启自身循环和大循环形式清洗，清洗10分钟后从灌装机排放。再从稀配注 水阀分别放注射用水约500L，循环清洗和排放方法同前。再重复操作一次；距上次清洗时 间不超过6小时：将从浓配循环清洗后栗入稀配的注射用水排放。开启喷淋淋洗内壁，直至 液位达到500L，其中一稀配罐采取自身循环和大循环形式清洗，清洗10分钟后从稀配罐排 放清洗水，另一稀配罐采取开启自身循环和大循环形式清洗，清洗10分钟后从灌装机排放 (4) 加60°C-80°C的注射用水使果糖的浓度在0.04g/mL-0.06g/mL，再加入稀盐酸 调节pH值在4. 7±0. 2 ; (5) 测定溶液含量，0. 20ym-0. 25ym条件下精滤； (6) 充氮灌装，控制氮气的流量使瓶口内气体含氧量不大于4% ; (7) 在120°C_125°C水浴，灭菌12分钟，灯检，贴签，质量检验，包装，成品，入库。
[0043] 生产工艺关键步骤和控制点
实施案例2 : 1)处方变更前后对比 本品拟定处方组成以已上市产品为基础，结合处方筛选结果，最终优选结果如下： 变更前后处方组成对比
[注]:含亚硫酸氢钠的中间体溶液pH值不稳定，或高或低，故有时需采用氢氧化钠调 溶液pH值。
[0044] 2)、溶液pH值对质量的影响考察 文献报道果糖注射液在PH值下灭菌后溶液稳定性有较大差异，依据果糖注射液部颁 标准中溶液的pH值限度（3. 0~5. 5)要求，设计不同梯度pH值（5. 5、5. 0、4. 5、4. 0、3. 5)的 溶液，考察灭菌（121°C灭菌15min)前后溶液的pH值、外观色泽、5-羟甲基糠醛（5-HFM)和 含量。
[0045] 不同pH值（3. 5~5. 5)灭菌前后对制剂质量的影响
结论：从实验结果看不同pH值溶液灭菌后其溶液pH值均下降；对果糖溶液色泽有一 定影响；对溶液中5-HMF量影响较大，对含量影响明显。
[0046] 为进一步确定溶液pH值最佳范围，同上述样品配制较小的pH值范围，依法测定， 结果如下： 不同pH值（4. 2~5. 0)灭菌前后对制剂质量的影响
结论：灭菌前溶液的pH值在4. 4~4. 8之间时，