杏仁酸在抗氧化中的用图
【技术领域】
[0001]本发明提供了一种杏仁酸在抗氧化中的用途，尤其是指具有清除DPPH自由基及超氧阴离子自由基的杏仁酸，将其用于制备抗氧化的化妆材料组合物或医药组合物，可达到减缓肌肤氧化或老化的功效。
【背景技术】
[0002]皮肤是人体内部生理活动的自然反映器，也是与外界环境接触的第一层防护。人体内常受到有害化学物质、光照或体内产生的自由基的攻击，尤其是高活跃的自由基带有未配对电子，因此非常不稳定进而对人体十分危险。为了平衡未配对电子，自由基会不断地从其它分子上吸取电子，这种分子间的连锁反应会导致蛋白质、细胞膜以及DNA的变异，容易导致细胞受损氧化或老化。因此，如何有效降低皮肤氧化作用以减缓皮肤老化速度，便成为相关领域发明人所思考的方向。
[0003]抗氧化剂(ant1xidant)能分辨出不稳定的自由基，以中和或阻止其氧化。目前，经研究证实具有抗氧化剂效果的天然物质例如维生素C(vitamin C,L_ascorbic acid)、维他命Ε、β胡萝卜素、曲酸(kojic acid)和超氧化物歧化酶(super dismutase)等等可以防止多数自由基的损害；虽然这些物质对于抗氧化的确有显著的功效，但是却有其使用上的限制，例如维生素C在阳光下或接触空气时易被氧化，并且不耐热，当浓度超过5%以上会对皮肤产生刺激性及红肿；曲酸非常的不稳定容易被氧化而变色及引起皮肤过敏，且长期过量使用曲酸产品会导致细胞中毒且发生病变；此外，有些抗氧化剂的作用是直接破坏细胞，易造成细胞的毒杀性。
[0004]杏仁酸(Mandelic acid),又名苯乙醇酸，学名为α -轻基苯乙酸(2-Hydroxy-2-phenylacetic acid),由于其化学结构式类似于抗生素,对于大肠杆菌和链球菌都有良好的抗菌效果，因此早期杏仁酸主要是被应用于治疗泌尿道感染的问题上，并用作口服抗生素。直到美国著名的皮肤专科医师Dr.James Ε.Fulton才开始将杏仁酸应用于皮肤医学美容领域，作为脸部换肤之用。杏仁酸属于亲脂性果酸，渗透角质层能力较强，温和不刺激，不易产生一般果酸换肤时产生的副作用如红肿、灼伤及结痂等，因此比其它换肤成份都更为有效。然而，目前却没有具体研究证实杏仁酸在抗氧化中的确切功效为何。
【发明内容】
[0005]现在，发明人即是鉴于上述现有抗氧化的化妆品组合物在实际实施使用时仍具有多处缺陷，于是凭借孜孜不倦的精神，并通过其丰富的专业知识及多年的实务经验的帮助，而对现有抗氧化化妆品组合物加以改善，并据此研创出本发明。
[0006]本发明的主要目的是为提供一种杏仁酸在抗氧化中的用途，其是指具有清除DPPH自由基及超氧阴离子自由基能力的杏仁酸，将其用于制备抗氧化的化妆材料组合物或医药组合物，可达到减缓肌肤氧化或老化的功效。
[0007]为了达到上述实施目的，本发明提供了一种杏仁酸在抗氧化中的用途，其是施予一重量百分浓度为0.01% -30%的杏仁酸在皮肤上，以清除DPPH自由基及超氧阴离子自由基；其中杏仁酸的PH值为3.5以上。
[0008]本发明还提供一种含杏仁酸的化妆材料组合物在抗氧化中的用途，其是施予一有效剂量的化妆材料组合物在皮肤上，以清除DPPH自由基及超氧阴离子自由基；其中化妆材料组合物由重量百分浓度为0.01% -30%的杏仁酸、0.5% -1.5%的1,3-丁二醇(I, 3-butaned1l)及剩余重量百分浓度的无菌水所构成,杏仁酸的pH值为3.5以上。
[0009]在本发明的一实施例中，杏仁酸的重量百分浓度优选为10% -30%。
[0010]在本发明的一实施例中，杏仁酸的pH值优选为3.5。
[0011]通过本发明杏仁酸的用途，可进一步用于制备抗氧化的化妆材料组合物，为使用者提供更好的抗老化保养品。
【附图说明】
[0012]图1为杏仁酸的DPPH自由基清除能力测定结果图；
[0013]图2为杏仁酸的超氧阴离子自由基清除能力测定结果图。
【具体实施方式】
[0014]本发明的目的及其结构功能上的优点，将依据以下各图所示的内容，配合具体实施例予以说明，使审查员能对本发明有更深入且具体的了解。
[0015]本发明提供了一种杏仁酸在抗氧化中的用途，其是施予一重量百分浓度为0.01% -30% (重量百分浓度优选为10% -30% )的杏仁酸在皮肤上，以清除DPPH自由基及超氧阴离子自由基；其中杏仁酸的PH值为3.5以上，pH值优选为3.5。
[0016]其次，本发明还揭示了一种含杏仁酸的化妆材料组合物在抗氧化中的用途，其是施予一有效剂量的化妆材料组合物在皮肤上，以清除DPPH自由基及超氧阴离子自由基；其中化妆材料组合物由重量百分浓度0.01% -30%的杏仁酸(优选为10% -30%的杏仁酸)、0.5%-1.5%的1，3-丁二醇(1，3-butaned1l)及剩余重量百分浓度的无菌水所构成，杏仁酸的pH值为3.5以上，pH值优选为3.5。
[0017]此外，通过下述具体实施例，可进一步证明本发明可实际应用的范围，但不能理解为对本发明的范围进行任何形式的限制。
[0018]I〈药物配制〉
[0019]本实施例的杏仁酸是由广德科苑化工有限公司购得。称取杏仁酸的粉末lg，并加入ImL无菌水及50 μ LI, 3- 丁二醇，随后加热至90°C保持约10分钟使其溶解，此浓度为100%,然后将溶液pH调制成1.9或3.5，再以0.22 μ m过滤膜过滤，用以进行以下试验。
[0020]IK培养液及缓冲液的配制>
[0021](I)配制 DMEM medium(供 B16 细胞使用):
[0022]称取13.4g 的 DMEM 粉末，加入 1.5g 碳酸氢^内(sodium bicarbonate)，4.5g 葡萄糖，先以250mL的去离子水溶解后,再加入lmL/L gentamicin,之后以去离子水定量至I公升，并以孔径为0.22 μ m的过滤膜过滤，储存于4°C备用。
[0023](2)配制 Phosphate-buffered saline (PBS):
[0024]称取8g氯化钠、0.2g氯化钾、1.44g的Na2HPO4.7Η20以及0.24g的KH2PO4,溶解在980mL去离子水后，将pH值调整至7.4，再加去离子水至I公升，高温灭菌后，室温储存。
[0025](3)配制 10 倍 Trypsin-EDTA 溶液:
[0026]称取0.5g 的 trypsin 以及 0.2g 的 2_[2_(bis(carboxymethyl)amino)ethyl- (carboxymethyl) amino] acetic acid (EDTA)，加入 PBS 至 10OmT,后，以 0.22 μ m 的滤膜过滤，储存于_20°C。
[0027]III〈细胞培养与保存〉
[0028]老鼠黑色素瘤细胞(mousemelanoma, B16cells)以含有 10% fetal bovineserum (FBS)的DMEM培养液，在37 °C，5 % 二氧化碳的细胞培养箱内培养，每周更换培养基2-3 次。
[0029]继代培养时，移除旧的培养液，以PBS缓冲液清洗细胞表层1-2次后，加入适量I倍Trypsin-EDTA溶液，在37°C培养箱中作用数分钟，待细胞自培养瓶壁脱落，立即加入新鲜细胞培养液，以无菌吸管将细胞均匀打散后，将适当的细胞数的细胞分装至新的培养瓶继续培养。
[0030]再者，欲冷冻保存的细胞应处于生长旺盛，且存活率高的状态，并拥有约80-90%的致密度。将生长情形良好的细胞，按照细胞继代培养的操作，收集细胞至装有适量细胞培养液的15mL离心管中，以1200rpm离心10分钟。离心后去除上清液，并另外配制含有0.5%DMSO的细胞培养液作为细胞冷冻保存液，将此冷冻保存液加入离心后的细胞中，混合均匀打散细胞，取适量细胞液分装至冷冻管中，再放至冷冻盒。冷冻盒放入-80°C