三结构域蛋白32（trim32）在治疗心肌肥厚中的功能及应用
【专利说明】三结构域蛋白32 (TRIM32)在治疗心肌肥厚中的功能及应 用
[0001]
技术领域
[0002] 本发明属于基因的功能与应用领域，特别涉及一种三结构域蛋白32 (TR頂32)在 治疗心肌肥厚中的功能及应用。
【背景技术】
[0003] 心肌肥厚是心脏为适应各种长期过度的压力和/或容积负荷刺激而产生的心肌 细胞体积增大，重量增加。心肌肥厚中心肌细胞由于蛋白合成增加，引起体积增大、直径或 长度增加，肌节数量增多。同时，心肌细胞表型也由成熟型向胚胎型转化，并伴随心肌间质 细胞增殖和心脏细胞外基质改建，引起心肌重构[1，2]。临床上许多心脏疾病可以引起心 肌肥厚，常见病因包括原发性或继发性高血压病、心脏瓣膜病、冠心病，以及先天性心脏病 等[3]。尽管以心肌细胞增大、心肌收缩力增强为特点的早期心肌肥厚表现为一种维持正常 心输出量的代偿机制，但是由于长期心肌肥厚会增加心肌耗氧量，引起心肌缺血和心肌细 胞凋亡，同时心肌肥厚降低心室顺应性，导致代偿机制失衡[4]。研究表明随着心肌肥厚重 构的进展，缺血性心脏病、恶性心律失常、充血性心衰、猝死等严重心血管事件的发生率增 加6~10倍[5]。
[0004] 在细胞和分子水平上，心肌细胞肥大过程主要涵盖3个环节：胞外肥大信号刺激、 胞内信号通路转导及核内基因转录活化[6]。不同的肥大信号诱发特异的基因表达模式， 信号转导通路在这一过程中扮演重要角色[7]。目前，明确与心肌肥厚相关的信号通路主 要包括：1丐调素依赖性蛋白激酶（C aMK )、|丐调神经磷酸酶（c a I c i n e u r i n )、丝裂原活化蛋 白激酶(MAPK)、磷酸脂酰肌醇-3激酶（PI3K) /丝-苏氨酸蛋白激酶(Akt)和两面神激酶 (JAK)/信号传导及转录激活因子（STAT)信号转导通路。其中MPK由细胞外信号调节激酶 (ERKs)、c-jun N末端激酶（JNKs)和p38-MAPK三个亚家族组成[8]。PI3K活化后激活下游 重要靶点Akt，Akt可进一步作用于下游底物引起雷帕霉素靶体蛋白（mTOR)和糖原合成激 酶（GSK3 P )的激活以及FoxO的失活[9]。尽管目前对于心肌肥厚发生发展的病理生理机 制有了初步认识，但是其具体分子的调控网络仍未完全明确，临床防治手段仍然十分有限。
[0005] 三结构域蛋白32 (TR頂（Tripartite motif )32)属于环指蛋白家族的TRIM亚家 族成员，其编码基因定位于9号染色体长臂3区3带1亚带（9q33. 1)[10, 11]。TR頂32蛋白 由653个氨基酸组成，在人体及小鼠各组织器官中广泛表达，其中心脏表达水平较高[11]。 TR頂32从N端到C端具有4个结构域，分别是RING结构域、B-boxl结构域、卷曲螺旋结构 域和六重复NHL结构域[11]。研究发现，TR頂32作为泛素连接酶，可以通过调控c-Myc、 Argonaute-1、PIASy、Abi_2、XIAP、MITA、dysbindin 和 desmin 等下游关键分子，参与包括 肿瘤发生、抗病毒反应和肌肉萎缩在内的多种病理生理过程[12-18]。
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【发明内容】
[0007] 为解决上述现有技术的缺陷和不足，本发明的目的在于确定TRIM32的表达和心 肌肥厚的相互关系，提供一种TRIM32在制备保护心脏功能、抗心脏纤维化和/或预防、缓解 和/治疗心肌肥厚的药物中的新应用。
[0008] 本发明的目的通过下述技术方案实现： 本发明通过试验确定TR頂32表达与心肌肥厚之间的关系： 1、发生心肌肥厚时心肌细胞肥大标志物ANP、Myh7的表达明显上调，TR頂32的表达明 显下调 本发明分别选用正常人和扩张型心肌病患者心脏，正常假手术（Sham)小鼠和通过主动 脉弓缩窄手术（AB)造成心肌肥厚的小鼠心脏，以及分别通过对照组（PBS)或血管紧张素II (AngII)或苯肾上腺素（PE)刺激后的心肌