一种胸膜/脑膜及其制备方法_2

文档序号:9360126阅读:来源:国知局
种胸膜/脑膜的制备方法,包括以下步骤:
[0032] S1、按固液比1:100~5:100g/ml的比例,将脱乙酰度大于60%、分子量大于 0. 5 X IO6的鱿鱼软骨壳聚糖或鱿鱼软骨壳聚糖粉末溶解成胶液;
[0033] S2、对胶液过滤、脱泡后旋转涂膜,得到胸膜/脑膜。
[0034] 其中,步骤Sl中鱿鱼软骨壳聚糖的制备包括:
[0035] Sl 1、按固液比5. 0:100~25: lOOg/ml的比例,将鱿鱼软骨0-甲壳素或鱿鱼软骨 壳聚糖溶解于质量百分比浓度30%~40%的NaOH溶液中,在50~80°C下搅拌1~6h后 过滤,得到滤渣;
[0036] S12、对步骤Sll得到的滤渣洗涤至中性后干燥,得到步骤Sl所用的鱿鱼软骨壳聚 糖。
[0037] 通过元素分析法测定鱿鱼软骨壳聚糖的脱乙酰度,稀溶液粘度法测定鱿鱼软骨壳 聚糖的粘均分子量,得到如下表1所示的一系列鱿鱼软骨壳聚糖。由表1可看出,采用不同 的脱乙酰条件(如碱浓度、时间、温度),得到的鱿鱼软骨壳聚糖的分子量相近,而脱乙酰度 不同。
[0038]
[0039] 表I
[0040] 其中,
[0041 ] P-chitin :鱿鱼软骨0 -甲壳素;
[0042] 2+la:脱乙酰两次,第一次2h,第二次Ih ;
[0043] 2+l+lb:脱乙酰三次,第一次2h,第二次lh,第三次Ih;
[0044] l+1+l+l+r:脱乙酰五次,每次Ih;
[0045] CS-75d:CS-75 在 70°C超声处理 2h ;
[0046] Nile:不完全溶解,无法测定粘均分子量。
[0047] 更进一步地,鱿鱼软骨壳聚糖的制备在步骤S12之后还包括:
[0048] S13、将步骤S12得到的鱿鱼软骨壳聚糖作为中间产物,按固液比5. 0:100~ 25: lOOg/ml的比例,将中间产物在室温下溶解于质量百分比浓度1%~5%的盐酸溶液中, 在60~80°C下超声处理2~8h,得到混合液;
[0049] S14、在混合液中加入0. 1~1.0 mol/L的NaOH溶液调节混合液至中性,抽滤得到 滤渣;
[0050] S15、对步骤S14得到的滤渣洗涤至中性后干燥,得到与中间产物分子量不同的鱿 鱼软骨壳聚糖,作为步骤Sl所用的鱿鱼软骨壳聚糖。
[0051] 仍然通过元素分析法测定鱿鱼软骨壳聚糖的脱乙酰度,稀溶液粘度法测定鱿鱼软 骨壳聚糖的粘均分子量,得到如下表2所示的一系列鱿鱼软骨壳聚糖。由表2可看出,通过 改变超声处理时间和/或温度,得到的鱿鱼软骨壳聚糖的脱乙酰度相近,而分子量不同。
[0052]
[0053] 表 2
[0054] 其中,
[0055] P -chitin :鱿鱼软骨P -甲壳素;
[0056] 〇5-150:00(80.00±0.65)%、丽(1.52±0.25)\106的鱿鱼软骨壳聚糖。
[0057] 以下通过优选的实施例对本发明进行详细说明。
[0058] 实施例一:
[0059] 本实施例提出一种胸膜/脑膜的制备方法,包括以下步骤:
[0060] Sl、将I. 3g鱿鱼软骨壳聚糖(DD = 75%,Mff = 1. 52 X IO6)粉末溶解在IOOmU质 量百分比浓度2 %的醋酸溶液中,配置成胶液;
[0061] S2、对经过过滤、脱泡的胶液旋转涂膜(r = 2000rad/min,t = 9s),得到壳聚糖薄 膜;
[0062] S3、将壳聚糖薄膜置于60°C鼓风干燥箱中烘干后,用稀碱溶液和去离子水洗涤,再 次置于60°C鼓风干燥箱中烘干,得到胸膜/脑膜补片。
[0063] 其中,步骤Sl中鱿鱼软骨壳聚糖粉末的制备包括:
[0064] Sl 1、按固液比为10:100 (g/ml)的比例,将鱿鱼软骨甲壳素溶解于质量百分比 浓度35 %的NaOH溶液中,在80 °C下搅拌2h后过滤得到滤渣;
[0065] S12、对滤渣用去离子水洗涤至中性后置于60°C鼓风干燥箱烘干、研磨,得到鱿鱼 软骨壳聚糖(DD = 75%,Mff = L 52 X IO6)粉末。
[0066] 由于步骤Sl中配置的胶液粘度较大,流延涂膜的胶液难以在基片上均匀铺展,而 旋转涂膜工艺则是通过胶液和基片之间粘滞力和旋转引起离心力的合力作用使胶液在平 整基片上流动成膜,形成的液膜平整,起伏性较小。因此本发明采用旋转涂膜方法制备的鱿 鱼软骨壳聚糖膜厚度更加均匀且膜中无气孔,防渗性能得到极大提高,参见图1是本发明
【具体实施方式】一的流延成膜和旋转涂膜厚度均匀性比较图;其中,上图为流延成膜,下图为 旋转涂膜。本实施例制备的胸膜/脑膜厚度为〇. l〇mm,湿态拉伸强度为11. 45±0. 12MPa, 断裂伸长率为209. 64±21. 21%,溶胀率为239%,具体力学性能数据如下表3所示:
[0067]
[0068] 表 3
[0069] 参见图2是本发明【具体实施方式】一的补片体外酶解残留率随时间变化曲线图,经 体外酶解性能测试发现,补片残留率随时间增加而减小。
[0070] 下面通过小鼠皮下植入补片实验评价补片的生物相容性、生物降解性及周围组织 炎症反应情况,作为实验组。以小鼠体内不放置补片、单纯缝合的为对照组,小鼠不作任何 处理的为正常组。宏观观察发现小鼠的伤口慢慢愈合,两月后伤口仅存线性疤痕。HE染 色光镜观察发现实验组和对照组伤口愈合前期都存在炎症反应,之后炎症反应慢慢消失。 Masson染色光镜观察发现伤口愈合过程中,实验组和对照组的伤口组织含有大量成纤维细 胞,并存在大量胶原蛋白沉积。参见图3是本发明【具体实施方式】一的体内植入补片的炎症 情况图,根据C0X-2/GAPDH的比值可知:补片植入后的前24天,创口组织出现炎症反应,在 第24天时最为强烈,是因为伤口未完全愈合以及补片在体内产生的不适应造成炎症;24天 后,补片植入材料与组织完全融合,且伤口基本愈合,其炎症反应慢慢减小;到了第60天, C0X-2/GAPDH比值与正常组差距较小,说明炎症反应慢慢消失。参见图4是本发明具体实 施方式一的补片在小鼠体内酶解情况图,根据补片体内残留率随时间的变化曲线可知:补 片在体内缓慢酶解吸收,植入后的前13天,补片降解缓慢,之后随小鼠自愈能力加强,伤口 慢慢愈合,补片吸收也随之加快;补片植入后的60天,补片残留率为58%。参见图5是本 发明【具体实施方式】一的补片植入后小鼠血清中MDA的变化图,通过对比实验组、对照组及 正常组小鼠血清中MDA的含量可知:补片植入后第13、39、60天的实验组和对照组小鼠MDA 含量均比正常组高,且对照组和实验组MDA含量基本上相等,说明补片的植入并未对小鼠 组织细胞造成额外的损伤,补片具有良好的生物相容性。
[0071] 以上综合性能检测和动物实验结果表明:由鱿鱼软骨壳聚糖通过旋转涂膜方法制 备的胸膜和硬脑膜补片具有良好的干、湿态力学性能,厚度更加均匀,且消除了膜的气孔, 提高其防渗性能。此外,该补片具有良好生物相容性、生物降解性及对周围组织无炎症反应 等特性。
[0072] 实施例二:
[0073] 本实施例提出一种胸膜/脑膜的制备方法,包括以下步骤:
[0074] Sl、将I. 5g鱿鱼软骨壳聚糖(DD = 95%,Mff = 1. 15 X IO6)粉末溶解在IOOmU质 量百分比浓度2 %的醋酸溶液中,配置成胶液;
[0075] S2、对经过过滤、脱泡的胶液旋转涂膜(r = 2500rad/min,t = IOs),得到壳聚糖 薄膜;
[0076] S3、将壳聚糖薄膜置于60°C鼓风干燥箱中烘干后,用稀碱溶液和去离子水洗涤,再 次置于60°C鼓风干燥箱中烘干,得到胸膜/脑膜补片。
[0077] 其中,步骤Sl中鱿鱼软骨壳聚糖粉末的制备包括:
[007
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