大叶茶提取物及其制备方法和在化妆品中的应用
【技术领域】
[0001] 本发明属于化妆品和医药技术领域，具体涉及从一种我国普洱茶主要原料大叶茶 中提取天然活性物质--大叶茶提取物，以其为活性成分的化妆品或药物，以及大叶茶提取 物在制备保湿、嫩肤、抗皱、防晒、美白等多种皮肤化妆品中的应用，还有在制备治疗或预防 皮肤病的药物中的应用。 技术背景，
[0002] 大叶茶（Camellia sinensis var. assamica)为山茶科山茶属常绿小乔木或者灌 木。枝叶茂密，叶形椭圆为主，叶尖聚尖或渐尖，叶面隆起，叶色绿有光泽，叶片厚而柔软，叶 身背卷或稍内折，叶缘微波，有明显主干，分支部位明显，生长于我国云南省西南部普洱、景 洪等地。
[0003] 大叶茶是我国云南省特有的树种之一，因其叶片中含有丰富的茶多酚、氨基酸、咖 啡碱，使其成为普洱茶不可或缺的原料之一。本发明通过实验提取大叶茶花中的有效成分， 并进行了细胞毒性及皮肤化妆品活性实验，明确了大叶茶提取物不仅拥有良好的安全性还 表现出优秀的皮肤化妆品活性即良好的促胶原蛋白分泌活性，使之成为了良好的天然护肤 品原材料来源，为大叶茶的开发和利用提供了更好、更佳的途径，对于大叶茶未来的可持续 利用具有重大意义。
【发明内容】
[0004] 本发明目的在于提供大叶茶提取物，以其为活性成分的化妆品，它们的制备方法， 及其在制备化妆品中的应用。本发明明确了大叶茶提取物具有良好的护肤效果和安全性， 使其成为很好的天然护肤化妆品原材料。
[0005] 为了实现本发明的上述目的，本发明提供了如下的技术方案：
[0006] 大叶茶提取物，由下述方法制备而得：取大叶茶籽，进行筛选除杂，在压力 350Pma-450Pma以及温度25°C -35°C的条件下进行液压冷榨冷炼即物理压榨成毛油后，用 纯净水洗、沉淀、过滤、脱水、过滤，得大叶茶籽油即为大叶茶提取物。
[0007] 本发明还提供了一种化妆品，由上述的大叶茶提取物和化妆品常用载体组成，所 述的载体选自一种或多种含水体系，甘油、C1-4醇、脂肪醇、多元醇、脂肪醚、脂肪酯、乙二 醇、丙二醇、植物油、矿物油、脂质体、层状类脂材料、硅油、水，或者它们的组合。
[0008] 以及，所述的大叶茶提取物在制备化妆品中的应用。
[0009] 所述的大叶茶提取物在制备保湿或嫩肤或抗皱或防晒或美白化妆品中的应用。
[0010] 所述的大叶茶提取物在制备麻醉剂、抗真菌剂、抗炎剂、抗氧化剂、防腐剂、螯合 剂、着色剂、脱色剂、软化剂、乳化剂、脱落剂、成膜剂、芳香剂、湿润剂、驱虫剂、润滑剂、增湿 剂、药剂、光稳定剂、防腐剂、皮肤保护剂、皮肤渗透增强剂、防晒剂、稳定剂、表面活性剂、增 稠剂、粘度调节剂、维生素中的应用。
[0011] 所述的大叶茶提取物在制备麻醉剂、抗真菌剂、抗炎剂、抗氧化剂、防腐剂、螯合 剂、着色剂、脱色剂、软化剂、乳化剂、脱落剂、成膜剂、芳香剂、湿润剂、驱虫剂、润滑剂、增湿 剂、药剂、光稳定剂、防腐剂、皮肤保护剂、皮肤渗透增强剂、防晒剂、稳定剂、表面活性剂、增 稠剂、粘度调节剂、维生素中的应用。
[0012] 所述的大叶茶提取物在制备促胶原蛋白分泌活化剂中的应用。
[0013] 本发明还提供了一种预防或治疗皮肤病的药物组合物，由所述的大叶茶提取物和 药物常用载体组成。
[0014] 本发明所述的大叶茶提取物在制备预防或治疗皮肤病的药物中的应用。
[0015] 本发明同时还提供了大叶茶提取物的制备方法，包括下述步骤：取大叶茶籽，进行 筛选除杂，在压力350Pma-450Pma，温度25°C -35°C的条件下进行液压冷榨冷炼即物理压榨 成毛油后，用纯净水洗、沉淀、过滤、脱水、过滤，得大叶茶籽油即为大叶茶提取物。
[0016] 与现有技术相比，本发明具备如下的优益性：本发明通过对大叶茶植物进行浓缩 提取得到目标提取物，对目标提取物进行了细胞毒性实验和皮肤化妆品活性实验，证明了 目标提取物的安全性，明确了目标提取物优良的化妆品活性和药物活性。本发明提高了大 叶茶的利用功能和附加值，又拓展了天然护肤品植物原料的来源。本发明通过实验提取大 叶茶树皮的活性提取物，并进行了细胞毒性及皮肤化妆品活性实验，明确了大叶茶提取物 不仅拥有良好的安全性还表现出良好的抗氧化活性，使之成为了很好的天然护肤品植物原 材料，突破了大叶茶传统利用方式的局限，拓宽了大叶茶的利用途径，对于提高大叶茶的资 源利用价值具有重大意义。
【附图说明】：
[0017] 图1 :大叶茶提取物对HDFa胶原蛋白分泌的促进作用；
[0018] 图2 :大叶茶提取物的制备工艺流程图。
【具体实施方式】：
[0019] 以下结合附图，用本发明的实施例对本发明进行更详细叙述，但并不限制本发明 的范围。
[0020] 实施例1 :
[0021] 大叶茶提取物的制备：
[0022] 取大叶茶籽1000g，进行筛选除杂，在压力350Pma以及温度30°C的条件下进行液 压冷榨冷炼即物理压榨成毛油后，用纯净水洗、沉淀、过滤、脱水、过滤，得大叶茶籽油即大 叶茶提取物172. 4g，提取率为17. 2%。
[0023] 或取大叶茶籽1000g，进行筛选除杂，在压力450Pma以及温度25°C的条件下进行 液压冷榨冷炼即物理压榨成毛油后，用纯净水洗、沉淀、过滤、脱水、过滤，得大叶茶籽油即 大叶茶提取物175g，提取率为17. 5%。
[0024] 实施例2 :
[0025] 大叶茶提取物的细胞毒性实验：通过MTS比色法，确定样品的CC5。(50% cytotoxic concentration)，即对50%的细胞产生毒性时的药物浓度，从而确定以下活性实验的安全 样品浓度。
[0026] 实验方法：96孔细胞培养板上，将B16细胞与不同浓度的待测药物溶液混合，设定 3个重复孔，同时设置不含药物的空白对照，37°C，5% CO2培养24h，采用MTS比色法检测细 胞毒性，酶标仪测定OD值，测定波长490nm。计算得到CC5。值。
[0027] 细胞存活率（％ )=实验孔OD490nni/空白孔OD490nni X 100 %
[0028] 实验结果：大叶茶乙醇提取物的细胞存活率为96. 288%，属于正常水平，可明显 看出大叶茶提取物对细胞没有毒害作用，所以大叶茶提取物作为皮肤化妆品的天然原材料 的安全性是有保证的。
[0029] 实施例3 :
[0030] 促HDFa胶原蛋白分泌实验：
[0031] 12孔细胞培养板上，将HDFa细胞与不同浓度的待测药物溶液混合，设置不含药物 的空白照和TGF- 阳性对照。37 °C，5 % CO2培养3天，收取细胞培养上清，存于-80 °C ;加 入MTS，采用MTS比色法检测490nm的OD值；按胶原蛋白ELISA试剂盒中提供的方法检测 胶原蛋白的分泌，酶标仪测定OD值，检测波长为450nm。计算得到胶原蛋白分泌增加率。
[0032] 细胞存活率（％ )=实验孔OD490nni/空白孔OD490nni X 100 %
[0033] 胶原蛋白分泌增加率（％ )=(实验孔OD45cnn/细胞存活率/空白孔 OD45Onn1-D X 100%
[0034] 实验结果：在与人纤维原细胞的共培养中，大叶茶提取物（ECm= 53. 030 y g/mL) 呈现良好促胶原蛋白分泌活性并具很强的量效关系（见图1)，说明大叶茶提取物具有很好 的滋润或保湿及改善皮肤自身代谢功能或皮障功能的皮肤化妆品活性应用潜力。
[0035] 本发明提供具有天然植物成分或天然植物成分混合物的组合物，它在药学上或化 妆品上可接受的载体。这些组合物能抑制皮肤的酪氨酸酶活性，B16细胞黑色素生成抑制 活性，弹性蛋白活性，TNF-a分泌抑制活性，促胶原蛋白分泌活性，抑制皮肤的氧化。这些 组合物能用于细纹和/皱纹，皮肤红疹，干性、敏感肌肤，皮肤瘙痒，肤色不均或皮肤黑斑， 皮肤发炎和其它与此相关的皮肤不适症。这些组合物包含有从大叶茶中得到的提取物或从 该植物中得到的活性成分。这些组合物能进一步抑制皮肤的脂肪氧化酶，COX(环氧化酶） 活性，MMP-I和MMP-3活性。这些组合物中大叶茶提取物的含量是组合物总重的0.OOlwt% 至20.0 wt%。这些组合物可以是护肤液、护肤霜或乳剂等。大叶茶的提取物可以是水溶性 提取物，该提取物可以用醇（例如甲醇、乙醇、丙醇，丁醇等）提取。
[0036] 本发明含有大叶茶提取物的组合物可用于局部皮肤护理或护发产品。这些组合物 可以做成乳化剂（例如水包油、油包水、硅油包水，水包硅油，水包油包水，油包水包油，油 包水包硅油等），霜剂，护肤液，液体（例如水剂或水-醇溶液），无水基质（例如唇膏或粉 剂等），啫喱，油膏，奶液，软膏，喷雾剂，固体剂，眼霜等。
[0037] 本发明局部护肤组合物包含有大叶茶的提取物或从大叶茶提取物中获得的组分 或成分。局部施用这些组合物可减轻皮肤红斑的外观（如皮肤红斑、过敏性皮肤、皮肤红 月中、发炎等），还可减轻由于红斑引起的疼痛。红斑一般可由皮肤日光灼伤、皮肤的电疗、皮 肤烧伤、接触性过敏、全身过敏、皮肤毒性、锻炼、虫咬、细菌感染、病毒感染、真菌感染、寄生 原虫感染、按摩和吹风引起的皮炎等；可治疗干性皮肤、敏感皮肤或皮肤搔痒或减小肤色不 均的外观；可减小细纹或皱纹的外观。这些提取物可以是水溶性的或非水溶性的提取物，它 们可用醇（甲醇、乙醇、丙醇或丁醇等）、甘醇、油、水等来提取。