钾等。作为优选， 所述无机盐的加入量为原料总重量的0-3%。优选地，在发酵过程中，根据菌种的不同分阶 段植入培养基。
[0071] 用于本发明液体发酵的方法包括如下步骤：
[0072] (1)对原材料进行杀菌处理，此处的杀菌处理包括低温杀菌、射线杀菌、化学杀菌 等不破坏原材料品质的杀菌处理方法；
[0073] (2)制备培养基：采用本领域常规方法制备各种液体发酵培养基，包括但不限于 麦芽汁培养基、水果浆液培养基、谷物水溶液培养基。
[0074] 作为优选，所述麦芽汁培养基是将麦芽经过筛选、清洗、干燥，制得的干麦芽经糖 化、糊化、过滤等工序而成。作为优选，所述麦芽为大麦麦芽或小麦麦芽。作为优选，所述干 燥为晒干或烘干。作为优选，所述糖化采用酸法、酶法或酸酶结合法糖化。
[0075] 作为优选，所述水果浆液培养基是取水果可食用部分，经清洗、打浆（加水或不加 水）、过滤制得。
[0076] 作为优选，所述谷物水溶液培养基是将谷物去杂、清洗、研磨后，加水煮沸、过滤而 得。
[0077] 作为优选，所述培养基在使用前需经灭菌处理。
[0078] 作为优选，所述麦芽汁培养基适于仅以中药材为发酵基质；当发酵基质中含有水 果时可以以水果浆液作为培养基；如果发酵基质中含有谷物类物质时可以以谷物的水溶液 作为培养基。这种原则仅做一般性指导，当发酵基质中碳水化合物和水含量足够用于发酵 菌生长时，则可以使用发酵基质作为培养基。
[0079] (3)制备发酵基质：在灭菌培养基中，加入锁阳原料，优选加入研磨成浆液的锁阳 原料。作为优选，所述锁阳原料的加入量为培养基的〇. 3-8% (w/v，v/v)、或1-5% (w/w，v/ v)、或2.5% (w/w，v/v)。进步优选加入其他中药材粉末，更进一步优选加入谷物、蔬菜、食 用菌、坚果、海底植物等其中的一种或多种。其他中药材或谷物、蔬菜、食用菌、坚果、海底植 物可以粉末形式依据常规用量加入，一般为0-10% (w/v)。
[0080] (4)菌种植入并发酵：将选择的菌种进行扩大培养后，植入所述发酵基质中进行 发酵。作为优选，所述菌种为厌氧菌种、好氧菌种或厌氧与好氧菌种兼用。所述厌氧、好氧 菌种的植入量为发酵基质5-16 % (w/w)，或8-12 % (w/w)、或10 % (w/w)。作为优选，所述 扩大培养包括固体斜面培养、摇瓶培养和/或种子罐培养。作为优选，所述固体斜面培养的 培养基组成包括葡萄糖2-4%、蛋白胨1-3 %、豆粉1-2 %、琼脂2-4%、硫酸镁0. 05-0. 08 %、 磷酸二氢钾〇. 2-0. 3%、氯化钠0. 1-0. 3%。作为优选，所述摇瓶培养的培养基包括葡萄 糖2-3 %，蛋白胨1-4 %，豆粉0. 5-2 %，麸皮0. 5-2 %，硫酸镁0. 01-0. 1 %，磷酸二氢钾 0. 1-0. 4%、磷酸氢二钾0. 1-0. 2%。作为优选，所述摇瓶的转速为200转/min。作为优选， 所述种子罐培养的培养基为牛肉膏0.5% -1.5%、蛋白胨1% -2%、玉米浆0.5% -1.0%、 磷酸二氢钾0.03 % -0.05%、硫酸锌0.02 % -0.07%、氯化镁0.04 % -0.08%，其余为水。
[0081] 作为优选，当选择厌氧菌种时，在厌氧条件下于25-40Γ密封静置培养15-40天， 或发酵温度为28-35°C、30-32°C或31°C，发酵时间为21-35天、25-28天或27天。
[0082] 进一步优选，当选择好氧菌种时，在通气条件下于22-35Γ发酵7-30天，或发酵温 度为25-30°C或28 °C，发酵时间为14-25天或18-22天或20天。所通气体为无菌空气，通 气量为 2. 5-5. OL/min。
[0083] 更进一步优选，所述发酵分阶段进行，第一阶段为好氧发酵，选择好氧菌种，发酵 温度为22-35°C，无菌空气通气量为2. 5-5. OL/min，好氧发酵时间为7-30天；第二阶段转为 厌氧发酵，选择厌氧菌种，关闭通气，控制发酵温度为25-40°C，厌氧发酵时间为15-40天。
[0084] (5)抽取发酵后的液体，经过滤后得到锁阳酵素。
[0085] 固体发酵方法：
[0086] 将发酵菌种接种于含有固体培养基的发酵基质后在一定条件下发酵。
[0087] 用于本发明的固体发酵菌种包括但不限于酵母菌、乳酸杆菌、嗜酸乳杆菌、保加利 亚乳杆菌、植物乳杆菌、芽孢杆菌、双岐杆菌、米曲霉、蜜环菌、虫草菌、灵芝菌、朱红菌等一 种或多种能够用于食物或药物发酵的菌种。
[0088]用于本发明固体发酵的培养基是用于食物或药物常见的培养基如包括但不限于 麦芽汁固体培养基、水果培养基、谷物培养基等。所述培养基中可以加入糖类、氮源和无机 盐。所述糖类包括但不限于白糖、红糖、低聚糖类、糖醇类、冰糖、蜂蜜等。作为优选，所述糖 类的加入量为原料总重量的0-8%。所述氮源包括但不限于酵母粉、蛋白胨、黄豆饼粉、玉米 浆、鱼粉、蚕蛹粉、麸皮等。作为优选，所述氮源的加入量为原料总重量的0-10%。所述无机 盐包括但不限于硫酸铵、氯化锰、硫酸镁、磷酸二氢钾、磷酸氢二钾等。作为优选，所述无机 盐的加入量为原料总重量的0-3%。优选地，在发酵过程中，根据菌种的不同分阶段植入培 养基。
[0089] 用于本发明固体发酵的方法包括如下步骤：
[0090] (1)对原材料进行杀菌处理，此处的杀菌处理包括低温杀菌、射线杀菌、化学杀菌 等不破坏原材料品质的杀菌处理方法：
[0091] (2)制备培养基：采用本领域常规方法制备各种液体发酵培养基，包括但不限于 麦芽汁固体培养基、水果培养基、谷物培养基。
[0092] 作为优选，所述麦芽汁固体培养基是将麦芽经过筛选、清洗、干燥，制得的干麦芽 经糖化、糊化、过滤等工序，最后加入琼脂制成。作为优选，所述麦芽为大麦麦芽或小麦麦 芽。作为优选，所述干燥为晒干或烘干。作为优选，所述糖化采用酸法、酶法或酸酶结合 法糖化。作为优选，所述琼脂的加入量为1-5% (g/100mL)，或2-4% (g/100mL)、或3% (g/100mL)〇
[0093] 作为优选，所述水果培养基是取水果可食用部分，经清洗、打浆（加水或不加水）、 过滤、浓缩，最后加入琼脂制得。作为优选，所述浓缩至浆液中固含量为3-15% (g/100mL)、 或5-10% (g/100mL)、或8% (g/100mL)。作为优选，所述琼脂的加入量为1-5% (g/100mL)， 或 2-4% (g/100mL)、或 3% (g/100mL)。
[0094] 作为优选，所述谷物培养基是将谷物去杂、清洗、研磨后，加水煮沸、过滤，加入琼 脂而得。作为优选，所述琼脂的加入量为1-5% (g/100mL)，或2-4% (g/100mL)、或3% (g/100mL)〇
[0095] 作为优选，所述培养基在使用前需经灭菌处理。
[0096] 作为优选，所述麦芽汁固体培养基适于仅以中药材为发酵基质；当发酵基质中含 有水果时可以选择水果培养基；如果发酵基质中含有谷物类物质时可以选择谷物培养基。 这种原则仅做一般性指导，当发酵基质中碳水化合物和水含量足够用于发酵菌生长时，则 可以使用发酵基质作为培养基。
[0097] (3)制备发酵基质：在灭菌培养基中，加入锁阳原料，优选加入切成适宜大小的片 状、条状或粒状的锁阳原料。作为优选，所述锁阳原料的加入量为培养基的0.3-8% (w/w)、 或1.5% (w/w)、或2.5% (w/w)。进一步优选加入其他中药材粉末，更进一步优选加入谷 物、蔬菜、食用菌、坚果、海底植物等其中的一种或多种。其他中药材或谷物、蔬菜、食用菌、 坚果、海底植物可以粉末形式依据常规用量加入，一般为0-10% (w/w)。
[0098] (4)菌种植入并发酵：将选择的菌种进行扩大培养后，植入所述发酵基质中进行 发酵。作为优选，所述菌种为厌氧菌种、好氧菌种或厌氧与好氧菌种兼用。所述厌氧、好氧 菌种的植入量为发酵基质5-16 % (w/w)，或8-12 % (w/w)、或10 % (w/w)。作为优选，所述 扩大培养包括固体斜面培养、摇瓶培养和/或种子罐培养。作为优选，所述固体斜面培养的 培养基组成包括葡萄糖2-4%、蛋白胨1-3 %、豆粉1-2 %、琼脂2-4%、硫酸镁0. 05-0. 08 %、 磷酸二氢钾〇. 2-0. 3%、氯化钠0. 1-0. 3%。作为优选，所述摇瓶培养的培养基包括葡萄 糖2-3 %，蛋白胨1-4 %，豆粉0. 5-2 %，麸皮0. 5-2 %，硫酸镁0. 01-0. 1 %，磷酸二氢钾 0. 1-0. 4%、磷酸氢二钾0. 1-0. 2%。作为优选，所述摇瓶的转速为200转/min。作为优选， 所述种子罐培养的培养基为牛肉膏0.5% -1.5%、蛋白胨1% -2%、玉米浆0.5% -1.0%、 磷酸二氢钾0.03 % -0.05%、硫酸锌0.02 % -0.07%、氯化镁0.04 % -0.08%，其余为水。
[0099] 作为优选，当选择厌氧菌种时，在厌氧条件下于25-40Γ密封静置培养15-40天， 或发酵温度为28-35°C、30-32°C或31°C，发酵时间为21-35天、25-28天或27天。
[0100] 进一步优选，当选择好氧菌种时，在通气条件下于22-35Γ发酵7-30天，或发酵温 度为25-30°C或28 °C，发酵时间为14-25天或18-22天或20天。所通气体为无菌空气，通 气量为 2. 5-5. OL/min。
[0101] 更进一步优选，所述发酵分阶段进行，第一阶段为好氧发酵，选择好氧菌种，发酵 温度为22-35°C，无菌空气通气量为2. 5-5. OL/min，好氧发酵时间为7-30天；第二阶段转为 厌氧发酵，选择厌氧菌种，关闭通气，控制发酵温度为25-40°C，厌氧发酵时间为15-40天。
[0102] (5)收集培养基，获得本发明锁阳酵素。
[0103] 本发明相对于现有技术具有如下的优点及效果：
[0104] (1)本发明的肉苁蓉与酵素组合，进一步加强了肉苁蓉的功效，使得肉苁蓉的吸收 率显著增加，而且其抗疲劳、抗衰老以及增强免疫力方面效果显著高于肉苁蓉本身。
[0105] (2)本发明的制备工艺简单，制备过程可控，得到的酵素产品质量稳定，可常温保 存，适于规模化生产，具有良好的市场前景；
【具体实施方式】
[0106] 肉苁蓉酵素的制备实施例：
[0107] 实施例1
[0108] (1)取新鲜的肉苁蓉净选后打磨成浆液，低温杀菌处理。<