一种无菌他克莫司纳米混悬滴眼液的制备方法
【技术领域】
[0001] 本发明属于药物制剂技术领域，涉及一种无菌纳米混悬滴眼液的制备方法，具体 涉及无菌他克莫司纳米混悬滴眼液的制备方法。
【背景技术】
[0002] 春季角膜结膜炎（vernal keratoconjunctivitis，VKC)又名春季卡他性结膜炎、 季节性结膜炎，是反复发作的双侧慢性眼表疾病，属变态反应性疾病。VKC主要影响儿童和 年轻的成年人，在春季最为常见。VKC的典型特征为双侧上睑结膜的巨大乳头，最主要的症 状是持续性瘙痒。
[0003] 他克莫司（Tacrolimus, FK506)是一种大环内酯类新型免疫抑制剂，属f丐调蛋白 磷酸酶抑制剂，其免疫抑制作用机制与环孢素 A相似，但抑制T细胞的作用是环孢素 A的 10~100倍。他克莫司在临床上广泛应用于器官移植的抗排斥反应和治疗自身免疫系统疾 病，在眼科领域已用于角膜移植术后与免疫相关眼病的治疗。2008年日本千寿制药株式会 社开发的〇. 1%他克莫司滴眼液在日本获批上市，2013年在中国上市，用于治疗春季卡他性 结膜炎。
[0004] 他克莫司几不溶于水，生物利用度较低，为了提高患者用药顺应性和提高生物利 用度，日本千寿制药株式会社开发的〇. 1%他克莫司滴眼液中的他克莫司以纳米颗粒状态 存在，平均粒径在0. 4~0. 7 μπι范围内。因此从制剂技术角度来看，日本千寿制药株式会社 开发的0. 1%他克莫司滴眼液是无菌的纳米混悬型滴眼液。
[0005] 目前国内生产滴眼液主要采用过滤除菌和无菌分装的方法保证产品无菌，过滤除 菌的滤膜不大于〇. 22 μπι。对于纳米混悬型滴眼液，因滴眼液中的主药或辅料以固体形式存 在，具有一定粒径，且大于〇. 22 μ m，导致产品无法终端过滤除菌，因此开发他克莫司纳米混 悬型滴眼液存在两个难点：（1)如何使他克莫司粒径达到纳米级，且能均匀稳定的分散在 滴眼液基质中。（2)如何做到无菌。
[0006] 在专利CN 104784114 A和CN 104382848 A中分别提到了他克莫司混悬滴眼液的 制备方法，其中专利CN 104784114 A的处方组成中含有有机溶剂，对眼球刺激性较强；专 利CN 104382848 A中采用切向流超滤装置置换溶剂，除去有机溶剂残留，该方法采用的切 向流超滤装置价格昂贵，且该方法需使他克莫司悬浊液保持无菌，无菌操作步骤多，产品做 到无菌难度较大。
【发明内容】
[0007] 本发明需要解决的技术问题是克服现有技术缺陷，制备能均匀稳定的分散的他克 莫司无菌纳米混悬滴眼液，滴眼液中无有机溶剂，简化步骤，降低成本。
[0008] 为解决上述技术问题，本发明所采取的技术方案是： 一种无菌他克莫司纳米混悬滴眼液的制备方法，主要步骤为： 步骤一 a将他克莫司按照一定比例溶解于有机溶剂中，得到有机相；将粒径稳定性辅料按照 一定比例溶解于水中，再加入盐，搅拌得到水相；将有机相滴加至处于搅拌状态下的水相 中，他克莫司析出，得到初级他克莫司纳米混悬液； 所述有机溶剂是指能与水任意比例或一定比例内混溶的有机溶剂，包括乙醇、乙酸 乙酯、甲醇、异丙醇、正丁醇中的一种或几种；所述的粒径稳定性辅料是指具有一定表面 活性或者是溶解后具有一定粘度可以防止纳米颗粒聚集的辅料，包括聚乙烯醇、羟丙甲 纤维素、聚乙二醇、泊洛沙姆、吐温80、卡波姆、聚维酮、黄原胶中的一种或几种；所述的一 定比例为：有机相与水相的体积比为1:1-1:200,他克莫司与粒径稳定性辅料的重量比为 1:0. 5-1:20 ； b采用高压均质或微射流的方法对上步所得初级他克莫司纳米混悬液进行处理，至粒 径符合要求，即粒径D9。小于1. 5 μ m ; 步骤二 步骤一所得他克莫司纳米混悬液经干燥得到他克莫司纳米颗粒与粒径稳定性辅料的 固体混合物； 步骤三 上述固体混合物经灭菌操作得到无菌的他克莫司纳米颗粒； 步骤四 将上述纳米颗粒用灭菌的复溶液复溶、过滤、分装至滴眼瓶得到成品。
[0009] 本发明的进一步改进在于： 步骤二中所述的他克莫司纳米混悬液的干燥方法为真空干燥、烘箱干燥或旋转蒸发。 进一步优选真空干燥。
[0010] 步骤一中所述有机相与水相的体积比为1:2-1:100,他克莫司与粒径稳定性辅料 的重量比为1:1-1:10。进一步优选所述有机相与水相的体积比为1:3-1:20。
[0011] 本发明的进一步改进在于： 步骤一中所述的他克莫司纳米混悬液的浓度为成品中他克莫司浓度的0. 5~100倍；所 述的有机溶剂包括乙醇和乙酸乙酯中的任意一种或两种；所述的粒径稳定性辅料包括聚乙 烯醇、羟丙甲纤维素、聚乙二醇和泊洛沙姆中的一种或几种；所述的盐包括氯化钠、氯化钾、 磷酸二氢钠、磷酸氢二钠、碳酸钠和碳酸氢钠中的一种或几种；所述的的滴加在5分钟内完 成，根据有机相的体积按照在5分钟内滴加完成计算滴加速度；所述他克莫司析出的粒径 D9q小于3 μ m ;所述粒径符合要求，指粒径D 9。小于1 μ m ; 步骤二中真空干燥时温度为20~60°C ;采用真空干燥方法进行干燥/固化时，真空干燥 箱内加入水分吸附剂； 步骤四所述的复溶液由助悬剂、渗透压调节剂、PH调节剂和防腐剂溶解于新鲜制备的 注射水中配制而成。
[0012] 本发明的进一步改进在于： 步骤一中所述的他克莫司纳米混悬液的浓度为成品中他克莫司浓度的2~50倍；所 述的粒径稳定性辅料为聚乙烯醇；所述的盐包括氯化钠、磷酸二氢钠和磷酸氢二钠中的一 种或几种；所述他克莫司析出的粒径D9。小于2 μ m ;所述的粒径符合要求，指粒径D 9。小于 0· 8 μ m ; 步骤二中真空干燥时温度为30~50°C ;采用真空干燥方法进行干燥时，真空干燥箱内加 入吸水硅胶； 本发明的进一步改进在于： 步骤一中所述的他克莫司纳米混悬液的浓度为成品中他克莫司浓度的5~30倍。步骤 四中所述的助悬剂为聚乙烯醇。
[0013] 本发明所制备的无菌他克莫司纳米混悬滴眼液，pH控制范围为4. 3~5. 5 ;渗透压 控制为 285~310m0smol/kg。，粒径控制标准为 D1。彡 0· 5 μ m，D 5。彡 0· 8 μ m，D 9。彡 2. 5 μ m。
[0014] 下面是对本发明的具体描述： 一种无菌他克莫司纳米混悬滴眼液的制备方法，主要步骤为： 步骤一：制备他克莫司纳米混悬液 采用相转移方法制备初级他克莫司纳米混悬液，即先将他克莫司按照一定比例溶解于 有机溶剂中，得到有机相；将粒径稳定性辅料按照一定比例溶解于水中，再加入一定量的 盐，搅拌溶解得到水相。按照计算的滴加速度在控制的时间内将有机相滴加至处于搅拌状 态下的水相中，他克莫司析出，初步得到含有有机相的他克莫司纳米混悬液。采用高压均 质或微射流的方法对含有有机相的他克莫司纳米混悬液进行处理，至粒径符合要求。其中， 他克莫司纳米混悬液的浓度为成品中他克莫司浓度的0. 5~100倍，优选为2~50倍，更优选 为5~30倍。有机溶剂包括乙醇、乙酸乙酯、甲醇、异丙醇、正丁醇中的一种或几种，优选毒 性较小的乙醇和乙酸乙酯中的一种或两种。粒径稳定性辅料包括聚乙烯醇、羟丙甲纤维素、 聚乙二醇、泊洛沙姆、吐温80、卡波姆、聚维酮、黄原胶中的一种或几种，优选聚乙烯醇、羟丙 甲纤维素、聚乙二醇和泊洛沙姆中的一种或几种，最优选为聚乙烯醇。他克莫司与粒径稳定 性辅料的重量比优选为1:0. 5-1:20,更优选为1:1-1:10。盐包括氯化钠、氯化钾、磷酸二 氢钠、磷酸氢二钠、碳酸钠和碳酸氢钠中的一种或几种，优选氯化钠、磷酸二氢钠和磷酸氢 二钠中的一种或几种。采用相转移方法制备初级他克莫司纳米混悬液，有机相与水相的体 积比为1:1-1:200,优选为1:2-1:100,最优选为1:3-1:20。计算的滴加速度，是根据有机 相的体积按照在5分钟内滴加完成，计算而得。有机相滴加至处于搅拌状态下的水相中， 他克莫司析出，粒径D 9。小于3 μ m，优选粒径D 9。小于2 μ m。