所述的高压均质方法压力优选 500bar_2000bar，更优选为500bar_1500bar。米用高压均质的方法对含有机相的他克莫司 纳米混悬液进行处理，优选粒径D 9。小于1 μ m，更优选粒径D 9。小于0. 8 μ m。
[0015] 步骤二：他克莫司纳米混悬液的干燥/固化： 将步骤一中粒径符合要求的他克莫司纳米混悬液进行干燥/固化，得到他克莫司纳米 颗粒与粒径稳定性辅料的固体混合物，检测有机溶剂残留，合格后进行下步操作。他克莫司 纳米混悬液的干燥/固化方法包括真空干燥、烘箱干燥或旋转蒸发，优选真空干燥方法。其 中，真空干燥时优选的温度为20~60°C，最优选为30~50°C，真空度优选为-0.1 MPa。
[0016] 步骤三：灭菌： 将步骤二中得到的他克莫司纳米颗粒与粒径稳定性辅料的固体混合物进行灭菌处 理，得到无菌的固体混合物。灭菌处理方法优选辐照灭菌，其中，辐照灭菌剂量优选为 lkGy~10kGy，更优选为 2kGy~5kGy。
[0017] 步骤四： a复溶： 在滴眼液车间将助悬剂、渗透压调节剂、pH调节剂和防腐剂溶解于新鲜制备的注射水 中，配制复溶液，进行除菌操作，得到无菌的复溶液。按照处方比例，采用无菌的复溶液溶解 步骤三中的无菌固体混合物，得到无菌他克莫司纳米混悬滴眼液。其中，助悬剂包括聚乙烯 醇、羟丙甲纤维素、聚乙二醇、泊洛沙姆、吐温80、卡波姆、聚维酮、黄原胶中的一种或几种， 优选聚乙烯醇、羟丙甲纤维素、聚乙二醇和泊洛沙姆中的一种或几种，最优选为聚乙烯醇。 渗透压调节剂包括氯化钠、甘露醇、甘油、硼砂中的一种或几种，优选氯化钠和甘露醇中的 一种或两种。PH调节剂包括氢氧化钠、盐酸、磷酸、磷酸二氢钠、磷酸氢二钠、碳酸钠、碳酸氢 钠中的一种或几种，优选盐酸、磷酸二氢钠和磷酸氢二钠中的一种或几种。防腐剂包括季铵 盐类、尼泊金类、苯甲酸及其钠盐中的一种或几种，优选季铵盐类防腐剂中的苯扎溴铵、苯 扎氯铵中的一种或两种。除菌操作优选过滤除菌，滤膜孔径优选0. 22 μπι。
[0018] b 过滤： 采用经热压灭菌处理的过滤装置在滴眼液车间，对复溶得到的无菌他克莫司纳米混 悬滴眼液进行过滤操作，去除工艺过程中可能引入的大粒径异物。其中，滤膜孔径优选为 2~5 μ m，最优选为3 μ m。
[0019] c 分装： 将过滤后的无菌他克莫司纳米混悬滴眼液在滴眼液车间百级层流下分装至滴眼液瓶 中。滴眼液瓶材质为低密度聚乙烯，装量为5ml/瓶。制备的无菌他克莫司纳米混悬滴眼液， pH控制范围为4. 3~5· 5,渗透压控制为285~310m0smol/kg，粒径控制标准为D1。彡0· 5 μ m， D50< 0· 8 μ m，D 90< 2· 5 μ m。
[0020] 本发明的设计原理为：先采用相转移和高压均质方法制备他克莫司纳米混悬液； 再通过干燥、固化技术去除他克莫司纳米混悬液中的有机溶剂，并使他克莫司纳米颗粒稳 定化；经灭菌操作得到无菌的他克莫司纳米颗粒；最后再经无菌复溶、分装操作得到成品。
[0021] 本品采用干燥/固化技术制备他克莫司纳米颗粒，此步骤既能去除有机溶剂，又 能实现他克莫司纳米颗粒的均匀分散，便于灭菌。经查国内外尚无采用此方法制备纳米颗 粒的相关报道，通常认为干燥/固化后易形成聚集体，因此不适合采用干燥/固化技术制备 纳米颗粒。本发明采用干燥/固化技术能制备稳定均匀地分散的他克莫司纳米颗粒，据推 测可能是因为他克莫司不溶于水，而盐溶于水，干燥/固化时盐的析出起到分散他克莫司 颗粒的作用，其后复溶时即能形成均匀分散的他克莫司纳米颗粒混悬液。此技术可以有效 降低他克莫司纳米颗粒的表面能量，复溶后无聚集现象，粒径分布优良。同时非常重要的是 干燥/固化过程有效去除了有机溶剂。
[0022] 本发明的步骤一中有机相、具有粒径稳定性作用的辅料是重要的处方组成，通过 对上述两者的加入量的选择能更好地控制所制备的初级他克莫司纳米混悬液的粒径，本步 骤最优选粒径D 9。小于0. 8 μ m。
[0023] 由于采用了上述技术方案，本发明取得的技术进步在于： (1)本发明采用的他克莫司纳米颗粒干燥/固化技术，方法简单，采用普通的真空干燥 箱或烤箱即能完成，不需特殊设备，最后即能得到不含有机溶剂的、均匀分散的他克莫司无 菌纳米滴眼液。
[0024] (2)本发明提供的他克莫司纳米混悬液的制备方法，包含了对固体他克莫司纳米 颗粒的灭菌步骤，相比现有技术中对他克莫司溶液的灭菌处理，能显著减少整体工艺中无 菌操作步骤或缩短无菌操作过程，制备工艺与普通混悬液一致，不需对滴眼液车间进行改 造，降低了产品投入。采用的灭菌方法在制剂中常用，成本低廉，固体的他克莫司纳米颗粒 经辐照灭菌后含量和杂质无变化，无菌合格。
[0025] (3)采用本发明制备的产品无菌合格，产品质量与原研产品一致；40°C，RH75%条 件加速6个月后，本发明制备的产品无菌合格，粒径及分布、有关物质等指标均与原研产品 一致。
【附图说明】
[0026] 图1.原研样品的粒径分布图(稀释倍数50倍） 图2.实施例1制备样品的粒径分布图(稀释倍数50倍） 图3.实施例2制备样品的粒径分布图(稀释倍数50倍） 图4.对照例制备样品的粒径分布图(稀释倍数50倍)。
【具体实施方式】
[0027] 现在在下列实施例中描述本发明，这些实施例仅仅用于说明本发明，而不对保护 范围造成限制。
[0028] 下列实施例中所用原料和辅料，除特别说明外，均为普通市售原料和市售辅 料。所用高压均质机，厂家：GEA Niro Soavi，型号：NS001L2K。所用粒度分析仪，厂家： BR00KHAVEN，型号：90Plus。
[0029] 0. 1% (0. lg/100ml，即lmg/ml)无菌他克莫司纳米混悬滴眼液的处方、组成及制备 工艺过程： 实施例1 1、处方组成 表1实施例1无菌他克莫司纳米混悬滴眼液制备中的处方组成
混悬液中他克莫司浓度为成品中约10倍，有机溶剂(无水乙醇)与水相的体积比为15 : 100,他克莫司与粒径稳定性辅料聚乙烯醇的重量比为I :1. 6。
[0030] 2、制备工艺： (1)制备他克莫司纳米混悬液 称取处方量的他克莫司原料，加入有机溶剂(本例为无水乙醇）中，搅拌溶解，作为有机 相。称取处方量的稳定性辅料(本例为聚乙烯醇)加入水中，搅拌溶解(可用40~60°c的水浴 对水相进行加热，利于聚乙烯醇快速溶解)，作为水相。将有机相在5min内以恒定速度加至 搅拌的水相中，继续搅拌l〇min，得到初级他克莫司纳米混悬液。将此混悬液置于高压均质 机内，进行均质操作，先用1000 bar均质5次，再用1300bar均质5~10次，检测粒径平均值 和D 9。，符合规定后出料，即得含有机相的他克莫司纳米混悬液。
[0031] (2)他克莫司纳米混悬液的干燥/固化 将（1)中得到的含有机相的他克莫司纳米混悬液转移至玻璃表面皿内，置于含有活化 的吸水硅胶的真空干燥箱中，进行干燥/固化，温度控制为40±5°C，真空度为-0.1 MPa，干 燥/固化完全后，将他克莫司纳米颗粒取出，置于双铝包装袋内，密封。
[0032] (3)辐射灭菌 将（2)中密封好的他克莫司纳米颗粒，进行辐照灭菌，总照度为：2~5 kGy，得到无菌的 他克莫司纳米颗粒。
[0033] (4)复溶 按照复溶溶液的处方组成，称取处方量的各辅料加入新鲜制备的注射水中，搅拌至完 全溶解，用lmol/L盐酸溶液调节pH至4. 3~5. 5,过0. 22 μ m膜除菌，作为复溶溶液。称取 处方量的中间体1，加入至复溶溶液中，搅拌至完全溶解。
[0034] (5)过滤 将（4)中制得的样品，过3 μπι膜，去除可见异物，过滤装置用前进行热压灭菌，保证无 菌操作。
[0035] (6)分装 将（5)中过滤后的样品在滴眼液车间百级层流下分装至低密度聚乙烯滴眼液瓶中， 5ml