一种沙棘籽油的制备方法
【技术领域】
[0001] 本发明属于医药技术领域，特别是涉及一种不含有邻苯二甲酸酯类物质沙棘籽油 的口服营养乳剂及其制备方法。
【背景技术】
[0002] 沙棘籽油是从沙棘种子中提取的一种植物油，因富含多种脂肪酸，使其成为营养 价值较高的药用植物油。沙棘籽油为一种棕黄色到棕红色透明油状液体，集沙棘有效成分 为一体的高度浓缩物。内含黄酮、有机酸、生物碱、留醇类、三萜烯类及各种维生素等140多 种生物活性成分。主要制备方法包括：超临界二氧化碳萃取技术，亚临界低温萃取技术等。
[0003] 沙棘籽油的粗产品酸值高、过氧化值高、色泽深、气味浓，进一步精制后，可以去除 沙棘籽油的游离脂肪酸、色素、热原、脂肪烃、脂肪醇类等杂质，降低原油的酸值、过氧化值， 使其可以用于注射，但是用现有技术精制的沙棘籽油中对邻苯二甲酸酯类成分没有有效的 控制，导致一系列的质量问题。
[0004] 邻苯二甲酸酯类指邻苯二甲酸的酯化衍生物，是一类环境激素，对肝、肾、肺以及 心脏、生殖系统均有损害。邻苯二甲酸酯类在人体和动物体内发挥着类似雌性激素的作用， 对生殖系统有一定损害，甚至影响胚胎发育，表现出生殖发育毒性，损害严重时可导致细胞 突变，最终致畸和致癌。1982年，美国国家癌症研究所对邻苯二甲酸正二辛酯（D0P)、邻苯 二甲酸（2-乙基己基）酯（DEHP)的致癌性进行了生物鉴定，认为D0P和DEHP是大鼠和小鼠 的致癌物，能使啮类动物的肝脏致癌。国际癌症研究所（IARC)根据DEHP为过氧化物酶体 增殖剂，已将其列为人类可疑的促癌剂，美国环保署（EPA)也将DEHP列为B2类致癌物质。 欧洲化学品管理署已明确把邻苯二甲酸二丁酯（DBP)、邻苯二甲酸丁基苄基酯（BBP)两种 邻苯二甲酸酯类物质列入高关注物质（SVHC)来管理，其定性标准是该类物质具有高的生 殖毒性（第2类），研究表明，邻苯二甲酸酯类增塑剂是一种具有生殖毒性和发育毒性的环 境雌激素，可通过消化系统、呼吸系统及皮肤接触等途径进入人体。最近，越来越多的权威 科学家和国际研究小组已认定，过去几十年来男性精子数量持续减少、生育能力下降与吸 收越来越多的邻苯二甲酸酯有关。欧盟一科研小组研究表明，DEHP可能引起磷酸戊糖旁路 代谢，加速引起睾丸内还原型酰胺腺嘌啉二核苷酸磷酸（NADPH)缺乏，导致睾酮合成障碍， 从而影响生精过程的正常进行。另外，DEHP主要通过影响胎盘脂质及锌代谢影响胚胎发育， 研究发现，邻苯二甲酸正二丁酯（DBP)的代谢产物MBP对大鼠具有胚胎毒作用，导致胚胎生 长缓慢。
[0005] 在沙棘的果实、籽油中含有一定量的邻苯二甲酸酯类化合物，可在生产加工时随 籽油的提取而被提取。有人利用超临界αν流体对沙棘子进行萃取，并采用气相色谱-质 谱联用仪对提取物的化学成分进行分析，共鉴定出61种化合物，其中第五类化合物是基峰 为m/zl49、相对分子质量分别为362(C22H3404)和418(C 26H4204)的两组邻苯二甲酸的酯类化 合物，前者有17个同分异构体，后者有5个同分异构体化合物（《药物分析杂志》Chin J Pharm Anal 2009, 29 (2)《超临界流体萃取沙棘籽化学成分的气相色谱-质谱分析》）。
[0006] 中国专利201410419523. X公开了一种分离沙棘籽油中邻苯二甲酸酯类物质的方 法。但该方法仅去除了沙棘籽油中邻苯二甲酸二丁酯（DBP)，并未对其他的邻苯二甲酸酯类 物质，如邻苯二甲酸二（2-乙基）己酯（DEHP)、邻苯二甲酸二异丁酯（DINP)的去除进行描 述。
[0007] 本发明对现有技术进行了研究，发现尚无一种方法可以全部去除邻苯二甲酸酯类 物质，为此，本发明人针对这一情况对去除沙棘籽油中邻苯二甲酸酯类物质的方法进行了 研究，终于找到了一种方法，该方法通过无水乙醇萃取与活性炭吸附相结合方法，得到一种 不含有邻苯二甲酸酯类物质的沙棘籽油，并进一步将其制备成口服营养乳剂，制备出一种 能力补充，营养补充，促进体力恢复，提高抗病能力，增强免疫功能，减少并发症，且无生殖 毒性的药物及保健品制剂。
【发明内容】
[0008] 本发明提供一种不含有邻苯二甲酸酯类物质的沙棘籽油，制备方法及其医药用 途。本发明提供的制备方法，得到的沙棘籽油中邻苯二甲酸酯类物质含量为零。
[0009] 本发明的另一个目的是提供一种含有本发明方法制备的沙棘籽油的口服营养乳 剂。
[0010] 为了达到上述目的本发明是这样实现的：本发明提供一种沙棘籽油的制备方法， 所述方法，步骤如下：
[0011] 步骤（1)沙棘籽油的提取：
[0012] 采用超临界αν法萃法提取沙棘籽油，得到粗提取；
[0013] 步骤（2)酸化-水化联合脱胶：
[0014] 将步骤⑴得到的沙棘籽油粗提取，用酸，碱溶液处理除去油中磷脂，得到清油 液；
[0015] 步骤（3)脱酸：
[0016] 采用分子蒸馏技术对步骤（2)的清油液进行脱酸，得到脱酸油液；
[0017] 步骤（4)萃取：
[0018] 用无水乙醇萃取步骤（3)的脱酸油液，再采用真空蒸馏的方法除去沙棘籽油中残 留的无水乙醇；
[0019] 步骤（5)吸附：
[0020] 加入活性炭，强烈搅拌吸附有色杂质，过滤滤除活性炭；
[0021] 步骤（6)脱臭
[0022] 先将步骤（5)得到的脱色后的沙棘籽油通入水蒸气进行减压蒸馏脱臭；
[0023] 步骤（7)冷却处理
[0024] 将减压蒸馏脱臭的沙棘籽油真空脱水充氮气密封，冷藏后低温过滤，除去结晶物 和絮状物，即得。
[0025] 优选的，本发明的沙棘籽油的制备方法，步骤如下：
[0026] 步骤⑴沙棘籽油的粗提取：
[0027] 采用超临界C(V法萃取沙棘籽油，称取一定量的沙棘籽，粉碎，过20目筛，装入萃 取罐中，萃取压力20~30MPa、萃取温度40°C~55°C、萃取时间1. 5~2. 5h。步骤（2)酸 化-水化联合脱胶：
[0028] 将步骤⑴得到的沙棘籽油加热至55°C~65°C，加入0. 5%~1. 0% (v/w)的60% 磷酸，l〇〇rpm搅拌20min，调节转速20rpm，加入油重0· 6%~1. 0% (v/w)浓度为0· 1 %~ 0. 15%的K0H溶液，反应20min，补加纯化水，自然冷却至室温，静置5h后，将沙棘籽油预热 至70°C，7000~8000rpm离心10min，除去毛油中磷脂，取上清油液。
[0029] 步骤⑶脱酸：
[0030] 采用分子蒸馏技术对步骤（2)中脱胶的沙棘籽油进行脱酸。将沙棘籽油加入蒸发 器中，按照如下参数进行分子蒸馏。导热循环温度：150°C~160°C，柱温：140°C~150°C，转 速：400rpm，真空度：4· 5~5. 5Pa，冷凝温度：15°C~20°C，热水温度：50°C~60°C，阀加热 温度：50°C。
[0031] 步骤⑷萃取：
[0032] 按照无水乙醇和沙棘籽油1:5的比例，将无水乙醇加入沙棘籽油，在室温条件下， 搅拌lh，2000rpm离心10min ;取下层沙棘籽油，按照无水乙醇和沙棘籽油1:8的比例，在 50°C~60°C条件下，搅拌lh，2000rpm离心10min ;取下层沙棘籽油，按照无水乙醇和沙棘籽 油1:10的比例，在50°C~60°C条件下，搅拌lh，2000rpm离心10min ;进一步采用真空蒸馏 的方法除去下层沙棘籽油中残留的无水乙醇，真空蒸馏采用真空度为-600~-400mmHg，蒸 馏温度为50°C~60°C。步骤（5)吸附：
[0033] 在60°C条件下，加入油重量的1 %~2%活性炭，强烈搅拌2h，过滤滤除活性炭。
[0034] 步骤（6)脱臭
[0035] 先将步骤（5)脱色后的沙棘籽油放入减压蒸馏中的圆底烧瓶中，减压真空加热到 110°C，通入水蒸气至脱臭温度200°C，持续4h，减压真空状态下降温至100°C，停水蒸气，继 续减压真空下降温至50°C，破真空将油倒出，真空脱水后充氮保护。
[0036] 步骤（7)冷却处理
[0037] 将蒸馏脱水后的沙棘籽油真空脱水充氮气密封，置于4°C ±2°C环境中并保持大 于一周。然后，在4°C ±2°C环境中进行低温过滤，除去结晶物和絮状物，即得。
[0038] 经过检测，用以上方法得到的沙棘籽油中邻苯二甲酸酯类物质含量为零，不饱和 脂肪酸（其中ω-3: ω-6比例接近1:2)、总黄酮、维生素含量等占总油含量的98%以上。
[0039] 其中，邻苯二甲酸酯类物质的检测方法采用气相色谱-质谱联用的方法，该方法 的主要步骤和色谱条件如下：
[0040] 称取所制备的沙棘籽油0. 50g(精确至0. lmg