白藜芦醇基荜茇酰胺类似物在医药中的用图
【技术领域】
[0001] 本发明涉及白藜芦醇基荜茇酰胺类似物在医药中的用途，特别涉及白藜芦醇基荜 茇酰胺类似物在治疗恶性肿瘤中的应用。
【背景技术】
[0002] 恶性肿瘤是危害人类健康的重大疾病，已为我国居民死因的第一位。化学治疗目 前仍是许多恶性肿瘤治疗的主要手段，但肿瘤细胞对化疗药物的耐受，包括原发性耐药和 获得性耐药，一直是临床上困扰和制约恶性肿瘤化学治疗的首要问题。因而，探寻具有高效 抗癌活性的创新药物刻不容缓。近年来，天然产物及其衍生物已成为抗癌创新药物的重要 来源。通过对天然产物的结构修饰发展I类新药，无论是对于解决药物来源，实现药物的工 业化生产，还是对于资源和环境保护都具有重要意义。
[0003] 荜茇酰胺（piperlongumine)是从荜茇中分离到的主要有效成分之一，属生物碱 类似物。随着对其研究的深入，发现它具有抗血小板凝集、镇痛、抗真菌、抗血吸虫、抗焦虑 以及抗抑郁等诸多药理活性。尤其是它对多种肿瘤细胞表现出显着的细胞毒作用，而在相 同浓度下对正常细胞的毒性非常小，是一种极具潜力的具有选择毒力的抗肿瘤中药单体 (Rajetal.，2011，Nature475:231-234)。该化合物在国外的研究文献呈增多趋势，逐渐 成为该领域的研究热点之一。
[0004] 白藜芦醇（resveratrol)是一种具有生物活性的非黄酮多酚物质，被认为是一种 植物抗毒素，广泛存在于葡萄、花生、虎杖等天然植物中。研究发现，白黎芦醇具有显著的 抗白细胞突变、抗真菌、抗脂质过氧化、抑制血小板聚集、抗冠状动脉扩张和抗肿瘤作用等。 在抗肿瘤方面白藜芦醇被喻为继紫杉醇之后的又一新的绿色抗癌药物。大量研究表明白藜 芦醇类似物具有与白藜芦醇相似的药理活性，其中有些化合物的活性要强于白藜芦醇，且 选择性和稳定性也好于白藜芦醇。
[0005] 到目前为此，还未见白藜芦醇基荜茇酰胺类似物在医药中的应用。
【发明内容】
[0006] 本发明的目的在于提供一类白藜芦醇基荜茇酰胺类似物的用途，即在医药中的用 途，为治疗恶性肿瘤提供新药物。
[0007] 所述的白藜芦醇基荜茇酰胺类似物是指具有以下通式（I)所示的化合物：
其中， 札为氢原子、羟基、甲基、甲氧基、乙氧基、氟原子、氯原子、溴原子、三氟甲氧基； 私为氢原子、羟基、甲基、甲氧基、乙氧基、氟原子、氯原子、溴原子、三氟甲氧基。
[0008] 进一步地，本发明提供了白藜芦醇基荜茇酰胺类似物在医药中的用途。
[0009] 进一步地，所述用途是治疗恶性肿瘤的用途。
[0010] 进一步的所述的恶性肿瘤，其为皮肤癌、肝癌、食道癌、胃癌、血癌、卵巢癌、前列腺 癌、肺癌、结肠直肠癌、胰腺癌、乳腺癌或肾癌中的一种。
[0011] 发明人对白藜芦醇基荜茇酰胺类似物对多种恶性肿瘤细胞的活性进行了深入研 究，实验结果发现该类似物能够抑制多种恶性肿瘤细胞。这为把该类似物开发成为一种新 的抗肿瘤药物提供了一种新的思路。
[0012] 以下通过【具体实施方式】，对本发明的上述内容再作进一步的详细说明。但不应将 此理解为是对本发明的限制。 【具体实施方式】
[0013] 实施例1 :化合物BLBB-1 的制备 合成路线如下：
中间体1的合成路线见参考文献（511〇11]_丨3〇?6即6七31，1]^(1.〇16111.2015，58，5242 - 5255)。
[0014] 中间体2的合成路线见参考文献(刘文虎等，药学学报，2014，49 (2): 217 -224)〇
[0015] 中间体3的合成路线见参考文献(侯建等，中国医药工业杂志，2008,39，1，1-8)。
[0016] 化合物BLBB-1的合成路线如文献(侯建等，中国医药工业杂志，2008, 39,1，1-8) 所示：
在冰浴下将中间体3 10mmol溶于10mlDMF中，加入NaOCH3 10mmol并剧烈搅拌， 随后滴入中间体2 10mmol，室温反应10h。随后倒入冰水中，乙酸乙酯萃取、饱和食盐水 洗涤、分液、干燥、浓缩，得到粗品中间体4,直接进行下一步反应。
[0017] 将中间体4 10mmol和P比啶盐酸盐10mmol在150°C下搅拌反应1h，倒入冰水 中，抽滤、洗涤、干燥、重结晶，得到化合物BLBB-1，产率55%。
[0018]4匪R(400MHz,DMS0)：δ9. 48 (s, 1H), 9. 12 (s, 1H) , 7. 91 (d,J=15.6 Hz, 1H), 7.62-7.56 (m, 2H), 7. 38 (d,J= 8. 4Hz,2H),7. 36 (d,J= 15.6Hz, 1H), 6. 94(d,J= 16.4Hz, 1H) ,6. 92-6. 90 (m, 3H), 6. 80 (d,J= 16. 4Ηζ,ΙΗ), 6. 50 (d,J =2. 0Hz, 2H), 6. 23(t,J= 2. 4Hz, 1H), 6. 03 (t,J= 9. 6Hz, 1H), 4. 02 (t,J= 6. 4 Hz，2H)，2.46 (m，2H)〇
[0019]MS_ESI(m/z) :361. 13。
[0020] 实施例2:化合物BLBB-2 合成路线如化合物BLBB-1。
[0021] 4 匪R(400MHz,DMS0) :δ9. 50(s，1H)，9. 14(s，1H)，7· 92(d，J= 15. 6 Hz，lH)，7.34 (d，J= 15.6Hz，lH)，6.94(d，J= 16.4Ηζ，1Η)，6·92-6·90 (m，3H)， 6. 82(d,J= 16.4Ηζ,ΙΗ), 6. 52 (d,J= 2. 0Hz, 2H), 6. 21(t,J= 2.4Hz,lH),6. 01 (t，J= 9· 6Hz, 1H)，4· 00 (t，J= 6· 4Hz, 2H)，3· 88 (s，6H)，2· 44 (m，2H)〇
[0022] MS_ESI(m/z) :421. 15。
[0023] 实施例3:化合物BLBB-3
合成路线如化合物BLBB-1。
[0024] 4匪R (400 MHz, DMSO)： δ 9. 52 (s, 1H), 9. 12 (s, 1H) , 7. 90 (d, J = 15.6 Hz, 1H), 7.36 (d, J = 15. 6 Hz, 1H), 6.98 (d, J = 16. 4 Hz, 1H),6. 94-6. 92 (m, 3H), 6. 80(d, J = 16.4 Ηζ,ΙΗ), 6. 54(d, J = 2. 0 Hz, 2H),6. 22(t, J = 2.4 Hz,lH),6. 03 (t, J=9. 6 Hz, 1H)，4. 00 (t, J=6. 4 Hz, 2H)，2. 42(m,2H)。
[0025]MS_ESI(m/z) :397. 11。
[0026] 实施例4:化合物BLBB-4 合成路线如化合物BLBB-1。
[0027] 4匪R(400 MHz, DMSO)：δ 9. 52 (s, 1H),9. 16 (s, 1H),7. 94 (d, J = 15.6 Hz, 1H), 7.32 (d, J = 15.6 Hz, 1H), 6. 92 (d, J = 16.4 Hz, 1H),6. 90-6. 88 (m, 3H), 6. 84(d, J = 16. 4 Ηζ,ΙΗ), 6. 50 (d, J = 2. 0 Hz, 2H),6. 20(t, J = 2.4 Ηζ,ΙΗ), 6.00 (t, J=9. 6 Hz, 1H)，4. 02 (t, J=6. 4 Hz, 2H)，2. 42(m,2H)，2. 32 (s, 6H)。
[0028]MS_ESI(m/z) :389. 16。
[0029] 实施例5 :本发明化合物的抗肿瘤活性试验 对本发明的化合物进行了肿瘤细胞增殖抑制试验，试验方法采用常规的MTT法（如吕 秋军主编《新药药理学研究方法》，2007:242-243)。
[0030]RPMI-1640,DMEM、胎牛血清、膜酶等购自GibcoBRL公司（Invitrogen Corporation,USA),溴化噻唑蓝四唑（MTT)、二甲亚研^(DMSO)为Sigma公司（USA)产品。 2_甲酰胺基噻吩并吡啶衍生物购买自Specs公司（荷兰），为化学标准品，体外实验时用 DMS0配制成20mg/mL储存液，置4°C冰箱避光保存备用，临用时用完全培养液稀释至所需浓 度。
[0031] 细胞株选用人肺癌细胞株(A549)、人乳腺癌细胞株（MCF-7)、人结肠癌细胞株 (HCT-116)和人肝癌细胞株（HepG2)，均购于美国ATCC公司。
[0032] 人肺癌细胞株（A549)、人乳腺癌细胞株（(MCF-7)和人结肠癌细胞株（HCT-116) 用含10%胎牛血清、l〇〇U/mL青霉素、100yg/mL链霉素的RPMI-1640完全培养基、5% C02, 37°C培养。
[0033] 人肝癌细胞株〇fepG2)用含10%胎牛血清、lOOU/mL青霉素、100yg/mL链霉素的 DMEM完全培养基、5 %C02,37°C培养。
[0034] MTT法：用完全培养液调整细胞浓度为1-2X104/mL，接种于96孔板，每孔200 μL，培养过夜，次日分别用不同剂量的2-甲酰胺基噻吩并吡啶衍生物（终浓度分别为20、 5、1. 25、0. 31g/ml)处理细胞，同时设不含药物的阴性对照组和等体积的溶剂对照组，DMS0 浓度为〇. 1%，每个剂量组设5个复孔，37°C，5 %C02培养。培养48h后，每孔加入5mg/ mLMTT试剂20μL，继续培养2-4h，弃上清，再加DMS0150μL，振荡混匀15min，用酶标仪 (λ=570ηπι)测定吸光度（A)值（A值与活细胞数成正比），取其平均值。
[0035] 相对细胞增殖抑制率（%) = (对照组抑制率-实验组抑制率）/对照组抑制 率X100%。实验至少重复3次。实验数据用均数土标准差表示，采用SPSS13. 0统计软件 处理。计量资料采用t检验，P〈0. 05为差异有统计学意义。（这里的对照组是指溶剂对照 组，溶剂对照组无细胞增殖抑制作用，故未特别列出） 实验结果见表1。其中，化合物是指相应实施例中制备的白藜芦醇基荜茇酰胺类似物 (例如实施例1中的化合物BLBB-1)。
[0036] 表1化合物对4种肿瘤细胞的IC5。（μM)值
从表1可以看出，含有白藜芦醇药效团的荜茇酰胺类化合物具有良好的抗肿瘤活性， 多个化合物高于现有抗肿瘤化合物荜茇酰胺。
【主权项】
1. 白襲芦醇基孽菱酷胺类似物在医药中的用途，其特征在于所述的白襲芦醇基孽菱酷 胺类似物是指具有W下通式（I)所示的化合物：其中， Ri为氨原子、径基、甲基、甲氧基、乙氧基、氣原子、氯原子、漠原子、Ξ氣甲氧基； R2为氨原子、径基、甲基、甲氧基、乙氧基、氣原子、氯原子、漠原子、Ξ氣甲氧基。2. 根据权利要求1所述的用途，其特征在于所述在医药中的用途是治疗恶性肿瘤的用 途。3.根据权利要求2所述的恶性肿瘤，其为皮肤癌、肝癌、食道癌、胃癌、血癌、卵巢癌、前 列腺癌、肺癌、结肠直肠癌、膜腺癌、乳腺癌或肾癌中的一种。
【专利摘要】本发明提供一类含白藜芦醇基荜茇酰胺类似物在医药中的用途。本发明的白藜芦醇基荜茇酰胺类似物结构如图(I)所示，是通过大量活性筛选的基础上得到，具有良好抗肿瘤活性，为抗肿瘤药物的开发和应用提供了一种新的选择。
【IPC分类】C07D211/86, A61K31/4412, A61P35/00
【公开号】CN105311028
【申请号】CN201510761316
【发明人】金加明
【申请人】成都格瑞赛斯科技有限公司
【公开日】2016年2月10日
【申请日】2015年11月10日