中的有机溶剂，最终经冷冻干燥、粉碎机适度粉碎，剂量为6KGy/h6°Co所产生的γ射线消毒灭菌，成型包装，得到基于胶原聚集体的絮状抗菌止血材料的最终成品。
[0010]实施例2
(1)基于胶原聚集体的絮状型抗菌止血材料原液的制备:将20体积份的0.lmg/mL的硝酸银溶液缓慢加入到80体积份的0.lmg/ml氧化度为45%双醛羧甲基纤维素钠溶液，接着使用醋酸调节反应混合液pH至4，然后在55 °C恒温水浴锅中缓慢搅拌反应18h，得到混合液A ;待反应完成后，将混合液A室温下降至常温，再使用醋酸溶液调节混合液pH至4，接着取6重量份的胶原聚集体，8°C下搅拌将其溶胀于上述混合液A中，待胶原聚集体充分溶胀后，继续持续搅拌20h，得到混合液B ;最后取6重量份的聚乙烯吡咯烷酮，8°C下缓慢搅拌加入到混合液B中，待聚乙烯吡咯烷酮充分溶解后，得到混合液C ;
(2)基于胶原聚集体的絮状型抗菌止血材料的制备:向混合液C中缓慢加入纯乙醇，使得乙醇的最终体积分数为30%，静置12min后，接着补加乙醇，使得乙醇的最终体积分数为50%，静置12min后，继续补加乙醇，使得乙醇的最终体积分数为70%，静置12min后，将混合液C在8000rpm下离心12min，除去上清液，将沉淀物磁力搅拌分散在体积分数为90%的乙醇溶液中，静置12min后，在8000rpm离心8min，除去上清液，将沉淀物磁力搅拌分散在乙醇中，静置12min后，加入有机脱醇剂进行梯度脱醇，分别使用最终体积分数为30%、50%、70%、90%的有机脱醇剂分别脱醇12 min, 100%脱醇剂脱醇2次，每次12min，最后在5000?lOOOOrpm离心12min，回收上清液，将沉淀物放置于真空干燥箱中，室温下干燥36h，得到基于胶原聚集体的絮状型抗菌止血材料中间产品；将上述基于胶原聚集体的絮状型抗菌止血材料中间产品先后浸渍在生理盐水和PBS缓冲液中，以进一步除去残留在止血材料中的有机溶剂，最终经冷冻干燥、粉碎机适度粉碎，剂量为20KGy/h6°Co所产生的γ射线消毒灭菌，成型包装，得到基于胶原聚集体的絮状型抗菌止血材料的最终成品。
[0011]实施例3
(1)基于胶原聚集体的絮状型抗菌止血材料原液的制备:将100体积份的0.lmg/mL的硝酸银溶液缓慢加入到400体积份的0.lmg/ml氧化度为50%双醛羧甲基纤维素钠溶液，接着使用醋酸调节反应混合液pH至5，然后在70°C恒温水浴锅中缓慢搅拌反应20h，得到混合液A ;待反应完成后，将混合液A室温下降至常温，再使用醋酸溶液调节混合液pH至4.5，接着取20重量份的胶原聚集体，10°C下搅拌将其溶胀于上述混合液A中，待胶原聚集体充分溶胀后，继续持续搅拌24h，得到混合液B ;最后取20重量份的聚乙烯吡咯烷酮，10°C下缓慢搅拌加入到混合液B中，待聚乙烯吡咯烷酮充分溶解后，得到混合液C ;
(2)基于胶原聚集体的絮状型抗菌止血材料的制备:向混合液C中缓慢加入纯乙醇，使得乙醇的最终体积分数为30%，静置15min后，接着补加乙醇，使得乙醇的最终体积分数为50%，静置15min后，继续补加乙醇，使得乙醇的最终体积分数为70%，静置15min后，将混合液C在lOOOOrpm下离心20min，除去上清液，将沉淀物磁力搅拌分散在体积分数为90%的乙醇溶液中，静置15min后，在lOOOOrpm离心lOmin，除去上清液，将沉淀物磁力搅拌分散在乙醇中，静置10?15min后，加入有机脱醇剂进行梯度脱醇，分别使用最终体积分数为30%、50%、70%、90%的有机脱醇剂分别脱醇15 min，100%脱醇剂脱醇2次，每次15min，最后在lOOOOrpm离心15min，回收上清液，将沉淀物放置于真空干燥箱中，室温下干燥48h，得到基于胶原聚集体的絮状型抗菌止血材料中间产品；将上述基于胶原聚集体的絮状型抗菌止血材料中间产品先后浸渍在生理盐水和PBS缓冲液中，以进一步除去残留在止血材料中的有机溶剂，最终经冷冻干燥、粉碎机适度粉碎，剂量为30KGy/h6°Co所产生的γ射线消毒灭菌，成型包装，得到基于胶原聚集体的絮状型抗菌止血材料的最终成品。
【主权项】
1.基于胶原聚集体的絮状抗菌止血材料，主要包含有胶原聚集体、双醛羧甲基纤维素钠、纳米银与聚乙烯吡咯烷酮四种基料，其关键性能指标如下: 外观:黄色或棕黄色絮状物； 纳米银粒径:10?50nm ； 重金属含量:彡10 μ g/g(m/m)； 细胞毒性:细胞毒性反应不大于1级； 无菌试验:无菌； 致敏试验:无迟发性超敏反应； 皮内反应试验:原发性刺激指数ΡΙΚ0.4。2.如权利要求1所述的基于胶原聚集体的絮状抗菌止血材料的制备方法，其特征在于，包括如下步骤: (1)基于胶原聚集体的絮状抗菌止血材料原液的制备:将10?100体积份的0.lmg/mL硝酸银溶液缓慢加入到40?400体积份的0.lmg/ml氧化度为35%?50%的双醛羧甲基纤维素钠溶液，接着使用醋酸调节反应混合液pH至3?5，然后在50?70°C恒温水浴锅中缓慢搅拌反应10?20h，得到混合液A ;待反应完成后，将混合液A室温下降至常温，再使用醋酸调节混合液pH至3?4.5，接着取2?20重量份的胶原聚集体，4?10°C下搅拌将其溶胀于上述混合液A中，待胶原聚集体充分溶胀后，继续持续搅拌4?24h，得到混合液B ;最后取2?20重量份的聚乙稀卩比略烧酮，4?10°C下缓慢搅拌加入到混合液B中，待聚乙稀吡咯烷酮充分溶解后，得到混合液C ; (2)基于胶原聚集体的絮状抗菌止血材料的制备:向混合液C中缓慢加入纯乙醇，使得乙醇的最终体积分数为30%，静置10?15min后，接着补加乙醇，使得乙醇的最终体积分数为50%，静置10?15min后，继续补加乙醇，使得乙醇的最终体积分数为70%，静置10?15min后，将混合液C在5000?lOOOOrpm下离心10?20min，除去上清液，将沉淀物磁力搅拌分散在体积分数为90%的乙醇溶液中，静置10?15min后，在5000?lOOOOrpm离心5?lOmin，除去上清液，将沉淀物磁力搅拌分散在纯乙醇中，静置10?15min后，加入有机脱醇剂进行梯度脱醇，分别使用最终体积分数为30%、50%、70%、90%的有机脱醇剂分别脱醇10?15 min, 100%脱醇剂脱醇2次，每次10?15min，最后在5000?lOOOOrpm离心10?15min，回收上清液，将沉淀物放置于真空干燥箱中，室温下干燥24?48h，得到基于胶原聚集体的絮状抗菌止血材料中间产品；将上述基于胶原聚集体的絮状型抗菌止血材料中间产品先后浸渍在生理盐水和PBS缓冲液中，以进一步除去残留在止血材料中的有机溶剂，最终经冷冻干燥、粉碎机适度粉碎，剂量为6?30KGy/h6°Co所产生的γ射线消毒灭菌，成型包装，得到基于胶原聚集体的絮状型抗菌止血材料的最终成品。3.权利要求2所述的基于胶原聚集体的絮状抗菌止血材料的制备方法，其特征在于，所述的胶原聚集体为胶原分子的聚集态结构体，是从猪皮、猪腱、牛皮、牛腱、驴皮或鼠尾腱中的任何一种中提取获得的。4.权利要求2所述的基于胶原聚集体的絮状抗菌止血材料的制备方法，其特征在于，所述的有机脱醇剂为丙酮、六甲基二硅胺中的任何一种。
【专利摘要】本发明公开了一种基于胶原聚集体的絮状抗菌止血材料及其制备方法，其特点是将双醛羧甲基纤维素与硝酸银共混通过氧化还原反应制得含有纳米银的混合液，接着先后将一定量的胶原聚集体与聚乙烯吡咯烷酮溶解在上述混合液中，然后经过梯度脱水、脱醇、真空干燥、浸渍、冻干、适度粉碎、灭菌等工艺，最后获得了基于胶原聚集体的絮状抗菌止血材料。该材料使用了与天然组织胶原结构更类似的胶原聚集体，与普通胶原类材料相比，本发明所制备的絮状止血材料具有更为优异的结构稳定性、力学性能、生物降解性、生物相容性等理化性能和生物学性能，又能促进创面愈合和修复，更兼具了纳米银的广谱抗菌/抑菌性，与创面伤口接触面大，亲水性、粘附性强，可用于体表创伤的止血修复及一般性民用止血急救。
【IPC分类】A61L26/00
【公开号】CN105327389
【申请号】CN201510813848
【发明人】但卫华, 刘新华, 但年华, 高然
【申请人】四川大学
【公开日】2016年2月17日
【申请日】2015年11月23日