重和血清一起立即放在-80°C冰箱中保存，备用。
[0030] 2、对STZ致糖尿病小鼠糖耐量的实验
[0031] 灌胃处理12周后，各组小鼠均禁食化，采取小鼠尾静脉取血测得的血糖值作为化 的血糖值，接着按剂量2g/kg灌胃葡萄糖溶液，然后在灌胃后0. 5、1、1. 5、化尾静脉取血测 定血糖值。观察各组在各时间点上血糖浓度的变化。
[0032] 3、各项指标的测定
[0033] 在糖尿病小鼠模型建立成功后每天观察小鼠的一般情况，如毛发色泽、活动频率、 进食进水量、体重等。在灌胃给药12周内每周五早上称量各组小鼠的体重，并且在禁食12h 后采用尾静脉取血测定各组小鼠的空腹血糖值。
[0034] 3. 1血液标本指标
[0035]去眼球取血，350化/min离屯、lOmin，分离血清，用全自动生化仪测定血糖（GLU)、 总胆固醇（TC)、甘油Ξ醋（TG)、血肌酢（S化）；用酶标仪测定糖化血红蛋白（G冊Ale)、生物 转化因子PiUGF-iBi)。
[0036] 3. 2尿液标本指标
[0037] 实验结束前一天收集24h尿，计量后取4ml，3000;r/min离屯、lOmin去除沉渣，取 2ml测定24h尿微量蛋白（mALB)和尿肌酢扣化）。
[0038] 4、实验结果：
[0039] 4. 1复合原茶对STZ致糖尿病小鼠空腹血糖的影响见表1 : W40] 表1复合原茶对STZ致糖尿病小鼠空腹血糖的影响（；+S，η= 20)
[0041 ]
[0042] 注：各组与空白对照组比较，*p< 0. 05,**p< 0. 01 ;各组与模型对照组比较，Δp < 0. 05，ΔΔp< 0. 01。
[0043] 4. 2复合原茶对STZ致糖尿病小鼠糖耐量的影响见表2:
[0044] 表2复合原茶对STZ致糖尿病小鼠糖耐量的影响
[0045]
[0047]由表1和表2可知，实验组的原茶具有明显的降血糖作用，改善其糖耐量，有效的 调节了糖尿病小鼠体内的糖代谢。 W48] 4. 3复合原茶对STZ致糖尿病小鼠TC\TG的影响见表3: W例表3复合原茶对STZ致糖尿病小鼠TC\TG的影响（?ιΒ揉，η= 20) 阳化0]
阳化1] 注：给药12周后各组与模型对照组比较，Δp< 0. 05,ΔΔp< 0. 01。
[0052] 由表3可知，实验组的复合原茶能通过降低糖尿病小鼠体内过高的胆固醇TC，S 酷甘油TG，增强机体脂质代谢的能力，且效果明显优于对照组。 阳化引 4. 4复合原茶对STZ致糖尿病小鼠TGF-β1、mALB、G冊Ale的影响见表4 :
[0054] 表4复合原茶对STZ致糖尿病小鼠TGF-β1、mALB、G冊Ale的影响（X ±s，η= 20) 阳化引
阳05d 注：给药12周后各组与模型对照组比较，Δp< 0. 05,ΔΔp< 0. 01。-
[0057] 由表4可知，生物转化因子β 1是导致糖尿病小鼠肾脏损伤的重要因子，实验组的 复合原茶能够显著地降低糖尿病小鼠体内生物转化因子β1的含量，且效果强于对照组。 表明实验组对糖尿病小鼠的肾脏具有保护作用，并对糖尿病肾病的发生和发展起到一定的 预防作用。
[0058] 实验组的复合原茶能明显降低小鼠体内糖化血红蛋白水平，很大程度上减轻了由 于糖化血红蛋白水平升高引起的组织缺氧，减轻了糖化血红蛋白水平升高导致的尤其是发 生在肾脏末梢微血管丰富的部位微血管病变，进而减轻由此引起组织细胞缺血缺氧和组织 损伤，进而尿微量白蛋白的含量也显著降低。实验组的复合原茶能显著降低糖尿病小鼠体 内尿微量白蛋白和糖化血红蛋白的含量，对预防糖尿病肾病有一定的作用，且效果明显优 于对照组。
[0059] 4. 5复合原茶对STZ致糖尿病小鼠血肌酢（S化）和尿肌酢扣化）的影响见表5 :
[0060] 表5复合原茶对STZ致糖尿病小鼠血肌酢（S化）和尿肌酢扣化）的影响（X+S, η= 20)
[0061]
阳062] 注：给药12周后各组与空白对照组比较，*p< 0. 05,**p< 0. 01 ;各组与模型对 照组比较，Δρ< 0. 05，ΔΔρ< 0. 01。
[0063] 由表5可知，血肌酢和尿肌酢都是反映肾脏损伤程度的指标。实验组复合原茶能 显著地降低糖尿病小鼠体内血肌酢的含量，并且可W显著地提高糖尿病小鼠体内尿肌酢的 含量，说明实验组复合原茶可W有效调节二者在糖尿病小鼠体内的浓度，从而达到保护肾 脏的作用，且效果明显优于对照组。
[0064] 由表1~表5可知，实验组的复合原茶能够通过降低糖尿病小鼠体内过高的胆固 醇、Ξ酷甘油，增强机体脂质代谢的能力，显著降低糖尿病小鼠体内的血糖水平，改善其糖 耐量，同时还能够提高糖尿病小鼠血液、尿液中的尿肌酢的含量，降低糖尿病小鼠血液、尿 液中血肌酢、转化生长因子-0 1、尿微量白蛋白、糖化血红蛋白含量的功效，减轻糖尿病肾 病小鼠的肾脏损伤，对预防糖尿病小鼠肾脏的损伤具有保护作用。
【主权项】
1. 青钱柳与石崖茶复合原茶的制备方法，其特征在于：将青钱柳和石崖茶按1~ 2:1~10的重量比混合，加入60~75v%的乙醇，在超声波条件下提取，将提取液浓缩，加 入乙酸乙酯进行沉淀，抽滤，取沉淀冷冻干燥，即为复合原茶。2. 根据权利要求1所述的青钱柳与石崖茶复合原茶的制备方法，其特征在于：所述浓 缩是将提取液浓缩至原体积的1/2~1/5。3. 根据权利要求2所述的青钱柳与石崖茶复合原茶的制备方法，其特征在于：所述乙 酸乙酯的加入量为浓缩液体积的2~3倍。4. 根据权利要求1所述的青钱柳与石崖茶复合原茶的制备方法，其特征在于：在超声 波条件1~3次，每次1~2h;所述超声波条件为：温度40~50°C、频率为250~400Hz。5. 根据权利要求4所述的青钱柳与石崖茶复合原茶的制备方法，其特征在于：所述超 声波频率为300~400Hz。6. 根据权利要求1~6中任一项所述的青钱柳与石崖茶复合原茶的制备方法，其特征 在于：乙醇的加入量为青钱柳和石崖茶总重的4~10倍。7. 根据权利要求1~6中任一项所述的青钱柳与石崖茶复合原茶的制备方法，其特征 在于：青钱柳与石崖茶的重量比为1:1。
【专利摘要】本发明公开了一种青钱柳与石崖茶复合原茶的制备方法，将青钱柳和石崖茶混合，加入60～75v％的乙醇，在超声波条件下提取，将提取液浓缩，加入乙酸乙酯进行沉淀，抽滤，取沉淀冷冻干燥，即为复合原茶。本发明制得的复合原茶不仅在糖尿病降糖方面具有协同作用，并对改善糖尿病并发症脂代谢异常和肾脏损伤具有一定的保护作用。
【IPC分类】A61P3/06, A61P13/12, A61P3/10, A61K36/82, A61K36/52
【公开号】CN105381087
【申请号】CN201510974933
【发明人】程忠泉, 徐宝敏, 温宇, 吴丽文, 孙显屏, 杨丹
【申请人】桂林双象生物科技有限公司
【公开日】2016年3月9日
【申请日】2015年12月22日...