原料0. 3g、 0. 6g和1. 2g，另一组涂溶媒0. 8ml每日二次，连续一周，实验结束后，将豚鼠处死，心，肝，肾 及脱毛皮肤做病理检验。
[0044] 2、结果 上述三组用药豚鼠躯干脱毛区，未见局部皮肤有水肿、充血、红斑、出血点及溃疡。用药 组豚鼠毛发色泽、摄食、四肢活动等与对照组无明显差异，病理组织学检查，给药组心、肝、 肾及脱毛皮与对照字比较也无明显差异。结果提示，本发明喷膜剂无局部刺激作用，也未见 全身毒性表现。
[0045] 表明本发明喷膜剂使用安全。
[0046] 实验例2:本发明的喷膜剂促进肛周脓肿术后大鼠模型创面愈合的实验研究 1、实验用药 对照药：中国发明专利专利号201210178375. 8中优选技术方案制备的喷膜剂，规格为 0.llg原料/g喷膜剂(壳聚糖2%、壳寡糖1%、乳酸1. 1%、芦荟水提物6%，其余为水)。
[0047] 实验药：本发明实施例1所生产的喷膜剂，规格为0. 10g原料/g喷膜剂。
[0048] 2、造模 清洁级Wistar大鼠110只，雌雄各半，体质量220±20g，用1%盐酸氯胺酮（3ml/kg)腹 腔注射麻醉。局部备皮，常规消毒，大鼠背部取直径为lcm的圆形切口 1个，剪开皮肤全层、 皮下浅筋膜直至肌层，止血后在创面上加粪液lml(正常人新鲜粪便5g，加生理盐水5ml，混 勾，离心，取上清液，现配现用)，以油纱、敷料、胶带固定，48h后去除覆盖物，见伤口有脓性 分泌物、有粪臭味者为造模成功。
[0049] 3、实验分组及实验方法 随机选取造模成功的96只大鼠随机分为三组：模型对照组、对照药对照组、实验组，每 组32只大鼠。各组大鼠采用生理盐水清洗伤口，采用碘伏消毒，包扎敷料。其中，模型对照 组按青霉素钠14万单位/kg腹腔注射给药，同时于每天早中晚分别用生理盐水清洗伤口。 对照药对照组除按青霉素钠14万单位/kg腹腔注射给药外，同时分别用对照药的喷膜剂治 疗，每天早中晚各一次。试验组除按青霉素钠14万单位/kg腹腔注射给药外，同时分别喷 洒实施例1制备的喷膜剂治疗，每天早中晚各一次。
[0050] 在造模后第3、7、10、14d，分4批(每批每组8只大鼠）处死大鼠，在创缘切取 0. 5cmX0. 5cm肉芽组织，置卡诺液中固定45min，石蜡包埋、切片，行常规HE染色，采用光镜 及MPIAS-500彩色病理图文分析系统进行观察。
[0051] 4、实验结果 创面闭合指数的计算公式：创面闭合指数=(1 一治疗后创面面积/原始创面面 积)X100%，结果以，土SD表示，统计学处理方法采用组间t检验，结果参见表1。另外，每个 标本观察5个视野，计数肉芽组织中成纤维细胞数，并求均值(成纤维细胞数/每个视野)， 结果以土SD表示，统计学处理方法采用组间t检验，结果参见表2。
[0052] 表1各组创面闭合指数比较(f: 土SD，n=8)
与模型组比较：*P< 〇· 05,#P< 0· 01 ;与对照药组相比：#P< 0· 05。
[0053] 表2各组创面肉芽组织中成纤维细胞数的比较Cf±SD，n=8)
与模型组比较：*P< 〇· 05,#P< 0· 01 ;与对照药组相比：#P< 0· 05。
[0054] 5、实验结论 表1和表2的实验结果显示，随着时间的推移，对照药组和实验组与模型对照组相比， 在大鼠创面闭合指数或成纤维细胞数方面分别具有显著性差异（P< 0. 05)或极显著差异(P< 0. 01)，这说明对照药和本发明的组合物均可提高创面肉芽组织成纤维细胞的含量， 从而有效地快速促进创面愈合；将实验组与对照药组相比较，在大鼠创面闭合指数或成纤 维细胞数方面，本发明组合物具有显著性差异（P< 〇. 05)，这说明本发明组合物在有效地 快速促进创面愈合方面显著优于对照药，取得了意料不到的技术效果。
[0055] 实验例3:临床试验 1、一般资料 本次临床试验共征集到烧烫伤患者100例，手术切口患者100例，需要预防褥疮的患者 100例；将患者按病种分别平均分成对照组和试验组，使两个组在年龄、性别、病程等方面 具备统计学意义上的可比性。
[0056] 2、试验药品 对照药：中国发明专利专利号201210178375. 8中优选技术方案制备的喷膜剂，规格为 0.llg原料/g喷膜剂(壳聚糖2%、壳寡糖1%、乳酸1. 1%、芦荟水提物6%，其余为水)。
[0057] 实验药：本发明实施例1所生产的喷膜剂，规格为0. 10g原料/g喷膜剂。
[0058] 3、试验方法 两组患者在对创口经过常规处理后，分别均匀喷涂对照药和实验药，以均匀覆盖并略 大于创口范围l-2cm为准，每日2次，连续治疗20天；治疗结束后统计患者治疗情况，并进 行统计分析。
[0059] 4、评价标准 治愈：创口完全愈合，不再需要用药； 显效：创口基本愈合或结痂； 有效：创口明显缩小，炎症等表现减轻； 无效：创口没有明显的改善甚至更加严重。
[0060] 5、试验结果 试验全部结束以后，将试验结果统计分析如表3所示。
[0061] 表3试验结果统计分析表
表3数据显示，本发明喷膜剂无论是针对烧烫伤患者还是手术切口患者均有很好的治 愈率(均在90. 0%、80. 0%以上）和总有效率(均为100%);其治疗效果显著优于对照药组。此 外治愈后的实验组患者普遍瘢痕轻微或无任何瘢痕，而对照组普遍留有轻微或严重瘢痕。 [0062] 因此，与现有技术相比，本发明组合物获得了突破性的技术进步，在皮肤创口的愈 合方面获得了意想不到的技术成果。
[0063] 采用喷洒本发明喷膜剂预防褥疮的患者，无一例发生褥疮，而采用对照药预防褥 疮的患者中有13例发生褥疮。可见本发明喷膜剂预防褥疮的作用显著优于对照药。
【主权项】
1. 一种海洋生物护伤喷膜剂的制备方法，其特征在于包括以下步骤： 1) 称取原料：壳聚糖1-12份、壳寡糖1-12份、乳酸1-12份、芦荟水提物1-16份、黄芪 1-12份、白芷1-12份、儿茶1-12份、金银花1-12份； 2) 将黄芪、白芷、儿茶、金银花粉碎后混匀，加入6-12倍重量的纯化水，浸泡6-24小时， 回流煎煮1-2小时，过滤，得滤液；再加入4-8倍重量的纯化水，回流煎煮1-2小时，过滤，合 并两次滤液，浓缩至原体积的1/3-1/2,得中药浓缩液，备用； 3) 将芦荟粉加入纯化水中，升温至60±2°C搅拌提取2-3小时，过滤，滤液经浓缩、干 燥，得芦荟水提物； 4) 将壳聚糖、壳寡糖、乳酸及步骤3)所得芦荟水提物加入步骤2)所得的中药浓缩液 中，搅拌至壳聚糖、壳寡糖以及芦荟水提物完全溶解，得混合液； 5) 将步骤4)所述混合液浓缩后装在喷射瓶中，安好瓶盖，经钴-60照射杀菌，得喷膜 剂。2. 如权利要求1所述海洋生物护伤喷膜剂的制备方法，其特征在于所述海洋生物护伤 喷膜剂由以下重量份的原料制备而成：壳聚糖3-8份、壳寡糖2-6份、乳酸2-8份、芦荟水提 物2-6份、黄芪3-6份、白芷3-6份、儿茶6-12份、金银花2-8份。3. 如权利要求1所述海洋生物护伤喷膜剂的制备方法，其特征在于所述海洋生物护伤 喷膜剂由以下重量份的原料制备而成：壳聚糖6份、壳寡糖4份、乳酸4份、芦荟水提物4份、 黄芪4份、白芷4份、儿茶8份、金银花4份。4. 如权利要求1所述海洋生物护伤喷膜剂的制备方法，其特征在于所述海洋生物护伤 喷膜剂由以下重量份的原料制备而成：壳聚糖8份、壳寡糖4份、乳酸8份、芦荟水提物6份、 黄芪6份、白芷6份、儿茶8份、金银花8份。5. 如权利要求1所述海洋生物护伤喷膜剂的制备方法，其特征在于所述海洋生物护伤 喷膜剂由以下重量份的原料制备而成：壳聚糖6份、壳寡糖6份、乳酸3份、芦荟水提物3份、 黄芪3份、白芷3份、儿茶6份、金银花3份。
【专利摘要】本发明公开了一种海洋生物护伤喷膜剂的制备方法，属于中医药技术领域。其包括如下工艺步骤1）称取原料：壳聚糖、壳寡糖、乳酸、芦荟水提物、黄芪、白芷、儿茶、金银花；2）制备中药浓缩液；3）制备芦荟水提物；4）将壳聚糖、壳寡糖、乳酸及芦荟水提物加入中药浓缩液中，搅拌至壳聚糖、壳寡糖以及芦荟水提物完全溶解，得混合液；5）将混合液浓缩后装在喷射瓶中，安好瓶盖，经钴-60照射杀菌，得喷膜剂。本发明方法制得的喷膜剂与现有技术相比具有更强的杀菌、抗感染能力，其促进创面生长修复，缩短愈合时间，消除创面周围色素沉着，抑制疤痕形成的能力更强。
【IPC分类】A61P17/02, A61P31/02, A61K9/70, A61K31/702, A61K36/896, A61K47/36, A61K36/886, A61K31/722
【公开号】CN105395527
【申请号】CN201510910501
【发明人】焦念强, 焦坤
【申请人】天津百玛生物科技工程有限公司
【公开日】2016年3月16日
【申请日】2015年12月10日