组合药物疗法
【技术领域】
[0001] 本发明设及一种治疗癌症的方法和可用在运样的治疗中的组合。具体地，所述方 法设及包含雄激素受体抑制剂4-(3-(4-氯基-3-(Ξ氣甲基)苯基)-5,5-二甲基-4-氧代-2-硫代咪挫烧-1-基)-2-氣-N-甲基苯甲酯胺或其药学上可接受的盐或溶剂合物和PI3邸抑制 剂2-甲基甲基-3-(Ξ氣甲基)苯基]甲基}-6-(4-吗嘟基)-lH-苯并咪挫-4-甲酸或 其药学上可接受的盐的新组合，包含它们的药物组合物，和在状况(其中雄激素受体和/或 ΡΙ3Κβ的抑制具有益处，例如，癌症)的治疗中使用运样的组合和组合物的方法。
【背景技术】
[0002] 包括癌症在内的过度增殖病症的有效治疗是肿瘤学领域中的一个持续目标。通 常，癌症由控制细胞分裂、分化和细胞调亡性细胞死亡的正常过程的失调引起，并且特征在 于具有无限制生长、局部繁殖和全身性的潜力的恶性细胞的增殖。正常过程的失调包括信 号转导途径中的异常和对与在正常细胞中发现的那些因子不同的因子的应答。
[0003] 前列腺癌的特征在于它对雄激素受体的依赖性和雄激素受体途径中的遗传改变。 转移性前列腺癌的主要治疗模式在历史上集中于通过减少可供与雄激素受体结合的配体 (雄激素)的量而祀向雄激素-雄激素受体信号传递。
[0004] 雄激素括抗剂(也被称作抗雄激素)通过阻断受体、竞争细胞的表面上的结合位点 或影响雄激素产生而改变雄激素途径。最常见的抗雄激素是在祀细胞水平起作用和竞争性 地结合雄激素受体的雄激素受体括抗剂。通过与循环雄激素竞争前列腺细胞受体上的结合 位点，抗雄激素会促进细胞调亡和抑制前列腺癌生长。
[000引最近的研究掲示，雄激素受体的抑制会促进憐酸肌醇3-激酶(ΡΙ3Κ)的活化(Rini， B.I.,和Small, E.J., Hormone-refractory prostate cancer. Curr.Treat. Options Oncol. 2002; 3:437; Singh, P., Yam, M., Russell, P.J.,和Khatri, A., Molecular and traditional chemotherapy: a united front against prostate cancer. Cancer Lett. 2010; 293: l)0PI3K途径在人癌症中最常见地被活化，并且在致癌 作用中的重要性被充分确立(Samuels Y和liricson K. Oncogenic PI3K and its role in cancer. Current Opinion in Oncology, 2006; 18:77-82)。信号传递的起始开始于憐脂 酷肌醇-4, 5-二憐酸(PIP2)的憐酸化W产生憐脂酷肌醇-3, 4, 5-P3 (PIP3)dPIP3是一种 关键性的第二信使，其将含有普列克底物蛋白同源性结构域的蛋白募集至细胞膜，所述蛋 白在此处被活化。运些蛋白中被研究的最多的蛋白是促进细胞存活、生长和增殖的AKT。 [0006] PI3K家族由15种共享序列同源性(特别是在它们的激酶结构域内）、但是具有不同 底物特异性和调节模式的蛋白组成（Vivanco I和Sawyers CL. The phosphatidyl inositol 3-kinase-AKT pathway in human cancer. Nature Reviews Cancer, 2002; 2:489-501)。1类PI3K是由与几种调节亚基(被统称为p85)之一形成复合物 的pllO催化亚基组成的异源二聚体，并且已经在肿瘤发生的背景下进行了最广泛的研究。 1A类PI3K催化亚基包含ρ11〇α、ρ11〇β和ρΙΙΟδ同种型，它们与由3个单独基因编码的5种不同 调节亚基之一结合。单独的一类IB PI3K催化同种型pllO γ与2个结合的调节亚基之一相互 作用（Crabbe T, Welham MJ, Ward SG, The PI3K inhibitor arsenal: choose your weapon Trends in Biochem Sci, 2007; 32:450-456) d1 类PI3K主要负责5葬酸化关键性的 PIP2信号传递分子。
[0007] PI3K途径和癌症之间的联系得到了研究的证实，所述研究鉴别出在编码ρ??οα蛋 白的PIK3CA基因中的体细胞突变。随后，已经在众多癌症中鉴别出PIK3CA中的突变，所述癌 症包括结肠直肠癌、乳腺癌、成胶质细胞瘤、卵巢癌和肺癌。与PIK3CA不同，尚未在β同种型 中鉴别出体细胞突变。但是，在过表达研究中，已经暗示ΡΙ3Κ目同种型是ΡΤΕΝ肿瘤抑制物的 丧失或灭活在体外和在体内诱导的转化所必需的（Torbett ΝΕ，Luna Α，Knight ΖΑ，等 人，A chemical screen in diverse breast cancer cell lines reveals genetic enhancers and suppressors of sensitivity to PI3K isotype-selective inhibition. Biochem J 2008;415:97-110; Zhao JJ, Liu Z, Wang L, Shin E, Loda MF， Roberts TM, The oncogenic properties of mutant pllOaand ρΙΙΟβ phosphatidyl inositol 3-kinases in human mammary epithelial cells. Proc Natl Acad Sci USA 2005;102:18443-8)。与该发现相一致，已经在一些膀脫癌、结肠癌、成胶质 细胞瘤和白血病中鉴别出PIK3CB基因的过表达，并且siRNA介导的成胶质细胞瘤细胞系中 的ρΙΙΟβ的击倒(knockdown)会导致肿瘤体外和体内生长的抑制(Pu P，Kang C，Zhang Z， 等人，Downregulation of PIK3CB by si民ΝΑ suppresses malignant glioma cell growth in vitro and in vivo. Technolo Cancer Res Treat 2006; 5:271-280)。使用 shRNA的最新资料证实，下调pllO目且不下调ρΙΙΟα，会导致PI3K途径灭活，并随后在体外和 在体内灭活缺乏ΡΤΕΝ的癌细胞中的肿瘤细胞生长(Wee S, Wiederschain, Maira S-M, Loo A, Miller C,等人，PTEN-deficient cancers depend on PIK3CB. Proc Natl Acad Sci 2008; 105:13057-13062)。与PI3邮信号传递在没有PTEN的肿瘤中的作用相一致， 据报道，pllO目是没有ΡΤΕΝ的前列腺癌模型中的转化表型所必需的（Jia S，Liu Z，Zhang S, Liu P, Zhang L,等人，Essential roles of PI(3)K-pll0b in cell growth, metabolism and tumorgenesis. Nature 2008;10:1038)〇
[0008] 已经报道，包括系统性硬化症(SSc)、关节炎、肾病、肝硬化和某些癌症在内的纤维 发生与ΡΤΕΝ缺乏和对应的PI3K-Akt过表达有关（Parapuram，S.K·，等人，Loss of ΡΤΕΝ expression by dermal fibroblasts causes skin fibrosis. J. of Investigative Dermatology，advance online publication 9 June 2011; do i: 10.1038/ jid.2011.156)。总之，这些发现指示PI3K pllO目作为癌症和与PTEN缺失有关的其它综合征 的有希望的革E标（Hollander，M. Christine; Blumenthal，Gideon M·; Dennis, Phillip P.; PTEN loss in the continuum of common cancers, rare syndromes and mouse models. Nature 民eviews/Cancer 2011; 11: 289-301)。
[0009] 此外，研究已经掲示了PTEN-缺陷型前列腺癌中PI3K和雄激素受体信号传递的互 反反馈调节。具体地，PI3K或雄激素受体的抑制会活化另一种，由此维持肿瘤细胞存活 (Carver, Brett, S.，Chapinski, C.，Wongvipat, J.，Hieronymus, H.，Chen, Y.， 等人，Reciprocal Feeback 民egulation of P13K and Androgen Receptor Signaling in PTEN-Deficient Prostate Cancer, Cancer Cell 2011; 19:575)。雄激素阻断疗法仍 然是关于晚期前列腺癌的治疗的护理标准。尽管存在最初有利的应答，几乎所有的患者常 常进展成更侵袭性的、去雄抗性的表型。证据指示，去雄抗性的前列腺癌的发展在原因上与 雄激素受体的持续信号传递有关。
[0010]因而，尽管在用化合物诸如雄激素受体治疗癌症中已经存在许多新近的进展，但 是对于遭受癌症影响的个体而言仍然需要更有效的和/或增强的治疗。
[001。 发明概述 本发明的发明人已经鉴别出化学治疗剂的一种组合，其提供与单一疗法相比增加的活 性。本发明包括包含雄激素受体抑制剂和PI3I03抑制剂的药物组合。具体地，描述了运样的 药物组合，其包含:雄激素受体抑制剂，特别是4-(3-(4-氯基-3-(Ξ氣甲基)苯基)-5,5-二 甲基-4-氧代-2-硫代咪挫烧-1-基)-2-氣-N-甲基苯甲酯胺或其药学上可接受的盐或溶剂 合物，和PI3邸抑制剂2-甲基甲基-3-(Ξ氣甲基)苯基]甲基}-6-(4-吗嘟基)-lH-苯 并咪挫-4-甲酸或药学上可接受的盐。
[0012]本发明的雄激素抑制剂由式（I)的结构或其药学上可接受的盐或溶剂合物(在本 文中共同地被称作"化合物A")表示：
本发明的ΡΙ3ΙΦ抑制剂由式(II)的结构或其药学上可接受的盐或溶剂合物(在本文中 共同地被称作"化合物护）表示：
在本发明的第一方面，提供了一种组合，其包含： (i)式(I)的化合物
或其药学上可接受的盐或溶剂合物 和 (ii)式(II)的化合物
或其药学上可接受的盐。
[0013] 在本发明的一个方面，式II的P13K抑制剂化合物呈盐形式。在一个优选的实施方 案中，式II的P13K抑制剂化合物的盐形式呈Tris盐的形式。
[0014] 在本发明的另一个方面，提供了一种组合，其包含4-(3-(4-氯基-3-(立氣甲基)苯 基)-5,5-二甲基-4-氧代-2-硫代咪挫烧-1-基)-2-氣-N-甲基苯甲酯胺溶剂形式和2-甲基- 1- {[2-甲基-3-(Ξ氣甲基)苯基]甲基}-6-(4-吗嘟基)-lH-苯并咪挫-4-甲酸Tris盐形式。
[0015] 在本发明的另一个方面，提供了一种组合，其包含4-(3-(4-氯基-3-(立氣甲基)苯 基)-5,5-二甲基-4-氧代-2-硫代咪挫烧-1-基)-2-氣-N-甲基苯甲酯胺二甲亚讽(溶剂)和 2- 甲基甲基-3-(Ξ氣甲基)苯基]甲基}-6-(4-吗嘟基)-lH-苯并咪挫-4-甲酸2-氨 基-2-巧圣甲基)-1,3-丙二醇。
[0016] 在本发明的另一个方面，提供了一种用在治疗中的组合，其包含： (i)式(I)的化合物：
或其药学上可接受的盐或溶剂合物和 (ii)式(II)的化合物：
或其药学上可接受的盐。
[0017]在本发明的另一个方面，提供了一种用在癌症治疗中的组合，其包含： (i) 式(I)的化合物：
或其药学上可接受的盐或溶剂合物和 (ii) 式(II)的化合物：
或其药学上可接受的盐。
[0018] 在本发明的另一个方面，提供了一种组合，其包含： (i) 式(I)的化合物：
或其药学上可接受的盐或溶剂合物和 (ii) 式(II)的化合物：
或其药学上可接受的盐，W及药学上可接受的稀释剂或载体。
[0019] 在本发明的另一个方面，提供了一种组合在制备治疗癌症的药物中的用途，所述 组合包含： (i) 式(I)的化合物：
或其药学上可接受的盐或溶剂合物和 (ii) 式(II)的化合物：
或其药学上可接受的盐。
[0020] 在本发明的另一个方面，提供了一种治疗哺乳动物的癌症的方法，所述方法包括： 给所述哺乳动物施用： (i) 治疗有效量的式(I)的化合物
或其药学上可接受的盐或溶剂合物和 (ii) 式(II)的化合物：
或其药学上可接受的盐。
[0021] 在另一个方面，提供了一种治疗有此需要的人的癌症的方法，所述方法包括施用 治疗有效量的4-(3-(4-氯基-3-(Ξ氣甲基)苯基)-5,5-二甲基-4-氧代-2-硫代咪挫烧-1-基)-2-氣-N-甲基苯甲酯胺或其药学上可接受的盐或溶剂合物和2-甲基-1-{ [2-甲基-3-(Ξ氣甲基)苯基]甲基}-6-(4-吗嘟基)-lH-苯并咪挫-4-甲酸或其药学上可接受的盐的组 合。
[0022] 在另一个方面，提供了一种治疗有此需要的人的癌症的方法，所述方法包括施用 治疗有效量的4-(3-(4-氯基-3-(Ξ氣甲基)苯基)-5,5-二甲基-4-氧代-2-硫代咪挫烧-1-基)-2-氣-N-甲基苯甲酯胺二甲亚讽溶剂合物和2-甲基-1-{ [2-甲基-3-(Ξ氣甲基)苯基] 甲基}-6-(4-吗嘟基)-1Η-苯并咪挫-4-甲酸2-氨基-2-巧圣甲基)-1,3-丙二醇Tris盐形式 的组合。
[0023] 在本发明的另一个方面，提供了一种治疗有此需要的人的癌症的方法，所述方法 包括施用治疗有效量的本发明的组合，其中在特定时段内施用所述组合并持续一段时间。
[0024] 附图简述 图1的图显示了雄激素受体抑制剂化合物A和PI3邮抑制剂化合物BW及它们的组合在 前列腺癌细胞中的抗增殖作用。
[0025] 图2的免疫印迹显示了雄激素受体抑制剂化合物A和ΡΙ3Κβ抑制剂化合物BW及它 们的组合对前列腺癌细胞中的细胞信号传递的影响。
[0026] 图3的图显示了雄激素受体抑制剂化合物A和ΡΙ3Ι03抑制剂化合物BW及它们的组 合对前列腺癌细胞中的脫天蛋白酶(caspas e ) 3/7诱导的影响。
[0027] 发明详述 本部分呈现了本发明的详细描述和它的应用。该描述是通过本发明的一般方法的几个 示例性例证，用于增加细节和特异性。运些实施例是非限制性的，且本领域技术人员会明白 有关的变化。
[0028] 本文中使用的雄激素受体抑制剂4-(3-(4-氯基-3-(Ξ氣甲基）苯基)-5,5-二甲 基-4-氧代-2-硫代咪挫烧-1-基)-2-氣-N-甲基苯甲酯胺或其药学上可接受的盐或溶剂合 物由式(I)的化合物或其药学上可接受的盐或溶剂合物表示：
[0029] 为了方便，可能的化合物和盐或溶剂合物的集合被统称为化合物A，运意味着，提 及的化合物A将在替代方案中表示所述化合物或其药学上可接受的盐或溶剂合物中的任一 种。取决于命名约定，式（I)的化合物也可W适当地被称作4-(3-(4-氯基-3-(Ξ氣甲基)苯 基)-5，5-二甲基-4-氧代-2-硫代咪挫烧-1 -基)-2-氣-Ν-甲基苯甲酯胺。
[0030] 本文中使用的ΡΙ3Κβ抑制剂2-甲基甲基-3-(Ξ氣甲基)苯基]甲基}-6-(4-吗嘟基)-1Η-苯并咪挫-4-甲酸或其药学上可接受的盐或溶剂合物由式（II)的化合物或其 药学上可接受的盐或溶剂合物表示：
[0031]为了方便，可能的化合物和盐或溶剂合物的集合被统称为化合物B，运意味着，提 及的化合物B将在替代方案中表示所述化合物或其药学上可接受的盐或溶剂合物中的任一 种。
[0032 ]本文中使用的术语"本发明的组合"表示包含化合物A和化合物B的组合。
[0033] 本文中使用的术语"肿瘤"表示细胞或组织的异常生长，且被理解为包括良性的 (即，非癌性的)生长和恶性的（即，癌性的)生长。术语"肿瘤的"是指肿瘤或与肿瘤有关。
[0034] 本文中使用的术语"药剂"被理解为是指在组织、系统、动物、哺乳动物、人或其它 受试者中产生预期效应的物质。因此，术语"抗肿瘤剂"被理解为是指在组织、系统、动物、哺 乳动物、人或其它受试者中产生抗肿瘤作用的物质。还应该理解，"药剂"可W是单一化合物 或两种或更多种化合物的组合或组合物。
[003引本文中使用的术语"治疗"及其衍生表述是指治疗性疗法。当设及特定状况时，治 疗是指：（1)改善所述状况或所述状况的一种或多种生物学临床表现，（2)干扰(a)引起或响 应于所述状况的生物学级联中的一个或多个点，或(b)所述状况的一种或多种生物学临床 表现，（3)减轻与所述状况或其治疗有关的一种或多种征状、作用或副作用，或者(4)减缓所 述状况的进展或者所述状况的一种或多种生物学表现。
[0036] 本文中使用的"预防"被理解为表示药物的预防性施用W基本上减少状况或其生 物学临床表现的可能性或严重程度，或者W延迟运种状况或其生物学临床表现的开始。技 术人员会明白，"预防"不是绝对术语。例如，当受试者被认为处于发展癌症的高风险时，诸 如当受试者具有强癌症家族史时或者当受试者已经暴露于致癌原时，预防性疗法是合适 的。
[0037] 本文中使用的术语"有效量"意指运样的药物或药学试剂的量:其将引起组织、系 统、动物或人的生物学或医学应答，所述应答是例如研究人员或临床医师所追求的。此外， 术语"治疗有效量"是指运样的任何量:与没有接受运种量的相应受试者相比，其导致疾病、 病症或副作用的改善的治疗、治愈、预防或缓解，或者疾病或病症的进展速度的下降。该术 语在其范围内也包括有效地增强正常生理功能的量。
[0038] 化合物A和/或B可W含有一个或多个手性原子，或可其它方式能够作为对映 异构体存在。因此，本发明的化合物包括对映异构体的混合物W及纯化的对映异构体或对 映异构地富集的混合物。并且，应当理解，在化合物A和化合物B的范围内包括所有互变异构 体和互变异构体的混合物。
[0039] 并且，应当理解，化合物A和B可W分别或二者作为溶剂合物存在。本文中使用的术 语"溶剂合物"表示由溶质(在本发明中，式（I)或（II)的化合物或其盐)和溶剂形成的可变 化学计量学的复合物。就本发明的目的而言，运样的溶剂不可W干扰溶质的生物活性。合适 的溶剂的例子包括、但不限于:水、甲醇、二甲亚讽、乙醇和乙酸。在一个实施方案中，使用的 溶剂是药学上可接受的溶剂。合适的药学上可接受的溶剂的例子包括、但不限于，水