Arpp-19基因在制备治疗肝癌的药物中的用图
【技术领域】
[0001] 本发明属于肿瘤治疗领域，具体涉及ARPP-19基因在制备治疗肝癌的药物中的用 途。
【背景技术】
[0002] 肝癌是临床常见的诊治困难、预后极差的恶性肿瘤，其中肝细胞性肝癌 (hepatocellular carcinoma，HCC)是最常见类型，约占 70-85%，在我国则占 90% [Tang ZY, Ye SL, Liu YK, Qin LX, Sun HC, Ye QH, Wang L, Zhou J, Qiu SJ, Li Y, Ji XN, Liu H, Xia JL, ffu ZQ, Fan J, Ma ZC, Zhou XD, Lin ZY, Liu KD. A decade's studies on metastasis of hepatocellular carcinoma. J Cancer Res Clin Oncol. 2004 ;130(4):187_196.]。流 行病学资料显示，2008年全世界共诊断出超过70万例HCC，发病率在肿瘤中位居第六，病 死率位居第三 [Ferlay J, Shin HR, Bray F, Forman D, Mathers C, Parkin DM. Estimates of worldwide burden of cancer in 2008:GL0B0CAN2008.Int J Cancer.2010 ； 127(12) :2893-2917.]。80% HCC发生于东亚和沙哈拉以南非洲，乙型肝炎病毒感染和 黄曲霉毒素是主要病因，近年来由于丙型肝炎病毒感染和肥胖，欧美国家发病率有较大 巾畐度上升 [Forner A, Llovet JM, Bruix J. Hepatocellular carcinoma. Lancet. 2012 ； 379(9822) : 1245-1255.]。在我国由于肝炎病毒感染病人众多，HCC发病率、病死率均高 于世界平均水平，每10万人中有25-32人患HCC，在肿瘤致死原因中仅次于肺癌 [Yuen MF，Hou JL，Chutaputti A. Hepatocellular carcinoma in the Asia pacific region. J Gastroenterol Hepatol. 2009 ；24 (3):346-353. ；Venook AP,Papandreou C,Furuse J, de Guevara LL. The incidence and epidemiology of hepatocellular carcinoma:a global and regional perspective. Oncologist. 2010 ；15 Suppl 4(5-13. ]〇
[0003] HCC直到晚期才有明显症状，目前早期筛查和诊断HCC仍然依靠超声和检测血清 甲胎蛋白（alpha fetoprotein，AFP)，但二者敏感性均在60%左右，联合使用也无改善。对 大于lcm的肝内结节，增强CT和磁共振可略提高HCC诊断敏感性，否则将采用肝穿刺组织 活检，但其假阴性率高达30% [Forner A，Llovet JM，Bruix J. Hepatocellular carcinoma. Lancet. 2012 ;379 (9822) : 1245-1255. ]。HCC根治疗法包括肝癌切除术、肝移植和射频消融 术，但仅对小于3cm的早期小肝癌有效，且根治术后5年复发率高达70%。对大多数患者 的治疗只能采取姑息性治疗，中期可应用经皮动脉插管化疗栓塞（TACE)，进展期用靶向治 疗药物，终末期则仅支持治疗[Forner A, Llovet JM, Bruix J. Hepatocellular carcinoma. Lancet. 2012 ；379 (9822):1245-1255. ；Marquardt JU,Galle PR, Teufel A.Molecular diagnosis and therapy of hepatocellular carcinoma (HCC) : an emerging field for advanced technologies.J Hepatol. 2012 ;56 (1):267-275. ;Villanueva A,Llovet JM. Targeted therapies for hepatocellular carcinoma.Gastroenterology. 2011 ； 140(5) : 1410-1426.]。HCC对化疗药物高度耐受，针对细胞增殖和血管形成机制关键分子的 多激酶抑制剂-新型革G向药物索拉非尼（sorafenib)，是第一个被证明能延长HCC患者生存 期的药物，目前被列为进展期HCC的一线系统疗法用药，但在临床实验中索拉非尼对中晚 期HCC患者生存期的改善，仅从对照组的7. 9个月提高到9. 7个月[Villanueva A，Llovet JM. Targeted therapies for hepatocellular carcinoma.Gastroenterology. 2011 ； 140(5) : 1410-1426.]。
[0004] 起病隐匿、进展迅速、恶性度高、缺乏可靠的早期诊断和有效治疗方法，导致HCC 高死亡率，患者平均生存期不足1年[Yuen MF，Hou JL，Chutaputti A. Hepatocellular carcinoma in the Asia pacific region.J Gastroenterol Hepatol. 2009 ； 24(3) :346-353.]。尽管近年来在HCC诊断和治疗方面都有了长足进步，仍远未达到基本控 制该病的目标。因此，阐明HCC发生发展机制，探寻新的诊疗靶标和有效防治措施，仍是当 务之急。
[0005] 通过抑制HCC细胞相关周期蛋白的表达和活化，阻滞细胞分裂周期，阻止细胞异 常分裂增殖，是治疗 HCC 的重要靶向[Sun M, Mo W，Fu X，Wu G, Huang Y, Tang R, Guo Y，Qiu M, Zhao F,Li L,Huang S,Mao Y,Li Y, Xie Y. System biology analysis of cell cycle pathway involved in hepatocellular carcinoma. Front Biosci(Schol Ed) .2010 ； 2 (1127-1144. ；Teoh NC. Proliferative drive and liver carcinogenesis:too much of a good thing,J Gastroenterol Hepatol. 2009 ；24 (12):1817-1825. ]〇
[0006] ARPP-19在胚胎中表达水平最高，随着生长进展在出生前后逐渐下降，推测该 分子可能与生长发育相关。ARPP-19在包括肝癌细胞H印3B在内的多种人恶性细胞系 中表达均高于正常细胞[6;1抑1111: JA，Horiuchi A, Gustafson EL, Rosen NL，Greengard P.Differential expression of ARPP-16 and ARPP-19, two highly related cAMP-regulated phosphoproteins,one of which is specifically associated with dopamine-innervated brain regions. J Neurosci. 1990 ; 10 (4) : 1124-1133. ] 〇 弓 I起我们 兴趣的是，在课题组前期小样本研究中发现，ARPP-19在人HCC组织比正常肝组织中的蛋白 表达升高30% (图2)，据此并结合上述报道，推测该分子或许与HCC相关。既往对ARPP-19 为数不多的研究集中在神经系统，尚没有在癌症中的研究报道。
【发明内容】
[0007] 针对现有技术的上述不足，根据本发明的实施例，依据发明人对ARPP-19基因在 人肝癌中的变化及其对肝癌细胞生物学功能的调节作用的研究，希望提出基于ARPP-19基 因表达变化在制备抗肝癌的基因药物和化学药物的应用。
[0008] 本发明发现，肝癌组织中ARPP-19含量高于癌旁相对正常肝组织，且其表达与肿 瘤大小正相关，提示干预ARPP-19基因表达或活化可能成为肝癌治疗的新途径。为验证这 一设想，本发明应用RNA干扰及病毒表达载体技术构建了 ARPP-19低表达肝癌细胞株，结果 显示ARPP-19抑制后肝癌细胞的增殖和克隆形成率明显下调，对细胞周期有阻滞作用。研 究结果表明，ARPP-19在肝癌中起促进增殖的作用，其作用的机制是通过调节细胞周期从而 影响肿瘤细胞的有丝分裂。因此，制备抑制该基因表达或活化以及制备出其下游基因的干 预药物可应用于肿瘤的治疗。
[0009] 本发明提供一种抑制肝癌组织中ARPP-19表达的化合物的用途，用于制备对抗肝 癌的药物。
[0010] 本发明所述的治疗肝癌的药物是依据环腺苷酸调节的磷酸化蛋白-19基因序列 及分子结构获得的抑制肿瘤组织中环腺苷酸调节的磷酸化蛋白-19的基因表达的化合物。
[0011] 本发明所述的环腺苷酸调节的磷酸化蛋白-19基因选自人、